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Membre de jury :
Nous voudrions exprimer notre sincre et profonde gratitude notre professeur encadreur,
Monsieur Mir Abdellah, pour sa prcieuse supervision durant llaboration de ce projet de fin
dtude. En effet, la conception, la dfinition, et la configuration de cette recherche sont redevables
son minutieux encadrement.
Nous adressons aussi, avec un immense plaisir, nos vifs remerciements la facult des
sciences Moulay Ismail de Mekns, en la personne de son doyen et du chef du dpartement de
physique, Monsieur Hnnaoui Mohammed pour avoir bien voulu abriter les travaux de notre
recherche et avoir mis notre disposition les locaux et le personnel ncessaires.
Nous remercions d'avance tous les membres du jury pour leur aimable prsence, leur
valuation sera pour notre travail la meilleure rcompense qu'il puisse obtenir.
Une pense spciale va tous nos ami(e)s, et compagnons de classe, pour leurs suggestions et
conseils qui taient dune trs grande utilit pour notre recherche. Nous remercions aussi au passage
tous ceux qui, de prt ou de loin, nous ont apport une aide pendant la ralisation de ce projet de fin
dtude.
1
Table de Matire
INTRODUCTION ...................................................................................................................... 4
2
II.2.2 Capteur Rsonance plasmonique de surface (SPR) ........................................ 21
III.1.1 Photodiode........................................................................................................ 29
BIBLEOGRAPHIE ....................................................................................................................... 34
3
Introduction
A partir de cette date, la recherche sur les plasmons de surface sest intensifie, montrant leur
utilit notamment dans la caractrisation de couches minces ou le suivi des ractions la surface
dun mtal. Conjointement se sont dvelopps galement les premiers capteurs plasmoniques, avec
la premire mise en vidence de dtection de gaz et de biomolcules avec une configuration de
Kretschmann-Raether par C. Nylander et B. Liedberg [1].
Lengouement pour la dtection par rsonance plasmonique de surface (ou SPR, Surface
Plasmon Resonance) sexplique par la capacit de tels dispositifs dtecter de trs petites variations
dindices de rfraction, avec une trs grande prcision. Le montage reste bas sur une dtection
damplitude, facile raliser. Ces capteurs connaissent donc dans les annes 80 un grand succs
principalement dans le domaine biomdical, permettant par exemple de suivre en temps rel, et sans
marqueurs fluorescents ou radioactifs, des interactions chimiques diverses. Comme les capteurs
bass sur les guides d'ondes ou sur les interfromtres de type Mach- Zehnder, les biocapteurs bass
sur la rsonance de plasmons de surface sont sensibles la variation d'indice de rfraction ou
d'paisseur induite la surface du capteur dans la limite de la profondeur de pntration d'une onde
vanescente. Cette mthode est classe parmi les mthodes de dtection directe (sans marqueur) en
milieu htrogne (un des deux ractifs est fix sur la surface), avec possibilit d'avoir un suivi en
temps rel des interactions tudie [2].
Une tude dtaille sera, dans ce qui suit, sur la thorie des plasmons de surface et sur le
principe des biocapteurs bass sur la rsonance plasmonique de surface. En rajoute, une description
dapplication de ces capteurs dans le domaine de lenvironnement.
4
Chapitre I
RESONANCE
PLASMONIQUE
5
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Pour lintroduction des proprits optiques des mtaux et la comprhension des plasmons, on
considrera un mtal comme un milieu homogne, isotrope, linaire, de constante dilectrique , de
permabilit magntique et de conductivit .
Le modle de Drude: est une adaptation effectue en 1900 de la thorie cintique des gaz aux
lectrons des mtaux. En considrant les lectrons d'un mtal comme des particules classiques
ponctuelles confines l'intrieur du volume dfini par l'ensemble des atomes de l'chantillon, on
obtient un gaz qui est entran dans un mouvement d'ensemble par des champs lectriques et
magntiques et frein dans ce mouvement par des collisions. Les collisions envisages par Drude
sont les collisions sur les noyaux d'atomes [3].
Linteraction entre un mtal et une onde lumineuse de frquence sexplique par la rponse
des lectrons libres dans le mtal au champ lectromagntique de londe. On introduit tout dabord
la fonction dilectrique, qui relie la constante dilectrique et la conductivit du mtal :
( )
( ) ( ) (1)
A partir de cette fonction, on peut dfinir lindice de rfraction complexe du milieu mtallique
par la relation :
( ) ( ) ( )
6
Chapitre I : Rsonance plasmonique
La partie relle de lindice de rfraction est lie la propagation de londe lumineuse dans le
milieu, tandis que la partie imaginaire est lie labsorption de la lumire.
Ce sont les lectrons libres du mtal qui dterminent son comportement lorsquil est illumin
par une onde lectromagntique. Le modle de Drude permet alors de rendre compte du
comportement des lectrons sous laction dun champ lectrique. On considre les lectrons de
conduction comme un gaz, voluant dans un rseau ionique que sont les atomes du mtal. Le
mouvement des lectrons est trait de faon classique, mais le modle donne quand mme, une
bonne comprhension du phnomne. On cherche alors le mouvement dlectrons libres, dans un
( ) (3)
est la pulsation plasma [1]. Ce modle de Drude dcrit assez bien le comportement
optique des mtaux, en particulier aux longueurs donde du visible et du proche infrarouge.
7
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Il est connu que ces plasmons de surface peuvent tre diviss en deux sous-groupes, suivant
leur distance de propagation : les plasmons de surface localiss et les plasmons de surface
dlocaliss ou tendus. Dans ce travail et tout particulirement dans la suite de ce chapitre, nous
nous limiterons exclusivement aux plasmons de surface dlocaliss et leur rsonance, car ils sont
la base du fonctionnement de nos capteurs. En particulier, nous dcrirons le phnomne dit de
rsonance selon les diffrents modes de couplage optique possibles [4].
pulsation des plasmons de volume (cest une valeur caractristique du mtal). Cette constante est
ngative pour une pulsation infrieur . Cependant, ce modle ne rend pas compte de toute la
complexit du mtal, nous avons utilis pour nos calculs une constante dilectrique complexe de la
forme o est ngatif.
Considrons donc les plasmons de surface comme une onde lectromagntique se propageant
linterface plane entre un milieu dilectrique et un mtal. La pulsation de cette onde est lie au
vecteur donde k par une relation de dispersion caractristique. Nous allons chercher dans cette
partie trouver les conditions dexistence des plasmons de surface partir des quations de
Maxwell, et des conditions aux limites entre les deux milieux.
Nous considrons deux milieux semi-infinis, lun constitu dun milieu dilectrique et lautre
dun mtal. Dans un premier temps nous considrerons un mtal parfait non absorbant, . La
figure I.2 prsente le schma du systme, le plan xOy est dfini comme celui de linterface et la
direction z est perpendiculaire celle-ci. Le plasmon se propage selon la direction Ox, cela signifie
que le systme est invariant selon y. Dans ces conditions, si lon considre une onde polarise
linairement TE ou TM, nous dfinissons comme tant la composante transverse.
8
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Figure I.2: Gomtrie de linterface mtal dilectrique que nous considrons. La composante transverse du champ
est reprsente, elle correspond lquation (4)
Du champ :
{ ( )
O, j= m,d pour signifier le milieu dilectrique ou le mtal. Nous considrerons dans tout le
calcul la dpendance des avec le temps t en , les relations de Maxwell aboutissent alors
lquation de propagation :
(5)
O est la constante dilectrique du milieu j. Nous savons que le champ est vanescent
dans la direction z dans les deux milieux, nous cherchons donc une solution qui traduise cette
vanescence, sous la forme :
( )
-dans le mtal :
( )
-dans le dilectrique : (6)
O les sont des constantes positives, pour prendre en compte lvanescence, et nest pas
un imaginaire pur pour traduire la propagation selon la direction x. Intressons nous maintenant aux
conditions la limite entre les deux milieux. Dans le cas de londe polarise TE, ces conditions se
traduisent par les relations :
| |
(7)
| |
9
Chapitre I : Rsonance plasmonique
En remplaant dans ces relations par les expressions des relations (6) nous obtenons les
relations suivantes :
(8)
On obtient ainsi ce qui est impossible puisque les sont positifs. Ceci dmontre
que les plasmons de surface ne peuvent exister en mode TE. Dans le cas dune onde polarise en
mode TM, les conditions linterface sexpriment comme :
| |
| | (9)
(10)
Il vient donc :
( )
(12)
En utilisant dans cette quation le rsultat de la relation de continuit (11), il vient alors :
( ) (13)
10
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Cest le vecteur donde de propagation du plasmon dans la direction x, sur la surface mtallique.
Nous considrons maintenant une partie dissipative du plasmon de surface en tenant compte de la partie
imaginaire de la constante dilectrique du mtal. Le vecteur donde du plasmon de surface est alors
un nombre complexe, (o les et sont rels). En considrant | |>> , nous
obtenons alors :
( ) (14)
( ) (15)
Cest--dire (avec )
Cette condition est plus restrictive que lingalit donne prcdemment, et est
galement vrifie dans le cas dune interface mtal-dilectrique. Nous venons ainsi de donner les
conditions dexistence du plasmon de surface. A partir des composantes calcules des champs
lectromagntiques associs aux plasmons de surface, nous allons donner des ordres de grandeur
des distances associes ces modes, ainsi que quelques proprits physiques caractristiques [5].
Daprs ce qui prcde, le champ magntique du plasmon de surface dans les deux milieux
scrit :
(( ) )
(16)
(( ) )
Les termes en traduisent lvanescence dans les deux milieux. Les profondeurs de
pntration du champ dans les deux milieux sont caractrises par la longueur . Les
sont reprsents sur la figure I.3. Daprs les quations (11) et (12), nous trouvons aprs calcul les
valeurs des :
11
Chapitre I : Rsonance plasmonique
( )
| |
(17)
( )
| |
Figure I.3 : La figure reprsente la composante normale du champ lectrique du plasmon de surface selon la direction z
perpendiculaire linterface.
Il vient alors :
| |
Dans le milieu mtallique : ( )
(18)
| |
Dans le milieu dilectrique : ( )
Ces grandeurs traduisent la pntration du champ dans les deux milieux, que lon appelle
lpaisseur de peau du plasmon de surface. Elles dfinissent galement la profondeur laquelle les
plasmons sont susceptibles dinteragir avec la couche dilectrique. De plus, la relation de
dispersion du plasmon sera trs sensible la modification de lindice sur la distance correspondant
la profondeur de pntration, et donc la prsence et lpaisseur dune couche dilectrique la
surface du mtal.
( ) (19)
12
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Dans le domaine de longueur donde du visible, Li atteint une longueur de lordre de quelques
dizaines de m dans largent [5].
( )
On a: ( ( ) )
Donc : (20)
(( ( ))
Avec : ( ) et ( )
Cette dernire grandeur ( ) aura son importance dans la suite, puisquelle donne une ide
de la longueur sur laquelle les plasmons de surface sont sensibles aux proprits optiques des
milieux, et elle offre ainsi un moyen de quantifier la capacit de biocapteurs sonder le milieu
environnant, et jusqu quelle distance le capteur peut tre sensible [1]. Cette dernire information
permet donc de diffrencier les analystes dtectables en fonction de leur grandeur physique. Il est
intressant de noter que lextension spatiale de londe gnre par le plasmon de surface est plus
importante dans le dilectrique, ce qui le rendra plus sensible aux proprits optiques de ce
dilectrique.
Daprs les calculs prcdents, nous connaissons le vecteur donde du plasmon de surface .
Celui-ci est complexe, cependant pour dfinir la dispersion du plasmon, seule la partie relle
importe. A partir de la relation (13), on peut tracer la pulsation du plasmon de surface en fonction
du vecteur donde k. La figure I.4 reprsente la relation de dispersion.
13
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Figure. I.4: Relation de dispersion du plasmon de surface se propageant entre le mtal (Argent) et un milieu
dilectrique dindice n (Dans le cas dair )
pour les petits valeurs de k, la relation de dispersion du plasmon de surface est trs proche
de la droite de lumire (relation de dispersion de la lumire dans le milieu dilectrique dindice
optique formant linterface avec le mtal), dquation . La relation de dispersion
du plasmon de surface sen loigne ensuite lorsque le vecteur donde augmente.
La courbe de dispersion du plasmon de surface est toujours situe sous celle de la lumire
dans le milieu correspondant. Pour une nergie (une pulsation) donne, le vecteur donde du
plasmon est toujours plus grand que celui de la lumire. Imaginons alors une onde lumineuse
incidente, provenant du milieu dilectrique, directement sur la surface du milieu mtallique, la
projection de son vecteur donde sera toujours plus petite que le vecteur donde du plasmon de
surface. Cela interdit tout couplage entre la lumire radiative et le plasmon de surface, on dit que le
plasmon de surface est une onde non-radiative. Il existe plusieurs techniques grce auxquelles la
diffrence entre les deux vecteurs donde peut tre comble, cest le rle des systmes de couplage.
14
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Le principe des systemes de couplage pour lexcitation des plasmons de surface repose sur la
modification au niveau de londe incidente. Plus prcisment il faut augmenter le vecteur donde
tangentiel de cette onde pour arriver au couplage. On peut distinguer deux moyens pour arriver
ce rsultat [1] :
Figure I.5 : Configuration de Kretschmann (a) et dOtto (b) pour le couplage de plasmons de surface.
(21)
Cest londe vanescente, prsente lors dune rflexion totale interne de londe incidente dans
le prisme, qui permet dexciter le plasmon de surface. Cette onde possde alors un vecteur donde
avec une composante tangentielle dfinie par lquation (21). La condition de couplage scrit alors
:
( ) (22)
15
Chapitre I : Rsonance plasmonique
Graphiquement, cela revient diminuer la pente de la ligne de lumire, afin que le couplage
photon-plasmon puisse se faire, comme illustr sur la figure I.6 :
16
Chapitre I : Rsonance plasmonique
De faon mathmatique [1], si est le vecteur donde tangentiel de londe incidente, arrivant
avec un angle par rapport la normale (Figure I.7), sur le rseau de diffraction, alors pour un
ordre p de diffraction, son vecteur donde sera dfinit par :
(23)
le plan (k, ) la relation de dispersion de londe incidente. Ainsi nous obtenons des points de
couplage pour un certain pas du rseau une certaine longueur donde, prsent graphiquement sur
la figure I.8 :
Le couplage peut donc se faire pour plusieurs ordres de diffraction. Dans la pratique
cependant, seuls les quelques premiers modes seront observables, dans la plage de longueurs donde
dintrt notre tude, cest--dire le spectre visible.
17
Chapitre I : Rsonance plasmonique
I.3 Conclusion :
Dans ce premier chapitre nous avons dcrit le phnomne de plasmons, leur condition de
rsonance, en particulier linterface entre deux milieux dont lun est un mtal parfait. Nous avons
indiqu que ces plasmons sont des ondes de surface, solutions des quations de Maxwell, qui se
propagent paralllement linterface et dont lamplitude du champ lectromagntique associ
dcrot exponentiellement en sloignant de linterface. Ceci nous a amens dfinir des
caractristiques importantes lors de ltude des capteurs, telle la profondeur de pntration ou
lextension spatiale de ces ondes. Do une dduction de la relation de dispersion qui relie la
frquence dapparition du plasmon avec les caractristiques spatiales du champ lectromagntique.
Cette relation de dispersion nous a montr que les plasmons de surface gnrs linterface des
films mtalliques lisses ne peuvent se coupler spontanment avec une onde lectromagntique
photonique. Nous avons alors discut les conditions de couplage plasmon de surface onde
lumineuse polarise T M, puis une discussion sur les modes de couplages les plus usuels.
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Chapitre II
LES BIOCAPTEURS
19
Chapitre II : les biocapteurs
Depuis le premier biocapteur dvelopp par Clark et Lyons au dbut des annes 1960 [2],
la recherche sur leur dveloppement a fait lobjet de nombreux efforts. Ces efforts ont t
particulirement importants ces dernires annes en raison de leurs nombreuses applications
potentielles, que ce soit dans le domaine mdical, agro-alimentaire, ou du contrle environnemental.
Dans ce dernier cas, les biocapteurs sont considrs comme une solution alternative aux techniques
analytiques traditionnelles telles que la chromatographie ou la spectromtrie.
-Enzymes -Electrochimique
Amprmitrie
- Immuno-egents
potentiomtrie
conductimtrie Amplific-
-Micro-organisme Microlectronique
ateur
-Tissu -optique
-Calorimtrique
Biocapteur
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Chapitre II : les biocapteurs
Daprs notre tude thorique, dcrite dans le premier chapitre bas sur la rsonnance
plasmonique de surface, les transducteurs optiques seront lobjet principal de ce qui suit.
Diffrentes mthodes optiques ont t utilises en tant que systme de dtection des
biocapteurs. Ces transducteurs sont bass sur certains phnomnes : l'effet des molcules
biologiques sur l'absorption de la lumire, la fluorescence, la variation de lindice de rfraction, ou
d'autres paramtres optiques. Ces transducteurs sont devenus de plus en plus populaires au cours de
ces dernires annes avec beaucoup de dispositifs commercialement disponibles. Un des principaux
avantages des transducteurs optiques est leur capacit sonder des surfaces et des films de faon
non destructive. Ils possdent une bonne sensibilit, une robustesse et des faibles temps de rponse,
de plus ils permettent des mesures in situ et en temps rel. Une autre particularit est leur possibilit
de miniaturisation et leur capacit de dtection simultane de plusieurs analytes. Parmi les
techniques de transduction optique on distingue lellipsomtrie, la rsonance plasmonique de
surface, les guides dondes optiques, la fluorescence, le radiomarquage et les ondes vanescentes.
Ce capteur permet de mesurer en temps rel, et sans marquage spcifique, les caractristiques
dinteraction entre deux molcules. Pour cela une des molcules (sonde) sont immobilises sur la
surface du biocapteur et lautre molcule (cible) est injecte. Le principe de dtection par SPR
repose sur la quantification des changements de lindice de rfraction prs de la surface, relies
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Chapitre II : les biocapteurs
Figure II.2 : Principe de fonctionnement dun capteur rsonnance plasmonique de surface (SPR).
En effet la mesure est base sur la courbe de plasmon qui reprsente la variation de la
rflectivit en fonction de langle dincidence (Figure II.3). Loptimum de rsonance des plasmons
est au voisinage dun angle dincidence donnant le minimum de rflectivit. Les variations des
proprits de ce pic dadsorption vont permettre de quantifier les perturbations se produisant prs de
linterface mtal/solution dues aux variations de lindice de rfraction du milieu couvrant, de
lpaisseur de la couche forme lors de la variation de la concentration de la molcule cible. Ainsi
pour un tat (1) la courbe de plasmons prsentera un angle de rsonance ( ), la fixation dune
entit sur la surface tat (2), la courbe se dplace prsentant alors un angle de rsonnance ( ).
Physiquement, cela se traduit par le fait que lorsque la lumire monochromatique et polarise arrive
linterface entre deux milieux dindice de rfraction diffrent. Cette interface est recouverte dune
fine couche mtallique, lintensit de la lumire rflchie est nettement rduite pour un angle
dincidence particulier. La composante lectromagntique de la lumire, londe vanescente, se
propage perpendiculairement linterface, jusqu une certaine paisseur dans la couche mtallique.
Langle de rsonnance varie notamment en fonction de lindice de rfraction, donc en fonction de la
masse des molcules situes au voisinage de la surface.
Par consquent, un suivi de langle SPR en fonction du temps permet de suivre en temps rel
lassociation et la dissociation entre la sonde et la cible. Le signal obtenu est un sensorgramme
(Figure II.3). Il permet de donner des informations sur la cintique des interactions, lpaisseur et la
masse de la couche dpose sur la surface donc sur le nombre de molcules fixes [6].
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Chapitre II : les biocapteurs
A B
) )
Figure II.3 : Rponses dun capteur rsonance plasmonique de surface : (A) rflectivit en fonction de langle
dincidence de la source par rapport la surface, (B) suivi de langle de rsonance en fonction du temps [6].
La pollution biologique environnementale peut se retrouver dans diffrents lments tels que
lair, leau ou le sol. Leau est une des principales sources de propagation dpidmies bactriennes
ou virales. Il est donc important de contrler la qualit de leau, quelle soit de baignade ou
domestique, afin de limiter lexpansion de pollutions biologiques.
Au XIXme sicle, plusieurs pidmies mortelles ont t transmises par leau (typhode,
cholra). Les djections animales ou les rejets des matires fcales dorigine humaine ont t les
principales sources de contamination bactrienne de leau. Ce risque a t considrablement rduit
par la mise en place de procds de dsinfection des eaux et des installations de traitement des eaux
uses, mais il na pas disparu. Leau reste aujourdhui lorigine de la mort de 3 10 millions de
personnes dans le monde, entre autres par les contaminations bactriennes.
23
Chapitre II : les biocapteurs
Parmi les critres de qualit de leau distribue, le paramtre bactriologique mrite la plus
grande vigilance car il reflte le risque immdiat pour la sant du consommateur. La rglementation
impose la recherche dindicateurs de contamination fcale comme (E. Coli) ou les entrocoques [8].
A- Dans leau :
Des mesures de toxicits spcifiques peuvent par exemple tre mises en place. Il sagit alors
de renseigner sur la prsence ou non de composs pralablement dfinis, et de les quantifier. La
mise au point de systmes de mesures de pesticides, dhydrocarbures aromatiques (HAP benzne,
tolune, ), de PCB, ou encore de mtaux lourds fait lobjet de travaux actuels.
Ensuite, des mesures de toxicit globale, permettant de renseigner sur des pollutions globales
sans en identifier prcisment les composs peuvent galement tre mises en uvre. Ceci peut tre
intressant comme mthode dalerte, renseignant sur la prsence de composs toxiques avant mme
deffectuer des mesures physico-chimiques plus prcises.
Leau est le milieu dans lequel des biocapteurs ont principalement t dvelopps jusquici.
Les applications actuelles pour le sol et lair sont trs peu nombreuses, et encore un stade de
dveloppement exprimental. Les biocapteurs se sont ainsi historiquement dvelopps dans le
milieu prsentant le moins de difficults techniques, et dont le march tait le plus porteur [9].
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Chapitre II : les biocapteurs
B- Dans lair :
Le premier biocapteur appliqu lair date de 1974 et a t dvelopp par Goodson et Jacobs.
Il sagissait dun biocapteur enzymatique, permettant didentifier les toxines inhibitrices du
cholinestrase. Les travaux de recherche ont ensuite t mens surtout partir des annes 90, et les
polluants viss taient par exemple le mthane, le monoxyde de carbone, le formaldhyde, les
pesticides ou encore le phnol. Une publication datant de 1999, biosensors in air monitoring,
mentionne en dtail tous ces travaux de recherche [9].
Les travaux de recherche mens jusquici lont t non pas dans un but de surveillance de
la qualit de lair ambiant, mais plutt dans un but de caractrisation de milieux confins, et des
atmosphres de travail en particulier. Ceci sexplique la fois par la considration des marchs les
plus porteurs, la surveillance de la qualit de lair ambiant tant un march assez restreint, mais
surtout par la capacit des biocapteurs pouvoir mesurer des composs spcifiques, prsents en trs
faibles concentrations, tels quils peuvent ltre dans des milieux confins.
Lorsque la mesure des composs dans lair est ralise dans un but de surveillance de
lexposition des polluants, les biocapteurs peuvent tre mis en uvre de multiples manires :
mesure dexposition des polluants spcifiques ou multiples, caractrisations quantitatives ou
qualitatives des polluants, surveillance dexposition individuelle ou moyenne sur un atelier, etc...
En effet, malgr les travaux dj raliss, des efforts de dveloppement seraient encore ncessaires
(amliorations technologiques, plus grande validation des appareils et des rsultats, amlioration de
ltalonnage des systmes) afin darriver une ventuelle commercialisation.
Finalement, malgr les intrts et les applications potentielles des biocapteurs, il savre
que ceux-ci sont encore aujourdhui peu dvelopps en dehors du domaine mdical. Loffre actuelle
est donc limite et des obstacles subsistent un large dveloppement du march. Ces obstacles
peuvent tout dabord tre dordres technologiques, tels que la faible dure de vie des membranes
contenant les espces biologiques. Ensuite, un facteur limitant la commercialisation des biocapteurs
est leur aptitude concurrencer les autres mthodes analytiques, elles aussi de plus en plus
performantes (miniaturisation des appareils de chromatographie liquide ou gaz, dveloppement des
capteurs physico-chimiques,...). A lavenir, un dveloppement plus large des biocapteurs ne pourra
finalement se faire que par des investissements lourds afin daccder des marchs de niche [9].
25
Chapitre II : les biocapteurs
II.4 Conclusion :
Dans ce chapitre on a dfini les biocapteurs comme un dispositif qui utilise les ractions
molculaires pour dtecter une cible analyser. Il associe physiquement llment de
reconnaissance (rcepteur) un transducteur qui traduit la raction entre le rcepteur et la cible en
un signal physique interprtable. Ainsi que suivant le type de modification biochimique, on choisit
le type de transducteur appropri. Ensuite, nous avons limit notre tude sur les transducteurs
optique utilisons le principe de la rsonance plasmonique de surface. Le principe de dtection par
SPR repose sur la quantification des changements de lindice de rfraction prs de surface, relies
la variation de densit la surface du biocapteur, due la formation et la dissociation des
complexes molculaires. Cela entraine une variation de langle de rfraction. En effet, la courbe de
plasmons prsentera un angle de rsonance de , la fixation dune entit sur la surface, la courbe se
dplace prsentant alors un angle de rsonnance de . Par consquence, un suivi de langle SPR en
fonction du temps permet de suivre en temps rel lassociation et la dissociation entre la sonde et la
cible.
Les rayons rfracts donc a besoin dun dtecteur performant pour les transformer en une
grandeur mesurable gnralement un courant lectrique ou une tension lectrique. Pour cette raison,
nous expliquant le fonctionnement de ce dtecteur dans le chapitre suivant.
Nous avant aussi indiquer quelque application des biocapteurs dans lenvironnement et que
malgr les travaux dj raliss, des efforts de dveloppement seraient encore ncessaire afin
darriver une ventuelle commercialisation. Mais, un dveloppement plus large des biocapteurs ne
pourra finalement se faire que par des investissements lourds afin daccder des marchs de niche.
Les biocapteurs sont encore aujourdhui peu dvelopps en dehors du domaine mdical.
26
Chapitre III
LA DETECTION
27
Chapitre III : la dtection
Aprs avoir fait ltude thorique sur les palmons de surface, on a besoins dun processus qui
sappelle la dtection , pour transformer un rayon dans le domaine optique en une grandeur
mesurable gnralement un courant lectrique ou une tension lectrique. Pour cette raison, on a
plusieurs dispositifs utilis comme des photodtecteurs.
La lumire issue de la source (les photons) passe travers l'chantillon. Cet chantillon
absorbe une partie des photons mis suivant sa composition et la concentration de ses produits.
Ainsi, les photons restants sont dtects et par comparaison la lumire de la source dtect, on
retrouve les raies absorbes par l'chantillon et, de l, la composition de celui-ci.
Il doit tre sensible: pour mesurer les intensits faibles, il doit donner un signal
suffisamment important en sortie.
Le bruit doit tre faible: de faon invitable, en l'absence de radiation, le
dtecteur produira un signal rsiduel appel bruit. Ce bruit limite la taille
minimale du signal perceptible.
Il doit tre linaire, c'est--dire que la sortie du dtecteur doit tre
proportionnelle lintensit de la radiation d'entre. La constante de
proportionnalit, appele gain, doit tre indpendante de la longueur d'onde de la
radiation.
28
Chapitre III : la dtection
Les dtecteurs photoniques, dont l'absorption d'un quantum d'nergie produit une quantit
d'nergie lectrique que l'on peut dtecter de deux manires:
III.1.1 Photodiode
Le courant issu d'une photodiode est trs faible, il varie de quelques pico-ampres
quelques micro-ampres selon l'intensit de la lumire et la surface de la photodiode. La premire
tape consiste amplifier le courant. Pour obtenir un temps de rponse qui se rapproche de la
constante du temps du photo-dtecteur, il faut donc que le photo-courant soit converti en tension
sans que le temps de rponse du dtecteur soit affect.
29
Chapitre III : la dtection
Les photodiodes au silicium sont sensibles aux radiations de 180 1100 nm et sont souvent
montes en barrette. Une barrette de photodiodes est compose d'une srie de photodiodes montes
cte cte sur un cristal de silicium. Chaque diode est associe un condensateur et connecte
une ligne de sortie commune travers un commutateur l'tat solide. Les commutateurs sont
commands par un registre dcalage [10].
Initialement, les condensateurs sont chargs un niveau spcifique. Lorsque les photons
pntrent dans le silicium, des porteurs de charges lectriques libres sont gnrs et dchargent les
condensateurs.
30
Chapitre III : la dtection
Figure III.3 : Schma du dispositif exprimental dacquisition angulaire des spectres de rflexion
des filtres rsonance de plasmons de surface [11].
La radiation lumineuse issue dun laser He-Ne est polarise dans le mode transverse
magntique grce un polariseur. Une lame sparatrice place 45 degr permet de diviser le
faisceau incident en deux nouveaux faisceaux : transmis et rflchi. Le faisceau rflchi par la lame
est dirig vers la photodiode de rfrence. Le faisceau transmis est focalis sur le filtre laide de
lhmicylindre. Lhmicylindre a t conu de manire focaliser le faisceau incident sur
linterface verre/air dune lame de verre (de type microscope : d 1,5mm) qui lui est accole
laide dun liquide dindice adquat. La focalisation du faisceau incident est destine minimiser la
zone excite de la couche de mtal [11].
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Chapitre III : la dtection
Lorsque le plateau tourne dun angle , la photodiode sonde tourne dun angle . Ce
systme de rotation est appel [11]. Lordinateur, via linterface, permet de parcourir par
pas choisi, un intervalle angulaire incident donn.
A partir des mesures ralises, nous pouvons tablir le spectre de rflexion mais cette
opration ne peut seffectuer quaprs transformation et calibration des donnes brutes. En effet,
Linstallation fournit les valeurs des tensions gnres par les photodiodes sonde et rfrence en
fonction de lclairement reu. Ces mesures ncessitent donc une normalisation ainsi quune
calibration en clairement.
Pour chaque spectre, nous devons imprativement enregistrer deux canaux de mesures. Le
premier correspond une rfrence ddicace suivre lvolution de la source employe afin de
prendre en compte ses fluctuations et viter de les confondre avec le comportement du systme
tudi. Le rapport des mesures fournies par la photodiode sonde sur celles fournies par la
photodiode de rfrence permet de saffranchir de ces fluctuations. Cette tape doit tre effectue
pour chaque mesure exprimentale. La normalisation et le calibrage se sont deux tapes essentielles
pour le traitement des donnes brutes car il serre obtenir un spectre en rflexion exploitable.
III.2 Conclusion
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Conclusion gnrale
Conclusion Gnrale
Nous avant bien dtailler dans le premier chapitre la thorie des plasmons de surface .Ces
derniers gnrs linterface des films mtalliques lisses ne peuvent se coupler spontanment avec
une onde lectromagntique photonique. Pour dfinir ensuite les diffrentes mthodes de couplage
et en particulier le couplage par prisme.
Pendant la dernire dcennie, les biocapteurs optique base SPR t volu dans le mme
sens que la nanotechnologie. Le NanoSPR est un nouveau biocapteur base SPR utilise pour les
nanostructures dans lobjectif de la miniaturisation des biocapteurs. Le NanoSPR permet la
dtection en temps rel des interactions biomolculaires sur des nanoparticules mtalliques.
Dans l'ensemble, les biocapteurs optiques prsentent une bonne implantation dans le monde
industriel. En effet, des systmes bass sur des mesures SPR (Biacore) sont devenus des
Instruments privilgis pour la mesure en temps rel de toute interaction biomolculaire. La
tendance actuelle est la conception de biocapteurs miniaturiss, multiparamtriques et portables.
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Bibliographie
Bibliographie
[1] Laurent Guyot, "Intgration sur silicium de capteurs plasmonique base de nanostructures
priodiques", universit de Montral, mmoire prsent en vue du diplme de maitrise des sciences
appliques (gnie physique), 2011.
[3] http://fr.wikipedia.org/wiki/Mod%C3%A8le_de_Drude
[4] Malak Kanso, "Modlisation, ralisation et caractrisation d'un capteur plasmonique fibre
optique : Effets de la rugosit, des ractions de surface et de la cintique dans un systme
microfluidique", thse de doctorat, Universit de Nantes, 2008.
[7] http://irebs.u-strasbg.fr/spip.php?article874
[8] Nicolas Moll, "tude et ralisation dun systme immunocapteurs ondes de Love : application
la dtection de toxines, de virus ou de bactries", thse de doctorat duniversit Bordeaux 1, 2007.
[9] Guiot Alexis, Note de Synthse, " Les biocapteurs Quel dveloppement dans le domaine de
lair ? ". www.isige.ensmp.fr/ressources/travaux/theses/2004/guiot.pdf.
[10] centre SPIN, Ecole des Mines de Saint-Etienne, " mthodes spectromtriques d'analyse et de
caractrisation", Axe gnie de procds
[11] http://www.hololab.ulg.ac.be/fichiers/spr.pdf
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