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Rpublique Algrienne Dmocratique et Populaire

Ministre de lEnseignement Suprieur et de la Recherche Scientifique


Facult des Sciences de la Nature et de la Vie et des Sciences de la Terre
Dpartement des sciences biologique

Mmoire pour lobtention du diplme de Master

Filire : Hydrobiologie marine et continentale


Spcialit: Hydrobiologie

Reproduction du poisson chat africain Clarias garipinus


(Burchell, 1822) provoque par des inducteurs hormonaux

Soutenu le : 20/06/2017

Par :
-Mr: REHIF Hocine

-Mr: MELHA Salheddine


Devant le Jury
Mr. ZEGHDOUDI E. Prsident MAA (UDB Khemis Miliana)

Dr. ROUABAH A. Promoteur MCB (UDB Khemis-Miliana)

Mr. Djezzar M. Examinateur MCB (UDB Khemis-Miliana)

Mme. Chebaani N. Examinatrice MAA (UDB Khemis-Miliana)

Anne universitaire : 2016/2017


Rsum :
Notre travail est ffectu sur la reproduction artificielle du poisson chat africain (clarias
gariepinus).
Clarias gariepinus est sans aucun doute une espce adapte laquaculture. Elle et est connu
sous le nom de poisson-chat africain pour la prsence des barbillons au niveau de leurs
mchoires. Ce poisson peut avoir une taille maximale de 150cm et il pse une moyenne de
7kg. Le C.gariepinus est une espce benthoplagique, les habitats frquents sont des plaines
dinondation, et des marcages et prfre des habitats sombre a faible luminosit en ralit,
cest un poisson photophobie.
Son rgime est omnivore tendance carnassire, le C. gariepinus devient mature au cours de
sa premire anne. Et en ce qui concerne la reproduction naturelle elle se droule au moment
de la saison des pluies. La reproduction en captivit ce fait sans traitement hormonal
(Semi naturel) ou avec traitement hormonal.

Au cours de notre stage la ferme dAbderrahmane et au parc animalier menea le poisson-


chat africain a t induit artificiellement. Pour cela on a utilis la HCG et la Gn-RH. Ces
inducteurs ont t utilis selon un protocole prcis et nous ont permis dobtenir des rsultats
suivants : La technique de reproduction artificielle par la GnRH et la HCG titre
exprimental nous permet daffirmer que lutilisation de la GnRH a permis lovulation de la
totalit des gniteurs avec une dose de 3mg/kg ce qui nous rconforte dans le protocole qui a
t programm et appliqu.
En ce qui concerne la HCG nos rsultats sont mitigs en raison probablement de la faible dose
applique qui ntait pas suffisante pour achever lovogense et la folliculogenese voir
provoquer lovulation.
Le mme rsultat positif avec la GnRH a t obtenu dans la parc animalier ce qui confirme
que la technique artificielle avec la GnRH est bien maitrise.
Pour cela nous suggrons daugmenter de 500 UI 800U.I./kg la HCG et voir quelle est son
effet sur lovulation du Clarias et va nous permettre dans lavenir de parfaire davantage nos
techniques afin damliorer la production de cette espce et ouvrira certainement dautres
perspectives du dveloppement de laquaculture en Algrie.
Les mots cls : C. gariepinus ; Gn-RH ; HCG ; Poisson-chat
Summary:

Our work is carried out on the artificial reproduction of African catfish (clarias gariepinus).

Clarias gariepinus is undoubtedly a species suitable for aquaculture. She and is known as
African catfish for the presence of barbs in their jaws. This fish can have a maximum size of
150cm and it weighs an average of 7kg. C.gariepinus is a benthopelagic species, habitats
frequented are flood plains, and swamps and prefers dark habitats at low light in reality, it is a
photophobic fish.

Its diet is omnivorous to carnivorous tendency; C. gariepinus becomes mature during its first
year. And with regard to natural reproduction, it takes place at the time of the rainy season.
Reproduction in captivity this fact without hormonal treatment (Semi natural) or with
hormonal treatment.

During our internship at the farm of Abderrahmane and the animal park in menea the African
catfish was induced artificially. For this purpose, HCG and Gn-RH were used. These inducers
were used according to a precise protocol and allowed us to obtain the following results: The
artificial reproduction technique by GnRH and HCG on an experimental basis allows us to
affirm that the use of GnRH allowed the " Ovulation of the whole of the broodstocks with a
dose of 3mg / kg which comfort us in the protocol that was programmed and applied.
Regarding HCG our results are mixed due probably to the low dose applied which was not
sufficient to complete the oogenesis and folliculogenesis see causing ovulation.
The same positive result with GnRH was obtained in the animal park, which confirms that the
artificial technique with GnRH is well mastered.
For this we suggest increasing from 500 IU to 800U.I./kg the HCG and seeing what its effect
on the ovulation of Clarias and will allow us in the future to further improve our techniques to
improve the production of this species and will certainly open other perspectives for the
development of aquaculture in Algeria.
Keywords: C. gariepinus; Gn-RH; HCG; Catfish

( ) .

07 057 0 .

.
.
HCGGn-RH
:
Gn-RH 3/ ,
.
HCG
.
Gn-RH
.
HCG 577 077 ,
.
.

: . Clarias gariepinus, HCG,GnRH,


Uil nous soit permit, de traduire nos chaleureuses reconnaissances que
nous prouvons envers notre promoteur Mr : ROUABAH A. pour son
aide, soutient, conseils et, directives quil nous-a tant apport durant toutes ces
annes et, spcialement cette dernire anne avec complaisance et
gentillesse, toujours la bonne solution proposer et, de nous faire leffet de
savoir tout faire.

Nous tenons aussi exprimer, par la mme occasion, tout le respect


que nous avons en remerciant touts les enseignants du Hydrobiologie marine
et continentale pour leurs gnrosits de mettre la disposition de tous
tudiants leurs savoirs faire, de leurs persvrances honorer cet art, le
respecter et chercher sans relche le perfectionner, lenrichir et le chrir.

Enfin nous remercions infiniment tous ceux qui de loin ou de prs nous-
ont aid ou conseills pour llaboration de ce modeste travail.
Ddicaces

Tout dabord, je ddie ce travail mes trs chers parents pour leur
soutien moral et financier ainsi que laffection quils mont donn depuis
ma naissance jusqu nos jours et quils ne cessent de me donner
mon trs cher frre melha amine que Dieu lui donne une longue vie
mes trs chers amis qui ont t toujours mes cts dans les moments
les plus difficiles, spcialement Chita Hocine et Rehif Hocine Mazedi
Abd El Ghani Kreiria mohamed Asbar youssef Djouabi boualem
Daoued Hwadef .
Je remercie aussi toute la promotion 2me anne master 2016/2017 :
Hydrobiologie marines et continentale qui je souhaite plein de succs
et chances dans leur vie professionnelle
Sans oublier de remercier tous mes enseignants.

Salheddine
0

Louange dieu le puissant, prire et salut sur le prophte


Mohamed que le salut sur lui.
Je remercie dieu et grce lui que je vous arrive ce niveau.
Je ddie mon travail mes parents qui mont aide dans tous les
circonstances pour la bonne ralisation de cette mmoire.
Comme je la ddie mes frres et mes surs.
Mme je ddie cette mmoire aussi toute la famille Rehif et
La famille Hathout.
Et tous mes amis : Abdelghani, bouelem, hocine, yossef,
daoud, mohamed ,abasse ,djamal et tous ceux qui en out
aider de prs ou de loin raliser ce travail exception Et
Tous ceux qui me connaissent.

Hocine
Liste des tableaux
Tableau 1 : La composition alimentaire des filets de poisson chat africain C.gariepinus
(Ducarme et Micha, 2003)..12
Tableau 2 : les gniteurs utiliss, leurs tailles, poids et tours de poitrine ..29
Tableau3 : les doses de HCG injectes six femelles...31
Tableau4 : les doses de Gn-RH injectes six femelles32
Tableau5 : les doses de Gn-RH injectes deux males..33

Tableau6 : les doses de HCG injectes deux males.....33

Tableau7 : rsultats des prlvements dovules au mme temps de latence (injection par
HCG)...41
Tableau8 : rsultats des prlvements dovules au mme temps de latence (injection par
Gn-RH).41

Tableau9 : rsultats des prlvements dovules au mme temps de latence aprs la disme
injection.42

Tableau 10 : Rsultats des prlvements dovules et le temps de latence..42

Tableau 11: Nombre dufs par kilogramme de poids vif pour chaque femelle par la mthode
volumtrique.42

Tableau12 : taux de fcondation.44

Tableau13 : rsultat de la fcondation et de lclosion...46

Tableau14 : taux dclosion47


Liste des figures

Figure 1 : Clarias gariepinus (Burchell 1822)....................5

Figure 2 : la localisation de clarias gariepinus en Algrie6

Figure 3 : Production aquacole mondiale de Clarias gariepinus (FAO, 2012)8

Figure 4 : Principaux pays producteurs de Clarias gariepinus (FAO 2006)9

Figure 5 : Physiologie de la reproduction chez les poissons. Organes et hormones impliqus


dans la reproduction chez les poissons.(schlumberger,2002).23

Figure 6 : la ferme aquacole (Abderrahmane).25

Figure 7 : Eugenia caryophyllata.27

Figure 8 : Un gniteur mle de C .gariepinus ...28

Figure 9 : Un gniteur femelle de C.gariepinus..28

Figure 10 : lettrage en plastique......29

Figure 11 : marquage des gniteurs.....29

Figure 12 : balance lectronique .30

Figure 13: prparation des doses de Gn-RH et HCG...31

Figure 14: Injection de lHCG et de GnRH31

Figure 15: dissection des testicules..35

Figure 16 : prlvement dutesticule.35

Figure 17 : prlevement des sperme35

Figure 18 : stripping ..36

Figure 19 : ufs stripp...36

Figure 20 : Fcondation des ufs par la laitance..36

Figure 21: mlange du sperme et des ovules sec..37

Figure 22: ajout la solution de fcondation...37

Figure 23: addition de lait .37

Figure 24: addition de largile.37

Figure25 : mise en incubation dans le tamis38


Figure 26: rcolte du zooplancton (rotifres) ..39

Figure 27 : Diffrant stades du dveloppement embryonnaire....45

Figure 28 : bassin en terre pour le dveloppement des zooplanctons 47


Liste des abreviations

Gn-RH: Adeno corticotrop hormone


HCG : Human chorion gonadotropin
GTH : Gonadotrophine hormone
LH : Luteinizing hormone
NPO : Nucleus preopticus
NLT : Nucleus lateralis tuberis
RH : Releasing hormone
STH : Somatotrop hormone
UI : Unit international
Fig. : Figure

h : heur

w : willaya
Sommaire

Introduction. 1

Chapitre I : Gnralits

I.1. Biocologie de Clarias gariepinus (Burchell,1822)...... 4


I.1 .2 . Position systmatique .... 4

I.1 .3. Caractristiques morphologiques...... 5

I.1.4. Distribution gographiques........ 6

I.1.5. Exigences cologique.... 7

I.1.6. Aspect gnraux de laquaculture de Clarias gariepinus ..... 7

I.1.7. Production mondiale de Clarias gariepinus.. .8

I.1.8. Principaux pays producteurs .9

I.1.9. Rgime alimentaire... 10

I.1.10. Reproduction naturelle de Clarias gariepinus. 10

I.1.11. Le cannibalisme et la prdation... 11

I.1.12. Qualit de la chaire de Clarias gariepinus.. .12

Chapitre II : Biologie de lespce


II. endocrinologie de la reproduction du tlosten ...13

II.1. Mcanismes de la reproduction...13

II.1.1. Rle de Lhypothalamus..................................................................................... 13

II.1.2. LOrgane Pinal... 13

II.1.3. Lhypophyse.. .14

II.1.4. Rle des gonades .15

II.1.5. La GnRH dans laxe hypothalamo -hypophysogonadique des tlostens. .15

II.1.6. Influence des facteurs abiotiques externes sur la reproduction .. .17


II.1.6.1. Temprature .... 17

II.1.6.2.La photopriode . ..17

II.1.6.3.Lenvironnement. ..18

II.1.6.4.La qualit physico-chimique de leau. ..18

II.1.6.5 .Lalimentation ..18

II.1.7 .Gamtogense .. ..18

II.1.7.1. Spermatogense. ...18

II.1. 7.2 .Ovogense et vitellogenese......19

a-Ovognse ...19

b- Vitllognse.......20

II.1.8. Niveau dintervention sur la reproduction des tlostens..21

Chapitre III : Matriel et mthode

III.1. Prsentation du site exprimental....... 25

III.2. Matriel biologique ... 25

III.2.1.Collecte des gniteurs de Clarias gariepinus ....25

III.2.2. Alimentation des gniteurs....27

III.3. Protocole exprimentale..27

III.3.1. Anesthsie .28

III.3.2. Sexage....28

III.3.3.Marquage .. 29

III.3.4. Pesage .. 29

III.3.5. Induction des femelles.. 29

III.3.6.Traitement hormonal... 30

III.3.7 .Chronologie de linduction hormonale... 31


III.3.8. Le temps de latence....33
III.3.9. La fcondation...33

III.3.9.1. Prlvement des testicules ..33


III.3.9.2. Prlvement du sperme....34
III.3.9.3.Prlvement des ovules ....35

III.3.10. Mlange des gamtes.....36

III.3.11. Incubation des ufs ...37

III.3.12. Lembryogense........38

III.3 .13. Lclosion.38

III.3.14. levage larvaire......38

III.3.15. Rsorption de la vsicule vitelline..38

Chapitre IV : Rsultats et discussions


IV. Rsultats et discussions 39

IV.1. Reproduction de Clarias gariepinus... 39

IV.2. Maturation des


gonades ... 39

IV.3.Dtermination de ltat de maturation des femelles.... 39

IV.4.Ferme Abderrahmane.. 39

IV.5. Stripping des femelles. 40

IV.6. Parc animalier de MENEA.. 40

IV.7. Echec de la reproduction avec de la HCG la ferme Abderrahmane.41

IV.8. Prlvement des ovules.41

mthode thorique .... 42


la mthode volumtrique ....... 43

IV.9. Prlvement du sperme.....43

IV.10. fcondation et mis en incubation des ufs .44

IV.11.Dveloppement embryonnaire des ufs ...45


IV.12.Premire et deuxime tentative de reproduction par GnRH et HCG ..45

IV.13.Troisime exprience au parc animalier de Menea..46

IV.14. Elevages larvaires..47

IV.15. Alimentation des larves 47

IV.16. Collecte des gniteurs....48

IV.17. Induction hormonale des gniteurs....48

Conclusion

Bibliographie

Annexe
Introduction
Introduction

Introduction
L'aquaculture, est une activit vaste et vari, et prend de plus en plus dimportance dans
le secteur du dveloppement alimentaire .Elle est considre comme un grand secteur dans la
production daliment forte teneur en protine animale. Elle est devenue un important secteur
pour combler le dficit en produit de la pche dans tous les continents. Elle est compose de
llevage de poissons de mer, deau douce, de crustacs, de mollusques, dalgues. Au cours de
la dernire dcennie elle a connu un essor considrable et important dans le monde, elle est
considre de plus en plus comme partie intgrante des moyens utiliss pour assurer la scurit
alimentaire et le dveloppement conomique mondial (FAO ,2002).

Dans cette tude nous avons fix comme objectif la reproduction du Clarias garipinus grce
une technique de reproduction qui fait appel des hormones dinduction qui sont la HCG
sriques et la GnRH travers un nouveau protocole dinduction tenant compte de lespce et
des conditions extrmes dfavorables du lieu de notre exprience .Le choix dun tel thme de
recherches est dicte par la fait que cette espce autochtone st en danger de disparition et les
diffrents essais de reproduction induite vont permettre de mieux contrler la maitrise de sa
physiologie de la reproduction afin daboutir la mthode La plus efficace de reproduction.

Le poisson-chat africain Clarias gariepinus est une espce d'aquaculture eau chaude majeure
en Afrique et Asie (Khan et Abidi, 2011). C'est une excellente espce de culture intensive en
raison de sa tolrance une mauvaise qualit d'eau sa capacit maintenir une forte
croissance haute densit, sa rsistance aux maladies et la capacit d'accepter des aliments
bon march. (Nyina-wamwiza et al. 2007).

Dans ce but, la maitrise du processus de reproduction artificielle devient une ncessit afin
dassurer une continuit de la production au niveau dune ferme aquacole.

A cet effet, nous avons entrepris ce travail au niveau de la ferme Abderrahmane Menea (EL
Golea) afin de raliser la reproduction artificielle de poisson chat Clarias gariepinus
avec linduction de la ponte en utilisant la HCG et la Gn-RH.

Notre travail t rpartie en quatre chapitres :


Le premier, traite des gnralits sur lespce.
Le deuxime, Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens.
Le Troisime, prsente le matriel et les mthodes choisies.
Le quatrime, expose les rsultats obtenus avec une discussion justifiant ces rsultats.

1
Chapitre I
Gnralit
Chapitre I Gnralit

I.1. Bio-cologie de Clarias gariepinus (Burchell,1822)

Le travail que nous avons accompli se rapporte au poisson-chat africain clarias gariepinus
(Burchell ,1822) (Viveen et al. in Imorou toko, 2007)

Clarias gariepinus ou poisson- chat Africain est une espce rsistante aux pathologies et
trs apprcies par les pisciculteurs en raison de sa prdisposition sadapter aux facteurs
abiotiques de certains plans deau et surtout grce la rapidit de sa croissance et la qualit
de sa chaire et au peut darrte quelle contient. A travers le monde une attention particulire
est attribue la reproduction artificielle de cette espce en raison de sa particularit
rpondre favorablement en donnant une quantit dufs assez importante et galement un bon
taux dclosion et une bonne survie des post-larves.

I.1.2 Position systmatique


Les suliriformes reprsentent prs du tiers des poissons deau douce connus dans le monde
avec 34 familles (dont deux fossiles) comprenant 437 genres et plus de 2700 espces (Teugels
et al.in Chikou, 2006), en majorit deaux douce et /ou saumtres (Teugels in chikou, 2006).
La classification ci-dessus est dcrite dans (Teugels in Imorou toko, 2007)
Rgne : Animal
Embranchement : Chordata
Sous embranchement : Vertbrata
Super classe : Osteichtyes
Classe : Actinopettygii
Ordre : Siluriforme
Famille : Clariidae
Genre : Clarias
Espces : Clarias gariepinus (Burchell, 1822)

4
Chapitre I Gnralit

I.1.3. Caractristiques morphologiques

La dnomination de poisson chat dsigne communment quelques espces ayant des


barbillons au niveau de leurs mchoires (Proue.1974). Cette espce se caractrise par un
corps cinq neuf fois plus long que haut (Le Berre1989) cylindrique allong, ce poisson peut
avoir une taille maximale de 70 cm jusqu' 150Cm pour certains spcimens (Lvque et al.
1990), et il pse plus de 7kg (Le Berre1989).
Couleur allant du noir assez prononc au brun clair, souvent avec des taches aux nuances vert
olive et grises, partie inferieures de la tte et de labdomen blanche souvent avec extrmit
des nageoires rougeoyant, surtout au moment de la reproduction.
(Teugels,1986,Skelton,1993). tte grosse orient vers le bas, solide et compltement encaiss,
la nageoire dorsale compte 61 a 75 rayons et la nageoire anale entre 45 et 60 (Moreau,
1988).les nageoires dorsales et anale qui sont extrmement longue (atteindre la nageoire
caudale)contenant seulement des rayons mous (De graaf et janssen,1996) et pas de nageoire
adipeuse, la nageoire caudale est arrondie, la nageoire pectorale est pourvue daiguillons,
utilises pour se dfendre ou marcher sur le fond des pices deau (Moreau1988). Une
absence dcailles, la peau est recouverte de mucus (Le Berre, 1989) la bouche est large et
permet au poisson chat africain de prendre une grande varit de nourriture , depuis des
organismes minuscules du zooplancton, jusqu aux poissons il est capable daspirer le benthos
du fond (Lacroix,2004) il une mchoire avec des de nombreuses srie de dents fines et
pointues sries de dents longues sur la cloison vomrienne ,huit barbillons dont leur principale
fonction est la dtection des proies , le plus long de ces barbillons peut mesurer trois fois la
longueur de la tte et petites yeux latraux (Le Berre,1989).

Figure 01 : Clarais gariepinus (Burchell 1822)

5
Chapitre I Gnralit

I.1.4. Distribution gographiques

En Algrie
On trouve C.gariepinus dans la rgion du Zibans (Tolga W Biskra) dans
Oued Righ au niveau de Merdjadja , Temacine et Sidi bouhania ,aussi Tassili Najjer
(Iherir,Tadjeradjeri, Oued tikhammalt, Oued Tarat et Oued Iscien ),(figure02),( Le
Berre,1989).

Figure02 : la localisation de clarias gariepinus en Algrie

Dans le monde :
Clarias gariepinus, qui est considr comme lune des plus importantes espces de poisson
chat tropicales pour laquaculture une distribution presque panafricaine, du Nil lAfrique
de louest et de lAlgrie lAfrique australe, il se produit aussi dans lAsie Mineure (La
Syrie, et le sud de la Turquie) (De Graaf et Janssen, 1996).

6
Chapitre I Gnralit

I.1.5. Exigences cologique

C. gariepinus vit dans une trs large gamme deaux continentales, gnralement calmes
(rivires, marais, lacs, etc.), mais galement dans des cours deau plus rapides. Ils prosprent
bien dans les lacs turbides et peu profonds ainsi que dans les lacs clairs et profonds, mais ils
sont particulirement prsents dans les rivires. Son importante aire de rpartition et son
intrt en aquaculture sexpliquent entre autres par ses faibles exigences cologiques et sa
capacit survivre dans une large gamme de valeurs physico-chimiques.
Il respire efficacement lair atmosphrique en utilisant son organe supra branchial, son
pithlium branchial et ventuellement sa peau, il prsente une forte rsistance la
dessiccation. Il est capable, pour garder sa peau humide, de secrter un mucus ou de creuser
un trou ou un terrier grossier dans un substrat boueux lors de scheresse. Il tolre facilement
les eaux turbides ainsi que la surdensit. En conditions dlevage, la forte densit rduit le
stress (jusqu 500 kg de poisson / m) (Richir J, 2004).

I.1.6. Aspect gnraux de laquaculture de Clarias gariepinus

Les Clariidaes font lobjet dune culture traditionnelle dans de nombreux pays travers
le monde. C. gariepinus est lune des espces les mieux adaptes la pisciculture en milieu
rural en Afrique qui, pendant longtemps, a t domine par la culture du tilapia. Elle a t
considre comme une espce prometteuse de par son taux de croissance lev, sa bonne
rsistance aux manipulations, au stress et aux maladies et lapprciation de sa chair.

On observe un intrt croissant pour sa culture. Cependant, la production issue des captures
en milieu naturel en 2001 reprsentait 39.867 tonnes, alors que laquaculture nen produisait
que 6.942 tonnes, des conditions de temprature appropries reprsentent le facteur le plus
important pour sa culture, particulirement lors de la priode de croissance en bassins.
Llevage de Clarias en grossissement en bassins extrieurs nest ds lors rendue possible,
dans certains pays europens, que durant la priode estivale. Il est cependant possible
dassurer son levage toute lanne en travaillant en circuit ferm (ex : Universit de
Wageningen, Pays-Bas) ou en rcuprant les eaux chaudes des tours de refroidissement de
centrales nuclaires (ex : Piscimeuse, Belgique).
Les caractristiques qui font de C. gariepinus un excellent candidat pour la pisciculture
intensive sont multiples: ses gniteurs produisent de grandes quantits doeufs et de sperme
toute lanne, il accepte une grande varit daliments artificiels bon march, il supporte des
densits leves en conditions dlevage et il tolre de mauvaises conditions

7
Chapitre I Gnralit

environnementales. Leur capacit survivre hors de leau pendant de longues priodes en font
des poissons de choix pour laquaculture dans les pays tropicaux.
Il existe de plus des varits de cette espce acclimates aux hautes altitudes et aux faibles
tempratures, telles que celles qui prvalent au Rwanda (Richir J, 2004).

I.1.7. Production mondiale de Clarias gariepinus

La figure reprsente la production aquacole mondiale de C.gariepinus, selon les statistiques


de la (FAO 2009).
La production aquacole mondiale du C.gariepinus a dpass les 26000 Tonnes en 2005 et
2006, avec un maximum en 2007 ou la production a atteint 48000 Tonnes,(figure03).

Figure 03 : Production aquacole mondiale de Clarias gariepinus


(FAO, 2009).

8
Chapitre I Gnralit

I.1.8. Principaux pays producteurs


Le Nigeria est de loin le plus grand producteur de poisson -chat dans Les statistiques
officielles mais les pays bas, la Hongrie, Le Kenya, la Rpublique Arabe syrienne Le
Cameroun, Le Mali, et lAfrique de sud.

Il existe aussi dans dautres payes dans la chine, la Thalande lgypte et lOuganda (FAO,
2012).

Figure 04 : Principaux pays producteurs de Clarias gariepinus (FAO 2006).

9
Chapitre I Gnralit

I.1.9. Rgime alimentaire

C.gariepinus est omnivore tendance carnassire, cette caractristique de clariidae aconduit


utiliser par fois comme prdateur associe dans les levages de tilapia (Leveque et Paugy,
1999).
Le rgime alimentaire de ladulte est essentiellement ichtyophage et le tilapia constituent la
plus par de temps la majeur partie de sa ration (ils intressant de noter la concidence de
prsence de silure et de cichlides dans certaine points deau sahariens), les jeunes sont
planctophages (Le Berr 1989).
La bouche large lui permet de prendre une grande varit de nourriture depuis des organismes
minuscules du zooplancton jusqu aux petits poissons, il est capable daspirer le benthos du
fond de dchiqueter des animaux mort au moyen des petites dents maxillaires et davaler des
proies telles que des poissons entiers (Lacroix, 2004).
Les poissons chat-africains se nourrissent normalement sur le fond mais leurs habitude
alimentaire peuvent sadapter et l'occasion filtrent leur nourriture la surface de leau, on
leur connait quatre modes dalimentation : butinage individuel, pelletage individuel,
alimentation la surface et lalimentation en groupe. Ladoption de lun ou loutre des ces
modes dalimentation dpend de la disponibilit en nourriture (Burton 1979).

I.1.10. Reproduction naturelle de Clarias gariepinus

Clarias gariepinus atteint la maturit aprs environ douze mois de croissance un poids de
200g pour une longueur totale de 20 28 cm. Cependant dans certaines rgion ou la
temprature est inferieur le poisson natteint sa maturit qua lge de 18 24 mois pour un
poids de 500 600g et une longueur de 32 34 cm (Micha, Bruton in Janssen,1985).Il est
signaler quen levage intensif ou la croissance est plus leve mle et femelle peuvent se
reproduire ds lge de 7 8 mois(Micha,Pham in lvque et al. ,1988).

Les premiers essais dlevage de C.gariepinus en Afrique ont t effectues par Hey(1941)
et Jusqu' au milieu des annes 1970, peu de recherches ont alors port sur cette espce. De
nombreux travaux par la a suite ont t crit sur les divers aspects de son levage et des
rendements de plus de 40 Tonnes /ha ont t signal (Hecht et al. in Imorou toko ,2007).

10
Chapitre I Gnralit

I.1.11. Le cannibalisme et la prdation

Le cannibalisme est un phnomne frquent en aquaculture. Le dfinirent comme lacte de


tuer et de consommer la totalit ou la majeure partie dun individu appartenant sa propre
espce, et ce quel que soit son stade de dveloppement . On reconnat deux types de
cannibalisme : le cannibalisme de type I, lorsque la taille de la proie est grande par rapport
celle du prdateur (la proie est alors consomme de la queue vers la tte), qui est
progressivement remplac par le cannibalisme de type II, lorsque la diffrence de taille entre
la proie et son prdateur est suffisante pour que cette dernire soit totalement ingre.
Le cannibalisme peut tre provoqu ou augment par toute une srie de facteurs biotiques et
abiotiques qui peuvent tre classs dans une des deux catgories suivantes gntique ou
comportementale, cette seconde catgorie tant principalement contrle par les facteurs
environnementaux limitant, le principal caractre gntique influenant le cannibalisme est
lhtrognit de taille au sein dune cohorte. Le comportement cannibale de C.gariepinus
commence dautant plus tt que ses populations sont htrognes en taille.
Le cannibalisme est donc la fois une cause et un effet de cette htrognit de taille.
Les facteurs environnementaux sont multiples et incluent laccs une source alternative de
nourriture et la probabilit de capturer des proies, la qualit nutritionnelle de laliment ou des
proies et la densit de stockage qui peut intensifier ou au contraire rduire le cannibalisme. De
nombreux autres facteurs environnementaux tels que laccs un refuge, la transparence de
leau, lintensit lumineuse, la frquence laquelle la nourriture est distribue et la frquence
avec laquelle les proies alternatives sont prsentes influencent de mme ce comportement
cannibale.
Les effets des principaux facteurs intrinsques et environnementaux qui affectent le
cannibalisme chez C. gariepinus. Proposent une srie dtudes prliminaires sous des
conditions exprimentales susceptibles dinduire le cannibalisme afin de dterminer les
habitudes cannibales inconnues dune nouvelle espce potentiellement intressante pour
laquaculture et ainsi dtre mme de mitiger ce comportement. Quant lui liste une srie de
prcautions prendre afin de minimiser le cannibalisme chez les larves et les juvniles de C.
gariepinus : nourrir satit toutes les 2 heures en distribuant la nourriture de manire
uniforme sur toute la surface deau et supplmenter laliment avec de la nourriture vivante
(dabord avec des Artmia, ensuite avec des Daphnie). La taille des particules de nourriture
doit tre optimise (2,2 % de la longueur totale du poisson). Les larves devraient tre leves

11
Chapitre I Gnralit

sous de faibles intensits lumineuses (< 30 lux), une densit de stockage de 150 larves par
litre.
Enfin, le cannibalisme peut tre minimis en triant rgulirement les juvniles par classe de
taille, en retirant les cannibales et en vitant de slectionner les individus croissance trop
rapide (cannibales) comme reproducteurs (cela favoriserait la slection de ce trait
comportemental). (Richir J, 2004).

I.1.12. Qualit de la chaire de Clarias gariepinus

La qualit alimentaire de filet produit apparait vidente lexamen du tableau n1( ci-
dessous) qui dmontre un trs bon taux en protine (18-21%) et aussi des diffrents acides
amins avec taux faible de lipides (2-4%) constitu notamment dacides polyinsatures donc
ce type de chaire contribue la lutte contre les maladies cardiovasculaires (Ducarme et
Micha, 2003).

Tableau 1 : La composition alimentaire des filets de poisson chat africain C.gariepinus


Elment unit Filet San peau
Eau % 75-80
Protines % 18-21
Lipides % 2-4
Minraux % 0,5-1,5
Energie KJ/g 4-6
Calcium mg /kg 200
Phosphore mg/kg 2000
Fer mg/kg 10
Sodium mg /kg 1000
Potassium mg/kg 3000
Vitamine A mg /kg 0,4
Vitamine B1 mg/kg 0,5
Vitamine B2 mg/KG 2,5

12
Chapitre II
Endocrinologie de
la reproduction
chez les tlostens
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

II. Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

II.1. Mcanismes de la reproduction

II.1.1 .Rle de L'hypothalamus

Les rgions de lhypothalamus qui contrlent lactivit gonadotrope correspondent au


noyau proptique (NPO) et au noyau latral du Tuber (NLT). Ces noyaux sont constitus par
les corps cellulaires de cellules neuroscrtrices qui laborent des substances neuro hormones
libres au niveau des extrmits axonales.

La substance libre par les cellules neuroscrtrices qui a une action stimulante sur la
scrtion des gonadotropines sappelle hormone librante ou ,Gn-RH (gonadotropin releasing
hormone).

La prsence du Gn-RH ne se limiterait pas seulement lhypothalamus, mais intresserait


aussi dautres rgions du cerveau peut-tre elles mmes impliques dans le contrle de la
fonction gonadotrope. Par ailleurs, dautres travaux suggrent en outre lexistence, chez les
poissons, dun facteur hypothalamique inhibiteur (GRIF, ou gonadotropin releasing -
inhibitory factor) de la libration des gonadotrophines par lhypophyse, facteur qui pourrait
tre la dopamine dont lactivit GRIF a t dmontre (Legendre Marc, Jalabert B. 1988)

II.1.2. LOrgane Pinal

Lhypothalamus nest pas le seul rgulateur nerveux de la fonction gonadotrope. Un autre


organe du systme nerveux central, lorgane pinal ou piphyse (une extension du
diencphale situe sous la calotte crnienne) pourrait participer au contrle de la scrtion
des gonadotropines chez les tlostens. Lpiphyse est un organe la fois sensoriel
contenant des cellules photosensibles, et endocrines, tant le principal site de production de la
mlatonine dont on a suggr le rle antigonadotrope (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

Limplication de lorgane pinal dans la rgulation de la reproduction des poissons nest pas
clairement tablie et dpend vraisemblablement de la spcificit de chaque espce. Son
influence sur la fonction gonadotrope pourrait sexercer par lintermdiaire de
lhypothalamus [Gilles and al].

13
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

II.1.3. L'hypophyse

Lhypophyse scrte plusieurs hormones parmi lesquelles les gonadotrophines qui


exercent un rle majeur dans lactivit des gonades.

Les cellules synthtisant les gonadotrophines, identifies par les changements quelles
prsentent au cours du cycle sexuel et par leurs caractristiques morphologiques et
tinctoriales, sont situes principalement dans la pars distalis proximale de ladnohypophyse.

Les premires prparations ralises chez les tlostens concluaient lexistence dune
seule gonadotropine (GtH) de nature glycoprotique dont la composition en acides amins est
diffrente selon lespce mais qui prsente certaines similitudes avec les hormones
gonadotropes (LH et FSH) de mammifres (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

Un autre facteur faiblement glycoprotique a t isol chez quatre espces de tlostens.

La gonadotropine glycoprotique GtH semble agir soit directement, soit par lintermdiaire
des hormones stroides, sur la majorit des tapes du dveloppement de la gonade mle ou
femelle. Chez le mle, elle stimule le dveloppement complet du testicule et la spermiation.
Chez la femelle, elle induit la vitellogne endogne et indirectement la vitellogse exogne en
stimulant la synthse des strognes par lovaire, lesquels agissent sur la synthse et la
scrtion de vitellognine par le foie.

Elle induit galement la maturation ovocytaire en stimulant la production de strodes


maturants soit dans lovaire, soit ventuellement avec la participation de lorgane inter rnal.
Le facteur faiblement glycoprotique stimulerait principalement lincorporation de la
vitellognine dans lovocyte (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

Seule la gonadotrophine glycoprotique, pour les quelques espces chez lesquelles elle a t
purifie, a pu tre dose au cours du cycle.

Dune faon gnrale, on observe une lvation progressive de son niveau plasmatique
moyen stimulant la recrudescence progressive des gonades avec une augmentation parfois
considrable en priode dovulation ou de spermiation .

Son rle essentiel dans les phnomnes de maturation finale lont dailleurs fait nommer
hormone maturante .

14
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Il semble par ailleurs que les hormones hypophysaires puissent aussi intervenir de faon
directe sur le comportement sexuel (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

II.1.4 .Rle des gonades

Dans la voie humorale, les gonadotrophines hypophysaires agissent indirectement sur la


gamtognse grce aux strodes sexuels. Ont permis la mise en vidence chez les poissons
plusieurs types de molcules chez les mles, la testostrone et la 11dehydro- testostrone
agissent directement sur la spermatogense, par contre les progestines 17 alpha, 20 beta
dhydroxy progestrone jouent un rle dans la maturation spermatique et spermiation.

Chez les femelles, lstradiol agit sur la vitellogense et la mobilisation des rserves
lipidiques et minrales. Cette gonadotrophine est pauvre en glycoprotine. Suite de
nombreux travaux, Legendre Marc, Jalabert B. 1988 in Jalobert (1976 ; 1977) estime que
les prostaglandines et les catcholamines scrtes par lovaire interviennent comme
mdiateurs pour lovulation et le contrle du cycle sexuel.

II.1.5. GnRH dans laxe hypothalamo-hypophysogonadique des tlostens et action de


la HCG .

a-GnRH :

Ce sont de petites molcules (dcapeptide) qui contrle l'excution de la glande pituitaire


dans la production des gonadotrophines (LH et FSH ou GTH-I et GTH-II). Avec lapparition
des analogues synthtiques (LH-RRs et GnRHa) la stimulation de lhypophyse permet la
production d un taux trs important de FSH-LH . Chez les tlostens la GnRH constitue
llment majeur du contrle de laxe hypothalamo-hypophysogonadique.

Cest une neurohormone dorigine peptique synthtise par des neurones localiss au niveau
de lhypothalamus. Les neurones GnRH innervent directement les cellules gonadotropes
hypophysaires. Cest ce niveau que la GnRH est libre et se fixe sur des rcepteurs
spcifiques sept domaines transmembranaires (GnRH-R) stimulant ainsi la biosynthse et la
libration des hormones gonadotropes FSH et LH. Ces hormones agissent sur les gonades.
Elles rgulent la gamtogense et la synthse et la scrtion des peptides gonadiques
(inhibine, activine, vitelline) et des hormones strodes (andrognes, strognes).

15
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Les avantages de l'application d'hormones librantes (GnRH) dans l'induction des gniteurs
sont :
-Ne gnrent pas les rponses immunitaires chez les poissons car ils ne sont pas considrs
comme antigene, de sorte
Quils peuvent tre utiliss de faon rpte.
- La GnRH "rpare" la perturbation endocrinienne produite par la captivit et conduit les
poissons leur maturit sexuelle complte.
- La GnRH est produite dans l'hypothalamus, qui contrle la scrtion d'autres hormones
importantes et qui assurent une homostasie chez les poissons, comme la prolactine,
somatotropine et TSH.
- Enfin, la structure molculaire de ces hormones est trs similaire dans de nombreux
poissons, permettant l'utilisation dans un grand nombre d'espces avec une grande efficacit.

L'utilisation d'hormones pour le contrle de la reproduction chez les poissons, permet de


complter leur cycle de reproduction et elle est utilis comme un moyen d'optimiser la
gestion (performance) d'une production piscicole, fait avancer le processus de maturation
d'ovulation et la ponte de quelques semaines. Par consquent chez ces poissons, l'ovulation
est induite artificiellement afin de rduire le stress des et les mortalits leves produites en
cette priode de grande manipulation et de manutention (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

b-HCG
Au dbut des annes 70 la gonadotrophine chorionique humaine (HCG) a tait utilis afin
d'optimiser les rsultats de la synchronisation de la maturation des poissons. On a essay les
gonadotrophines des mammifre, les gonadotrophines chorionique des juments et
particulirement humaine (HCG), purifi partir d'urine de femmes enceinte. En
consquence, la HCG a t utilis pour induire la ponte chez certaines espces de poissons
levs aujourd'hui et son succs a t attribu cette activit FSH- LH. La HCG est utilise
en une dose simple, ce qui rduit la manutention du poisson par rapport l'utilisation de la
technique d hypophysation. L'efficacit d'une dose unique est probablement due la
catabolisation trs longue et qui permet une meilleure stimulation de la folliculogenese et la
vitellogenese et donc va augmenter le taux dovulation des gniteurs induits. Les
concentrations utilises taient entre 100 et 4000 UI par kg de poids du poisson. Les rsultats
de leur utilisation sont nettement amliors lorsquIls sont utiliss en combinaison avec
l'injection d'extraits hypophysaire. Lavantage de cette hormone est qu'elle agit directement
sur la gonade et ne ncessite pas d'activation de la glande hypophysaire, agissant ainsi

16
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

beaucoup plus rapidement, induisant la maturation finale de l'ovocyte et la spermiation.


Cependant, l'hCG peut provoquer des ractions immunitaires chez le poisson receveur,
rduire ou inhiber l'effet des injections d'hormones ultrieures. (Legendre Marc, Jalabert B.
1988).

II.1.6 .Influence des facteurs abiotiques externes sur la reproduction

La reproduction chez les vertbrs est contrle la fois par la rythme physiologique
interne et les variations environnementales, Chez la plupart des animaux, cette priodicit
une signification adaptative. La reproduction prcde, plus ou moins selon les caractristiques
spcifiques du dveloppement une priode ou les facteurs du milieu (en particulier la
disponibilit alimentaire) sont les plus favorables la survie des jeunes et donc la prennit
de l'espce.

II.1.6.1.Temprature
Chez les pokilothermes, la temprature du milieu ambiant est dterminante : elle intervient
sur l'activit gnrale notamment sur l'activit alimentaire : les tempratures anormalement
basses diminuent l'apptit et les potentialits de capture. Lorsque les rserves graisseuses sont
puises. Ce sont les gonades qui fournissent les mtabolites permettant aux animaux de
survivre (barnab, 1991).
La temprature un effet direct, la gamtogense ne s'effectue chez une espce donne que
dans une gamme dtermine de temprature (Barnab, 1991).
Chez C. gariepinus (lac sibaya), la ponte ne se produit que lorsque la temprature de l'eau est
suprieure 18 C, et gnralement 22 C (Bruton in Lvque et al .1988).

II.1.6.2.La photopriode
Laction de la photopriode sexercer par lintermdiaire des organes photorcepteurs (oeil,
piphyse) et au travers du systme nerveux sur laxe hypothalamo hypophysaire (Barnab,
1991).

II.1.6.3.Lenvironnement

Certains stimuli visuels ou olfactifs issus de lenvironnement peuvent tre

Indispensables au dclenchement du comportement sexuel comme la prsence de vgtation


aquatique (Stacey et al. in Breton et al, 1980).

17
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

II.1.6.4.La qualit physico-chimique de leau


La ponte peut tre dclenche par lapport des eaux de la mousson. Qui entraine des
modifications importantes de la composition physico-chimique de leau
(Von Ihering et Wright ; Lake in Breton et al. 1980), ont montr que des taux doxygne
dissous de 3 et 1.5 mg/l taient susceptibles de supprimer les rythmes de scrtion journalires
de GTH.

II.1.6.5 .Lalimentation

Les besoins mtaboliques sont couverts par l'alimentation qui est le premier facteur de
rgulation de la gamtogense. La reproduction consomme de l'nergie que l'animal obtient
de sa nourriture et la maturation ne s'effectue donc pas chez les poissons amaigris ne
disposant pas de rserves mobilisables suffisantes. Prcisant toutefois quune nourriture
abondante doit tre distribue pour que des femelles matures soient obtenues durant toute
lanne (Barnab ,1991).

II.1.7. Gamtognse

Lovogense et la spermatogense est un processus long et complexe o plusieurs phases


peuvent tre diffrencies afin de se diffrencier en ovule et spermatozodes.

II.1.7.1. Spermatogense

C'est la transformation des cellules germinales diplodes en cellules souches, qui sont
dites des spermatogonies ; en cellules germinales haplodes plus diffrencies et mobiles ou
(spermatozodes).

Durant la spermatognse, lvolution des cellules germinales est synchrone lintrieur de


chaque cyste. Les gonies A sont initialement isoles et entoures de quelques cellules
somatiques. Ces dernires se divisant forment lenveloppe du cyste, alors que les
spermatogonies (type B) subissent plusieurs divisions mitotiques aboutissant aux
spermatocytes primaires, puis aprs les deux divisions de la miose,aux spermatides. Une
srie de transformations cytologiques (spermiognse) intervient alors, au cours de laquelle
chaque spermatide se diffrencie en un spermatozode.

Les spermatozodes sont ensuite librs dans le canal dfrent du testicule ; cest la
spermiation. (Legendre Marc, Jalabert B. 1988)

18
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Lors de lmission du sperme, les spermatozodes diffrencis se dtachent des cellules de


soutien (cellules de Sertoli) pour tomber dans la lumire du tube sminifre et tre limins
dans le canal dfrent puis a lextrieur par jaculation.

Le sperme va saccumuler dans la cavit des tubes sminifres ou il reste ltat dormant
jusqu lapparition des conditions favorables. Les spermatozodes mme dans la phase de
dormance sont capables de fconder. Sans mouvement dans les testicules, ils deviennent
mobiles au contact de leau. Mais cette mobilit est trs courte et dpend de la temprature.

II.1.7.2. Ovognse et vitellogenese

a-Ovognse

Stade I: Les cellules primitives de lovogense (ovogonies) sont trs petites. Leur taille
est peine suprieure celle des autres cellules indiffrencies. Elles se multiplient
par mitose.

Stade II : La cellule mre de lovocyte grandit et un follicule commence se former


autour de chacune. Ce follicule qui a pour fonction de nourrir et de protger lovaire
au cours de son dveloppement, finit par donner naissance une double assise de
cellules.

Stade III : La cellule constituant lovocyte saccrot sensiblement le follicule lentoure


compltement. Cest trois premier stade marquent la priode de premire ordre pour
lovocyte avant quil accumule les rserves nutritives.

Stade IV : Cest le dbut de lovogense avec production et accumulation de vitellus.


Les premiers globules lipodes apparaissent dans le cytoplasme.

Stade V : Cest la seconde phase de la vitellogense. Le cytoplasme se remplit de


globules lipodes et le vitellus commence produire ses plaquettes.

Stade VI : Troisime phase de la vitellogense, pendant laquelle les plaquettes


poussent les gouttelettes huileuses vers le bord de la cellule ou deux anneaux
commencent se former : les nucloles qui participent la synthse protique et
laccumulation de rserves nutritives, et qui adhrent la membrane du noyau de la
cellule.

19
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Stade VII : La vitellogense, ou synthse du vitellus se termine pendant cette phase.


Lorsque laccumulation du vitellus s'achve les nucloles regagnent le centre du
noyau. Le micropyle orifice microscopique perc dans la membrane de lovule souvre
pour permettre aux spermatozodes de pntrer lors de la fcondation. Au terme de ce
stade VII, lovule peut rester inchang pendant des mois : cest le stade de dormance
ou de repos. Ou bien cette phase dormante se conclura par lovulation si les conditions
sont favorables, ou bien en labsence de celle-ci il y a putrfaction folliculaire et
rsorption (Legendre Marc, Jalabert B. 1988).

b- Vitllognse

Lovaire est un organe gnralement pair, Les tissus de lovaire forment de nombreux
replis ou lamelles ovigres dans lesquelles se dveloppent les ovocytes.

Chez les tlostens, lovaire contient un stock dovogonies indiffrencies qui semble
pouvoir tre renouvel par divisions mitotiques tout au long de la vie. Un oviducte reliant
lovaire la papille gnitale est prsent chez la majorit des tlostens.

Lovognse dbute vritablement avec la diffrenciation de certaines ovogonies qui entrent


en prophase de premire division miotique. Cette phase darrt de la miose caractrise au
niveau du noyau (ou vsicule germinative) par le maintien dun double stock de chromosomes
(4n) sous une forme peu condense, dure jusqu la fin de la vitellognse.

Les ovocytes ainsi forms sont progressivement entours par des cellules somatiques qui
se diffrencient en plusieurs couches formant les enveloppes folliculaires.
De la priphrie vers lovocyte on distingue : la thque constitue de plusieurs couches
cellulaires et la granulosa spare de la thque par une membrane basale. La granulosa,
forme dune couche monocellulaire, est en contact troit avec lovocyte grce de nombreux
inters digitations qui sentrecroisent travers une couche acellulaire, la zona pellucide, futur
chorion de luf.

La croissance ovocytaire peut tre dcompose de faon schmatique en deux phases :

-une phase de prvitellognse, parfois dnomme vitellognse endogne qui consiste


essentiellement, semble-t-il, en la mise en place de la machinerie mtabolique indispensable
la croissance ultrieure de cette cellule gante : organites cellulaires, acides nucliques.

20
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Ensuite la vitellognse proprement dite (accumulation des rserves vitellines ou vitellus)


dnomme parfois vitellogense exogne car elle est caractrise par lincorporation de
vitellognine.

A la fin de la vitellognse, lovocyte subit une volution rapide, la vsicule germinative


migre vers la priphrie au ple animal et la miose reprend jusqu la mtaphase de
deuxime division.

Lovocyte entour du chorion se spare ensuite du follicule et est expuls (ovulation) dans la
lumire ovarienne. (Legendre Marc, Jalabert B. 1988)

II.1.8. Niveau dintervention sur la reproduction des tlostens

Pour dclencher la reproduction, il est possible d'orienter notre travail de recherche sur trois
axes :

Intervenir sur l'environnement gnral du poisson. La temprature de l'eau et la


photopriode sont rarement totalement efficaces elles seules. Il faut y ajouter la mise
la disposition des gniteurs de supports de ponte qui soient leur convenance.

Intervenir sur la production d'hormone gonadotrope hypophysaire par injection


d'analogues synthtiques de la GnRH (Gonadotropine-Releasing Hormone) hormone
librante produite par l'hypothalamus. C'est ce que l'on fait en injectant de la LH-
RHa (Luteinising Hormone Releasing Hormone analog) qui induit la production de
gonadotrophine par l'hypophyse.

Augmenter directement le taux d'hormone gonadotrope (gonadotrophine GTH)


hypophysaire circulant par voie sanguine en injectant soit des extraits hypophysaires
(broyat d'hypophyse de carpe contenant de la GTH), soit de la gonadotrophine
humaine (HCG) (fig.5) (Schlumberger, 2002).

La reproduction chez les vertbrs est contrle la fois par le rythme physiologique interne
et les variations environnementales. Chez la plupart des animaux, cette priodicit une
signification adaptative. La reproduction prcde une priode o les facteurs du milieu, en
particulier la disponibilit alimentaire, sont les plus favorables la survie des jeunes et donc
la prennit de lespce.

21
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

En effet, la reproduction est sous le contrle de laxe Cerveau-Hypophyse-Gonade soumis


linfluence du milieu et des relations sociales entre les gniteurs.

En dehors de la reproduction naturelle, selon lintervention humaine, classifie deux types de


reproduction ; semi contrle et artificielle. Ces deux catgories ont dj fait lobjet
dexprimentations en Algrie :

La reproduction de type semi-contrle sur de gniteurs de Clarias gariepinus par


une ponte dans des tangs ou bassin amnags avec des frayres.

La reproduction de type artificielle avec ou sans stimulation hormonale.

Dans les programmes piscicoles, la matrise de la reproduction des espces cibles est lune
des conditions de russite de llevage. Pour cette matrise ncessite :

la connaissance du cycle sexuel dans les conditions dlevages,

la possibilit dinduire la ponte volont une fois lovogense termine,

la possibilit dtaler la saison de la ponte au cours de lanne.

Ainsi, pour induire artificiellement la maturation sexuelle chez Clarias gariepinus, il est
donc possible dagir sur les facteurs environnementaux, favoriser les conditions optimales et
utiliser les hormones pour une action spcifique au niveau de laxe hypothalamo-
hypophysaire afin darriver au stade de ponte, entre- prendre les oprations de fcondation,
dembryogense, aboutir lclosion des larves et appliquer un rgime alimentaire spcifique
chaque stade de dveloppement.

22
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Figure 5: Physiologie de la reproduction chez les poissons. Organes et hormones


impliqus dans la reproduction des poissons (Schlumberger, 2002).

Les processus de reproduction sont sous le contrle de laxe Cerveau-Hypophyse-


Gonades depuis la perception de stimuli ambiant jusqu la libration des gamtes (Fig.05).
Laction neurale prdomine au dbut pour tre remplace ensuite par laction hormonale. La
rception de stimuli de lenvironnement, tels que la photopriode, temprature et
prcipitation, relve du systme nerveux et comporte le passage de linformation, des
rcepteurs sensoriels vers le cerveau.

23
Chapitre II Endocrinologie de la reproduction chez les tlostens

Dans lhypothalamus, linformation dtermine lactivit hypophysaire par des messagers


chimiques appels hormones librantes ou Releasing Homones qui incitent lhypophyse
librer dans la circulation sanguine une hormone dont lorgane cible est la gonade. Cette
hormone est la Gonadotropine Releasing Hormone (GnRH) qui assure le dveloppement et la
rgulation de laxe reproducteur. Ainsi, la fonction gonadique et la fonction de reproduction
sont dpendantes des rgulations issues du systme nerveux central.

Dans lhypothalamus, les rseaux neuroendocrines agissent de manire coordonne pour


rguler la fonction hypophysaire qui intgre les informations dorigine hypo- thalamique et
qui passe le relais sous forme de scrtion des gonadotrophines FSH et LH. Ces
gonadotrophines hypophysaires jouent donc un rle essentiel dans le contrle des activits
endocrines et gamtogntiques des gonades. Les strodes sexuels sont responsables de la
maturation des gamtes. La transition entre linformation neurale et le contrle hormonal se
produit linterface hypothalamus-hypophyse.

24
Chapitre III :
Matriels et
Mthodes
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Matriels et mthodes

Dans ce prsent chapitre, nous prsentant le lieu exprimental ainsi quune brve
description de notre protocole de travail et de nos rsultats obtenus.

III.1. Prsentation du site exprimental


Notre stage sest effectu la station piscicole Abderrahmane (fig.06)et parc
animalier, durant la priode du 21mars au 4 avril. Cette station se situe dans la Dara de
Menia, Wilaya de Ghardaa, 270 Km au Sud de la ville de Ghardaa .Le site offre toutes les
commodits pour la ralisation de notre travail exprimental sur la reproduction induite du
Clarias gariepinus par GnRh et hCG .Cette station stend sur 10 hectares et elle est dote de
plusieurs bassins dlevages :

-Un bassin de 500.000 litres pourvu de 5 bassins en bton dune contenance de 70.000 l avec
systme de vidange conus pour llevage intensif de Clarias gariepinus et favorable la
diversit piscicole.
-De 08 bassins en fibre de verre de stockage des gniteurs dune capacit de 10.000 l.
-De 08 raceways de 3000 l pour llevage larvaire.
-Dun bassin en terre de 40.000 l pour llevage du zooplancton et lintroduction des larves
aprs rsorption de la vsicule vitelline.

Figure 06: la ferme aquacole (Abderrahmane)

25
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.2. Matriel biologique

III.2.1.Collecte des gniteurs de Clarias gariepinus .

Pour les besoins de nos exprimentations, nous avons utilis douze gniteurs femelles et
quatre gniteurs mles de C.gariepinus. La pche des gniteurs taient trs faciles raliser
car les poissons ont t au pralable slectionns et placs dans des bacs de stabulation.
Tout au long de notre expriences des pess laide dune balance et les mensurations de la
longueur total, standard et abdomen par un ichtyo mtre (Fig.07) ont t effectues sur ces
gniteurs

III.2.2. Alimentation des gniteurs

Afin damliorer les derniers stades de lovogense et de la spermatogense et afin de raliser


un flashing une nourriture riche en acide amins indispensable ainsi quen vitamines AD3E et
en oligo-lments a t administre.

Les gniteurs ont t nourris avec des granuls, distribus manuellement, leurs taux protique
est de 40%.
La formulation de laliment est la suivante :
Farine de poisson (40%).
Tourteau de soja (30%).
Mas (30%).
Huile de soja (10ml dans un litre deau).
Complment minraux vitaminiques (10ml dans un litre deau).
Multi vitamines (1g dans 1kg daliment).

26
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3. Protocole exprimentale

Pour raliser notre protocole exprimental, nous avons excuts les tapes suivantes :

Le choix des gniteurs :

Une premire slection des gniteurs est faite au moment de la pche.

Cependant la slection finale des gniteurs femelles et mles repose sur les critres suivants :
Femelle mature
On repre les bonnes femelles, les plus matures, par la rondeur du ventre bien gonfl.
Mle mur
Pour les mles, il suffit de prendre les plus gros, ce qui signifie trs souvent que leurs
testicules sont bien dveloppes et pleines de sperme .Chez le male le dimorphisme sexuel est
trs prononc et il est trs ais de reconnaitre le mle de la femelle (Micha, 1976).

III.3.1. Anesthsie

Afin de ne pas perturber la maturation des gonades par le stress de la manipulation un


sdatif Eugenia caryophyllata est utilis en injection intra musculaire chez les gniteurs
(fig.07).

Figure 7: Eugenia caryophyllata

27
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.2. Sexage

Les mles et les femelles de C. gariepinus sont aisment identifiables, du moins chez les
adultes, puisqu'il existe un net dimorphisme sexuel au niveau des papilles gnitales (Fig.08/
Fig. 09). Celles-ci sont protubrantes et arrondies chez les femelles tandis quelles sont en
forme de fer de lance chez les mles (Gilles et al, 2001).

Fig.08 : Mle de C.gariepinus Fig.09. : Femelle de C.gariepinus

28
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.3.Marquage

Dans le but de faciliter lobservation nous avons marqu les gniteurs laide dun tag
numrot en lettre en plastique de couleurs rose et bleu au niveau de la nageoire dorsale
(fig.10/ fig.11).

Figure10 : Tag en plastique figure11 : Marquage des gniteurs

III.3.4. Pesage

La pese des gniteurs a t effectu laide dune balance lectronique de marque


KERNPCB M Memory (Max 6000g de 0.1g) ,(fig.12). . Dans le tableau (02) sont dsigns les
tailles et les poids et les tours de poitrine de ces mles et femelles.
Tableau 02. : Les gniteurs utiliss, leurs tailles, poids et tours de poitrine
Sexe Gniteurs Poids(g) Taille totale Tours de
(cm) poitrine (cm)
M rose 1800 57 30
B rose 1800 60 28
H rose 1220 56 21
C rose 1200 50 22
D rose 1100 50 22
Femelles
N rose 1660 60 27
R rose 1150 57 25
P rose 1140 50 25
E rose 1280 55 26
L rose 1130 48 22
V rose 1340 51 26
Z rose 1710 56 26
Male A bleu 1550 50 22
E bleu 1900 63 24
F bleu 1220 56 21
C bleu 1300 58 23

29
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Figure 12 : balance lectronique

III.3.5. Induction des femelles


Les techniques dinduction hormonale de la maturation ovocytaire et de lovulation suivies
dune fcondation artificielle sont souvent privilgies car elles permettent un meilleur
contrle sur toutes les phases de la reproduction puis de llevage larvaire (Legendre et al. in
lvque et Paugy, 1999). L'injection hormonale a t effectue dons le muscle dorsal, entre
la base de la nageoire dorsale et la ligne latrale (Mthode d'Huet ,1970).
Les femelles matures ncessitent une injection hormonale pour permettre le stripping qui
consiste la libration massive des ovules par pression manuelle de labdomen (Ducarme et
Micha, 2003).

III.3.6.Traitement hormonal

Avant linduction hormonale les gniteurs ont t introduits dans une eau 24C pendant
deux semaines.

Nous avons utilis deux hormones : lHCG (Human chorion gonadotropin ) et Gn-RH (
Gonadotrophine releasing hormon). Les gniteurs ne sont pas aliments durant les 48h qui
prcde le jour de linjection afin quil y ait moins de contamination des gamtes lors du
stripping par laccumulation de dchets dans le bassin.

Traitement hormonal par voie intramusculaire base de GnRh et de HCG.


Calcul des doses injectes:
Les doses de Gn-RH et de HCG sont dtermines en fonction du poids de chaque gniteurs
(fig.13) ; la dose totale est de 4mg/kg du poids vif de gniteurs pour la GnRH et de 500 U.I.
de HCG ; (Micha, 2001)

30
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Linjection hormonale t effectue dans le muscle dorsal entre la base de la nageoire


dorsale et la ligne latrale (HUET, 1970).
Laiguille de 2 3cm est enfonce dans le muscle (fig.14). Lors du retrait de l'aiguille, le
point dinjection est mass afin dviter le refoulement de la solution (Gillet et al, 2001 ;
Janssen, 1985).

Figure13. : Prparation des doses de Gn-Rh et HCG

Figure14.: Injection de lhCG et de Gn-Rh

Nous avons ralis deux tentatives dinduction hormonale.

31
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.7 .Chronologie de linduction hormonale


Au cours du premier essai qui sest droul le 22mars 2017, on a inject six femelle avec une
dose prparatoire de la HCG 19 :00h jusqu' 19 :35h, et le 23mars 2017, par une dose
dcisive a 8 :00h jusqu' 8 :20h.

Dans la deuxime exprience, le 22 mars 2017, on a inject six femelles avec une dose
prparatoire de Gn-RH, a 19 :40h jusqu' 20 :02 et le 23 mars 2017, par une dose dcisive
depuis 8 :40h jusqu' 9 :00h.

Nous avons pris le soin de not sur un cahier de suivi lheure effective de chaque
injection. Les doses des HCG et la Gn-RH injectes chaque individu sont indiques dans les
tableaux ci-dessous :

Tableau03. : Les doses de HCG injectes aux 06 femelles

Gniteurs Poids (g) Taille Dose de HCG prparatoire Dose de HCG dcisive (ml)
(cm)
Dose (ml) Lheure de Dose (ml) Lheure de
Linjection Linjection
M rose 1800 57 0,2 19 :00 1,8 8 :00
B rose 1800 60 0,2 19 :03 1,8 8 :03
D rose 1100 50 0,1 19 :09 0,9 8 :06
N rose 1660 60 0,2 19 :15 1,8 8 :10
E rose 1280 55 0,1 19:18 0,9 8 :15
L rose 1200 48 0,1 19:23 0,9 8 :20

Tableau 04 : les doses de Gn-RH injectes aux 6 femelles.

Gniteurs Poids(g) Taille Dose de GnRH Dose de GnRH dcisive


prparatoire (ml)
Dose Lheure de Dose (ml) Lheure de
(ml) Linjection Linjection
H rose 1650 56 0,15 19 :40 1,35 8 :40
C rose 1200 50 0,12 19 :43 1,08 8 :43
R rose 1150 57 0,12 19 :45 1,08 8 :47
P rose 1140 50 0,12 19 :48 1,08 8 :51
V rose 1340 51 0,14 19:51 1,26 8 :54
Z rose 1710 56 0,18 19:55 1,62 9 :00

Le 22 mars 2017, nous avons injects les malles par une dose dcisive dans les deux
expriences, Les doses des HCG et la Gn-RH injectes chaque individu sont indiques dans
les tableaux ci-dessous :

32
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Tableau 05: Les doses de Gn-RH injectes aux 2 mles.

Gniteurs Poids (g) Taille Dose de injecte Lheure de


GNRH (ml) Linjection
F bleu 1220 56 1,2 19 :59
C bleu 1300 58 1,3 20 :02

Tableau 06 : Les doses de HCG injectes aux 2 mles.

Gniteurs Poids (g) Taille Dose de injecte Lheure de


HCG (ml) Linjection
A bleu 1550 50 1,5 19 :30
E bleu 1900 63 2 19:35

Calcul des doses de Gn-RH :

Gn-RH : 4mg kg de poids


Nous avons utilis 10 Gn-RH diluaient dans 10 ml deau physiologique, donc 1ml contient
4mg de GnRh.
La dose prparatoire 10%
Donc pour 1kg nous avons inject 0.1 ml (0.4mg de GnRH)
La dose dcisive 90 %
Nous avons inject 0.9 ml pour chaque kg de poids (3.6mg de GnRH)

Calcul des doses de HCG :


500 U.I kg de poids
Nous avons utilis 5000 UI diluait dans 10 ml deau physiologique, donc 1ml contient
500UI.
La dose prparatoire 10%
Donc pour 1kg nous avons inject 0.1 ml (50 U.I de HCG)
La dose dcisive 90 %
Nous avons inject 0.9 ml pour chaque kg de poids (450 U.I de HCG).

33
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.8. Le temps de latence


Cest le temps de maturation des ovocytes, il dpend des fluctuations de la temprature de
leau dans laquelle sont stocks les gniteurs. Plus elle sera basse, plus le temps de latence
sera long (Gilles 2001).A cet effet nous avons relev toutes les heures la temprature de leau
pour dterminer si elle concordait avec lovogense ou maturation des ovocytes.
Le temps de latence est de 21h pour une temprature de 20C et de 8h pour une temprature
de 28C (Rukera tabaro et al. 2005).

III.3.9. La fcondation

III.3.9.1. Prlvement des testicules


Le sperme du Clarias gariepinus ne peut tre obtenu que par sacrifice du mle Aprs
anesthsie, les mles sont sacrifis, puis nous avons prlev leurs testicules (De Graaf et
Janssen, 1996).
La castration des mles sest faite selon le protocole suivant :
Premire tentative.
Le gniteur a fait lobjet dune castration ou testiculo-ectomie in vivo avec anesthsie pour
autant tre sacrifi .Apres intervention et suture de labdomen partir de la linea alba une
injection doxytetracycline lui a t administre puis il a de nouveau tait replong dans une
eau riche en oxygne.
Deuxime tentative
Le mle a t sacrifi en introduisant une aiguille au niveau de lencphale et en prenant soin
de ne pas perforer les organes .Au pralable il faut scher les mains et labdomen du poisson
avant de commencer la dissection et pour viter la pntration de leau dans les testicules, qui
activerait les spermatozodes qui deviendraient inactifs trs rapidement.
Nous avons pos le mle de C.gariepinus sur une serpillire le ventre vers le haut, et
laide dun scalpel et des ciseaux, nous avons commenc la dissection en partant de lanus
jusquaux nageoires pectorales (fig.15).
Ensuite nous avons rcupr les testicules tout en vitant de perforer les organes et surtout
les testicules (fig.16).

34
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Figure15 : dissection des testicules Figure16 : prlvement du testicule

III.3.9.2. Prlvement du sperme


Chaque testicule est maintenu au-dessus d'une bassine en inox que l'on a pralablement
sch pour viter que les spermatozodes ne soient activs au contact de l'eau (fig. 17). Sans
eau, les spermatozodes demeurent inactifs et peuvent tre conservs dans un rfrigrateur
pendant au moins 24 heures sans perdre leur capacit de fcondit (Janseen, 1985).

Figure17 : prlevement du sperme

III.3.9.3.Prlvement des ovules

Le prlvement des ovules se fait par massage abdominal de la femelle, c'est le "stripping", on
veillera effectuer cette opration exactement l'heure dtermine par le temps de latence
que l'on a dj calcul (Gilles et al. 2001).

35
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Nous avons pos les femelles une par une sur une table couverte avec une serpillire et
scher les mains de manipulateur, labdomen, la queue du poisson a laide dune serpillire et
papier absorbant.
Nous avons maintenu les femelles en position incline, pour viter le risque de lovaire on
faite une lgre pression abdominale en posant les mains sur les deux flancs du poisson et en
les trainant du ct antrieur vers le postrieur du corps (fig.18.).

Figure18.stripping Figure19. : ufs stripp

III.3.10. Mlange des gamtes

Nous avons utilis la mthode (sche), qui consiste mlanger des ovules et la laitance
strictement sec pendant 5mn, avant dajouter de leau (fig. 20), car les ovules sont plong
directement dans leau, les ovules ce gonflent et provoquent la fermeture du micropyle et ainsi
empche l'entr des spermatozodes et la fcondation des ovules (Vrasski in Billard, 2005).

Figure 20 : Fcondation des ufs par la laitance

36
Chapitre III : Matriels et Mthodes

Aprs avoir mlang le tout dlicatement laide dune cuillre pendant 5 minutes (fig.
21), on ajoute la solution fcondante (un mlange de 30 grammes de sel dans 10 litres deau)
(fig. 22). Elle a pour rle de crer un gradient de concentration permettant louverture des
pores, des ufs et ainsi la pntration des spermatozodes et ela grce au sel, lure quant
lui joue le rle dun anti inflammatoire (Woynarovich, 1980).

Figure21: Melange du sperme et des ovules Figure22: Ajout de la solution de fcondation

Ensuite on mlange les ufs fconds par deux mthodes :a- avec du lait de vache 2 ,8%
de matire grasse, (fig.23.) b-avec de largile, pour viter lagglutination des ufs.(fig.24)

Figure23. addition de lait Figure24: addition de largile

37
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.11. Incubation des ufs

Le 22 mars 2017 L'incubation des ufs est ralise selon une seule mthode qui consistait
introduire des tamis conu avec du grillage synthtique dans les bassins (Fig. 25), rempli
d'eau de forage en circuit ouvert temprature de 24C et avec un dbit d'eau dans les bassins
de 0.05l/s. Les ufs taient soumis quon aune oxygnation trs lgre au dpart puis
augmenter progressivement pendant la division cellulaire (embryogense)

Figure25. : Mise en incubation sur des tamis

III.3.12. Lembryogense

Le 23 mars 2017 nous avons utilis un microscope optique (G10 x10), pour vrifier ltat des
ufs et le dveloppement des embryons en fonction du temps, Lidentification des stades
embryonnaires sest base sur les travaux de Legendre et al.(1991).

III.3 .13. Lclosion

Le 25 mars 2017, Pour dterminer le taux dclosion, nous avons effectu le comptage des
larves vivantes. Le taux d'closion des ufs a t ainsi calcul :
Nombre des larves vivants
Taux d'closion= 100
Nombre dufs mis en incubation

III.3.14. levage larvaire

Llevage larvaire est certainement la phase la plus difficile de llevage de C.gariepinus.


(Ducarme et Micha, 2003).Notre levage larvaire est ralis dans de receways de 2000l
rempli deau de forage pralablement oxygn une temprature de 24C de jour et 22C de
nuit.

38
Chapitre III : Matriels et Mthodes

III.3.15. Rsorption de la vsicule vitelline


Apres closion les larves consomment leur rserve vitellines et ce stade elles nont besoin
daucune alimentation, elles nagent du haut vers le bas en flamme de bougie et de temps
autre horizontalement (Gilles et al.2001).
Premire alimentation : Au deuxime jour aprs closion les larves sont nourries.
Nous avons rcolt du zooplancton avec un petit tamis mail 50,150, et 250 m
(rotifres, coppodes, cladocres) nous avons distribus des cistes dartmia, de la levure
(saccharomyces cerevisiae) (fig.26) et on a galement utilis du jaune dufs comme
premire alimentation.

Figure 26. : Rcolte du zooplancton (rotifres)

39
Chapitre IV
Rsultats et
discussions
Chapitre IV Rsultats et discussions

Rsultats et discussions
IV.3.Dtermination de ltat de maturation des femelles

Les ovules observs sous loupe binoculaire avaient un diamtre moyen de 1,4mm(7
ovules /1cm),ce qui correspond aux critres de slection de (Viveen et al in Imoru
toko,2007).Les femelles que nous avons choisi ont un ventre bien arrondi qui nous laisse
suppos quelle sont prte ovuler.

Les injections stimulantes de GnRH et de HCG ont t appliques selon le protocole suivant.

IV.4.Ferme Abderrahmane
Premire tentative

La dose prparatoire se droule mardi 22 mars 2017 18h30mn. Une dose de HCG a t
administr qui reprsent 10% de la quantit totale.

Dose dcisive, Mercredi 23mars 2017 9 h30 mn au matin a t administre la dose


dcisive.
Deuxime tentative
-dose prparatoire :
Administre le 22mars 19h30mn.
-dose dcisive
Administre le 23 mars 9 h du matin.
Aprs linjection des gniteurs par la dose dcisive de GnRH, nous avons constat une
ovulation de 5 femelles aprs 12h de temps de latence. Le gniteur numro (C rose) a rpondu
en partie lors du premier stripping, cependant 24 h aprs il a rpondu totalement .Cela
pourrait s'expliquer par la quantit dhormone mal injecte qui a partiellement augment le
temps de latence. Il faut signaler que la femelle C rose qui a reu uniquement 2mg/kg de
GnRH na ovul que 48h aprs la stimulation hormonale.

IV.5. Stripping des femelles

Sest droul le 23 mars 19h 30mn.


Aucun cas de mortalit na t constat. Par contre les femelles qui ont t induit par de la
HCG nont pas ragi favorablement cela peut sexpliquer par :
- la dose insuffisante ou mal inocul.
-La dose qui t de mauvaise qualit cause dune mauvaise conservation.
- la chute de temprature qui a inhib lembryogense et agit sur le temps de latence.

40
Chapitre IV Rsultats et discussions

- la mauvaise alimentation pauvre en acide amins indispensable et pauvre en nergie.


-le stress de la manipulation qui a provoqu des micros blessures et des ptchies ou certaines
maladies bactriennes telles que l rythrodermatite et une mycose la saprolegnie qui ont pu
tre des facteurs amplifiants inhibition de lovulation.

IV.6. Parc animalier de MENEA


Ponte le 26 mars 6 h du matin.
Eclosion le 27 mars 4h du matin sur claie synthtique.
Rsorption vitelline le 28 mars 2017 16h.
Nage horizontale le 28 mars 10h du matin.
Premire alimentation avec rotifres et vitellus le 28 mars 18h.

IV.7. Echec de la reproduction avec de la HCG la ferme Abderrahmane


Lchec de la reproduction peut tre d aux facteurs suivants :
-Le stress de la manipulation qui peut inhib la ponte.
-les doses de HCG et de GnRH non dtermines avec prcision et donc non stimulante.
-hypophyse gnralement utilis de Cyprinus carpio est phylogeniquement plus rapproch de
lespce donc plus efficace que la HCG humaine.
-la mauvaise qualit des inducteurs hormonaux.(mauvaise conservation)
-Le respect du temps de latence (sur maturation des ufs) due la fluctuation de temprature
de l'eau.

41
Chapitre IV Rsultats et discussions

IV.8. Prlvement des ovules

Nous avons calcul la temprature moyenne de leau pour connaitre le temps de latence qui
est de 12,5 heures ( 25,5 C) aprs linjection dcisive. (Rukera Tabaro et al, 2005). Selon
(Gilles,2001) plus la temprature sera basse, plus le temps de latence sera long .Les rsultat
des prlvement sont indiqu dans les tableaux ci-dessous :
la ferme dAbderrahmane
Tableau 7: Rsultats des prlvements dovules et le temps de latence (injection par HCG)
Gniteurs Temprature Temps de latence Rsultat Poids des ufs
moyenne (h) (g)
M rose 24 Pas dovulation /
B rose 24 Pas dovulation /
D rose 22.5C 24 Ovulation 36
N rose 24 Pas dovulation /
E rose 24 Pas dovulation /
L rose 24 Ovulation 21
Tableau 8 : Rsultats des prlvements dovules et le temps de latence (injection par Gn-RH)

Gniteurs Temprature Temps de latence Rsultat Poids des ufs


moyenne (h) (g)
H rose 24 Ovulation 177
C rose 24 Pas dovulation /
R rose 22.5C 24 Ovulation 139
P rose 24 Ovulation 132
V rose 24 Ovulation 107
Z rose 24 Ovulation 109

Nous avons inject la femelle C rose par une deuxime dose value 500 U.I/kg de
poids de HCG. Le rsultat est prsent dans le tableau ci-dessous :

Tableau 09 : Rsultats des prlvements dovules au mme temps de latence aprs la seconde
injection.

Gniteurs Temprature Temps de latence Rsultat Poids des ufs


moyenne (h) (g)
C rose 22.5C 12 Ovulation 108

Au parc animalier :
Tableau 10 : Rsultats des prlvements dovules et le temps de latence

Gniteurs Temprature moyenne Temps de Rsultat Poids des ufs


latence (h) (g)
1 23 C 22 Ovulation 72
2 23 C 22 Ovulation 58
3 23 C 22 Ovulation 63

42
Chapitre IV Rsultats et discussions

Le prlvement des ovules sest effectu diffrentes tempratures et diffrents temps de


latence.
La quantit dovules produite a t dtermine selon deux mthodes :
Mthode thorique

Les femelles de clarias gariepinus produisent environs 30.000 ovules /kg de poids vif (Micha
et Ducarme, 2003).
la mthode volumtrique

Nous avons relev le volume dufs et leur nombre (nombre dufs dans 1 ml ramen au
volume total de chaque ponte).
Nous avons calcul le nombre dufs uniquement pour les femelles qui avait des poids les
plus proches de 1 kg pour facilit les calculs.
Tableau 11: Nombre dufs par kilogramme de poids vif pour chaque femelle par la
mthode volumtrique.
Gniteurs Poids (kg) volume des ufs Nombre des ufs Nombre totale
dans 1ml marron dans 1ml dufs
H rose 1220 177 302 53454
C rose 1200 108 210 22680
R rose 1100 139 240 33360
P rose 1150 132 213 28116
V rose 1140 107 180 19260
Z rose 1130 109 188 20492
3 1220 63 203 12789

IV.9. Prlvement du sperme

Aprs la dissection du mle nous avons pu obtenir 16 g de testicules. La laitance soutire


contenait 14ml, et selon (Janssen ,1985) 1 ml est une quantit suffisante pour fcond 15
millions d'ufs (sachant quun millilitre de laitance contient entre 10 et 20 milliards de
spermatozodes).
La castration du mle N2 a permis de rcuprer 5ml de laitance qui est largement suffisante
pour la stimulation des gniteurs. La laitance non utilise a t place dans des flacons et
rfrigre pour une utilisation ultrieure.
Par mesure prventive on a utilis la laitance des 2 mles afin dassurer la fcondation.
Cependant avant la castration des 02 gniteurs on a pas procd au contrle de la laitance
par coloration losine ngrosine et contrle sous microscope de la viabilit des
spermatozodes.
43
Chapitre IV Rsultats et discussions

Le mle opr donner une quantit apprciable de sperme , cela sexplique par le fait que
le mle tait mature et rpondait aux exigences dun bon reproducteur.
Le mle sacrifi a par contre rpondu avec une mission de laitance trs faible due en
particulier sa cachexie (mauvaise alimentation) qui a influ sur la qualit des gonades.

IV.10. Fcondation et mis en incubation des ufs


Aprs la fcondation des ufs, nous avons calcul le taux de fcondation pour les 8 femelles
qui est le rapport des ufs fconds sur le nombre total des ufs

Taux de fcondation :

Nous avons obtenus environ ( 70.000 ) ovules par geniteurs.Rukera et Tabaro et al.(2005)
ont obtenu 99.800 ovules par kg de femelle ,alors que Ducarne et Micha ont obtenu 30.000
ovules environ par kg de poids.
Apres la fcondation des ufs, nous avons calcul le taux de fcondation des femelles.
Taux de fcondation est de Chebel et Khouas ont obtenu un taux de fcondation de 27% ;
- Les femelles injectes par la HCG (femelle D, L) ont donn une quantit moyenne dufs et
les femelles qui injectes par la Gn-RH (H ,R,P,Z) , elles sont donnes une grande quantit
dufs . Les rsultats obtenus sont reprsents dans le tableau suivant :

Tableau 12 : taux de fcondation

Gniteurs Poids des ufs Nombre des ufs Nombre des ufs Taux de
(g) dans 1g marron dans 1g fcondation
(%)
H rose 177 425 302 71.05
C rose 108 350 210 60
R rose 139 400 240 60
P rose 132 396 213 53.78
V rose 107 370 180 48.64
Z rose 109 380 188 49.47
D rose 36 223 95 42.60
L rose 21 230 98 42.60

44
Chapitre IV Rsultats et discussions

IV.11.Dveloppement embryonnaire des ufs


Les diffrents stades du dveloppement embryonnaire observs sont reprsents dans la figure
suivante :
1) uf fcond 2) Stade deux cellules 3) stade morula 4) gastrulation
5) fermeture du blastopore 6) formation des premiers somites 7) larve close

1 2 3

4 5 6

Figure4.1. Diffrents stades du dveloppement embryonnaire.(Horvath L 2002)

IV.12.Premire et deuxime expriences de reproduction par GnRH et HCG ferme


dAbderrahmane
Les ufs des femelles injectes par GnRH ont t tals sur des frayres (Claies) prpar
par nos soins et aprs plongs dans une eau 24C.
-Le vendredi 26/ 03/ 2017 a dbut lclosion des ufs qui a dure 672 heures, soit 28h
une temprature moyenne de 24C et une concentration doxygne dissous moyenne de 3.2
mg/ml. Il est signal que loptimum thermique qui conduit aux pourcentages dclosion le
plus lev, se situe entre 25 et 29C (Legendre et al, 1991).En Afrique du Sud,
lembryogense du poisson chat se fait 28C et lclosion des ufs se droulent aprs 16h-
18h de latence

45
Chapitre IV Rsultats et discussions

Nous avons enregistr un blocage de dveloppement embryonnaire sur les frayres labores
par nos soins grce l'utilisation de grillage moustiquaire de couleur verte.
La mortalit est due en particulier la qualit des reproducteurs mles qui ont produit une
mauvaise qualit de spermatozodes qui a t vrifie sous microscope ou on a constat une
fcondation qui est suivi dune division cellulaire (embryogense) qui sarrte au stade
morula et gastrula. Cependant nous avons constat que certains embryon ont achev leur
division cellulaire mais au moment de lclosion narrivaient pas se librer de leur
enveloppe. Cette constatation est taye par le fait quune tentative de reproduction au parc
animalier avec des bons mles a donn des larves de bonnes qualits.

IV.13.Troisime exprience au parc animalier de Menea

Apres lchec des 2 premires une troisime tentative de reproduction a t effectue le


samedi 27/03 /2017 au parc animalier avec de la HGC et de la GnRH sur un autre lot de
gniteurs de Clarias gariepinus compos de 3 femelles et de 02 mles. Le rsultat obtenu dans
le tableau ci-dessous :

Tableau 13 : Rsultat de la ponte, de la fcondation

Gniteurs Poids des Nombre des Nombre des ufs Taux de


ufs dans 1g marron dans 1g fcondation
ufs (g)
(%)
1 72 396 213 53.78
2 58 380 180 47.36
3 63 400 203 50.75

Daprs Ducarme et Micha (2003), lclosion lieu aprs 27h une temprature de 25C.
Le taux dclosion est mentionn dans le tableau suivant : Le taux de dclosion est de
21.99% .Ce rsultat est infrieur celui enregistr par (Rukra Tabaro et al ,2005), ce qui
signifie que la proportion dufs non fconds est importante par rapport celle des ufs
fconds.
Cette mortalit s'explique galement par la mauvaise qualit des spermatozodes, par la
fluctuation importante de la temprature, ainsi que le non viabilit des embryons due
certainement la mauvaise alimentation des gniteurs et la saprolegniose.

46
Chapitre IV Rsultats et discussions

Tableau 14 : Taux dclosion

Numro de bassin Nombres des ufs Nombres des larves Taux dclosion
mis en incubation Vivants (%)
01(gniteur1et2) 26628 5858 21.99
02(gniteur 3) 12789 3100 24.23

IV.14. Elevages larvaires

Au lendemain de lclosion, nous avons remarqu une forte mortalit dans le bassin
dalevinage, les larves mortes sont de couleur blanchtre et flottent la surface de leau, En
effet, Gilles et al. (2001) signalent quil faut vrifier rapidement les ufs blancs dans les
incubateurs. Leur pourrissement peut provoquer une pollution importante de leau.
La troisime exprience au parc animalier de Menea ou il y a eu un taux dclosion trs
intressant dpassant les 70% de la valeur totales des ufs qui taient estim 50.000 ufs.
Malheureusement aprs le quatrime jour 70% des larves sont morte mortes cause de la
coupure de llectricit.

IV.15. Alimentation des larves


Llevage larvaire est la phase la plus dlicate dans la vie dun poisson(Ducarne et
Micha,2003).Nous avons prpar un bassin en terre dune contenance de 10.000 l quon a
enrichi de matires organiques et de chaux afin de dvelopper du zooplancton en particulier
des rotifres pour lalimentation des larves aprs rsorption de la vsicule vitelline (Fig. 29).
De mme quon a prpar du saccharomyce cerevisiae (levure) et du jaune dufs

Figure 29 : bassin en terre pour le dveloppement des zooplanctons

En conclusion les rsultats contradictoires de reproduction du Clarias par la GnRH et la


HCG obtenus Menea sexplique par :
Lutilisation de femelles nayant pas acheve leur vitellogenese.
Femelles sur mature.

47
Chapitre IV Rsultats et discussions

Un faible dosage de HCG.


Comment y remdier :
Trouver la dose favorable de HCG car une faible ou une forte dose peut tre inhibitrice.
Procder une pression abdominale pour la reconnaissance de la vsicule germinale
priphrique sur les ovules.
Enfin amliorer la formulation alimentaire pour une meilleure ovulation.

48
Conclusion
Conclusion

Conclusion

Ds lachvement de notre travail la ferme Abderrahmane et au parc animalier, il ressort


que cette espce prsente dexcellente prdisposition du point de vue reproduction et cet essai
exprimental plaide en faveur dune gnralisation des hormones HCG et plus
particulirement GnRH.
Cependant dautres travaux de recherche reste indispensable afin de dterminer les doses
exactes dinduction en particulier les doses dhormones HCG.
Il est important de mettre en relief laliment qui est un facteur dterminant et un facteur
essentiel dans la reproduction du Clarias gariepinus.
Ce travail exprimental sur les diffrentes techniques de stimulation avec de la HCG et la
GnRH permet de conclure quil est possible damliorer la reproduction du Clarias
gariepinus en utilisant convenablement les techniques de stimulation hormonale et amliorer
lalimentation et les facteurs abiotiques qui sont dominants dans llevage piscicole.
La maitrise de la reproduction artificielle du Clarias gariepinus et la solution pour augmenter
la production et mettre en partie fin limportation dune denre qui coute trs cher
lconomie nationale.

50
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Annexes
Annexe 1 : Matriel exprimental

Stockage des gniteurs


Bassins de stockage des gniteurs
Filet
Pche
Salabre
Prparation des bassins de stabulation
Deux bassins 1.5m3
Diffuseurs
Salabre
Marquage
Salabre
Balance lectronique de marque KERNPCB M Memory (Max 6000g de
0.1g
Fils de marquage
Ichtyo mtre
Induction des femelles :
Une table de travaille
Anesthsiant
Bassin de 1.5m3
Seringues jetables de 10 ml
HCG (hormone chorionique gonadotrope)
Gn-RH
Srum physiologique
Thermomtre
Papier absorbant
Serpillires
Prlvement et conservation du sperme
Ciseaux
Petit pince
Bcher 500 ml
Srum physiologique
Papier absorbant
Lames
Lamelles
Pipettes jetables
Prlvement des ovules
Bassines
Serpillires
Papier absorbant
Fcondation et mise en incubation
Bassin
Pompes daration
Cadres grillags
Multi-paramtre
Elevage larvaires
Multi-paramtre
Pompe daration
Bassin de 1000 L
Annexe 2 : mesure de paramtre physicochimique des gniteurs

Bassins1 (males) :

jour Temprature(C) Oxygne dissous (mg/l) pH


matin soir Matin soir matin Soir
1 25 22 1.65 1.02 7.6 7.5
2 26 21 1.56 1.25 7.28 7.12
3 25 23 1.89 0.98 7.45 7.1
4 24 22 1.54 1.04 7.35 7.2
5 24.5 21 1.98 1.32 7.5 7.2
6 25 22 2.12 1.56 7.38 7.15
moyen 24.91 21.83 1.79 1.19 7.42 7.21
Bassins2 (femelles) :

jour Temprature(C) Oxygne dissous (mg/l) pH


matin soir Matin soir matin Soir
1 24.5 22 1.98 1.81 7.3 7.01
2 24 21 1.25 1.55 7.45 7.2
3 25 22 1.32 1.69 7.5 7.25
4 24 21 1.02 1.98 7.4 7.1
5 26 23 0.98 1.02 7.25 7.02
6 25 22.5 1.65 0.99 7.6 7.25
moyen 24.75 21.91 1.36 1.50 7.41 7.13

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