43

Bull. Soc. Pharm. Bordeaux, 2010, 149, 43-56

TRAITEMENT DES MARGINES À PH NEUTRE

ET EN CONDITIONS D’AÉROBIE PAR LA
MICROFLORE DU SOL AVANT ÉPANDAGE (*)

Abderrahmane YAAKOUBI (1), Abdelkader CHAHLAOUI (1), Mohammed

ELYACHIOUI (2), Abdelaziz CHAOUCH (2)

Les microorganismes du sol sont indispensables à la

biodégradation de la matière organique, notamment les composés
phénoliques des margines. À pH acide, leur effet est quasiment nul.
Après neutralisation du pH par ajout de carbonate de
calcium et en conditions d’aérobie, la demande chimique en
oxygène diminue de 51,73 % et les composés phénoliques de
65,71 % au bout de dix jours. Parallèlement, le pH passe de 7,00
à 8,05. Dans ces conditions, les extraits phénoliques présentent
par CLHP à 280 nm cinq pics majoritaires qui ne sont présents
qu’à l’état de traces après dix jours de traitement.

INTRODUCTION

Le rejet non contrôlé des margines constitue un problème

environnemental pour les pays du bassin méditerranéen. L'épandage de ces
effluents des huileries d’olive sur les sols agricoles a généralement des

(*) Manuscrit reçu le 01 novembre 2009.

(1) Laboratoire de Biochimie et de Pharmacognosie, Département de Biologie,
U.F.R : Qualité et Fonctionnement Hydrobiologique des Systèmes Aquatique,
Faculté des Sciences, Université Moulay Ismail BP 11201 Zitoune Meknès Maroc.
yaakoubi123@yahoo.fr, elyaakoubia@gmail.com, a_chahlaoui@yahoo.fr
(2) Laboratoire de Biotechnologie, Environnement et Qualité, Faculté des Sciences de
Kénitra, BP 133, 14000 Kénitra, Maroc. elyachioui@hotmaill.com,
achaouch161@gmail.com
 44

effets positifs [6,22,30] sur la productivité des cultures, sur les

caractéristiques du sol, à cause de la richesse de ces déchets en matière
organique [11] et en sels minéraux, notamment en potassium et augmente le
nombre et la diversité des microorganismes présents dans le sol [7].
Cependant, les polyphénols sont responsables d’effets phytotoxiques et
antimicrobiens [15,28,34].
Ces déchets organiques sont susceptibles d’être dégradés par les
microorganismes [4,13-14,17] et minéralisent la matière organique par voie
aérobie [3]. Cependant, le temps nécessaire pour une dégradation totale peut
être considérable.
Martinez et al. [25] ont observé que la dégradation aérobie des
composés phénoliques par Aspergillus terreus sur des margines filtrées,
stérilisées et diluées diminue d’autant que les margines sont concentrées.
Garrido Hoyos et al. [12] ont obtenu une élimination de 65,77 % de DCO de
margines traitées en aérobiose avec la même espèce. Funalia troggi permet
d'éliminer 70 % de la DCO et 93 % des phénols, alors que Coriolus
versicolor permet une réduction de 63 % de la DCO et 90 % des phénols
pour une DCO initiale de 28,20 g d’O2/l [32]. Vinciguerra et al. [29] ont
obtenu par traitement aérobie avec Lentinus edodes une réduction de 75 %
du carbone organique total, 66 % des phénols totaux et une décoloration de
l’ordre de 45 % après 4 jours d’incubation.
Aissam et al. [1] ont montré que quatre souches indigènes, deux
champignons (Aspergillus niger et Penicillium sp.) et deux levures
(Geotrichum terrestre et Candida boidinii), étaient performantes pour
l'assimilation des composés phénoliques et lipidiques. L’adaptation de ces
souches à des concentrations croissantes de margines (25, 50, 75 et 100 %)
permet d’augmenter leur résistance à la toxicité des composés phénoliques.
Ainsi, ces souches ont réduit la DCO de 78,3, 63,1, 48,4 et 40,3 % après un
mois de traitement des margines brutes. A. niger a été aussi efficace pour la
diminution des composés phénoliques (63,1%). Un traitement aérobie des
margines par des souches de Phanerochaete chrysosporium a diminué la
DCO de 73 % et les polyphénols de 83 % après 12 jours d’incubation pour
une DCO initiale de 50 g d’O2/l [20]. Des réductions de la DCO de 55,0,
52,5 et 62,8 % ont été obtenues en aérobiose avec Geotrichum sp.,
Aspergillus sp., et Candida tropicalis [10].
Au Maroc, le traitement aérobie des margines à pH neutre par les
microorganismes du sol a permis d’éliminer 70 % des composés
phénoliques et de réduire 63 % de la demande chimique en oxygène (DCO)
initiale [35]. El Hajjouji et al. [9] ont observé après 45 jours des baisses de
 45

DCO de 21,8 et 4,8 % pour des traitements avec et sans chaux ; la

neutralisation du pH par ajout de chaux a permis un abattement de 75,9 %
des phénols totaux.
L’augmentation du pH vers des valeurs neutres entraine la
transformation des phénols en phénates avec la formation d’ions C6H5O-
[23]. Ces derniers sont bien retenus par les cations du sol tels que les oxydes
d’aluminium et de fer, le carbonate de calcium et les silicates.
Les huileries équipées d’un système continu à trois phases rejettent
des margines diluées suite au lavage préalable des olives, à l’humidification
des pâtes durant le pressage, la troisième phase étant une centrifugation.
L’épandage de ces margines de centrifugation est souvent pratiqué.
Dans cette étude, des margines issues du système de centrifugation
ont été traitées par une suspension de microorganismes du sol en conditions
d’aérobie afin de tester leur effet sur la décomposition de la matière
organique et des composés phénoliques.

MATÉRIEL ET MÉTHODES

Échantillonnage
Les échantillons de sol ont été prélevés dans la couche superficielle
(10 à 30 cm) d’une parcelle témoin non traitée par les margines de texture
argileuse du domaine Mellahi de la région de Meknès (Tableau I). La charge
microbienne du sol présente 22.106, 18.106, 12.106 UFC (unités formant
colonie) par gramme de sol frais respectivement pour les germes totaux, les
champignons et les levures.
Tableau I :
Caractéristiques granulométiques du sol du domaine Mellahi de la
région de Meknès [30].
Profondeur Argiles Limons Sables
du sol (%) Limons fins Limons Sables fins Sables
(cm) (%) grossiers (%) (%) grossiers (%)
10-30 28,80 22,20 10,25 16,83 21,92
30-60 34,67 25,52 6,65 11,23 21,90
 46

Les margines utilisées proviennent d’une unité industrielle moderne

de trituration d’olives par centrifugation à trois phases, située dans la région
de Meknès (Domaine Zouina AGOURAY), pendant la compagne oléicole
2005/2006. Les échantillons ont été prélevés le 15 janvier 2006 à partir du
bassin de stockage des margines et transportés dans des flacons de 2 litres
pour les dosages physicochimiques, puis ont été conservés à l’abri de la
lumière à 4°C pour une utilisation ultérieure.

Caractérisation physicochimique des margines

Le pH est déterminé par un pH-mètre à affichage électronique
Jenway préalablement étalonné à pH 4 et 7.
La conductivité électrique a été mesurée par un conductimètre
Tacussel. Les résultats sont exprimés en mS/cm à 20°C.
Les matières en suspension (MES) sont déterminées par filtration sur
filtres de verre, séchage 4 heures à 105°C, puis pesées (AFNOR NF T90-
105).
Deux paramètres indicateurs de la pollution organique ont été
estimés.
La demande chimique en oxygène (DCO) est déterminée sur des
échantillons de margine brute selon la norme AFNOR NF T90-101, dilués
au 1/1000e vu la forte charge en matière organique. Le principe consiste à
oxyder la matière organique contenue dans les margines par un excès de
bicarbonate de potassium en milieu acide pendant deux heures et en
présence de sulfate de potassium comme catalyseur. Le dosage de cet excès
est effectué par le sel de Mohr en présence de ferroïne. Pour éviter
l’interférence des chlorures avec la matière organique, on les complexe avec
le sulfate mercurique.
Pour la demande biologique en oxygène (DBO5) (AFNOR T90-103),
les échantillons dilués au 1/200e pour diminuer l’effet toxique des
polyphénols sur les microorganismes ont été incubés dans un DBO-mètre
qui donne la quantité d’oxygène consommée par les bactéries durant cinq
jours à 20°C et à l’obscurité.

Extraction, dosage et chromatographie des composés phénoliques

La technique d’extraction des composés phénoliques de Macheix
et al. [23] a été utilisée. À 20 ml de margine préalablement acidifiée par
l’acide métaphosphorique (20 %) pour empêcher l’oxydation des composés
phénoliques, 20 ml de sulfate d’ammonium à 40 % ont été ajoutés pour
augmenter la force ionique du milieu. L’échantillon subit ensuite une
délipidation par trois fois 20 ml d’hexane. L’extraction des polyphénols est
 47

réalisée ensuite par trois fois 4,4 ml d’acétate d’éthyle. L’extrait est évaporé
à sec à 35°C et le résidu est récupéré dans 5 ml de méthanol pur.
Pour le dosage des composés phénoliques, 50 µl de l’extrait
phénolique sont mélangés à 1,35 ml d’eau distillée et 200 µl de réactif de
Folin-Ciocalteu. Après 3 min, 400 µl d’une solution de carbonate de sodium
à 20 % est additionnée au mélange. Le tout est placé dans un bain-marie
pendant 20 min à 40°C. L’absorbance est mesurée à 760 nm. Les résultats
sont exprimés en équivalent acide caféique utilisé dans une gamme étalon.
Les fractions phénoliques des margines ont été identifiées par
chromatographie liquide à haute pression (CLHP) en utilisant un détecteur
UV (280 nm) et une colonne C18 (4,6 x 250 mm). 20 μL d’extrait ont été
injectés et élués par gradient croissant d’acétonitrile (phases mobiles : H2O
+ H3PO4 (0,1 %), acétonitrile/eau (7/3), durant 60 min avec un débit de
0,8 ml/min.

Analyse microbiologique du sol

Elle a porté sur les germes totaux, les champignons et les levures.
Pour les germes totaux, à 10 g de sol, on ajoute 90 ml d’eau distillée
stérile. Après agitation, cette suspension est soumise à des dilutions jusqu'à
10-5.
20 ml de milieu solide PCA (Plate Count Agar) prêt à l’emploi ont
été coulés dans des boites de Petri de 100 mm de diamètre. Chaque dilution
(0,1 ml) est ensemencée en surface puis étalée dans trois boites de Petri. Ces
dernières ont été incubées 48 h à 25°C, dans une étuve thermostatée. Seules
les boites qui contiennent un nombre comptable de colonies séparées ont été
prises en compte. Les résultats sont exprimés en unités formant colonies
(UFC) par gramme de sol. L’expérience a été répétée trois fois.
Le dénombrement des levures et moisissures a été réalisé sur milieu
PDA (Potato Dextrose Agar), après incubation à 30°C trois jours pour les
levures et sept pour les moisissures.

Protocole expérimental
Les margines brutes ont été diluées au 1/10e, autoclavées 20 min à
120°C pour éviter toute interférence avec leur propre flore.
100 ml des margines diluées ont été préparées dans 3 erlenmeyers de
500 ml et ensemencées par 10 g du sol. L’incubation en aérobie a été
effectuée à 25°C dans une étuve thermostatée. L’aération a été assurée par
un flux d’air permanent, assurant une concentration en oxygène dissous de
10 mg/l.
 48

Afin d’examiner l’influence du pH sur l’activité des

microorganismes dans le traitement des margines, deux essais ont été
réalisés, l’un au pH initial des margines (4,93) et l’autre en amenant le pH à
la neutralité par l’apport de carbonate de calcium (CaCO3). Par ailleurs, un
essai témoin a été réalisé à pH 7 avec des margines stériles, aérées et non
ensemencées, afin de rechercher le degré d’implication des
microorganismes dans la dégradation des composés phénoliques et la
matière organique.
Les composés phénoliques, la matière organique exprimée en DCO
et le pH ont été suivis tous les deux jours pendant dix jours.
Les moyennes et la déviation standard des résultats analytiques ont
été calculées suivant une analyse de variance (ANOVA) des données.

RÉSULTATS

Margines étudiées
Les margines sont caractérisées par un pH acide (Tableau II). Elles
sont riches en matière organique exprimée en terme de DCO et DBO5. Leur
teneur en composés phénoliques est moyenne.

Tableau II :
Caractéristiques physicochimiques des margines brutes du système
continu à trois phases de la campagne oléicole 2005-2006 de l’unité du
Domaine Zouina Agouray de la ville de Meknès.
Paramètres
pH 4,93
Demande chimique en oxygène DCO (g/l) 78,00
Demande biologique en oxygène à 5 jours DBO5 (g/l) 49,08
Composés phénoliques totaux (g/l) 9,50

Évolution des phénols totaux

À pH initial (pH 4,93) et en présence des microorganismes du sol
(Figure 1a), la dégradation des composés phénoliques est négligeable, voire
nulle. Il en va de même à pH neutre en l’absence de microorganismes
(Figure 1b).
 49

En revanche, à pH neutre et en présence des microorganismes

(Figure 1c), la teneur en composés phénoliques diminue nettement dès le
deuxième jour et passe en dix jours de 950,0 à 325,76 mg/l, soit une
réduction de 65,71 %. La concentration en composés phénoliques chute
essentiellement entre le 2e et le 6e jour. Au-delà, la diminution n’est plus
significative.
1000 a
900
Phénols totaux (mg/l)

800 b
700
600 c
500
400
300
200
100
0 Jours
0 2 4 6 8 10

Fig. 1 : Évolution des phénols totaux en fonction du temps dans les

margines ensemencées, à pH acide (a) et neutre (c) et dans les margines
non ensemencées et neutralisées (b).
L’extrait phénolique des margines brutes apparait très riche en
composés phénoliques par CLHP à 280 nm (Figure 2). Plus de dix pics ont
été observés dont cinq majoritaires.

Fig. 2 : CLHP d’extraits phénoliques purifiés des margines brutes (échelle

de 0,1 à 0,9) et traitées par les microorganismes du sol (échelle de 0,1 à
0,05) en conditions aérobie, à pH 7 après dix jours de traitement.
 50

Après dix jours de traitement, la richesse qualitative en phénols

s’estompe. Seuls quelques faibles pics ont été détectés à 280 nm. La plupart
d’entre eux ne correspondent pas aux pics initiaux.

Évolution de la matière organique

À pH acide et en présence des microorganismes du sol (Figure 3a),
la matière organique exprimée en DCO ne subit pas de dégradation
chimique. À pH neutre et en absence de microorganismes, la DCO reste
stable (Figure 3b).
Par contre, à pH neutre et en présence des microorganismes
(Figure 3c), la DCO passe en dix jours de 7800,00 à 3765,12 mg/l, soit une
réduction de 51,73 %. La courbe de dégradation de la matière organique est
similaire à celle des composés phénoliques totaux. Une corrélation très
significative (r2 = 0,9757, y= 6,9576 + 1461,1) est observée entre l’évolution
des phénols totaux et celle de la DCO à pH neutre et en présence de
microorganismes.

9000
a
8000
7000 b
DCO (mg/l)

6000
c
5000
4000
3000
2000
1000 Jours
0 2 4 6 8 10

Fig. 3 : Évolution de la DCO en fonction du temps dans les margines

ensemencées, à pH acide (a) et neutre (c) et dans les margines non
ensemencées à pH neutre (b).
 51

Au cours du traitement des margines par les microorganismes du sol,

le pH passe de 7 à 8,05 (Figure 4).

9
8 a
7
6 b
pH

5
4
3
2
1 Jours
0 2 4 6 8 10

Fig. 4 : Évolution du pH en fonction du temps dans les margines

neutralisées ensemencées (a) et non ensemencées (b).

DISCUSSION

Les margines présentent une composition moyenne et habituelle par

rapport à celle d’autres auteurs [5,24].
La faible dégradation chimique des composés phénoliques pourrait
être due à une inhibition de l’activité des microorganismes du sol par le pH
acide des margines. Les composés phénoliques à pH acide ont un effet
antimicrobien [19,27]. Par ailleurs, l’oxydation des margines entraine la
polymérisation des composés phénoliques en tanins [18] plus résistants à la
biodégradation.
À pH neutre, les microorganismes du sol biodégradent les composés
phénoliques. L’activité microbienne n’est plus inhibée. La biodégradation
des composés phénoliques par les bactéries peut être accélérée par une
élévation de pH et/ou une amélioration de l’aération [8]. À pH neutre ou
légèrement alcalin (7,4 à 7,6), les composés phénoliques passent sous forme
de phénates et perdent une grande partie de leur pouvoir antimicrobien [26].
Les microorganismes peuvent alors les utiliser comme nutriments
carbonés [4].
Les nouveaux pics à 280 nm observés par CLHP après dix jours
pourraient correspondre à de nouveaux composés issus de la dégradation
des composés phénoliques de départ [4,34].
 52

La rapidité de dégradation suggère l’implication d’un métabolisme

microbien. Des bactéries des genres Pseudomonas, Achromobacter,
Aeromonas et Serratia du sol sont capables de dégrader les composés
phénoliques [18,21].
La stabilité de la teneur en composés phénoliques au-delà du 6e jour
suggère que certains d’entre eux puissent être impliqués dans la formation
de molécules pré-humiques stables portant des groupements phénoliques.
En effet, les composés phénoliques sont précurseurs de substances
humiques [2,33].
La dégradation de la matière organique comme celle des composés
phénoliques par les microorganismes du sol est affectée par le pH acide et
probablement par la présence des composés phénoliques qui sont des anti-
oxydants naturels.
Pour les margines ensemencées à pH 7, la dégradation rapide de la
matière organique suggère également un rôle important des bactéries, tandis
que la stabilité de la DCO au-delà du 6e jour peut correspondre à la
formation microbienne de composés humiques stables.
Hamdi et al. [16] ont également noté une augmentation du pH (de
7,00 à 8,20) lors de la biodégradation de la matière organique des margines
par la microflore du sol. Ceci a vraisemblablement deux causes simultanées,
la dégradation de composés organiques portant des groupements -COO-
et/ou -OH, qui sont libérés et contribuent à l’élévation du pH et la
dégradation microbienne des protéines, abondantes dans les margines,
libérant des ions NH4+ qui sont des bases fortes, d’où une augmentation
du pH.

CONCLUSION

Les résultats obtenus montrent que la microflore du sol a le pouvoir

de biodégrader dans des conditions d’aérobie et à pH neutre la matière
organique exprimée en DCO et en particulier les composés phénoliques. Ce
procédé biologique assure une réduction de 51,73 % de la DCO et de
65,71 % des composés phénoliques. Il permet la libération d’ions
ammonium et probablement la formation de substances humiques ou pré-
humiques naturelles, améliorant la valeur fertilisante des margines.
 53

RÉFÉRENCES

1- Aissam (H.), Errachidi (F.), Merzouki (M.), Benlemlih (M.),

Identification des levures isolées des margines et étude de leur activité
catalase. - Cah. Assoc. Sci. Eur. Eau Santé, 2002, 7(1), 23-30.
2- Bailly (J.R.), Raboanary (M.) - Sur la formation de substances
parahumiques à partir d’acides phénoliques simples par des
microorganismes du sol. - Agrochimica, 1986, 30(1-2), 58-74.
3- Bechac (J.P.), Boutin (P.), Mercier (B.), Nuer (P.) - Traitement des
eaux usées. Paris : Ed. Eyrolles, 1984, vi, 281 p.
4- Borja (R.), Banks (C.J.), Alba (J.) - A simplified method for
determination of kinetic parameters to describe the aerobic
biodegradation of two important phenolic constituents of olive mill
wastewater treatment by a heterogeneous microbial culture. -
Environ., Sci, Health., 1995, A 30(3), 607-626.
5- Cadillon (M.), Lacassin (J.C.) - La valorisation agronomique des
margines. 2002, 10 p. http://www.canal-deprovence.com/Portals/0/
files/pdf/Publications/2002/Septembre_2002
6- Di Giovacchino (L.), Basti (C.), Costantini (N.), Ferrante (M.L.),
Surrichio (G.) - Effects of olive vegetable water spreading on soil
cultivated with maize and grapevine. - Agric. Medit., 2001, 131(1-2),
33-41.
7- Di Giovacchino (L.), Basti (C.), Costantini (N.), Surricchio (G.),
Ferrante (D.), Lombardi (D.) - Effet de l’épandage des eaux de
végétation des olives sur des sols complantés de maïs et de vigne. -
Olivae, 2002, (91), 37-43.
8- Dommergues (Y.) - Interrelations sans caractère symbiotique entre la
végétation et la microflore du sol : “l’effet litière”. In Pesson (P.) (Ed.)
La vie dans les sols : aspect nouveaux, études expérimentales. Paris :
Gauthier-Villars édit., 1971, p. 423-471.
9- El Hajjouji (H.), Fakharedine (N.), Ait Baddi (G.), Winterton (P.),
Bailly (J.R.), Revel (J.C.), Hafidi (M.) - Treatment of olive mill waste-
water by aerobic biodegradation: an analytical study using gel
permeation chromatography, ultraviolet-visible and Fourier transform
infrared spectroscopy. - Bioresour. Technol., 2007, 98(18),
3513-3520.
 54

10 - Fadil (K.), Chahlaoui (A.), Ouahbi (A.), Zaid (A.), Borja (R.) -
Aerobic biodegradation and detoxification of wastewaters from the
olive oil industry. - Int. Biodeterior. Biodegrad., 2003, 51(1), 37-41.
11 - Galli (E.), Pasetti (L.), Fiorelli (F.), Tomati (U.) - Olive-mill
wastewater composting: Microbiological aspects. - Waste Manage.
Res., 1997, 15(3), 323-330.
12 - Garrido Hoyos (S.E.), Martinez Nieto (L.), Camacho Rubio (F.),
Ramos Cormenzana (A.) - Kinetics of aerobic treatment of olive-mill
wastewater (OMW) with Aspergillus terreus. - Process Biochem.,
2002, 37(10), 1169-1176.
13 - Gharsallah (N.), Labat (M.), Aloui (F.), Sayadi (S.) - The effect of
Phanerochaete chrysosporium pretreatment of olive mill waste waters
on anaerobic digestion. - Resour. Conserv. Recycling, 1999,
27(1-2), 187-192.
14 - Hajjouji (M.), El Hajjouji (H.), Ait Baddi (G.), Yaacoubi (A.), Hamdi
(H.), Winterton (P.), Revel (J.C.), Hafidi (M.) - Optimisation of
biodegradation conditions for the treatment of olive mill wastewater. -
Olivea, 2008, 99(13), 5505-5510.
15 - Hamdi (M.) - Valorisation et épuration des effluents des huileries
d’olive, l’utilité de la microbiologie industrielle. - Olivae, 1993, (46),
20-24.
16 - Hamdi (M.), Festino (C.), Aubart (C.) - Anaerobic digestion of olive
mill wastewaters in fully mixed film reactors and in fixed film
reactors. - Process Biochem., 1992, 27(1), 37-42.
17 - Hamdi (M.), Garcia (J.L.) - Comparison between anaerobic filter and
anaerobic contact process for fermented olive mill wastewaters. -
Biores. Technol., 1991, 38(1), 23-29. http://horizon.Documen
tation.ird.fr/exl-doc/pleins_textes/pleins_textes_6/b_fdi_33-34/36491
.pdf
18 - Hamdi (M.), Garcia (J.L.), Ellouz (R.) - Integrated biological process
for olive mill wastewaters treatment. - Bioprocess. Engin., 1992,
8(1-2), 79-84.
19 - Hill (G.A.), Robinson (C.W.) - Substrate inhibition kinetics: Phenol
degradation by Pseudomonas putida. - Biotechnol. Bioeng., 1975,
17(11), 1599-1615.
20 - Kissi (M.), Mountadar M.), Assobhei (O.), Gargiulo (E.), Palmierie
(G.), Giardina (P.), Sannia (G.) - Roles of tow white-rot
basidiomycete fungi in decolorisation and detoxification of olive mill
wastewater. - Appl. Microbiol. Biotechnol., 2001, 57(1-2), 221-226.
 55

21 - Knupp (G.), Rücker (G.), Ramos-Cormenzana (A.), Garrido Hoyos

(S.), Neugebauer (M.), Ossenkop (T.) - Problems of identifying
phenolic compounds during the microbial degradation of olive mill
wastewater. - Int. Biodeterior. Biodegrad., 1996, 38(3-4), 277-282.
22 - Lombardo (N.), Briccoli Bati (C.), Marsilio (V.) Di Giovacchino (L.) -
Comportamento vegeto-produttivo di un oliveto trattato con acquae di
vegetazione. - Atti Conv. "Tecniche, norme e qualità in olivicoltura",
Potenza, Italia, 15-17 dic. 1993, 1993, p. 97-107.
23 - Macheix (J.J.), Fleuriet (A.), Billo (J.A.) - Fruit phenolics. Boca
Raton Florida: CRC Press Inc., 1990, 378 p.
24 - Marsilio (V.), Di Giovacchino (L.), Solinas (M.), Lombardo (N.),
Briccoli-Bati (C.) - First observations on the disposal effects of olive
oil mills vegetation waters on cultivated soil. - Acta Hortic., 1990,
(286), 493-498.
25 - Martinez (N.L.), Ramos-Cormenzana (A.), García Pareja (M.P.),
Garrido Hoyos (S.E.) - Biodegradación de compuestos fenolicos del
alpechín con Aspergillus terrus. - Grasas Aceites, 1992, 43(2), 75-81.
26 - Medeci (F.), Merli (C.), Spagnoli (E.) - Anaerobic digestion of olive
mill wastewater: a new process. In Ferranti (H.), Ferrero (M.P.),
Vaveau (H.) Eds., Anaerobic digestion and carbohydrates hydrolysis
of waste. London: Elsevier Publ., 1985, p. 385-398.
27 - Rodriguez (M.M.), Perez (J.), Ramos-Cormenzana (A.), Martinez (J.)
- Effect of extracts obtained from olive oil mill wastewaters on
Bacillus megaterium ATCC 33085. - J. Appl. Bacteriol., 1988, 64(3),
219-226. http://www3.interscience.wiley.com/cgi-bin/fulltext/
12007454/PDFSTART
28 - Sayadi (S.), Allouch (N.), Jaoua (M.), Alaoui (F.) - Detrimental effect
of high molecular-mass polyphenols on olive mill wastewater
biotraitement. - Process Biochem., 2000, 35(7), 725-735.
29 - Vinciguerra (V.), D’Annibale (A.), Delle Monache (G.), Sermanni
(G.G.) - Correlated effects during the bioconversion of waste olive
waters by Lentinus edodes. - Bioresource Technol., 1995, 51(2-3),
221-226.
30 - Yaakoubi (A.), Chahlaoui (A.), Rahmani (M.), Elyachioui (M.),
Oulhote (Y.) - Effet de l’épandage des margines sur la microflore du
sol. - Agrosolutions, 2009, 20(1), 35-43. www.irda.qc.ca/_documents/
_Results/203.pdf, 203.pdf
 56

31 - Yesilada (O.), Fiskin (K.), Yesilada (E.) - The use of white rot fungus
Funalia trogii (Malatya) for the decolourization and phenol removal
from olive mill wastewater. - Environ. Technol., 1995, 16(1), 95-100.
32 - Yesilada (O.), Sik (S.), Sam (M.) - Biodegradation of olive oil mill
wastewater by Coriolus versicolor and Funalia trogii: effects of
agitation, initial COD concentration, inoculum size and
immobilization. - World J. Microbiol. Biotechnol., 1998, 14(1), 37-42.
33 - Zaim (H.), Bailly (J.R.), Codomier (L.) - Influence d’une argile sur la
formation des substances parahumiques d’origine microbienne. -
Agrochimica, 1994, 39, 18-25.
34 - Zenjari (B.), El Hajjouji (H.), Ait Baddi (G.), Bailly (J.R.), Revel
(J.C.), Nejmeddine (A.), Hafidi (M.) - Reduction of toxic compounds
during the composting of olive mill wastewater-straw mixture. - J.
Hazard. Mat., 2006, A138, 433-437.
35 - Zenjari (B.), Hafidi (M.), El Hadrami (I.), Bailly, (J.R.), Nejmeddine,
(A.) - Traitement aérobie des effluents d’huileries par les micro-
organismes du sol. - Agrochimica. 1999, 43(5-6), 277-286.

ABSTRACT

Treatment of olive waste waters at neutral pH and in aerobic conditions

by soil microflora before spreading
Soil micro-organisms were found to be essential for the
biodegradation of organic matter, notably phenolic compounds provided by
olive mill wastewaters. At acidic pH, their effect was quasi absent.
After neutralization of the pH by addition of calcium carbonate and
in aerobic conditions, the COD and polyphenol content were reduced by
51.73 and 65.71% after 10 days, respectively. Moreover, during treatment,
the pH rose from 7 to 8.05. In these conditions, HPLC of the phenolic
extracts at 280 nm showed five major peaks, while only traces were detected
after 10 days of treatment.

Keywords: olive mill wastewater (OMWW), pH, phenolic compounds.

__________