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FORMATION CONTINUE TECHNICIEN(NE) DE LABORATOIRE

Runion du 12 mars 2009 Htel des II Mas - CABESTANY


Pr Alexis VALENTIN Hpitaux de TOULOUSE

Ce document a t ralis pour la formation des techniciens partir de documents personnels


du Pr VALENTIN ainsi que dimages prises sur Internet.
Notamment sur le site : http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/Default.htm , lequel dispose dune
banque de donnes images trs bien fournie. Nhsitez pas la consulter.
Ce document ne doit tre utilis que dans un but ducatif et d'aide
dans les laboratoires.

Le microscope optique et ses rglages


La partie mcanique d'un microscope optique comprend principalement :
- Le statif compos d'un pied et d'une potence ;
- La platine porte objet surmonte d'un chariot guide objet ;
- Le tube binoculaire ;
- Le revolver porte objectif ;
- Les vis macromtriques et micromtriques de mise au point .

1. oculaire de rglage dioptrique,


2. glissire de rglage de l'cartement inter-pupillaire
3. tube binoculaire
4. potence
5. tourelle porte-objectif
6. vernier de positionnement avec vis de dplacement bidirectionnel du chariot
7. chariot de fixation et de positionnement de la lame porte-objet
8. platine porte-objet
9. vis macromtrique de mise au point
10. vis micromtrique de mise au point
11. vis de rglage de la hauteur du condenseur
12. pied

La partie optique d'un microscope fond clair comprend :Une optique d'clairage
compose principalement d'une source lumineuse intensit d'clairage rglable et surmonte
d'un collecteur et d'un condenseur. Une optique de formation de l'image comprise entre la
lentille frontale de l'objectif et le verre d'il de l'oculaire

13. oculaire
14. objectif
15. condenseur avec diaphragme d'ouverture (1)
16. potentiomtre de rglage de l'intensit lumineuse
17. diaphragme de champ (1)
18. collecteur
(1) Le rglage correct de l'ouverture de ces diaphragmes est essentiel en microscopie
photonique fond clair ; cela permet de raliser, "l'clairage de KOHLER"
Cet "clairage" assure que l'objet soit clair de faon trs uniforme car chaque point de la
source lumineuse claire tout le champ objet. En consquence, un point de l'objet est clair
par l'ensemble des points lumineux de la source
(N.B. : Chaque point lumineux de la source claire aussi l'ensemble de la rtine de
l'observateur).
Le diaphragme de champ (situ la sortie du collecteur) permet de rgler le diamtre du
faisceau lumineux qui arrive sur la prparation. Ainsi seul le champ objet est clair. On
limite alors, l'entre de faisceaux lumineux parasites provenant aprs diffraction de zones
externes celle directement observe.
Le diaphragme d'ouverture plac sous le condenseur permet de rgler le cne de lumire qui
claire chaque point de l'objet Cela a pour incidence sur l'image observe d'en modifier le
contraste.

Utilisation du microscope optique


1.Mettre sous tension la source de lumire aprs s'tre assur que le potentiomtre de rglage
de l'intensit lumineuse se trouve sur sa position minimale (ou presque ).
Rq. :Les lampes halognes supportent mal les variations brusques de tension.
Les rglages du microscope prennent du temps et les prparations microscopiques supportent
mal l'chauffement du une intensit lumineuse trop leve.
2. Ouvrir en grand les diaphragmes de champ (au-dessus du collecteur de lumire situ aprs
la lampe sur le socle du statif) et d'ouverture ( l'entre du condenseur).
Le rglage de ces diaphragmes
dpend de l'objectif utilis et des
caractristiques de la prparation
observe (objet +/- pais et +/color, paisseur variable de la lame
porte objet et ventuellement de la
lamelle couvre objet).
3. Positionner la prparation observer sur la platine porte objet.

4. Prparer la mise au point un faible grossissement en amenant la prparation moins d'un


millimtre de la lentille de l'objectif x40. (Tous les microscopes n'ont pas de systme de
rglage de la pr focalisation).
.
Le technicien regarde sur le cot du microscope, ses yeux ne
sont pas sur les oculaires.
La recherche de la mise au point en " aveugle " ( les yeux sur
les oculaires sans pr focalisation pralable) augmente le
risque de toucher l'objectif avec la prparation (trs petits
objets ncessitant d'emble l'objectif x40) est trs laborieuse
quand on ne sait pas quelle distance d'un objectif court (x4
ou x10) se trouve la plage de mise au point

5. Les yeux sur les oculaires, on ajuste l'intensit lumineuse (potentiomtre sur le socle) et on
recherche la mise au point (vis macromtrique puis micromtrique) en loignant lentement la
platine porte objet de la lentille de l'objectif.
5 bis. Si la mise au point n'est pas trouve, il est prfrable de remonter la platine porte objet
en regardant sur le cot du microscope et reprendre l'tape 4.

Eviter le choc objectif - prparation. Permettre ventuellement


de dplacer la lame porte objet vers une zone apparaissant
l'il nu plus colore.

6. Rgler l'cartement inter pupillaire des oculaires pour obtenir une parfaite superposition des
deux images vues par chaque il. On observe alors une seule image circulaire. (pr-rglage
conserver)

7. Affiner la mise au point en ne regardant qu'avec l'il ne disposant pas d'oculaire rglable
(l'autre il tant ferm).
7 bis. Sans toucher la mise au point (vis macro et micromtrique) jouer sur l'oculaire
rglage dioptrique pour obtenir une image nette avec l'il prcdemment ferm (l'il ayant
initialement servi affiner la mise au point tant alors ferm).

Permettre l'utilisateur ayant une diffrence d'acuit visuelle


entre ces deux yeux de profiter du confort de l'observation
binoculaire.

8. Reprer le champ le plus intressant en utilisant le chariot guide objet puis positionner
l'objectif souhait pour l'observation. Ajuster ventuellement la mise au point (vis
micromtrique).

Il ne sert rien d'chauffer


inutilement des rgions non
observes de la prparation.
Un diaphragme de champ trop
ouvert favorise l'entre dans
l'objectif de lumires diffractes ou
diffuses parasites, ce qui nuit la
qualit de l'image.
9. Fermer progressivement le diaphragme de champ D.C.(situ sur le collecteur) pour
n'clairer que le champ observ. Le diamtre de la colonne de lumire qui monte de la source
est peine suprieure au champ prsent sous la lentille de l'oculaire.

9 bis. Si, en fermant un peu le diaphragme de champ, le faisceau d'clairage n'est pas centr
par rapport au champ d'observation, il faut recentrer l'iris du diaphragme en jouant sur les vis
situes sur les cots du systme d'clairement (collecteur + diaphragme de champ).

L'axe du faisceau d'clairage qui traverse l'objet et l'axe de l'objectif doivent tre
aligns. Chaque point de la source claire l'ensemble de la prparation : on a un
fond clair !!!
10. Rgler la hauteur du condenseur pour obtenir un bord net de la zone de champ claire
lorsque le diaphragme de champ est partiellement ferm. Puis rouvrir le diaphragme de
champ pour clairer de nouveau tout le champ d'observation.

Tous les faisceaux lumineux se croisent sur l'objet.


Chaque point de l'objet est clair par l'ensemble de la
source de lumire et donne un point sur la rtine.

11. Rgler le diaphragme d'ouverture (D.O.) situ l'entre du condenseur


Si le D.O.est trop ouvert des rayons diffracts ou diffuss hors de la zone observe pntrent
dans l'objectif (ouverture d'clairage suprieure l'ouverture numrique de l'objectif) et

diminue les contrastes. Si le D.O. est trop ferm l'image s'assombri et des franges de
diffraction apparaissent. Dans les deux cas l'image est de mauvaise qualit.

Pour les objets trs contrasts (= colors) le meilleur pouvoir sparateur est obtenu lorsque
l'ouverture d'clairage est gale l'ouverture numrique de l'objectif. On parle de " pleine
ouverture d'clairage ".
Le diaphragme d'ouverture est " plutt " ouvert.Pour les objets peu contrasts, il faut fermer le
diaphragme d'ouverture jusqu' environ 2/3 de la " pleine ouverture d'clairage ".Cela permet
d'augmenter le contraste et la profondeur de champ (le pouvoir sparateur est alors moins
bon).
Lorsque l'on change d'objectif il est ncessaire d'ajuster l'ouverture du D.O.

Jouer sur le diaphragme d'ouverture pour ajuster la clart


est une erreur car on touche alors systmatiquement la
qualit de l'image (contraste et pouvoir sparateur).

13. Pour passer en immersion, on conserve la mise au point. L'objectif x40 est dgag de l'axe
optique en tournant doucement le revolver porte objectif. Lorsque les objectifs x40 et x100
sont de part et d'autre de la prparation, on dpose une fine goutte d'huile immersion puis
l'objectif x100 est positionn au-dessus de la prparation.

Aprs cette opration on ne peu plus retourner vers les objectifs de plus petits
grandissement. Ces derniers ne doivent pas entrer en contact avec l'huile
immersion.

14. Aprs utilisation :


- diminuer l'intensit lumineuse au maximum (potentiomtre) puis teindre le microscope
(interrupteur)
- essuyer l'objectif immersion avec du papier Joseph.
- coincer un carr de papier Joseph entre la lentille frontale de l'objectif immersion et la
platine porte objet.
- remettre la house de protection sur le microscope.
Maintenir la qualit du matriel et rduire les coups d'entretien.

Principales techniques en coprologie


parasitaire:
ED, Fixation, Enrichissement

Diagnostic direct des parasitoses

Introduction
Nombre de prlvements
Prparation du patient
Recueil des selles et dlai dexamen
Techniques de conservation
Examen direct
Techniques denrichissement
Numration
Intrts et limites

Diagnostic direct des parasitoses : coprologie : Introduction

Introduction
- Chaque parasite nest bien mis en vidence que par la technique
qui lui est adapt
origine gographique
signes cliniques
rsultats des autres examens
thrapeutique parallle

- Un examen ngatif isol na aucune valeur dlimination


- Le prlvement doit tre examin rapidement

Coprologie : Nombre de prlvements

Nombre de prlvements
- Une seule analyse ne permet de dceler la prsence
dlments parasitaires que dans 30 % des cas (voire moins)
- Raret des lments parasitaires
- Efficacit des techniques utilises
- Une priode muette de rejet dlments caractristiques
giardiase
amibiase
pauciparasitisme par des nmatodes ou des trmatodes

Il faut, dans lidal, pratiquer trois examens coprologiques


quelques jours dintervalle pour affirmer la ngativit

Coprologie : recueil et dlai dobservation

Recueil des selles


- Rcipient propre et sec bouchage hermtique
- Faire recueillir lensemble de lmission
- Etiquetage :
prescripteur
nom du patient
date du prlvement
traitement observ si il existe

Coprologie : recueil et dlai dobservation

Dlai dexamen
- Selles dures et moules
dlai jusqu 12 heures (pas de trophozotes de protozoaires)
observation en gnral difficile car toute dilution et/ou
remise en suspension sont difficiles
- Autres selles :
examen dans lheure (mise en vidence des trophozotes)
sinon : fixateur
- Selles trop dilues (diarrhe importante)
laugmentation du transit donne de nombreux dbris
volumineux

Coprologie : recueil et dlai dobservation

Dlai dexamen
- Consquences dun retard lexamen
aucune sur la plupart des ufs et des kystes
perte des trophozotes (et surtout de leur mobilit)
embryonnement, voire closion des ufs dAnkylostomids
mtamorphoses :
les larves rhabditodes de certains helminthes se
transforment en larves strongylodes en moins
de 24 h si les conditions sont optimales

- En rsum :
Observation dans lheure suivant lmission,
sinon, fixation (mais perte de mobilit des trophozotes)

Coprologie : conservation

Techniques de conservation

- Conservation provisoire par le froid


+4C : mort rapide des trophozotes de protozoaires
bonne conservation des kystes de protozoaires et/ou
ufs dhelminthes. Mort des larves danguilules

Coprologie : conservation

Techniques de conservation
- Conservation des ufs dhelminthe et kystes de protozoaires
- mthode leau formole
aldhyde formique (formol) de 5 20 %(v/v)
glycrine (facultatif)
1%
eau distill ou physiologique qsp 100ml
- technique
triturer la selle dans leau formole
ajuster 1vol de selle pour 3 volume de solution
tamiser (passe-th)
laisser sdimenter 1 mn
stocker aprs remplissage du flacon et tiquetage
- rsultats
bonne conservation tant que le prlvement reste liquide
Possibilit de conserver des selles parasites intressantes

Coprologie : conservation

Techniques de conservation
Conservation des formes vgtatives damibes (eau formole :qq sem)
Fixation au MIF
Solution (1) de mercurothiolate-iode-formol : MIF (Blagg et al.)
Teinture de mercurothiolate RAL
glycrol bidistill
formol 40 %
eau distille

50 ml
10 ml
40 ml
850 ml

Prparation extemporane (3 semaines maximum) de lugol (2)


iode bisublime
iodure de potassium
eau distille

0.5 g
0.1 g
10 ml

Coprologie : conservation

Techniques de conservation
Fixation au MIF
Technique :
Mlanger extemporanment : 11.75 ml de (1) et 0.75 ml de (2)
Ajouter une noisette de selles (3 5 g)
Triturer, stocker
Pour lexamen
Agiter, transvaser dans un tube,
mulsionner avec un gal volume dther
Repos 2 min

Homogne :

centrifugation 1 mn
observation du culot

Diphasique :

rajouter 1 ml deau
homogniser
repos 2 mn
si homogne, sinon

Techniques de conservation
Fixation au MIF

Coprologie : conservation

Codification MOP.PARA.SEL.05-1 et 101

Coprologie : ED

Examen direct
- Il est obligatoire
- Il seffectue pendant la ralisation dau moins
deux techniques de routine de concentration
- Il dbute par un examen macroscopique des selles
consistance (teneur en eau)
couleur (fonction biliaire)
prsence de mucus, glaires, sang
- Il renseigne

sur laspect microscopique de la digestion


sur la prsence de cellules
et bien sur, sur la prsence dlments parasitaires

Coprologie : ED

Examen direct
- Au moins 2 prparations entre lames et lamelles
- talement de selles non dilues
selles fluides ou glairo-sanguinolentes
- talement de selles dilues dans du srum physiologique
selles plus consistantes
srum 37 C plus quelques fragments de selles
observation aprs homognisation sur la lame
- talement de selles dilues dans leau du robinet (hypotonique + HClO3)
lyse rapide des Blastocystis / kystes damibes
altration rapide des trophozotes
de Dientamoeba fragilis
de Pseudolimax butschlii
et donc diagnose diffrentielle davec ceux
d Entamoeba histolytica/dispar

Examen direct

Coprologie : ED

Trophozote d E. histolytica

Coprologie : enrichissement

Techniques denrichissement
- Pas de mthode idale
On distingue - les mthodes physiques
Sdimentation, flottation
- les mthodes diphasiques
1 sparation des lments volumineux
1 concentration des lments parasitaires
- Classification des mthodes denrichissement
- mthodes simples lther : usage gnral
flottation : recherche des ufs
sdimentation : recherches particulires

- mthodes combines

technique de Roman
technique de Junod : ther flottation
: sdimentation flottation

- mthodes

spciales extraction de Baermann (anguillulose)


coproculture des larves
numration des lments parasitaires

Coprologie : enrichissement

Techniques denrichissement : mthodes simples


- Mthode lther (Ritchie selon Lger et Notteghem)
- Ractifs :

formol 10%, ther,


passe-th, tube centrifuger conique

- Protocole :

- 1 vol de selles + 10 vol de formol


- triturer le mlange
- passer ou laisser sdimenter 2 min
- dcanter dans le tube
- ajouter la moiti du volume dther
- centrifuger (2000 rpm, 2 min)
- examiner le culot

Coprologie : enrichissement

Techniques denrichissement : mthodes simples


- Mthode par flottation au sulfate de zinc (Baker)
- Ractifs :
- Protocole :

ZnSO4,7H2O
Eau
- 15 g de selles dans 20 ml
- verser dans un cylindre de verre
- obtention dun mnisque
- poser une lamelle sur le mnisque
- aprs 20 30 min enlever la lamelle
- observer

Coprologie : enrichissement

Techniques spciales :

mthode de Baermann
recherche des larves danguillules

Utilisation du thermotropisme et du phototropisme des


larves strongylodes

Diagnostic direct des parasitoses : nmatodes

III - Techniques appliques aux larves de nmatodes


Mthode de Baermann et Lee :
Mise profit de lhygrotropisme et du thermotropisme des larves

Eau tide (35C)

Diagnostic direct des parasitoses : nmatodes

III - Techniques appliques aux larves

Au moins 3 h

Centifugation
Observation du culot

Coprologie : enrichissement

Techniques spciales :

mthode de Baermann
recherche des larves danguillules

Larve vivante parasite animal mobile

Parasite vgtal altr et immobile

Coprologie : intrts et limites

Intrt et limites de lexamen coprologique


Intrt : diagnostic de certitude
Limites

Confusions et faux positifs


rsidus alimentaires, graisses, savons
amidon
pollens
spores de champignons
lments endognes
leucocytes
cellules pithliales
Faux ngatifs
doivent tre carts par le choix technique
et par la rptition des prlvements

Coprologie : intrts et limites

Intrt et limites de lexamen coprologique

Spore de truffe
Cellules vgtales

Amidon

Cristaux

Diagnostic
Parasitologique

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions

Parasite: "celui qui vit avec"

Organisme eucaryote vivant obligatoirement une


partie de sa vie au dpens dun autre organisme.
Symbiose : bnfice mutuel
Mutualisme : bnfice mutuel
Phorsie : transport

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions

Modes de parasitisme:
Accidentel ex: larves de mouches sur une plaie
Facultatif
ex: champignons
Obligatoire:
temporaire ex : moustiques
priodique ex : helminthes adultes: Ascaris
permanent ex : taenias

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions

Localisation des parasites


Ectoparasites / ectoparasitisme :
peau et cavits accessibles
ex: arthropodes, champignons
Endoparasites / endoparasitisme :
cavits profondes et tissus
ex: Plasmodium et Schistosomes

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions

Cycle volutif
"Ensemble des transformations obligatoires,
se succdant dans un ordre prcis, avec ou
sans passage dans le milieu extrieur (ME)
subies par un parasite pour passer d'une
gnration la suivante"

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions
Cycle direct (parasite monoxne)
- un seul hte (espce ou groupe d'espces animales)
+ passage dans le Milieu Extrieur (ME) ex : Trichuris trichiura

Cycle indirect (parasite htroxne)


- 2 ou plus de 2 htes qui se succdent
+/- passage dans le ME

ex : Fasciola hepatica

- HD = hte dfinitif (hberge la forme sexue du parasite)


- HI = hte intermdiaire (forme asexue du parasite)
- hte paratnique = d'attente = non obligatoire

Parasitologie mdicaleIntroduction : dfinitions

Dfinitions
Maladie Parasitaire : nom de genre du parasite + "ose"
1 - Historique
2 - Le parasite, biologie, rpartition gographique
3 - Description clinique:
2 - Pathognie:
3 - Dfenses de l'organisme
4- Diagnostic Biologique d'une parasitose
Diagnostic d'orientation, Diagnostic clinique
Diagnostic direct ou Parasitologique
Diagnostic indirect ou immunologique
5- Thrapeutique
6- Prophylaxie
"Ensemble des moyens visant radiquer la maladie parasitaire"
La prophylaxie dcoule du cycle volutif

Amibiase et autres protozoaires


intestinaux

Cycle biologique
( dans google : nom du parasite en latin, CDC puis aller dans images)

Amibiase

Amibiase

Diagnostic
Coproscopie sur selles frachement mises :
glaires : trophozotes
selles moules : forme non pathogne et kystes
Enrichissement et colorations ventuelles (MIF, lugol)

8-15 m

noyau
Chromatine priphrique
Caryosome central

20m

Diagnostic

Amibiase

Diagnostic (confusions possibles)

Trophozote

Amibiase

Macrophage

Cellule pithliale

Entamoeba coli

Autres amibes

15-20 m
25-35 m

Entamoeba hartmanni

Autres amibes

Cosmopolite mais assez rare

Similaire E . hystolytica
Plus petit, caryosome excentr

4-10 m

6-10 m
4 noyaux
Inclusions et vacuoles

Entamoeba polecki

Autres amibes

Cosmopolite, Parasite du Porc et du singe, rare en Europe de


louest, mais courant en Europe de lEst Migration population.

10-25 m

Similaire E . hystolytica
Plus petit, caryosome central

5-15 m
1 noyau
Inclusions et vacuole
prenant peu le Lugol

Endolimax nana

Autres amibes

Cosmopolite, Pouvoir pathogne non reconnu

Similaire E . hystolytica
Plus petit, caryosome de
grande taille,excentr

8-10 m

8-10 m
2-4 noyaux
Souvent sub-rectangulaire

Pseudolimax (Anc. Iodamoeba) butschlii

Autres amibes

Cosmopolite, Pouvoir pathogne non reconnu

Similaire E . Hystolytica - Plus petit, gros caryosome central

10 m

8-10 m
1 noyau
Polymorphes

Autres protozoaires intestinaux


Coccidies

Cryptosporidies - Cycle biologique

Coccidies - Cryptosporidioses

Diagnostic

Coccidies - Cryptosporidioses

Mise en vidence des oocystes dans les selles, les biopsies intestinales,
le LBA ou la bile
Coloration de Zhiel-Nielsen aprs concentration au formol ther
Coloration lauramine

Ookystes

Auramine
DD : Cyclospora
cayetanensis

4 Sporozotes
dans lookyste

Isospora belli

Coccidies - Isospora

Biologie
Cycle direct chez lHomme (HD), dans les cellules pithliales du TD
Une reproduction asexue suivie dune reproduction sexue conduit
lmission dun oocyste qui est expuls de la cellule hte et libr dans
le milieu extrieur.
L'oocyste mrit l'extrieur : individualisation successive dans
l'oocyste de 2 sporocystes contenant chacun 4 sporozotes.

20 m

Sarcocystis bovis hominis


S. suis hominis

Coccidies - Sarcocystis

- Parasite des carnivores (HD) et des herbivores (HI) dans les muscles
desquels ils senkystent
- Contamination orale par ingestion de viande
- Diagnostic direct : limination souvent discontinue et retarde

Autres protozoaires intestinaux


Flagells

Cycle biologique

Flagells - Giardiase

Morphologie

Trophozote (18-20 m)

Flagells - Giardiase

noyaux
corps parabasal
axostyle
flagelles (4 paires)

Kyste (12-14 m)
Rsidus

paroi

axostyle
corps parabasal

noyaux (2X2)
flagelles

Flagells - Giardiase

Chilomastix mesnili
Flagells - Autres - 1

Trophozoite : Etat frais, 5 7 m


Kyste: +/- piriforme, 5 6 m

+ Trichomonas intestinalis, Embadomonas intestinalis,


Enteromonas intestinalis

Dientamoeba fragilis

Flagells - Autres - 2

Trichrome

Etat frais, 7 20 m

Cycle biologique de quelques


helminthes

1- Nmatodes

Ascaris lumbricoides

Traitement 5 nitronazols (Fluvermal)

uf fertile

40 60 m

uf infertile

Enterobius vermicularis (Oxyure)

Environ 40m

Strongyloides stercoralis
(Anguillule)
Cycle externe long

Cycle externe
court
Cycle
endogne

Traitement : Ivermectine (stromectol mectizan)

Diagnostic diffrentiel des ankylostomids : Baermann

Trichuris trichura, Trichocphale

Adultes dans le TD

Diagnostic spcifique:
ufs pondus et vacus
avec les matires fcales

Ankylostoma duodenale ou Necator americanus


(Ankylostomids)

Diagnostic spcifique:
ufs pondus et vacus
avec les matires fcales

Environ 50 m

Trichinella spiralis (Trichine)

Nmathelminthes - Trichine

2 - Trmatodes

Fasciola hepatica
Cycle biologique
Emission dufs
dans les selles

Ingestion des
mtacercaires

Miracidium

Migration des cercaires


et enkystement

Contamination active de lhte intermdiaire, la limne tronque


pntration dans le poumon : sporocyste
migration vers la glande digestive : rdie
closion des rdies : cercaires
POLYEMBRYONNIE

Fasciola hepatica
LOeuf

130-150m
opercule
6090
m

Clonorchiase Clonorchis sinensis


(douve de chine)

Autres douves hpatiques

A- Morphologie:
1- Adulte
longueur: 15-20 mm,
largeur: 2-5 mm, paisseur: 1 mm
2- Oeuf
ovode, opercul avec opercule
paul, petite pine au ple
postrieur : environ 28 m

Autres douves hpatiques


B- Cycle biologique:
HD = homme (et Mammifres),
HI 1 = Bithynia: mollusque aquatique

HI 2 = poisson d'eau douce (100


espces, surtout cyprinids)
- les douvules remontent par le choldoque pour se fixer dans les
canaux biliaires :
vers adultes en 1 mois
dure de vie: 10 30 ans

Paragonimose, Distomatoses pulmonaires


Paragonimus westermani, P. ringeri, P. kelicotti, P. africanus

A- Morphologie:
1- Adulte
longueur: 10 mm,
largeur: 5 mm, paisseur: 3 mm
2- Oeuf
ovode, opercul
environ 80-100 m

Douves pulmonaires

Douves pulmonaires

HI2 : crustacs deau douce

HD : mammifres
carnassiers

Migration du TD vers
les bronches :
6 8 semaines

HI1 : Melania sp.


1 3 mois

Miracidium en 2 3 semaines

Schistosomes

Schistosomes

Cycle biologique
Migration sanguine, mues
Recto-colique
S. mansoni,
S. i et S. j
Vessie
S. haematobium

Adultes
plexus veineux

Eclosion
miracidium

HI
Planorbe : S. mansoni
Bulin : S. haematobium et S. intercalatum
Oncomelania : S. Japonicum

Pntration dans lHD

Sortie de HI
furcocercaire
Pntration
dans lHI
Multiplication
(sporocyste I et II)

Dignes Schistosomes

Oeufs

ovodes, clairs, munis d'un peron

S.mansoni

140 m x 60 m

S.haematobium
S. intercalatum

140 m x 60 m

S. japonicum

70 m x 40 m

3 - Cestodes

Taenia saginata

40 m

Taenia solium

Hymenolepis nana

uf : fine membrane
- Environ 60 m

- Embryophore avec embryon hexacanthe

Adulte : 15-40 mm de long

Diphyllobothrium latum

Diphyllobothrium latum

Adulte : Jusqu 10m de long, scolex sans ventouses : bothridies

Anneaux avec petit utrus au centre

uf : fine membrane
-Environ 90-120 m
-Pas dopercule

TABLEAU RECAPITULATIF DES AMIBES voir aussi http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/frames/morphologytables/body_morph_figure1.htm


1 FORMES VEGETATIVES
Taille
en m
Entamoeba coli
Entamoeba
histolytica
histolytica
Entamoeba
histolytica
minuta
Entamoeba
hartmanni
Entamoeba
polecki
Endolimax nana
Pseudolimax
butschlii
Dientamoeba
fragilis

20 30

Pseudopodes

Mobilit

Courts, larges, lents


Plusieurs la fois

Cytoplasme

Noyaux

Endoplasme grossirement
granuleux. Grosses vacuoles
bourres dinclusions.
Ectoplasme distinct de
lendoplasme.

Visibles ltat frais.


Chromatine irrgulire.
Caryosome pais, en gnral excentr.

Longs, hyalins,
12 15
rapides
jusqu 40
Un seul la fois

+++++

Endoplasme finement granuleux.


Vacuoles petites et peu visibles.
Hmaties

Difficile voir ltat frais.


Chromatine rgulire. Caryosome
central punctiforme.

12 15
Effils, hyalins,
jusqu 25 rapide

+++

Endoplasme finement granuleux.


Ectoplasme hyalin et
transparent.

Difficile voir ltat frais.


Chromatine rgulire. Caryosome
central punctiforme.

Ectoplasme et endoplasme peu


distincts.
Petites vacuoles

Difficile voir ltat frais.


Chromatine paisse, en amas.
Caryosome de grande taille, en gnral
central.

4 10

10 25

Allongs, hyalins

++

Arrondis

8 10
Arrondis, en boule,
jusqu 15 clairs

Ectoplasme et endoplasme
distincts.
Grosses vacuoles alimentaires
remplies dinclusions.
Ectoplasme et endoplasme peu
distincts.
Petites vacuoles

8 15

Longs, en doigt de
gant, rfringents.

Endoplasme et ectoplasme peu


diffrencis
Vacuoles +++
Inclusions ++

7 20
et plus

Courts, nets

Fines granulations
Vacuoles peu visibles
Inclusions +++

ATLAS DE PARASITOLOGIE

Peu visible ltat frais. Chromatine


fine. Caryosome petit, compact,
excentrique.
Non visible ltat frais. Membrane
nuclaire fine. Caryosome de grande
taille, ovalaire, excentr.
Non visible si lamibe est vivante.
Visible si elle est morte : gros,
vsiculeux, membrane priphrique
mince. Caryosome central, arrondi,
entour de granules.
Peuvent tre 2 : non visibles ltat
frais. Membrane nuclaire fine.
Caryosome central form de 4 5
granules chromatiques.

images

TABLEAU RECAPITULATIF DES AMIBES voir aussi http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/html/frames/morphologytables/body_morph_figure1.htm


2 FORMES KYSTIQUES
Taille
en m
Entamoeba coli

15 20

Forme

Contour

Cytoplasme

Cristallodes

Arrondie
Ovalaire

Net
Epais

Clair, hyalin,
rfringent
Vacuole +

difficile voir
en forme daiguille

Granuleux
Vacuoles ++

Prsence irrgulire
En forme de saucisse

Entamoeba
histolytica
minuta

12 14

Arrondie

Net, moins pais


que dans E.Coli

Entamoeba
hartmanni

3 10

Arrondie

Net
Rfringent

Vacuoles +++

Prsence irrgulire
Trapus, en forme de
saucisse

Entamoeba
polecki

9 17

Arrondie
Ovalaire

Net
Rfringent

Petites vacuoles ++

+++

Endolimax nana

8 10

Ovode
Rectangulaire

Net
Peu rfringent

Hyalin

Nant

Pseudolimax
butschlii

8 15

Toutes les formes

Epais
Rfringent +++

1 vacuole
iodophile +++

Nant

Dientamoeba
fragilis
Remarques :

Noyaux

images

18
Caryosome pais et
excentr
14
chromatine irrgulire
Caryosome central et
punctiforme
14
chromatine paisse
Caryosome de grande
taille
1
chromatine fine et
rgulire
Caryosome petit et
excentrique
14
Membrane nuclaire fine
Caryosome en tche
1
Caryosome de grande
taille entour dun halo
clair, ltat frais

Kyste inconnu
Il convient de rappeler que la mise en vidence des formes kystiques prsente le mme intrt diagnostique que celle des formes vgtatives
Le diagnostic des kystes damibes est dautant plus important quils constituent la forme de rsistance et de dissmination de lespce
Llimination des kystes dans les selles est intermittente, car leur formation est irrgulire. Ceci se traduit donc par lexistence de priodes ngatives qui
justifient la prescription de plusieurs examens de selles conscutifs pour un mme patient ou nde ractivation qui permettra ventuellement la mise en
vidence des formes vgtatives.
Les kystes, trs rsistants, peuvent conserver leur pouvoir infectieux dans les selles pendant plusieurs jours : cinq jours pour Entamoeba Histolytica minuta.
Ils sont dtruits par la chaleur 70C environ
Rappelons enfin que Dientamoeba fragilis ne possde pas de forme kystique connue.

ATLAS DE PARASITOLOGIE