Biocapteur

Biocapteur

C’est quoi un biocapteur ?

Principe d’un biocapteur
Principe de construction d’un biocapteur
Classification des biocapteurs
 les biorécepteurs
Les transducteurs
Introduction général
Recherche et développement des biocapteurs

Fig.01: Nombre de publication sur Fig.02: Estimation des investissements

les biocapteurs commercial de biocapteurs dans le marché
Historique
• Premier rapport sur l'immobilisation des protéines:
1916 adsorption de l'invertase sur charbon actif

1922 • Première électrode de pH en verre

• Première description d'un biocapteur: une électrode

1962 enzymatique ampérométrique pour le glucose

1975 • Premier biocapteur à base de microbe

• Premier biocapteur à base de fibres optiques pour le

1982 glucose

1996 • Glucocard lancé

• Glucotel, Un glucomètre compatible Bluetooth a été

2007 lancé
C’est quoi un biocapteur ?
 Définition d’un biocapteur
Un biocapteur est un système analytique
formé de deux parties qui sont :
1. Un récepteur biologique (ligand)
capable de reconnaitre une
substance cible présente dans un
milieu complexe
2. Un transducteur qui traduit les
modification physico-chimiques
engendrées par la reconnaissance
spécifique en un signal électrique ou
optique permettant de mesurer la
substance cible
Le nez comme « biocapteur »
 Définition d’un biocapteur selon
IUPAC
• Selon IUPAC (Union internationale de la chimie
pure et appliquée ), un biocapteur doit être petit
et compact, avoir un signal réversible, donner
des déterminations précises et établir une
connexion réelle entre le matériel biologique et
le transducteur
Evolution scientifique et technique, pluridisciplinarité

Physique
 Optique
Chimie  Semi-conducteur Biologie
 Bio-récepteurs synthétique • Bio-reconnaissance
 Matériaux des électrode moléculaire
 Polymère
 Immobilisation

Biocapteur
Electronique
• Technologies du silicium
Instrumentation • Traitement des données
• Micro-instrumentation • contrôle
• Portable
Opportunités du marché
• On-line
• In vivo, implantable
Principe d’un biocapteur
 les éléments de biocapteur
Analyte : une substance d'intérêt qui doit être détectée. Par exemple, le glucose est un «analyte»
dans un biocapteur conçu pour détecter le glucose.

Biorécepteur : Une molécule qui reconnaît spécifiquement l'analyte. Le processus de génération

de signal lors de l'interaction du biorécepteur avec l'analyte est appelé bio-reconnaissance

Transducteur : Le transducteur est un élément qui convertit une forme d'énergie en une autre.
Dans un biocapteur, le rôle du transducteur est de convertir l'événement de bio-reconnaissance en
un signal mesurable. Ce processus de conversion d'énergie est appelé signalisation.

Électronique : partie d'un biocapteur qui traite le signal traduit et le prépare pour l'affichage.

Enregistrement ou affichage : L’affichage consiste en un système d’interprétation utilisateur, tel

l’écran ou une imprimante directe générant des chiffres ou des courbes compréhensibles par
l’utilisateur.
 Principe de construction d’un biocapteur

La construction d’un biocapteur est essentiellement basée sur l’immobilisation

du biorécepteur sur le transducteur correspondant

biocapteur permettant la
Combinaison judicieuse
détection et le dosage d’un
d’un composant biologique
composé d’intérêt dans un
et d’un transducteur
milieu complexe.

• Les 1ers biocapteurs étudiés, puis mis sur le marché, sont des biocapteurs enzymatiques.
 Principe de construction d’un biocapteur
Construction du biocapteur

En théorique

Différentes combinaisons biorécepteur – transducteur donne une grand

nombre de biocapteurs

Mais en pratique:

Nécessité d’une compatibilité transducteur – biorécepteur pour obtention

de signal électrique
 Principe de construction d’un biocapteur
• Exemple:
Utilisation d’un transducteur thermométrique possible

si

réaction de transformation du substrat

Variation d’enthalpie ΔH
 Classification des biocapteur
Les biocapteurs peuvent être classés selon pleusieur paramètres :

1. Type de reconnaissance moléculaire (biorécepteur):

 Catalyse enzymatique, métabolisme cellulaire ou tissulaire.
 Formation de bio-complexe: réaction immunologique, récepteur membranaire

2. Classement par espèce(s) détectée(s):

 Substrats de réactions biologiques: sucres, acides aminés, alcools, phénols...
 Nutriments: demande biologique d’oxygène (DBO)…
 Inhibiteurs, toxiques: Pesticides (organo-phosphorés),
métaux, fluorures...
 Classification des biocapteur

3. Type de transducteur associé:

 électrochimique: Ampérométrique, potentiométrique, conductimétrique,…

 optique: résonnance de plasmon de surface (RPS)…
 enthalpimétrique: microcalorimétrie…
 massique: Quartz piézo-électriques,
Les biorécepteur
 Généralité

Plusieurs biorécepteurs ont été utilisés comme élément de reconnaissance

moléculaire pour le développement de divers biocapteurs:
Les enzymes

Les enzymes: biocatalyseurs les plus utilisés pour la construction de biocapteurs

Les enzymes
 Il existe plusieurs enzymes commerciales;
 L’enzyme doit être immobilisée au proche contact du transducteur:

(a)Enzyme immobilisée avec son site actif

intact et prêt à accepter la molécule de
substrat (comme le montre (b)).

(c) Enzyme inactivée par l’immobilisation:

site actif inaccessible au substrat.

(d) La déformation du site actif produit une

enzyme immobilisée inactive.
Les anticorps
 Un anticorps est une protéine complexe utilisée par le système
immunitaire pour détecter et neutraliser les agents pathogènes comme
les bactéries et les virus.
 Les anticorps ont la capacité de reconnaître et de se fixer de manière
spécifique sur un antigène.
Les anticorps
 La reconnaissance entre antigène et anticorps est, par exemple,
mise à profit dans la lutte contre les toxines bactériennes

 Ces toxines agissent en se fixant sur des récepteurs présents à la surface

des cellules de l'organisme dérèglements importants de l'activité
cellulaire. En se fixant sur ces toxines, les anticorps anti-toxine les
neutralisent et préviennent les liaisons avec les récepteurs cellulaires.
Les anticorps

 Sont généralement immobilisés chimiquement à

la surface du transducteur;
 l’immobilisation doit être contrôlée pour assurer
une orientation uniforme des sites récepteurs
(réaction d’affinité optimale);
 l’interaction avec 1 Ag ou haptène est
spécifique + possibilité d’amplification à l’aide
de marqueurs fluorescents ou enzymatiques;
 les biocapteurs résultants sont appelés
immunocapteurs
Les récepteurs
Les différentes cellules de l’organisme reçoivent les informations
nécessaires à la modulation de leur activité par l’intermédiaire de
signaux et de molécules extracellulaires.
Les récepteurs
 Ces molécules (hormones, neurotransmetteurs, molécules d'odorants,
facteurs de croissance,…) viennent la plupart du temps se lier à des
protéines réceptrices (font partie intégrante de la membrane
plasmique de la cellule cible) qui vont permettre la transmission de
l'information à l'intérieur de la cellule.

 Les récepteurs membranaires, eux, constituent l'interface

entre un stimulus extracellulaire et sa perpétuation dans le
cytosol.
 Les microorganismes
 Plusieurs types de microorganismes ont été utilisés pour mettre au point des
biocapteurs microbiens: bactéries, levures ou champignons.

 L’utilisation de cellules entières présente certains avantages:

- évite de longs et coûteux processus d’extraction purification que nécessitent
les autres biorécepteurs (enzymes, acides nucléiques…);
- possibilité de régénérer le biocatalyseur in situ sans nécessité de reconstruire
le biocapteur;
- extraordinaires possibilités de transformer des microorganismes en vue
d’améliorer leurs activités enzymatiques ou de leur permettre d’exprimer de
nouvelles activités.
Les transducteur
Les transducteur

• Le transducteur est l’élément physique qui exploite la modification

biochimique issue d’une interaction entre l’analyte et le biorecépteur
pour la transformer en signal électrique

• L’adéquation entre le type de transducteur et l’élément biologique

permet d’obtenir un signal sensible et facilement exploitable
Transducteur électrochimique
• Les méthodes de transduction électrochimique sont très populaires dans le domaine des
biocapteurs, non seulement pour des raisons historiques, mais aussi pour leur simplicité.

• Basé sur le changement des propriétés électriques ou la production d’espèces redox.

• Trois mode de transduction

• Potentiométrique :mesurent les variations de potentiels entre une électrode active et
une électrode de référence causées par des ions, des réactions chimiques ou les charges
électriques de biomolécules.

• Ampérométrique : L’ampérométrie consiste à mesurer le courant issu de l’électrolyse

d’une espèce électro-active et un potentiel constant entre une électrode de travail sur
laquelle est fixé le bio-récepteur et une électrode de référence.

• Conductométrique : ils permettent plutôt de mesurer une grandeur physique : la

conductivité électrique des solutions.
Transducteur optique
Une large variété de méthodes optiques a été utilisée pour
être associée au système de détection des biocapteurs :
mesure de l’absorbance, de la chimiluminescence, de la
fluorescence, de la résonance plasmonique de surface (SPR)

SPR: est un phénomène physique d'interaction lumière-matière

principalement connu pour son utilisation comme méthode de
mesure de la liaison d'un « ligand » sur un « récepteur » adsorbé à la
surface d'une couche métallique.

I0/I1 :
L : la longueur
C : le concentration d’absorption d’un matérielle
α : coefficient d’absorption