INITIATION AU MICROSCOPE OPTIQUE

LE MICROSCOPE
• Les différentes parties du microscope:

1- parties pour le support: …

2- parties pour le réglage: …

3- parties pour l’observation: …

4- parties pour l’éclairage: …

 Le microscope

Préparation du microscope

- Installer le câble électrique et brancher

l’appareil.
- Descendre la platine et mettre le faible
grossissement (x 4).
- Ouvrir le diaphragme.
 Le microscope
Méthodologie pour l’observation au microscope
(préparation microscopique)

- Prendre une lame et une lamelle très propres,

- Placer la lame sur la table,
- Déposer au milieu avec une pipette une goutte
d’eau ou de colorant, (liquide de montage),
 Observation d’une cellule végétale:
épiderme interne d’une écaille de bulbe d’oignon
- Prélèvement d’un
petit lambeau
d’épiderme sur la
face concave d’une
écaille d’oignon.

- Placer le lambeau
immédiatement
dans le liquide de
montage.
 Le microscope
Méthodologie pour l’observation au microscope
(préparation microscopique)

- Placer l’objet à observer dans le liquide(l’objet doit être très

mince et transparent),
- Appliquer un côté de la lamelle contre le liquide de
préparation et faire descendre la lamelle doucement. Si l’eau
déborde de la lamelle, essuyer avec un peu de papier
absorbant.
 Le microscope
1- Observation au faible grossissement:

En regardant dans l’oculaire, monter la

platine à l'aide de la vis macrométrique
jusqu’à ce que l’image soit nette.

Rechercher la zone intéressante et la

centrer.
 Le microscope
2- Observation au moyen grossissement:
Faire tourner le revolver pour que le moyen grossissement
(x 10) soit en face du trou de la platine.

Sans changer le réglage, et en regardant dans l’oculaire,

monter lentement la platine à l'aide de la vis
macrométrique jusqu’à ce que l’image soit nette. Centrer.

Faire la mise au point avec la vis micrométrique

 Le microscope
3- Observation au fort grossissement:
Descendre la platine.
Faire tourner le revolver pour que le fort grossissement
(x40) soit en face du trou de la platine.
En regardant latéralement (les yeux ne sont pas sur les
oculaires), remonter prudemment la platine de façon que
l’objectif touche presque la lamelle.
En regardant cette fois dans l’oculaire, régler avec la vis
micrométrique jusqu’à ce que l’image soit nette.
 Notion de grandissement

Le grandissement est le rapport entre la taille du

dessin d'observation réalisé (D) et la taille réelle de
l'objet (d).
Il est noté sous la forme "X n", avec n la valeur de ce
rapport.
 Notion de grandissement
Un dessin de biologie doit comporter une indication de
grandissement G = D/d avec:

- D = dimension réelle du dessin de l’objet,

- d = dimension réelle de l’objet dessiné.

1/ On choisit pour le dessin une dimension donnée

(longueur / largeur ou diamètre) D.

2/ On calcule d à partir du champ microscopique:

d = diamètre du champ (A) / nombre de cellules qui
occupent le champ (a).
d= A/a
 Grossissement
Il indique le grossissement de
l'appareil optique (microscope)
qui a permis de réaliser
l'observation et donc le
dessin.

Il est obtenu en multipliant

les grossissements des
éléments de l'appareil
optique (objectif, oculaire,
etc.). Il est noté sous la forme
"X n", avec n le grossissement
utilisé.
 Observation microscopique
Coloration au rouge neutre

Le rouge neutre pénètre dans la cellule sans la tuer : c'est un colorant

vital. Une vaste "cavité", la vacuole, est ainsi colorée en rouge.

Une mince couche de cytoplasme incolore sépare la membrane

cellulaire de la vacuole. Le cytoplasme s'épaissit légèrement aux
angles.
 Observation microscopique
Coloration au vert de méthyle

Le vert de méthyle est un colorant spécifique qui se fixe sur l’acide

désoxyribonucléique (ADN).

On observe que les noyaux des cellules sont colorés en vert.

 Observation microscopique
Coloration au lugol

L'iode contenu dans le lugol tue la cellule en provoquant la

coagulation du cytoplasme et du noyau (c'est un fixateur) et en
teintant en jaune certains éléments.
Le cytoplasme prend une structure finement granuleuse.
Les parois, les noyaux et les cytoplasmes coagulés sont
particulièrement visibles.
 LE COMPTE RENDU

Titre: Dessin d'une cellule de l'épiderme externe d'oignon

observée au microscope optique.

Liquide de montage: …….

Grossissement: X ……
Grandissement: X ……