UNIVERSITE DE NOUAKCHOTT FACULTE DES SCIENCES ET TECHNIQUES DEPARTEMENT DE BIOLOGIE

TRAVAUX PRATIQUES DE BIOLOGIE CELLULAIRE

Biologie-Gologie 1

Elabor par : Ali O. Med Salem O. BOUKHARY

2007-2008

SOMMAIRE
Recommandations importantes Sance I : Microscopie
TP 1. Prsentation du microscope photonique : Principe, utilisation et application

Sance II : La Cellule et ses organites

TP 2. Etude microscopique de cellules vgtales TP 3. Etude microscopique de cellules animales

TP 4. Observation des plastes

TP 5. Ultra structure de quelques organites cellulaires

Sance III : La division cellulaire chez les eucaryotes, la mitose

TP 6. Ralisation de prparations microscopiques de mitose

Sance IV : Osmose et permabilit cellulaire

TP 7. Mise en vidence des mouvements de leau dans la cellule vgtale

RECOMMANDATIONS IMPORTANTES Les tudiants sont pris de : - Arriver lheure pour ne pas perturber le droulement de la sance ; - Travailler par binme ; - Porter une blouse blanche propre ; - Prparer la sance de TP : lire attentivement le texte du fascicule correspondant la manipulation du jour ; - Nettoyer sa paillasse la fin de chaque sance. - Se munir de matriel de dessin : feuilles de dessin blanches non quadrilles format A4, crayon graphite HB, gomme, taille, rgle, compat., boite de couleur. Ralisation des copies - Les copies doivent tre ralises entirement au crayon ; - Sur chaque feuille doit figurer : en haut et gauche votre nom et prnom, votre numro de groupe, en haut et droite la date au milieu le thme et le titre du TP - Ne jamais dessiner recto-verso, une seule face du papier doit tre employe pour une bonne prsentation ; - Dune faon gnrale, le dessin doit reproduire fidlement limage que donne le microscope (agrandir limage en lui conservant ses proportions et sa disposition) et donner la valeur du grossissement ; - Deux dessins par feuille au maximum ; - Tout dessin doit tre accompagn dune lgende complte, sinon le travail na aucune valeur. Les flches doivent tre, dans la mesure du possible, toutes situes du mme ct du dessin droite en gnral et diriges vers le dessin, les crire horizontalement. Les flches doivent tre traces la rgle et paralllement les unes aux autres.

Sance I Microscopie

TP1. PRSENTATION DU MICROSCOPE PHOTONIQUE I. DFINITION Cest un instrument doptique qui permet dobserver des objets trs minces (qui peuvent tre traverss par la lumire) en les grossissant (15 1800 fois). Lobjet observer appel prparation est entre une lame et une lamelle de verre. Il existe dautres microscopes, dits microscopes lectroniques, qui permettent des grossissements plus importants. II. PRINCIPE PHYSIQUE DU MICROSCOPIE (VOIR : COURS BIOLOGIE

CELLULAIRE) Le microscope photonique utilisent un flux ondulatoire de particules (FP) non charges, les photons, au travers dun systme de lentilles (L1, L2 et L3) de manire former dun objet (O) tudier (AB) une image agrandie (AB) sur un cran E

L1

O A B

L2-L3 FP

E A

S : source de lumire L1 : lentille condensatrice O : objet tudier de dimension AB : Demi-angle douverture de lobjectif L2, L3 : respectivement lobjectif et loculaire FP : faisceau de particule E : cran permettant de voir limage AB obtenue de lobjet O tudier. III. LES DIFFRENTES PARTIES DU MICROSCOPE PHOTONIQUE ET LEURS RLES

Les diffrentes parties du microscope : I. Parties statiques 1 : La potence 2 : Pied ou socle 3 : Platine II. Parties mobiles 4 : Vis macromtrique 5 : Vis micromtrique 6 : Vis de dplacement avant arrire (vernier ) 7 : Vis de dplacement droite gauche ( vernier ) 8 : Vis de dplacement hautbas du condenseur III. Parties optiques 9 : Oculaire 10 : Porte oculaire 11 : Revolver 12 : Objectifs 13 : Prparation ( lame ) IV. clairage 14 : Condenseur 15 : Diaphragme 16 : Porte filtre 17 : Lampe 18 : Interrupteur

On peut classer les diffrentes parties dun microscope selon leur fonction en cinq catgories : 1. Fonction de maintien de la prparation : le maintien de la prparation microscopique est assur par la platine et les deux valets. 2. Fonctions de grossissement de la prparation : on distingue dans cette catgorie les lments suivants : 2.1. L'oculaire grossit la prparation comme une loupe. Un chiffre grav dessus indique son pouvoir grossissant (ex : X12). 2.2. Les objectifs : Ils sont en gnral au nombre de 3 et situs l'extrmit infrieure du tube optique. Ils compltent le systme grossissant. Sur chacun d'eux, un chiffre indique le pouvoir grossissant (ex. x40, x100). Pour en changer, il suffit de tourner le revolver. 3. Fonction dclairage de la prparation : lclairage de la prparation microscopique est assur par une lampe halogne qui envoie la lumire vers la prparation microscopique via le condenseur. La lumire traverse l'objet et ''emporte'' son image vers des lentilles de verre (places dans l'objectif et l'oculaire) qui l'agrandissent. C'est en plaant son oeil sur l'oculaire que l'on voit cette image. 4. Fonction de mise au point : La mise au point s'effectue en tournant la vis macromtrique qui permet les mouvements rapides et importants du tube optique. Cette mise au point est souvent complte par l'utilisation de la vis micromtrique dont la rotation assure des mouvements trs lents (invisible l'oeil nu) du tube optique. 5. Fonction de soutien : La potence supporte l'ensemble des pices du microscope (tube optique, platine et miroir). Souvent, il est possible de l'incliner par rapport la base ou socle qui reste fixe et qui maintient le microscope sur la table. IV. MODE DEMPLOI DU MICROSCOPE 1 - PRENDRE LE MICROSCOPE : Le microscope est pris sans mouvement brusque par la potence ou poigne une main sous le socle. Il ne faut pas pencher le microscope au risque de faire tomber l'oculaire l'extrmit du tube optique.

2- UTILISER LE MICROSCOPE : tape n1 : Rgler la lumire. Il faut orienter la lumire vers le miroir de faon ce que la lumire soit dirige dans l'axe du tube optique. Le diaphragme permet de rgler l'intensit de la lumire pendant l'observation. tape n2 : Placer la lame. La lame se glisse sur la platine, sous les ressorts, de telle faon que la partie que nous dsirons observer, soit au dessus et place au milieu du trou central. Si la prparation est munie d'une tiquette, celle-ci doit tre visible. tape n3 : Choisir les objectifs. Une observation doit toujours commence par le plus petit objectif ( celui qui a le moins fort grossissement). Cela permet de trouver le meilleur endroit observer . tape n4 : Faire la mise au point. Procder comme suit : - Rgler la nettet : Grce la vis macromtrique (grosse vis) il faut descendre les objectifs au plus bas sans regarder dans l'oculaire pour ne pas casser la lame. Ensuite il faut remonter tout doucement les objectifs jusqu' ce que l'image soit nette. La petite vis (vis micromtrique permet un rglage plus fin pour des objectifs plus forts) - Dplacer la lame : Le dplacement apparent de la lame se fait en sens inverse du dplacement rel, c'est--dire que si tu pousses la lame vers la droite, l'image se dplacera vers la gauche. 3 - RANGER LE MICROSCOPE : Lorsque nos observations sont termines, nous rangeons le microscope afin qu'il ne prenne pas la poussire. Il doit tre maintenu trs propre et si besoin est, nous essuierons la poussire qui aurait pu se dposer sur les lentilles, avec un chiffon doux imprgn d'alcool. V. NOTIONS THORIQUES - Un champ microscopique ou champ dobservation est la zone dobservation claire qui apparat au manipulateur lors dune observation au microscope :

Diamtre du champ microscopique

Le diamtre du champ microscopique est fonction de lobjectif utilis : il est donc ncessaire de le connatre pour chacun des objectifs que lon utilise. Ceci permet destimer la taille des objets que lon observe. - Grossissement: Le grossissement d'un objet est le produit du grossissement de l'objectif par celui de l'oculaire: on note par exemple: G=10x60 ou (x 600). - Pouvoir de sparation ou limite de rsolution Le pouvoir sparateur ou limite de rsolution est la plus petite distance sparant deux objets que l'on peut distinguer l'aide du microscope: elle dpend de la qualit des lentilles et de la nature mme de la lumire: elle est au maximum de 0,2 m.

=
O, 0,61 = constante

0.61 n sin

= longueur donde du rayonnement utilis = demi angle douverture de lobjectif n = indice de rfraction du milieu transparent qui spare lobjet de lobjectif (lair ou lhuile immersion) On peut augmenter en plaant une goutte d'huile immersion (huile incolore dans laquelle la lumire se propage la mme vitesse que dans le verre) sur la prparation: on ralise alors une observation " l'immersion", l'huile remplaant l'air entre l'objet et l'objectif. VI. APPLICATIONS : 1. DTERMINATION DU DIAMTRE DU CHAMP MICROSCOPIQUE - Dcouper un morceau de papier millimtr denviron 1 cm par 1 cm, et le coller sur une lame de verre avec du ruban adhsif. Observer le papier avec les objectifs x4, x10, puis x40. - En utilisant comme rfrence, le quadrillage du papier millimtr (1 carreau = 1 mm), estimer pour chaque objectif, le diamtre dun champ dobservation (en mm et en m). Pour cela remplir le tableau ci-dessous :

Grossissement Grossissement oculaire X10 objectif Faible grossissement X4 Moyen grossissement X10 Fort X10 grossissement X40 Conclure. 2. LE POUVOIR DE SPARATION :

Grossissement Diamtre total

du

champ

microscopique (mm) n

X10

(40/100)xn = n

(40/400)xn = n

2.1. Dessiner sur un morceau de papier millimtr deux points trs rapprochs qui vous paraissent confondus ; coller le morceau sur une lame avec du ruban adhsif. 2.2. Observer aux deux objectifs x10 et x40. Quobservez-vous ? Conclure

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Sance II La cellule et ses organites

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TP 2. ETUDE MICROSCOPIQUE DE CELLULES VEGETALES OBSERVATION DUN PIDERME DOIGNON (ALLIUM CEPA L.) 1. INTRODUCTION Lobservation dun fragment dpiderme interne du bulbe doignon permet de prendre connaissance de lessentiel de la structure de la cellule vgtale. Le bulbe doignon montre, lorsquil est coup verticalement, une tige trs courte appele plateau qui porte un faisceau de racines adventives et des cailles embotes les unes dans les autres. Les plus externes sont dessches, les autres sont gorges de rserves. Dans laxe, le bourgeon central est envelopp dcailles minces.

Ecailles sches Ecailles charnues Bourgeon central Tige trs courte (plateau) Jeunes racines

2. MATRIEL ET RACTIFS

Microscope, lames, lamelles, 1 oignon, 1 couteau, pinces fines, 2 verres de montre pour chaque paillasse, solution de rouge neutre 1g/L (Dissoudre 0,1g de rouge neutre dans 100 ml de tampon phosphate pH 6,5 : la pntration du rouge neutre dans les cellules nest possible qu ce pH), solution deau iodo-iodure ou lugol (4g diode, 8g de KI dans 1L deau distille), cristallisoir avec eau de Javel pour lames et lamelles usages 3. PRPARATION DES LAMES - On prpare simultanment 2 colorants dans 2 verres de montre : - Rouge neutre - Solution deau iodo-iodure - A laide de pinces fines, on prlve de petits lambeaux d'piderme sur la face concave d'une caille d'oignon. On les place immdiatement dans les solutions colores (2 ou 3 dans chaque verre de montre). - Sur une premire lame, on dpose 1 goutte de la solution de rouge neutre et on y place 1 ou 2 lambeaux. On recouvre d'une lamelle. - On fait de mme avec la 2me lame et la solution d'iode.

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Pose de la lamelle

Prparation termine

4. Observations (objectifs x10, x40)

4.1. Coloration au rouge neutre (coloration vitale) Le rouge neutre pntre dans la cellule sans la tuer : c'est un colorant vital. - Chercher a lobjectif la plus faible, une image nette de la prparation et placer une cellule au centre du champ du microscope. - Passer au fort grossissememt (400X) - Dessiner, Mettre un titre et une lgende et dcrire vos observations : coloration, forme des cellules, prsence de vacuoles, noyau et nucloles, paroi pecto-cellulosique etc. 4.2.Coloration liode (coloration post-vitale) L'iode tue la cellule en provoquant la coagulation du cytoplasme et du noyau (c'est un fixateur) et en teintant en jaune certains lments. Procder comme dans 4.1 TP 3. ETUDE MICROSCOPIQUE DE CELLULES ANIMALES 1. OBSERVATION DES CELLULES DE FOIE (HPATOCYTES) 1.1. GNRALITS Un matriel pratique pour lobservation microscopique des cellules animales est constitu par le foie frais. On peut utilis indiffremment du foie de mouton, veau ou poulet. congel. La seule contrainte dont il faut tenir compte est que le foie ne doit pas avoir t

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1.2. MATRIEL ET RACTIFS - Morceau de foie, microscopes, lame et lamelles, spatule, papier essuie-tout, glycrol, bleu de mthylne 0,01% (Dissoudre 100 mg de bleu de mthylne en poudre dans 100 mL d'eau distille). 1.3. MODE OPRATOIRE - Couper un petit morceau de foie et gratter avec une spatule la surface de la section de faon dposer sur une lame de microscope un chantillon de la taille d'une lentille au maximum. - Dissocier au mieux les cellules avec la spatule puis recouvrir d'une goutte de bleu de mthylne. - Laisser agir environ une minute. - Dposer une goutte de glycrol et bien mlanger avec la spatule. Le glycrol rend possible lobservation de la prparation pendant une longue dure sans risquer lvaporation du milieu de montage. - Poser une lamelle sur lchantillon et placer lensemble sur une feuille de papier essuie-tout. - Utiliser une autre feuille pour presser fermement sur la lamelle de faon dissocier les cellules en prenant garde de ne pas casser la lamelle. Le papier sert essorer le trop plein de liquide qui schappe lors du pressage. - Essuyer soigneusement la surface de la lamelle et observer au microscope. - Rechercher les rgions de la prparation o les cellules sont dissocies et suffisamment colores pour faciliter leur observation. 1.4. RSULTATS Dessiner, mettre un titre et une lgende et dcrivez vos observations : - Forme et taille des hpatocytes, forme et nombre de noyaux par cellule, prsence de nuclole, prsence de granulations etc. 2. OBSERVATION DES CELLULES DE LPITHLIUM BUCCAL 2.1. MATRIEL Microscope, lames, lamelles, hmatoxyline-osine ou bleu de mthylne, pissette avec eau ordinaire, compte gouttes, cuve coloration, cristallisoir avec eau de Javel pour lames et lamelles usages, bec Bunsen.

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2.2. PRLVEMENT ET COLORATION - Se rincer dabord, la bouche a leau - Frotter avec un doigt propre, la paroi interne de la joue. - Dposer le produit recueilli sur une lame et la placer sur le support de la cuve coloration. - Recouvrir sans attendre avec quelques gouttes d'hmatoxyline-osine ou de bleu de mthylne - Rincer l'eau aprs 5 minutes. - Avec un papier absorbant, essuyer le dessous et le pourtour de la lame. - Recouvrir la prparation d'une lamelle et placer la lame sur la platine du microscope.

2.3. OBSERVATIONS Dessiner, mettre un titre et une lgende et dcrivez vos observations : Fort grossissement: coloration de diffrents compartiments cellulaires, prsence de granulations, aspect et taille des cellules, aspect de la membrane cellulaire, etc.

Remarques - Si la prparation est bonne, on peut observer un ou deux grains brillants dans le noyau. Il s'agit des nucloles (ensemble de fibrilles et granules, producteurs de ribosomes). - En ralit, ces cellules constituent un tissu (elles sont jointives). On peut les observer isoles, car au frottement, elles ont t dtaches de ce tissu. Enfin, dresser un tableau rcapitulatif des caractres distinctifs morphologiques et structuraux des cellules animales et vgtales

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TP 4. OBSERVATION DES PLASTES Les plastes sont des organites intracellulaires prsents exclusivement chez les cellules vgtales. Ils renferment, selon les cas, des substances comme la chlorophylle, la carotne, lamidon etc. On distingue ainsi, les amyloplastes, les chromoplastes et les choloroplastes. I. LES AMYLOPLASTES Les amyloplastes (du grec "amulon" qui signifie amidon) sont des organites qui renferment lamidon. L'amidon est une substance de rserve trs rpandue chez les plantes (les animaux n'en fabriquent pas), accumule dans des plastes spciaux qui se transforment progressivement en grains d'amidon. Remarque : Les fcules (pomme de terre, mas, manioc ...) sont des amidons. 1. Matriel et ractifs - Microscope, lames, lamelles, coton, un cristallisoir (avec eau de Javel) pour lames et lamelles usages. - Colorant : solution trs dilue de lugol. - 1 aiguille lancole, 1 assiette porcelaine ou plastique, 1 pissette avec eau de conduite. - Pomme de terre (SOLANUM 2. Prparation de la lame - Sur un petit morceau d'une pomme de terre, on gratte doucement la pulpe avec une aiguille lancole. - On place une goutte deau sur une lame puis on y dilue le produit recueilli. - On recouvre ensuite d'une lamelle (en vitant la formation de bulles d'air).
TUBEROSUM).

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3. Observation sans coloration Dessiner, mettre un titre et une lgende. On distingue nettement les grains d'amidon ou amyloplastes et leurs stries d'accroissement autour d'un point central : le hile.

4. Observation avec coloration On refait une prparation et on ajoute une goutte d'eau iode trs dilue. Les amyloplastes se colorent en bleu violet (c'est une raction caractristique).

II. LES CHLOROPLASTES Comme les amyloplastes, les chloroplastes sont des organites des cellules vgtales qui contiennent la chlorophylle (Chloros = vert ; phullon = feuille). Les feuilles du bourgeon terminal d'une lode (plante aquatique rpandue dans les cours d'eau et tangs) se prte bien lobservation des chloroplastes. Cependant, dans notre manipulation, nous utiliserons des feuilles dpinards ou du poivron vert. 1. Matriel - Microscope, lames, lamelles, un cristallisoir avec eau de Javel, pince fine, lame bistouri, poivron vert (Capsicum annuum) ou feuilles dpinards. 2. Prparation de la lame Avec une pince fine, on pratique une coupe fine dans la couche externe du poivron et on la place entre lame et lamelle, dans une goutte d'eau. 3. Observation (objectifs x10, x40)

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Dcrire vos observations au faible, moyen et fort grossissement : aspect des cellules, les constituants cellulaires observs, la membrane plasmique, aspect du cytoplasme, forme de la vacuole, position du noyau, aspect et abondance des chloroplastes. III. LES CHROMOPLASTES Ce sont des organites cellulaires qui contiennent des pigments carotnodes (pigments jaune, rouge ou orang). La tomate, le poivron jaune, la carotte sont riches en chromoplastes. 1. Matriel - Microscope, lames, lamelles, coton, un cristallisoir avec eau de Javel, pince fine, lame bistouri, poivron rouge ou tomate 2. Prparation de la lame Mme protocole que la manipulation prcdente 3. Observation (objectifs x10, x40) Dcrire vos observations au faible, moyen et fort grossissement : aspect des cellules, les constituants cellulaires observs, la membrane plasmique, aspect du cytoplasme, forme de la vacuole, position du noyau, aspect et abondance des chromoplastes.

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TP 5 ULTRASTRUCTURE DE QUELQUES ORGANITES CELLULAIRE Cette sance porte sur lobservation de schmas pris au microscope lectronique de quelques organites cellulaires. Il sagit de : 1. lappareil de golgi 2. le noyau 3. la mitochondrie 4. le rticulum endoplasmique Voir figure ci-dessous.

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Sance III La division cellulaire chez les eucaryotes, la mitose

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TP 6. RALISATION DE PRPARATIONS MICROSCOPIQUES DE MITOSE Pour observer les diffrentes phases de la mitose et les chromosomes, un matriel biologique simple et facile obtenir est constitu par les jeunes racines obtenues la base de bulbes de diverses plantes (ail, oignon). Lorsque l'on place ces bulbes sur un rcipient de manire ce que leur base baigne dans l'eau, des racines se dveloppent en quelques jours.

Aprs quelques jours

La croissance est rapide (quelques mm par jour). Elle rsulte des mitoses qui se produisent dans le mristme racinaire situ dans la zone sub-apicale de la racine. 1. RACTIFS - Acide chlorhydrique 1 mol.L-1 Dans une fiole jauge de 1L, verser 914 mL deau distille. Complter 1 L avec de lacide chlorhydrique 36 % (densit 1,178). - Orcine actique, solution mre - Dissoudre 1 g dorcine dans 45 mL dacide actique pur (attention danger de brlure). - Faire bouillir jusqu dissolution et laisser refroidir. - Filtrer et conserver le filtrat au rfrigrateur. - Solution dilue prparer extemporanment Mlanger 9 mL de solution mre avec 11 mL deau distille et rpartir dans des flacons compte-gouttes. 2. MODE OPRATOIRE 1. Prlever avec des ciseaux une jeune racine en croissance sur un bulbe. Couper le segment terminal environ 5 mm de l'extrmit et le dposer sur une lame porteobjet. On doit observer prs de l'extrmit le mristme qui forme une petite tache.

2.

Recouvrir l'chantillon d'acide chlorhydrique 1 mol.L-1. Laisser agir 5 minutes pendant lesquelles l'acide hydrolyse le ciment pectique qui relie les parois cellulaires. Ceci facilitera ensuite la dissociation des cellules.

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3. Enlever l'acide avec un essuie tout utilis comme papier buvard en faisant attention de ne pas coller lchantillon sur le papier. 4. Recouvrir l'chantillon d'une solution d'orcine et laisser agir pendant 20 minutes. 5. liminer le colorant avec un essuie tout en faisant attention de ne pas entraner l'chantillon. 6. Recouvrir d'une goutte d'acide actique 45 % et poser une lamelle couvre-objet. 7. Appuyer doucement sur la lamelle (attention, fragile !) pour aplatir l'chantillon de faon former une couche monocellulaire en dplaant lgrement la lamelle tout en appuyant pour provoquer la dissociation des cellules. 3. TRAVAIL
DEMAND RECHERCHE, OBSERVATION ET DESSIN DE QUATRE PHASES DE MITOSE VEGETALES ET DESSIN DE DEUX STADES AU CHOIX.

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Fig. diffrentes phases de la mitose animale

PHASE G2 DE LINTERPHASE

PROPHASE

DEBUT DE METAPHASE

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METAPHASE

Dbut danaphase

ANAPHASE

TELOPHASE ET CYTOKINESE

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Sance IV
osmose et permeabilite cellulaire

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TP 7. MISE EN EVIDENCE DES MOVEMENTS DE LEAU DANS LA CELLULE VEGETALE INTRODUCTION Les cellules sont entoures par une mince pellicule, la membrane plasmique, travers laquelle se ralisent les changes. Cette membrane peut tre : Semi-permable lorsquelle ne laisse passer que le solvant. Permable lorsquelle laisse passer le solvant et le solut

Mais la permabilit de la membrane est slective cest--dire quelle peut laisser passer certaines substances tout en tant impermable dautres. La permabilit cellulaire dpend de plusieurs facteurs tels que le pH des solutions et la taille des substances dissoutes. 1. PHENOMENE DOSMOSE Losmose dsigne le phnomne qui entrane la diffusion de leau travers une membrane semi-permable qui spare deux solutions de concentration ingales en soluts. Dans ces conditions, l'eau a tendance se dplacer de la solution la moins concentre (solution HYPOTONIQUE) vers la solution la plus concentre (solution HYPERTONIQUE). Les solutions qui contiennent des concentration gales de soluts sont dites ISOTONIQUES. Le phnomne dosmose est important chez les cellules pour le maintien de la concentration des soluts. 2. MATRIEL ET RACTIFS Eau distille, oignon, solution de NaCl 4% (ou saccharose 300 g/L), solution de rouge neutre 1g/L de tampon phosphate pH 6,5, lames, verre de montre. 3. Principe Lorsqu'on plonge une cellule vgtale dans une solution hypertonique, une grande vacuole centrale se vide en partie de son eau et la cellule se rapetisse. La membrane cellulaire se dcolle de la paroi ; on dit que la cellule est en tat de plasmolyse. Lorsque la cellule se trouve dans une solution hypotonique, la vacuole s'enrichit en eau, la membrane repousse la paroi mais celle-ci empche normalement la cellule d'clater; on dit que la cellule est en tat de turgescence. C'est la turgescence qui maintient les plantes herbaces dresses; en absence de turgescence, la plante se fltrit.

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Plasmolyse dune cellule vgtale 4. Mode opratoire 1. Sur une caille doignon, on prlve laide dun scalpel, dpiderme de 1 cm de cot au maximum. 2. Etaler ces fragments pendant quelques minutes, dans un verre de montre contenant une solution de rouge neutre 1 g/L. Observer au microscope et dessiner une cellule turgescente. 3. Au moyen dun papier absorbant plac contre le bord gauche de la lamelle, aspirer le colorant et le remplacer par une goutte de NaCl 4%. Recommencer cette opration jusqu ce que le liquide du montage ne renferme plus que du NaCl 4%. Observer au microscope et dessiner une cellule plasmolyse. 4. Recommencer lopration 3 mais remplacer le NaCl 4% par leau pure. Attendre quelques minutes et observer le phnomne de dplasmolyse. 5. INTERPRTATION DES RSULTATS Dire simplement pour quelle raison les cellules doignon ont t modifies. Expliquer en utilisant la notion de pression osmotique les modifications des cellules observes. Conclure sur le mcanisme biologique mis en jeu dans ce TP. des fragments

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