Biologie Cellulaire

UNIVERSITE DE DOUALA
INSTUTUT UNIVERSITAIRE DE TECHNOLOGIE

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Plate forme des Technologies de lInformation et du Numrique : PFTIN

Filire : Gnie Biomdical
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COURS DE BIOLOGIE CELLULAIRE
Mars 2015
Par :
Pr. Leopold Gustave LEHMAN

Immuno-parasitologue
Mme Arlette Linda NGAPMEN p. MBOA

Etudiante en Ph.D : Option Parasitologie
IUT/PFTIN/Gnie Biomdical/1re Anne/Cours magistral Biologie Cellulaire/Pr. Lehman L.G./Mme Mboa Ngapmen
CHAPITRE 1 : LA CELLULE
I.
INTRODUCTION
Les organismes animaux ou vgtaux sont des ensembles complexes constitus de
plusieurs parties agences entre elles pour accomplir les fonctions vitales telles que la
croissance, la nutrition ou la reproduction. Un organisme tel que le notre est constitu de
plusieurs organes spcialiss chacun dans une fonction qui contribue la vie de lensemble
(Ex Appareil digestif: langue, estomac, foie pancras etc...). Lanatomie permet dtudier la
disposition, la forme et la structure des organes. Chaque organe est son tour constitu dun
assemblage de minuscules compartiments dlimits chacun par une membrane entourant une
suspension aqueuse de macromolcules. Ces compartiments sont des cellules.
La biologie cellulaire tudie les cellules et leurs organites, les processus vitaux qui
s'y droulent ainsi que les mcanismes permettant leur survie.
II.
HISTORIQUE DE LA BIOLOGIE CELLULAIRE
1677 : Antoine van Leeuwenhoek, connu pour ses amliorations du

microscope, observe le poivre pour vrifier s'il porte des aiguilles minuscules.
Cela l'amne la dcouverte accidentelle danimalcules, connus sous le nom
de protozoaires.
1858 : Louis Pasteur rfute la gnration spontane, croyance selon laquelle des
formes de vie peuvent apparatre spontanment.
1665 : Robert Hooke dcouvre des cellules dans du lige en utilisant les
premiers microscopes.
1839 : Theodor Schwann dcouvre que les plantes et les animaux sont faits de
cellules, concluant que la cellule est l'unit commune de structure et de
dveloppement: thorie cellulaire. Il donna son nom aux cellules de Schwann.
1858 : Rudolph Virchow affirme que les cellules naissent du rsultat de la
division cellulaire ( omnis cellula ex cellula )
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III. GENERALITES SUR LA CELLULE

La cellule (du latin cellula petite chambre) est l'unit structurale, fonctionnelle et
reproductrice constituant toute partie d'un tre vivant ( l'exception des virus). Chaque cellule est
une entit vivante qui, dans le cas d'organismes multicellulaires, fonctionne de manire
autonome, mais coordonne avec les autres. Les cellules de mme type sont runies en tissus
(assemblage de cellules remplissant une fonction particulire lintrieur), eux-mmes runis
en organes (assemblage de plusieurs tissus qui remplissent une fonction spcifique. Ex : foie,
cerveau, thyrode). La cellule est lunit de base des tres vivants.
De faon gnrale, Lensemble des systmes biologiques peut se diviser en deux
catgories:
1 - Les virus
Ils ne sont pas des cellules au vrai sens du terme car ils ne possdent que le matriel
gntique (acaryotes). De ce fait, ils nont pas un mtabolisme propre et dpendent
obligatoirement dune cellule quils infestent pour la fabrication de leur matriel gntique.
2 - Les organismes cellulaires
Ils peuvent tre constitus dune seule cellule. Ils sont alors dits unicellulaires. Ex:
bactries, amibes, plasmodies. Ils vivent alors isols ou en colonies.
Les organismes pluricellulaires sont constitus de plusieurs cellules spcialises
fonctionnant de faon cohrente. Ils se divisent en 2 groupes:
- Les organismes cellulaires procaryotes (bactries) : ils sont des unicellulaires
caractriss essentiellement par labsence dune enveloppe nuclaire. Le matriel gntique est
reprsent par un seul chromosome qui baigne dans le cytoplasme
-
Les organismes cellulaires eucaryotes : ce sont, contrairement aux procaryotes, des
organismes chez lesquels le nucloplasme est bien dfini et spar du cytoplasme par une
membrane nuclaire double. Les eucaryotes regroupent deux grands ensembles:
Les protozoaires constitus dune seule cellule isole (amibes, paramcies, plasmodies)
ou associe dans un agrgat appel colonie (Gonium, volvox).
Les mtazoaires dont les cellules sont groupes en tissus (conjonctifs, pithliaux,
musculaire, nerveux, de soutien, osseux, cartilagineux).
IV. CELLULES PROCARYOTES ET CELLULES EUCARYOTES

Les deux grands types dorganismes cellulaires, procaryotes et eucaryotes, ont un
anctre commun unicellulaire appel proto-cellule ou prognote qui est un organisme
procaryote.
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Les procaryotes sont identifis aux bactries : la plupart vivent comme des
organismes monocellulaires mais certaines bactries sassocient en chanette. Les
procaryotes ont leur ADN dans le cytoplasme de la cellule.
Les eucaryotes (ou noyau-vrai ) possdent un noyau, compartiment spar du
reste du contenu cellulaire, qui contient lADN.
Attention !!! Les virus, ou acaryotes, sont des lments (et non des cellules) qui ne
possdent ni de noyaux ni de cytoplasme et ne peuvent se reproduire quen parasitant une
cellule hte en dtournant la machinerie cellulaire.
Schma 1 : plan
dorganisation des cellules
Tableau 1 : Composition moyenne des cellules

vivantes
IV.1. CELLULES PROCARYOTES

Les cellules procaryotes sont divises en deux types cellulaires :
Les archobactries qui prennent en compte les cellules mthanognes, les cellules
halophiles et les cellules thermoacidophiles. Les archobactries sont les premires

coloniser les roches nues car elles survivent avec le minimum de ressources.
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Les eubactries (ou vraie-bactrie ) sont les plus proches des bactries actuelles.
Elles prennent en compte les bactries contemporaines, les mycoplasmes et les

cyanobactries.
Le procaryote classique est Escherichia-coli (ou E-coli), qui est une bactrie habitant dans la
flore intestinale humaine grce une paroi cellulaire rigide.
Les bactries se distinguent de part leurs parois cellulaires mise en vidence par la
coloration de Gram. On trouve des bactries gram + et des bactries gram :
Les bactries gram + retiennent le colorant, coloration violette. Leurs parois
possdent une couche unique de peptidoglycane qui repose sur la membrane plasmique, les
deux constituent la paroi cellulaire. On pourra prendre comme exemple les staphylocoques.
Les bactries gram sont beaucoup plus permables au colorant, coloration rose.
Leurs parois sont constitues dune couche fine de peptidoglycanes qui repose sur la
membrane plasmique entoure par une membrane externe : il y a donc trois couches.
Lexemple le plus pertinent sera Escherichia coli.
Les cellules procaryotes contiennent un compartiment unique, le cytoplasme, contenant un
chromosome ou une molcule dADN unique qui est le plus souvent circulaire et que lon
appelle le nuclode. Les bactries se rpliquent rapidement par division cellulaire ou
scissiparit. Elles peuvent tre pathognes ou non pathognes.
Schma 2 : Organisation gnrale de la cellule procaryote

(bacterie)
Escherichia coli
Algue bleue
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IV.2. CELLULES EUCARYOTES

Les eucaryotes correspondent aux organismes multicellulaires (animaux, plantes,
champignons) ainsi qu quelques eucaryotes unicellulaires. Les eucaryotes monocellulaires
correspondent aux protistes qui sont de deux types : animal les protozoaires et vgtal les
protophytes. Les cellules eucaryotes sont dlimites par une membrane (animaux) ou paroi
(vgtaux) et possdent un noyau qui est lorganite contenant le gnome de lindividu. Les
cellules vgtales sont le sommet de lvolution vgtale : elles sont capables de synthtiser
toutes substances organiques partir de matire inorganique et de lumire. Elles contiennent
des chloroplastes prsentant des vacuoles volumineuses limites par une double membrane
qui correspondent des saccules empiles les unes sur les autres appeles thylakode, o se
ralisent la photosynthse et donc qui contiennent de la chlorophylle. Les chloroplastes,
comme les mitochondries, peuvent se reproduire et possdent leurs propres ADN.
Schma 3 : Organisation
gnrale de la cellule animale
eucaryote
Schma 4 : Organisation gnrale

de la cellule vgtale eucaryote
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Tableau 2 : Tableau comparatif des cellules procaryotes et eucaryotes
Caractristiques
Cellule procaryote
Cellule eucaryote
Taille
Gnralement petite (1-10m)
Gnralement grande (10-100m)
Cytosquelette
Absent
Prsent
Organites
Absent
Prsents
Systme gntique
Absence de Noyau
ADN avec quelques protines nonhistones; simple. Chromosome : une
seule molcule circulaire dans les
nuclotides
non rattachs la
membrane
Noyau prsent
ADN complex avec des protines histones
et protines non-histones dans un noyau
entour dune membrane nuclaire.
Chromosome constitu de plusieurs
molcules linaires
Division cellulaire
Directe par fission binaire

bourgeonnement. Pas de mitose
Certaines formes de mitose, Centrioles

prsents chez la +part fuseau mitotique
prsent
Systme
reproducteur
Gnralement absent ou trs modifi
Prsent chez la plupart des partenaires mle

et femelle
Nutrition
Absorption
pour
la
photosynthse chez dautres
Absorption, ingestion, photosynthse chez

certains
Mtabolisme
nergtique
Pas
de
mitochondries,
enzymes
oxidatives lies la membrane
cellulaire
et
non
enveloppes
sparment
Mitochondrie prsente avec enzymes

oxydatives empaquetes lintrieur.
Modle plus unifi de mtabolisme oxydatif
Mouvements
intracellulaires
Aucun
Phagocytose, pinocytose
ou
plupart,
Neurone
Globules
rouges
Cellule
dendriti
que
Cellule
musculai
re
Fibrobla
stes
Schma 5 : Diversit des cellules au sein dun organisme

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V.
COMPOSITION DE LA CELLULE
Les organites constituant la cellule dont les mitochondries, rticulum endoplasmique,
chloroplastes, noyau, membrane cellulaire, abritent des molcules et matriaux de base en

biochimie, dont les protines, lipides, glucides et acides nucliques. Les chanes du mtabolisme
prennent lieu dans diffrents organites.
V.1. La paroi cellulaire
La paroi des cellules est une caractristique structurale de plusieurs tres vivants dont
les vgtaux. Elle est constitue principalement de cellulose, hmicellulose, pectines,
polymres phnoliques, protines structurales et enzymatiques et diffrents ions. De
nombreuses hydrolases (glucanases, pectine Methyle Estrase,...) sont prsentes dans
la paroi des cellules.
Les oses constituent les lments de base des polysaccharides de la paroi cellulaire. Ce sont
des composs carbons possdant des fonctions alcool et des fonctions rductrices
(aldhydes et ctones). Il existe de nombreux isomres pour chacun des oses.
Schma 6 : Quelques oses
V.2. La membrane plasmique

La membrane plasmique est constitue de lipides et de protines. Les lipides
membranaires sont des phospholipides prsentant un ple hydrophile (soluble dans l'eau) et
un ple hydrophobe. Au niveau des cellules, les phospholipides des membranes sont
disposs en 2 couches, avec des parties hydrophobes en vis vis. Les protines
hydrophiles sont fixes aux ples hydrophiles des lipides. Les protines hydrophobes sont
fortement lies aux lipides (intgration).
Schma 7: La membrane plasmique
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Les membranes cellulaires sont des doubles couches phospholipidiques dans lesquelles
sinsrent de manire asymtrique et inhomogne dautres structures les caractrisant.
La membrane dlimitant la cellule est appele membrane plasmique et les membranes des
organites sont appeles par le nom de lorganite concern (membrane nuclaire, membrane
mitochondriale, etc.).
En microscopie lectronique on observe une tri-lamination de la membrane : un
feuillet clair de 3 nm (environ 2 fois la longueur dune chane dacide gras) entour par 2
feuillets sombres de 2,5 nm chacun ; lpaisseur totale est donc denviron 8 nm. Ceci a
permis de mettre en vidence la structure en bicouche phospholipidique de la membrane
plasmique.
V.2.1. Composition des membranes

Les membranes sont constitues (en poids sec de membrane) de 40% de lipides, 52% de
protines et 8% de glucides. En prenant en compte la diffrence de poids existant entre ces
classes de molcules, on compte 50 molcules de lipides par molcule de protine.
V.2.1.1. Diversits des lipides membranaires
Au sein de la membrane les lipides sont prsents sous diffrentes formes ; parmi elles on
compte les phospholipides, les glycolipides et le cholestrol.
a) Phospholipides
Ils prsentent tous une tte hydrophile (phosphate et groupement spcialis) et une queue
hydrophobe (glycrol et acides gras). On distingue deux types de phospholipides :
Les glycrophospholipides correspondent lassociation de glycrol, de deux acides

gras, dun acide phosphorique et dalcools ou dacides amins. Les alcools ou les acides
amins donnent lidentit et la caractristique du glycrophospholipides. Parmi les acides
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amins on trouve la srine et parmi les alcools on trouve linositol, lthanolamine et la
choline ; on obtient ainsi la phosphatidyl-srine, le phosphatidyl-inositol, la phosphatidylthanolamine et la phosphatidyl-choline.
Les sphingophospholipides correspondent lassociation de sphingosine, dacide gras,

dacide phosphorique et dalcool ou dacides amins ; on obtient ainsi la sphingomyline
(par association de la choline).
b) Glycolipides
Ils sont de deux types : les glycroglycolipides et les sphingoglycolipides. Il est intressant
de prciser que les glycolipides des membranes des rythrocytes (globules-rouges),
dfinissent le groupe sanguin de lindividu.
c) Cholestrol
Le cholestrol est uniquement prsent dans les membranes des cellules animales, en
effet, il est absent des cellules vgtales et des bactries. Le cholestrol est compos dun
noyau strode hydrophobe, dune queue hydrophobe et dune fonction alcool hydrophile.
La molcule est donc amphiphile, reprsente environ un quart des lipides membranaires et
influence la fluidit membranaire.
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V.2.1.2. Diversits des protines membranaires
Les protines membranaires ont des rles bien spcifiques au sein de la double couche
phospholipidique : rcepteurs, transporteurs, adhrence cellulaire, catalyse enzymatique,
messagers intracellulaires, etc. Chaque protine possde une extrmit N-terminale et une
extrmit C-terminale). Les protines sont ancres de diffrentes manires dans la
membrane.
a) Les protines extrinsques
Les protines extrinsques sont localises en dehors de la bicouche phospholipidique et sont
ainsi soit entirement intracellulaire, soit entirement extracellulaire. Elles interagissent avec
la membrane, par des liaisons lectrostatiques de types liaisons hydrognes et liaisons de
Van der Waals, au niveau de domaines caractristiques de protines transmembranaires ou
de lipides. Ces interactions tant faibles, elles sont rompues facilement par des variations de
forces ioniques et de pH.
b) Les protines ancres dans des acides gras
Les protines priphriques ancres dans les lipides sont de deux types :
Ancres sur les glyco-phosphatidyl-inositol (GPI) qui correspondent lassociation

dune phospho-thanol-amine sur des sucres, eux-mmes ancrs sur un phosphatidylinositol. Ces protines sont prsentent sur la face extracellulaire de la membrane.
Ancres la membrane par lintermdiaire dacide gras (acide palmitique et acide

myristique). Ces protines sont prsentent sur la face intracellulaire de la membrane.
c) Les protines transmembranaires

Les protines transmembranaires traversent les deux feuillets de la membrane. Ces protines
sont lies de manire stable la membrane avec lenvironnement hydrophobe de la face
interne de la membrane, par les acides amins apolaires de leurs hlices . Elles ne peuvent
ainsi tre spares de la double couche phospholipidique (et donc tudies) que par laction
de dtergents.
V.2.1.3. Diversits des glucides membranaires
La grande majorit des glucides membranaires sont sous forme de glycoprotines et une
petite partie sous forme de glycolipides. Au niveau de la membrane les glucides nexistent
pas ltat libre, ils sont lis des protines, par des liaisons N-glycosidiques (le plus
souvent) et des liaisons O-glycosidiques, sous forme de petites glycoprotines ou de
protoglycanes.
Les glycoprotines contiennent des polysaccharides courts, souvent ramifis et

nexcdant pas 50% du poids molculaire de la glycoprotine. Le sucre terminal est
souvent de lacide sialique charg ngativement.
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Les protoglycanes sont galement des glycoprotines, mais qui contiennent des
polysaccharides chane longue compose dunits disaccharidiques rptes linfini,
reprsentant jusqu 90% du poids molculaire globale. Souvent un des deux sucres de
lunit est amin, on parle alors de glyco-amino-glycane (ou GAG) dont le plus simple
est lacide hyaluronique.
Pour information, les protoglycanes scrtoires composent la matrice extracellulaire (tissu

conjonctif, cartilage, etc.) et sont diffrents des protoglycanes cellulaire.
V.2.2. Proprits des membranes
V.2.2.1. Auto-assemblage des lipides
Les phospholipides, dus leurs proprits physico-chimiques, sassemblent de manire
automatique en diffrentes sortes de structures suivant lenvironnement :
Les monocouches sont des couches mono-molculaires dont les ttes hydrophiles sont
diriges vers le milieu aqueux et les queues hydrophobes vers le milieu lipidiques.
Les micelles sont des formations sous la forme de gouttelettes rondes, o dans un milieu
aqueux les ttes hydrophiles sont diriges vers lextrieur de la sphre et les queues hydrophobes
sont diriges vers lintrieur (dans un milieu lipidique la conformation est inverse).
Les bicouches phospholipidiques permettent la formation de vsicules sphriques
appeles liposomes. Les bicouches phospholipides rentrent dans la formation des bicouches
membranaires. Pour information, les liposomes sont actuellement utiliss en thrapeutique pour
encapsuler des substances mdicamenteuses.
V.2.2.2. Asymtrie membranaire

Toutes les membranes biologiques sont constitues de feuillets dont les compositions lipidiques
sont diffrentes, sauf le cholestrol qui se trouve en quantit quivalente dans lun ou lautre des
feuillets, pouvant basculer facilement de lun lautre.
Le feuillet interne est caractris par les phosphatidyl-srine (amphotre) et

phosphatidyl-thanol-amine (charge ngative).
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Le feuillet externe est caractris par la sphingomyline (charge ngative) et la

phosphatidyl-choline (charge ngative).
Lasymtrie des lipides entrane ainsi une asymtrie de la charge globale de chaque feuillet. On
visualise galement une asymtrie des protines prsente dans la double couche
phospholipidique ; ces protines participent caractriser les proprits de la membrane, que
cela soit du ct intracellulaire ou extracellulaire.
La plus grande asymtrie est celle prsente au niveau des glucides, en effet tous les motifs
glucidiques sont localiss sur le feuillet externe de la membrane plasmique. Pour les organites
intracellulaires les sucres sont dirigs vers la lumire de lorganite. Larbre glucidique
prsent au niveau du feuillet externe de la membrane plasmique forme ce que lon appelle le
glycocalix.
3) Fluidit membranaire
La mobilit des lipides est ncessaire pour lactivit cellulaire. Ils peuvent se mouvoir de
diffrentes manires au sein de la membrane : rotation, diffusion latral et flip flop (passage dun
feuillet lautre). Certaines protines vont tre bloques par des structures intracellulaires ou
extracellulaires par des interactions protines-protines ou interactions avec le cytosquelette.
La fluidit membranaire intervient dans diffrentes fonctions cellulaires : absorption, scrtion,
protection,
adhrence,
communication,
interaction
avec
la
matrice,
etc.
La fluidit est influence par diffrents facteurs, des facteurs externes comme la temprature
(une augmentation de la temprature entrane la fluidification de la membrane) et des facteurs
internes :
La composition en acides-gras : Plus les chanes carbones des acides-gras sont courtes et
insatures plus la membrane est fluide.
La proportion de cholestrol : Le cholestrol renforce la solidit et rigidit membranaire

et correspond jusqu 50% des lipides totaux de la membrane.
Le nombre de protines : Les protines diminuent la fluidit membranaire.
V.2.3. Diffrenciation de la membrane plasmique

On distingue 3 principaux types de diffrenciation de la membrane plasmique, qui touche des
ples diffrents de la cellule concerne.
V.2.3.1. La bordure en brosse
La bordure en brosse est un rassemblement de microvillosits qui touche la membrane
plasmique du ple apical des cellules, permettant une augmentation de la surface dchanges des
cellules pithliales (entrocytes, tubules rnaux, etc.).
Les microvillosits sont constitues de faisceaux de microfilaments dactines, paralllement par
rapport laxe de la microvillosit. A la base de la microvillosit on trouve des filaments
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intermdiaires qui sorientent de manire perpendiculaire par rapport aux microvillosits. La
structure des faisceaux est permise grce aux villines et fimbrines qui unissent les
microfilaments dactines entre eux (cf. chapitres microfilaments dactines). Les faisceaux sont
fixs la membrane laide de protines contractiles : les myosines 1 latralement et les
myosines 5 la pointe de la microvillosit.
V.2.3.2. Les microvillosits isoles
Les microvillosits peuvent tre distantes les unes des autres, on parle de
microvillosits isoles. Ces dernires sont notamment visibles au niveau des polynuclaires
(ou globules-blanc ou leucocytes) lors de la diapdse (cf. cours dimmunologie
Immunit inne ).
V.2.3.3. Les intra-digitations
Les intra-digitations correspondent des replis de la membrane plasmique au niveau
du ple basal des cellules pithliales, le plus souvent au niveau de cellules qui sont sujettes
des changent deau et de minraux de manire bidirectionnelle avec la matrice
extracellulaire.
II) Molcules dadhrences et jonctions intercellulaires
1) Les molcules dadhrence
Parmi les molcules dadhrence on trouve les CAM (pour Cell Adhesion Molecules) qui
permettent linteraction cellule-cellule et les SAM (pour Substrate Adhesion Molecules) qui
permettent linteraction cellule-matrice extracellulaire.
Ces interactions peuvent tre homophile, cest--dire quil y a interaction entre deux mmes
protines, et htrophile, cest--dire quil y a interaction entre deux protines diffrentes.
a) Immunoglobuline
Les immunoglobulines sont des monomres de la mme superfamille que les anticorps,
possdant galement une chane lourde et une chane lgre, avec des boucles fermes par
des liaisons disulfure. Ce sont des glycoprotines riches en acide sialique et possdent une
trentaine de membres, dont les N-CAM prsentent au niveau du systme nerveux.
Les immunoglobulines sont calcium (Ca2+) indpendante, contrairement aux autres
molcules dadhrence, et sont exprims de manire constitutive au niveau de la membrane
plasmique, autrement dit en permanence. Elles ralisent des liaisons homophiles mais qui
peuvent se faire avec des membres diffrents, ainsi que des liaisons htrophiles avec des
protoglycanes de la matrice extracellulaire et des intgrines.
b) Cadhrine
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Les cadhrines sont des glycoprotines sous la forme de monomre, possdant une extrmit
N-terminale extracellulaire et tant calcium (Ca2+) dpendante. Les diffrents types de
cadhrines sont spcifiques au tissu.
Ces molcules jouent un rle principal dans les jonctions intercellulaires de type
desmosomes. De cette manire leurs extrmits intracellulaires C-terminale interagiront
avec les plaques denses ou directement avec les protines du cytosquelette, et leurs
extrmits extracellulaires N-terminale raliseront des interactions homophiles et
htrophiles avec des autres cadhrines, des intgrines et des protines de la matrice
extracellulaire.
Dans les tissus, les cellules inhibent leurs propres croissances en interagissant les unes avec
les autres et ceci grce la prsence des cadhrines qui sont responsables de ce phnomne
appel inhibition de contact.
c) Slectine
Les slectines sont des glycoprotines sous forme de monomre possdant une extrmit Nterminale extracellulaire. Les slectines sont des lectines calcium (Ca2+) dpendante qui ont
la spcificit de reconnatre les groupements glucidiques dautres glycoprotines.
Les slectines permettent la formation de liaison brve et de trs haute spcificit. Elles ne
sont pas exprimes en permanence, mais ncessite une activation entranant son endocytose.
Elles interviennent dans des interactions htrophiles lors de la diapdse.
d) Intgrine
Les intgrines sont des glycoprotines sous forme de dimre () prsentant une
extrmit extracellulaire N-terminale et tant elles aussi calcium (Ca2+) dpendante.
Les intgrines interagissent avec les composants de la matrice extracellulaire et de la lame
basale tels que les fibronectines, les laminines et le collagne. Elles interagissent galement
par des interactions htrognes avec des immunoglobulines et des cadhrines, et dans le
milieu intracellulaire avec le cytosquelette.
2) Jonctions intercellulaires et jonctions cellules-matrice extracellulaire
Les jonctions intercellulaires sont des rgions diffrencies de la membrane plasmique
responsable de ladhrence intercellulaire et au niveau desquelles on distingue une
concentration importante de molcules dadhrence. Parmi elles on distingue les jonctions
serres (ou Zonula Occludens), les jonctions intermdiaires (ou Zonula Adherens), les
desmosomes, les jonctions communicantes (de type nexus ou jonctions gap).
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Les jonctions cellules matrice-extracellulaire sont des rgions diffrencies de la

membrane plasmique responsable de ladhrence entre les cellules et les lments de la
matrice extracellulaire. Elles sont galement riches en molcules dadhrence. Parmi elles
on distingue les hmidesmosomes.
Ces jonctions sont prsentent chez le animaux, mais pas chez les vgtaux et les bactries
qui sont uniquement lis par leurs parois. Elles permettent une solidit mcanique dune part
et une communication cellulaire dautre part.
a) Les jonctions serres (ou zonula-occludens)
Les zonula-occludens sont des jonctions tanches qui
ceinturent la cellule, do le terme de zonula , au
niveau du ple apical et ceci notamment au niveau
des pithliums monocouches (endothlium et
cellules polarises par exemple au niveau des
entrocytes
et
hpatocytes).
Elles
cres
des
occlusions qui interdissent entirement la diffusion

latrale des protines ; lespace intercellulaire est
totalement obtur.
Elles sont composes doccludines et de claudines
qui sont des molcules calcium indpendantes et
dimmunoglobulines dont les JAM (Junctionnal
Adhesion Molecule).
Du ct cytoplasmique on trouve des protines
spcifiques appeles protines ZO qui interagissent
Production
Mariana
RUIZ
(LadyofHats) Traduction Berru
aves les molcules de la jonction dune part, et

permet lancrage des microfilaments dactine (cf.
cytosquelette) dautre part, et ceci grce la
cinguline qui joue le rle dadaptateur entre les
protines ZO et les microfilaments dactine.
b) Les jonctions intermdiaires (ou zonula-adherens)
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Les zonula-adherens sont galement des jonctions
qui ceinturent la cellule au niveau du ple apicale,
situes juste en dessous des zonula-occludens. Elles
sont situes au niveau des cellules polarises et
laissent un espace intercellulaire plus important que
les jonctions serres.
Elles sont composes de cadhrines et de nectines
qui sont des immunoglobulines spcifiques. Du ct
cytoplasmique
on
trouve
une
plaque
dense
cytoplasmique o sont ancres les cadhrines et les

nectines :
Les catnines permettent la jonction entre les Production

microfilaments dactines et les cadhrines.
Mariana
RUIZ
(LadyofHats) Traduction Berru
Lafadine et la ponsine permettent la jonction

entre les microfilaments dactines et les nectines.
c) Les desmosomes
Les desmosomes ne sont cette fois-ci plus des zonulas,
mais des macula-adherens qui sont des zones
dancrage des filaments intermdiaires sous la forme
de tche, do le terme de macula . Ils permettent la
formation de jonctions intercellulaires, contrairement
aux hmidesmosomes qui crs des jonctions entre
cellules et lame basale. On trouve les desmosomes
principalement au niveau des pithliums, mais pas
exclusivement.
Ils sont composs de desmocolline et desmogline qui
sont des cadhrines (calcium dpendantes) spcifiques
formant des interactions homophiles et htrophiles
entre elles, ainsi que des molcules de la superfamille
des immunoglobulines.
Production
Mariana
RUIZ
(LadyofHats)
La plaque dense a cette fois-ci une forme arrondie et est compose de desmoplakine, o se
fixent les filaments intermdiaires de cytokratine. Il est important de noter que deux
molcules font office dintermdiaire entre les molcules transmembranaires(desmocolline
et desmogline), et les molcules de la plaque dense (desmoplakine) : la plakoglobine et la
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plakophiline.
Les desmosomes permettent ladhrence intercellulaire, le maintien de la forme des cellules
et une rsistance cytoplasmique.
d) Les hmidesmosomes
Les hmidesmosomes sont prsents au niveau du ple basal et forment, comme dit
prcdemment, des jonctions avec la lame basale par interaction entre les intgrines des
hmidesmosomes et les laminines de la lame basale.
Comme les desmosomes, les hmidesmosomes prsentent une plaque dense qui permet
dancr les filaments intermdiaires de cytokratine. Ces derniers forment un rseau entre
les plaques des desmosomes et hmidesmosomes permettant le maintient de la cohsion
cellulaire.
e) Les jonctions communicantes de type nexus (ou jonction gap)
Au niveau des nexus on observe un espace intercellulaire de 2 3 nm. On les trouve au
niveau des faces latrales des cellules pithliales et galement des cellules non pithliales
(fibroblastes, cellules musculaires, cellules osseuses, neurones, etc.).
Ils sont composs de plusieurs centaines de canaux bidirectionnels par association de lun
lautre provenant dune cellule et de lautre. Chaque canal est un connexon form de 6 sousunits,
dont
chaque
sous-unit
est
une
connexine
qui
possde
segments
transmembranaires. Les nexus permettent une cooprativit mtabolique intercellulaire en

fonction du gradient de concentration (ions et petites molcules) et permet ainsi le transfert
dinformations (second messagers tels que lAMP cyclique, le calcium Ca2+ et certains
enzymes).
Ces jonctions ne sont pas exprimes de manire constitutionnelle mais possdent des demivies de lordre de 24 heures. La rgulation de la permabilit dpend donc de la
concentration des nexus qui varie selon lactivit cellulaire.
Page 18/38
V.3. Le cytoplasme
Dans le cytoplasme, baignent des lments appels organites ou organelles.(le 1er
organite dcrit fut lappareil de Golgi, par Golgi en 1898 grce une coloration des cellules
au nitrate dargent). C'est le lieu de la glycolyse o les sucres simples sont convertis en
pyruvate. C'est ce niveau aussi que les cellules ralisent le repliement des protines.
V.4. Le noyau
Il existe suivant les cellules un ou plusieurs noyaux, certaines cellules mme n'en
contiennent pas (les hmaties). Sa forme est en gnral sphrique ou ovode. Sa taille est
proportionnelle la cellule (environ 1/3 de la cellule. Les constituants du noyau sont varis:
une enveloppe nuclaire, le nucloplasme, la chromatine et un ou plusieurs nucloles.
1- L'enveloppe nuclaire
Elle est constitue de 2 membranes (6nm d'paisseur),
une membrane externe au contact du cytoplasme
une membrane interne au contact du nucloplasme
Elles sont spares par un espace prinuclaire de 40nm. La membrane interne est
tapise par une structure fibreuse: la lamina. La lamina correspond a un rseau protique qui
relie la membrane interne l'ADN chromatidien. Elle est constitue de 3 types de protines:
la lamine A
la lamine B
la lamine C.
2- La chromatine
L'ADN contenu dans le noyau est li des proteines de liaisons formant ainsi la
chromatine. Il existe deux types de protines:
Les protines histones qui assurent une forte liaison avec l'ADN
Les protines non histones
L'association de l'ADN aux proteines histones se fait selon un modle dfini: la fibre
nuclosomique, considr comme l'unit chromatidienne. Diffrents types de chromatines
sont mis en vidence:
la chromatine disperse (ou euchromatine) constitue principalement de fibres A

(ensemble de nuclosomes enrouls en spirale et lis chacun par un histone H1)
la chromatine condense (ou htrochomatine) constitue principalement de fibres B

(spiralisation des fibres A en fibres B)
3- Le nuclole
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Le nuclole est le site de production des ribosomes. C'est l'activit de segment d'ADN, les
organisateurs nuclolaires, qui expriment les gnes sous forme d'ARNr. Le nuclole contient
trois composants:
un composant fibrillaire clair: correspond aux organisateurs nuclolaires.
un composant fibrillaire dense: correspond aux transcrits primaires donc a la partie

active du nuclole.
un composant granulaire priphrique: correspond la zone de stockage des prribosomes.
Schma 8 : Le Noyau
V. 5. Le rticulum endoplasmique
Au niveau des cellules, le rticulum endoplasmique est un ensemble de cavits de formes
varies. Si la face hyaloplasmique des cavits peut tre couverte de petits grains
(ribosomes) : le rticulum est dit granuleux. Sinon, il est dit lisse. Les ribosomes sont
impliqus dans la synthse des chanes polypeptidiques. Ils dcodent le message port par le
RNA messager. Les chanes polypeptidiques traversent les membranes et sont libres dans
les cavits. Les protines sont constitues d'acides amins de diffrentes catgories.
Schma 9: Le rticulum endoplasmique
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V.6. Les ribosomes (20-25nm)
V.6. 1. Structure
Ils sont constitus dARN associ des protines.
Les ribosomes synthtiss dans le nuclole se retrouvent libres dans le cytoplasme ou
rattachs au REG.
Les ribosomes sont dpourvus de membrane. Ils sont constitus de 2 sous units ayant
respectivement une constante de sdimentation de 40S et de 60S.
Les sous units sassemblent dans le cytoplasme sur des structures appeles
polyribosomes.
Les mitochondries, les chloroplastes et les bactriens ont leurs propres ribosomes.
V.6.2. Fonction
Ils sont les principaux acteurs de la biosynthse des protines (celle-ci tant accentue
dans la phase G du cycle cellulaire).
La biosynthse des protines est la translation du code de lARN messager (mRNA)
partir de la squence dacides amins de la chane polypeptidique.
V.7. Lappareil de Golgi
Cest un organite cytoplasmique constitu suivant le type cellulaire par un ou plusieurs
dictyosomes (saccules + vsicules) gnralement situs proximit du noyau.
Schma 10 a : Lappareil de Golgi
V.7. 1 Structure et ultrastructure

Chaque dictyosome se prsente comme un empilement polaris de saccules membranaires
aplaties, spares par le hyaloplasme.
On distingue deux ples (ou faces):
Une face tourne vers le REG voisin ; cest la face cis ou face de formation (=face
convexe, externe, proximale). La face cis se caractrise par la formation de nouveaux
saccules golgiens provenant de la fusion de vsicules mis par le REG.
Page 21/38
Une face gnralement oriente vers la surface cellulaire, ou face trans (= face de
maturation ou concave ou distale) ; cest la face produisant des vsicules.
Rappel: les saccules de la face cis ont une structure proche du RE 6m dpaisseur alors
que celles de la face trans sont proches de la membrane cytoplasmique 7,5m.
Entre les compartiments cis et trans se trouve le compartiment mdian.
Le nombre de saccules est variable (4-8) chez certains protozoaires, plus de 40 chez les
mtazoaires. Il y en a en moyenne une vingtaine par cellule.
Les vsicules faisant suite aux saccules du compartiment de maturation constituent le rseau
trans golgien (Trans Golgi Network, TGN). Les diffrents types de transport par
lintermdiaire des signaux cellulaires sont effectus par des vsicules tapisses de clathrine
bourgeonnant du rseau trans golgien.
Figure 10 b : Modle
hypothtique de transport de
protines dans une cellule non
polarise
V.7.2. Composition chimique

Les saccules golgiens sont dlimits par une membrane cellulaire classique 35% de
lipides et 65% de protines (protines structurales et enzymes)
* Les enzymes golgiennes :
Ce sont principalement des glycosyl transferases qui modifient les protines et les
lipides travers:
- laddition de glycoprotines provenant du glycocalyx.
- laddition de glycoprotines contenant surtout des ions sulfates et sulfures [(sulfates et
sulfones) = mucopolysaccharides] des cellules cartilagineuses.
- laddition dacides gras.
Les principales enzymes sont la mannosidase et la galactosyltransfrase.
V.7.3. Fonctions
Lacide gras est un atelier demballage et de finition pour les protines et lipides
nouvellement synthtises provenant du RE telles que les hormones et les enzymes.
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Les prcurseurs denzymes (protines nayant pas encore atteint leur stade actif final)
dont la synthse dbute dans les ribosomes et se poursuit dans le RE y subissent une O ou
N-glycosylation (O=Serine HO-CH2-, Thronine; HO-CHCH3-R), envelopps et stocks
dans les saccules de Golgi do ils migrent progressivement. La migration des diffrentes
protines vers la face de maturation (cis) saccompagne dincorporations progressives de
sucres spcifiques chaque tape. Le contenu des saccules golgiens subit une sgrgation au
niveau du TGN. Les vsicules de transport provenant du TGN portent les produits
synthtiss vers leur destination finale (structure, scrtion, etc...).
V.8. Les mitochondries
Elles sont prsentes en grand nombre chez tous les eucaryotes (1000 2000 dans les
hpatocytes).
Schma 11 : La mitochondrie
V.8.1. Structure
Ce sont des organites cellulaires enveloppe dont la taille varie (longueur 2-4m,
paisseur 0,5-1m). Elles
apparaissent arrondies ou allonges mais sont en fait trs
dformables.
Elles sont en forme:
- danneau autour de la pice intermdiaire des spermatozodes
- de btonnet allong chez les trypanosomes
- ramifie dans les cellules des glandes muqueuses descargot.
On y distingue 04 principales parties :
La matrice mitochondriale: elle contient un mlange fortement concentr de
plusieurs centaines denzymes dont celles ncessaires pour loxydation du pyruvate, et des
acides gras et celle du cycle de Krebs.
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La membrane interne : cest une bicouche lipidique. Elle sinvagine pour donner
plusieurs crtes qui augmentent sa surface totale. Elle contient des protines possdant 3
principales fonctions:
- Celles qui effectuent les ractions doxydation avec la chane respiratoire.
- Un complexe enzymatique appel ATP synthtase (=F0F1ATPase) qui produit lATP
dans la matrice (15% des protines de la membrane interne).
- Des protines de transport spcifiques qui rglent le passage des mtabolites vers la
matrice et en provenance de celle-ci.
La membrane externe est galement une bicouche lipidique. Elle contient une
grande protine-canal appele porine, elle est permable toutes les molcules de moins de
10 000 daltons. Elle contient galement des enzymes impliques dans la synthse des lipides
mitochondriaux
Lespace inter membranaire : Il contient plusieurs enzymes qui utilisent lATP
traversant la matrice pour phosphoryler dautres nuclotides.
V.8.2. Fonctions
La mitochondrie est le site des ractions d'oxydation de la respiration. Il en rsulte une
production d'nergie stocke sous forme d'ATP dans les cellules.
Elles constituent les centrales nergtiques de la cellule par leur production dATP,
directement au niveau des sites o cette molcule est fortement consomme. Les
mitochondries sont donc plus frquentes dans les cellules consommatrices dnergie
(Exemple : muscle cardiaque, tubules rnaux, spermatozodes).
V.9. Les chloroplastes
Grace ses pigments, le chloroplaste (CH) transforme l'nergie lumineuse en nergie
chimique permettant la synthse des glucides.
V. 10. Inclusions, lysosome et peroxysome
Ce sont des structures vacuolaires dont le rle est de dgrader les dchets cellulaires.
Le peroxysome est un organite ou une vsicule dcouverte en 1954 par Rhodin et abrite
plusieurs oxydases qui produisent du peroxyde dhydrogne (H2O2), molcule toxique pour
la cellule et prise en charge par une enzyme spcifique, la catalase. Il semble quil soit
prsent dans presque toutes les cellules eucaryotes. Dans les cellules vgtales, on peut
trouver aussi un organite proche: le glyoxysome. Toutes les protines peroxysomales sont
codes par des gnes nuclaires et synthtises sur des ribosomes libres dans le cytosol. Les
lysosomes sont des compartiments acides contenant des enzymes pour la digestion des
protines et des acides nucliques.
Page 24/38
V.11. Le cytosol / le cytosquelette
V.11.1. le cytosol
Le cytosol, ou hyaloplasme se prsente comme un plasma transparent contenant de 70 %
90 % d'eau et de pH proche de la neutralit. Constitu de protines, il est apte changer de
morphologie: il passe de l'tat de gel (collode) l'tat sol (liquide) et rciproquement selon
l'activit cellulaire. Le cytosol contient:
des enzymes de stockage intracellulaire de produits de rserve (graisses, glucides)
des ribosomes assurant la synthse des protines
des prcurseurs des constituants du cytosquelette
V.12. 2. Le cytosquelette
V.12. 2. 1. Dfinition
Cest un rseau complexe de filaments protiques ou tubulaires qui stend travers le
cytoplasme. Il confre aux cellules eucaryotes leur aptitude prendre des formes diffrentes
et se dplacer. Il est galement appel cytomusculature car responsable des mouvements
amibodes, cilis et flagells de la cellule. Il permet aussi les changes cellulaires.
V.12. 2. 2. Elments du cytosquelette
Les diffrentes activits du cytosquelette ne dpendent que de 3 types de filaments
protiques: les microfilaments, les microtubules et les filaments intermdiaires.
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CHAPITRE 2 : METHODES DETUDES CELLULAIRES
En 1939 Theodor Schwann dcrit les cellules animales comme semblables aux
cellules vgtales. Cest ainsi que naquit la cytologie avec la cell doctrine de Schleiden &
Schwann qui stipule que toutes les plantes et les tissus animaux sont des aggrgats de
cellules individuelles. Lorganisme humain compte environ 1018 cellules (= un trillion). La
cellule animale typique mesure 10 20m de diamtre (environ 5 fois plus petite que la plus
petite particule visible) En gnral, la taille dune cellule varie de 0,2m 100m.
La cytologie est la partie de la biologie qui tudie la structure et les fonctions de la
cellule. (= biologie cellulaire).
Les cellules sont de trs petite taille et dorganisation trs complexe. Ltude de leur
structure, de leur composition chimique et de leur fonctionnement (physiologie) a ncessit
la mise au point doutils et de techniques appropris qui ont t perfectionns au fur et
mesure des progrs scientifiques et technologiques raliss dans divers domaines. Pour
comprendre la biologie cellulaire, il est indispensable de se familiariser avec les mthodes et
les appareillages utiliss pour son tude.
Trois approches sont dveloppes pour tudier les divers aspects de la cellule :
- les techniques morphologiques.
- les techniques chimiques et biochimiques.
- les techniques physiologiques.
Ces techniques sont toutes bases sur lemploi de microscopes optiques et lectroniques.
I.
LA MICROSCOPIE
La microscopie est un ensemble de techniques permettant d'obtenir une image des
structures biologiques. Principe : une onde est envoye sur la prparation ou mise par la
prparation. Cette onde est capte par un objectif qui la concentre et passe par un oculaire
qui cre une image observable. Cette image est soit observe l'il nu, soit photographie,
soit enregistre par camra CCD et stock sur ordinateur pour retraitement.
Aujourd'hui la microscopie est divise en deux grands groupes, diffrents par la
nature de la particule lmentaire implique : le microscope optique, aussi appel
photonique, parce qu'il utilise des photons et le microscope lectronique qui utilise des
lectrons pour tudier l'objet.
I.1. Caractristiques du microscope
Le microscope est caractris par :
Page 26/38
- son grossissement ou puissance : Egal au produit du grossissement (ou puissance)
de lobjectif et de loculaire Plus le grossissement de lobjectif est important, plus lobjectif
doit tre proche de lobjet observer.
- son pouvoir de rsolution : La rsolution d'un microscope dsigne sa capacit
sparer des dtails trs voisins. Indpendamment du capteur utilis et des aberrations ou
imperfections des lentilles, la rsolution du microscope optique est fondamentalement
limite par la diffraction de la lumire.
I.2. Prsentation du microscope optique :
Un microscope optique en gnral est compos dun statif (pied) qui assure la stabilit de
lappareil, dun tube optique le long duquel existe un systme de lentilles en verre et
comportant ses extrmits un oculaire permettant de recueillir limage et des objectif
servant agrandir un certain nombre de fois limage de la prparation, dune platine (porte
objet) perce dun trou et munie de pinces pour immobiliser la lame et dune source
lumineuse clairant la prparation.
Lgende
1 : oculaire
2 : tube optique
3 : tourelle ou revolver
4 : objectif
5 : potence
6 : platine
7 : prparation
8 : diaphragme
9 : condenseur
10 : clairage, source lumineuse
11 : socle
12 : vis macromtrique
13 : vis micromtrique
Schma 12 : Microscope optique
I.3. Principe du fonctionnement du microscope :

Deux types dobservations sont ralisables en microscopie : lobservation par transmission
pour le microscope optique et pour le microscope lectronique transmission et
lobservation par rflexion pour le microscope lectronique balayage.
Donc le microscope travaille en :
Transmission : lchantillon est travers par des photons et lectrons ; les lentilles de verre
(MO) ou les champs lectromagntiques (MET) permettent lobtention dune image qui est
reprise par loculaire (MO) ou cran fluorescent (MET).
Page 27/38
Rflexion : le microscope ne capte que les rayons rflchis par les parois de la prparation.
Ce type de microscopie donne une image de la surface des objets et non de leur structure
interne.
Lintensit tant fonction de lorientation des parois par rapport au systme optique, cela
donne une image en relief de lobjet. Elles ne sont donc pas applicables des objets sans
relief comme les coupes de tissus ! Elles ncessitent un clairage latral de lobjet. Ce
mode de microscopie est peu utilis, il correspond aux loupes binoculaires ou
stromicroscopes, au microscope fond noir en microscopie optique et au microscope
lectronique balayage (MEB) en microscopie lectronique.
I.4. Conditions dobservation en microscopie :
Pour effectuer une observation en microscopie deux exigences simposent : lpaisseur de
lchantillon et le contraste.
Lpaisseur de lchantillon : pour une observation par transmission lchantillon doit
prsenter une faible paisseur afin de permettre le passage du faisceau incident des photons
ou dlectrons do la ncessit de faire des coupes trs trs fines. Les coupes exiges en
(MO) varient entre 2 m 10 m et de 0,03m 0,05m
Le contraste : Lobservation par transmission nest possible que si certaines rgions de la
cupe absorbent les photons ou les lectrons plus que dautres (effet contraste). En rgle
gnrale, les constituants cellulaires prsentent des contrastes naturels faibles do
lutilisation de certains artifices tels que les montages optiques qui amplifient les contrastes
naturels comme le microscope contraste de phase ou des colorants vitaux slectifs (MO)
ou encore des sels de mtaux lourds comme les sels de plomb (ME).
I.5. Types de microscopes optiques :
Un certain nombre de microscopes ayant chacun des montages optiques spciaux ont
t mis au point pour permettre lobservation des cellules dans certaines conditions et
amliorer la qualit de celle ci. Le dveloppement de ces microscopes rpond
principalement 2 objectifs :
- augmenter les contrastes pour mieux visualiser les structures subcellulaires
- amliorer le pouvoir de rsolution (voir des dtails de plus en plus petits !)
Parmi ces microscopes, nous avons :
I.5.1. Les microscopes optiques, lumire ou photoniques
Il existe divers types de microscopes lumire :
- les microscopes par transmission ; ils permettent l'observation directe de structures
dont les dimensions sont de l'ordre de 0,2 m : ce sont les autres microscopes donnant des
Page 28/38
informations indirectes sur l'ultrastructure des cellules : microscope lumire polarise,
microscope fond noir et microscope contraste de phase
- le microscope confocal balayage.
I.5.1.1. Le microscope par transmission
Le microscope le plus courant utilise la lumire visible (lumire blanche constitue
de plusieurs longueurs d'onde) qui est transmise directement sur la prpa biologique. Ces
microscopes sont quips de systme de lentilles qui condensent la lumire sur la
prparation observer. Les chantillons biologiques observs sont traverss par la lumire.
I.5.1.2. Le microscope contraste de phase
Il permet dobserver des objets non pralablement colors, par exemple des cellules
vivantes. Lorsque des ondes lumineuses traversent des objets colors, leurs amplitudes sont
diminues, cest ce qui cr limage. Quand les ondes lumineuses traversent un objet non
color leur amplitude est trs peu change, mais leur phase est modifie, ce qui cre des
interfrences. Ce sont les effets de ces interfrences qui sont exploits pour crer une image
dans les microscopes contraste de phase.
Figure 1 : Exemple dun microscope contraste de phase
I.5.1.3. Le microscope fond noir

I.5.1.4. Le microscope lumire polarise
I.5.1.5. Le microscope rayons UV (= microscope fluorescence)
Cest une technique de microscopie optique qui tire profit du phnomne de
fluorescence pour observer divers composs. Elle fait dsormais partie des mthodes de
recherche classiques en biologie. La fluorescence est une mission lumineuse provoque par
diverses formes d'excitation autres que la chaleur (on parle parfois de lumire froide ).
Elle se distingue de la phosphorescence (phnomne observ lorsqu'une matire continue
Page 29/38
mettre de la lumire aprs avoir t claire) en ce que la production de lumire intervient
immdiatement ou rapidement aprs l'excitation. En microscopie fluorescence, on peut
donc visualiser directement des substances fluorescentes. Pour des substances, des cellules,
des molcules non fluorescentes, il est ncessaire de les marquer par des substances appeles
fluorochromes (tableau I), comme par exemple le DAPI (Di Amidino Phnyle Indole) qui
marque l'ADN et fluoresce en bleu.
Tableau 3: Les marqueurs fluorescents les plus courants et leur lumire d'excitation.
Principe de la microscopie fluorescence

La fluorescence est la proprit que possdent certains corps d'mettre de la lumire
aprs avoir absorb des photons de plus haute nergie. La microscopie fluorescence repose
sur la formation d'une image par dtection de cette lumire mise.
Page 30/38
Mycobacterium
tuberculosis
Cellules
pithliales
Figure 2 : Exemple dun microscope fluorescence
Schma 14 : Principe de limmunofluorescence
I.5.1.6. Le microscope confocal balayage

Sa technique consiste balayer une prparation par un faisceau dlectrons, permettant la
mise en vidence des reliefs de lchantillon.
Page 31/38
Schma 15 : Microscope confocal balayage
II.2. Les microscopes lectroniques

Le principe de fonctionnement d'un microscope lectronique ressemble un peu
celui d'un microscope optique sauf quau lieu des photons ce microscope fonction avec des
lectrons le faisceau est produit et acclr par un canon lectrons (cathode et anode
perce).
Lensemble du dispositif est plac sous vide. Les lentilles de verre sont remplaces par des
bobines lectromagntiques seules capables de focaliser les lectrons, et de crer des
images. Avec ces microscopes on ne peut examiner que des cellules tues, mais le pouvoir
sparateur est de lordre de quelques A. On aura donc accs lultra structure des
organites. Il existe deux variantes de la microscopie lectronique :
a. Le microscope lectronique par transmission:
- tout seffectue sous vide;
- un filament de Tungstne chauff met des lectrons;
- les lectrons sont plus ou moins diffracts par les diverses structures cellulaires.
b. Le microscope lectronique balayage :
- le spcimen est vaporis par un mtal lourd;
- le spcimen est vaporis par un faisceau dlectron;
- Il ya mission de faisceau secondaires par le spcimen;
- Il y a production dune vue 3D du spcimen.
Page 32/38
Tableau 4 : Comparaison entre le microscope optique et lectronique
II. TECHNIQUES DE PREPARATION DES ECHANTILLONS

II.1. Etudes des structures
Afin dtudier des structures on utilise un certain nombre de techniques : prparation des
coupes fines, coloration ngative, ombrage mtallique, cryodcapage.
II.1.2. La prparation des coupes fines se fait en plusieurs tapes :
1. La fixation se fait par le formaldhyde et le glutaraldhyde, qui sont des aldhydes
trs ractifs ou le ttroxyde dosmium. Malheureusement la fixation tue les cellules mais
permet leur immobilisation et leur conservation.
Exemple de fixation
au glutaraldhyde
Page 33/38
2. La dshydratation permet llimination de leau en la remplaant par des solvants de
types xylne et tolune.
3. Linclusion dans de la rsine, cire ou paraffine, permet une solidification de
lchantillon, par leur polymrisation.
4. La formation des coupes ultrafines est ralise par des microtomes.
Schma 16: Coupe au microtome
5. La coloration des coupes se fait par diffrents types de colorants ou mthodes de

mise en vidence :
o
Les colorants mtachromatiques qui changent de couleur suivant la nature des
structures colores. On donnera comme exemple le May-Grunwald-Giemsa (MGG), qui

correspond lassociation dosine et de bleu de mthylne, permettant la coloration des
frottis sanguins.
o
Les colorants histochimiques comme lacide priodique de Schiff qui colore les
polysaccharides et le noir soudan qui colore les lipides.

o
La mthode histo-enzymatique qui permet la formation dun produit color par
action dune enzyme sur son substrat incolore.

6. Le montage rend la prparation observable.
La coloration ngative permet de mettre en vidence le contour de petits objets, grce
des projections de mtaux lourds sur la prparation.
Les ombrages mtalliques permettent daccentuer les reliefs dun objet en vaporisant sous
vide une trs fine couche mtallique avec un certain angle dincidence entranant la
formation dombre porte.
Page 34/38
II.1.2. Mise en culture

La culture cellulaire est obtenue aprs le maintien en vie de cellules plus de 24 heures dans
un milieu de culture artificielle. On met en vidence deux types de cultures :
Les cultures organotypiques sont soumises un maintien de la diffrentiation
morphologique et fonctionnelle. Ces fragments dorganes ou tissus sont appels des

explants.
Les cultures histiotypiques correspondent une multiplication active mais sans
maintien de lorganisation.
Page 35/38
Schma 17 : Cultures
III. LES METHODES DE FRACTIONNEMENT SUBCELLULAIRE

Les mthodes de fractionnement subcellulaire consistent sparer les diffrents composants
cellulaires par destruction de la membrane plasmique, puis par dsorganisation de la cellule.
III.1. Homognisation
Le but de lhomognisation est de rompre la membrane plasmique (ou la paroi pour les
cellules vgtales et fongique). Pour se faire on met les cellules en suspension dans un
tampon de pH et de force ionique connus. Lhomogniseur est un tube de verre dans
lequel on place la prparation puis un piston en verre. La cellule passera entre le tube de
verre et le piston, sera ainsi comprime et clatera, librant son contenu dans le tampon. On
obtient un homognat avec tous les constituants de la cellule. La plupart des organites
restent intactes, mais sans prcaution particulire lappareil de Golgi et le rticulum
endoplasmique vont tre fragments sous forme de vsicules appeles microsomes.
III.2. Purification
III.2.1. Centrifugation diffrentielle
Elle permet la purification de lhomognat en fonction de la taille et de la densit de ses
constituants. Pour se faire on centrifuge lhomognat diffrentes vitesses ; chaque
vitesse, diffrents organites se dposent dans le culot, qui sera prlev
A 1000g, on observe la sdimentation du noyau et du cytosquelette.
A 10000g, on observe la sdimentation des mitochondries, des lysosomes et des
peroxysomes.
A 105000g (ultracentrifugation), on observe la sdimentation de la membrane plasmique,
des microsomes et des grands polysomes.
Page 36/38
A 200000g, on observe la sdimentation des ribosomes et des petits polysomes. Ce qui
reste la fin cest la fraction hydrosoluble du cytosol.
Schma 18 : Centrifugation differentielle
III.2.2.
Centrifugation par gradient prform ou de densit

La centrifugation par gradient prform consiste dposer une mince couche dhomognat
au dessus de la solution de saccharose dont la concentration varie de faon rgulire et
dcroissante du bas vers le haut. Les diffrents constituants de lhomognat sdimentent tous
des vitesses diffrentes, on obtient ainsi diffrentes bandes (la couche la plus dense tant
au fond) que lon sparera. La vitesse de sdimentation dpend de la taille des molcules,
de la forme des particules et de la densit. La vitesse de sdimentation est dfinie par le
coefficient de sdimentation en unit Svedberg (S).
Page 37/38
Schma 19 : Centrifugation par densit
III.3.Diffraction des rayons X

La diffraction
permet de dterminer la structure tridimensionnelle dune
molcule. Elle est fonction de la proprit des rayons X dtre diffracts lorsquils
rencontrent des obstacles. Selon lespacement et la disposition des atomes, les rayons seront
dvis de manire diffrente. Ex structure en double hlice de la molcule dADN par la
cristallographie de diffraction de rayons X.
III.4. Cytomtrie de flux
La cytomtrie en flux dcrit une technique danalyse de routine des cellules ou
particules biologiques en suspension qui traversent une cellule de mesure les unes aprs les
autres. Un ou plusieurs lasers excitent chaque particule ainsi injectes. Si les particules ont
t marques avec un ou plusieurs fluorochromes, la source lumineuse excite ceux-ci et nous
informe sur certains aspects biologiques supplmentaires
Le cytomtre mesure la lumire de fluorescence et la lumire diffus. Grce des
phnomnes de diffusion lumineuse, il caractrise les cellules selon : la taille, la granularit
et la fluorescence.
Schma 19 : sparation des populations par cytomtie
Page 38/38

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INSTUTUT UNIVERSITAIRE DE TECHNOLOGIE

Plate forme des Technologies de lInformation et du Numrique : PFTIN

COURS DE BIOLOGIE CELLULAIRE

Pr. Leopold Gustave LEHMAN

Mme Arlette Linda NGAPMEN p. MBOA

HISTORIQUE DE LA BIOLOGIE CELLULAIRE

1677 : Antoine van Leeuwenhoek, connu pour ses amliorations du

III. GENERALITES SUR LA CELLULE

Les organismes cellulaires eucaryotes : ce sont, contrairement aux procaryotes, des

IV. CELLULES PROCARYOTES ET CELLULES EUCARYOTES

Tableau 1 : Composition moyenne des cellules

IV.1. CELLULES PROCARYOTES

halophiles et les cellules thermoacidophiles. Les archobactries sont les premires

Elles prennent en compte les bactries contemporaines, les mycoplasmes et les

Les bactries gram + retiennent le colorant, coloration violette. Leurs parois

Schma 2 : Organisation gnrale de la cellule procaryote

IV.2. CELLULES EUCARYOTES

Schma 4 : Organisation gnrale

Gnralement petite (1-10m)

Gnralement grande (10-100m)

Directe par fission binaire

Certaines formes de mitose, Centrioles

Gnralement absent ou trs modifi

Prsent chez la plupart des partenaires mle

Absorption, ingestion, photosynthse chez

Mitochondrie prsente avec enzymes

Schma 5 : Diversit des cellules au sein dun organisme

chloroplastes, noyau, membrane cellulaire, abritent des molcules et matriaux de base en

Schma 6 : Quelques oses

V.2. La membrane plasmique

Schma 7: La membrane plasmique

V.2.1. Composition des membranes

Les glycrophospholipides correspondent lassociation de glycrol, de deux acides

Les sphingophospholipides correspondent lassociation de sphingosine, dacide gras,

Ancres sur les glyco-phosphatidyl-inositol (GPI) qui correspondent lassociation

Ancres la membrane par lintermdiaire dacide gras (acide palmitique et acide

c) Les protines transmembranaires

Les glycoprotines contiennent des polysaccharides courts, souvent ramifis et

Pour information, les protoglycanes scrtoires composent la matrice extracellulaire (tissu

Les bicouches phospholipidiques permettent la formation de vsicules sphriques

V.2.2.2. Asymtrie membranaire

Le feuillet interne est caractris par les phosphatidyl-srine (amphotre) et

Le feuillet externe est caractris par la sphingomyline (charge ngative) et la

La proportion de cholestrol : Le cholestrol renforce la solidit et rigidit membranaire

Le nombre de protines : Les protines diminuent la fluidit membranaire.

V.2.3. Diffrenciation de la membrane plasmique

Les jonctions cellules matrice-extracellulaire sont des rgions diffrencies de la

occlusions qui interdissent entirement la diffusion

(LadyofHats) Traduction Berru

aves les molcules de la jonction dune part, et

cytoplasmique o sont ancres les cadhrines et les

Les catnines permettent la jonction entre les Production

(LadyofHats) Traduction Berru

Lafadine et la ponsine permettent la jonction

transmembranaires. Les nexus permettent une cooprativit mtabolique intercellulaire en

une membrane externe au contact du cytoplasme

une membrane interne au contact du nucloplasme

Les protines non histones

la chromatine disperse (ou euchromatine) constitue principalement de fibres A

la chromatine condense (ou htrochomatine) constitue principalement de fibres B

un composant fibrillaire clair: correspond aux organisateurs nuclolaires.

un composant fibrillaire dense: correspond aux transcrits primaires donc a la partie