2me partie : Neurobiologie molculaire

Chapitre 6 LA TRANSMISSION SYNAPTIQUE (fascicule 1/3)

Ramon y Cajal, ds 1888, tablit que les contacts entre les terminaisons axonales d'un neurone et les dendrites ou le soma d'un autre neurone, sont les lieux de passage de l'influx nerveux : Les articulations ou contacts utiles et efficaces entre neurones ne s'effectuent qu'entre axone, collatrales ou terminales d'un neurone et les prolongements ou le corps cellulaire d'un autre neurone . Le terme synapse a t propos par la suite par Sherrington (1897) pour dsigner ces zones de contigut entre neurones, spcialises dans la transmission des informations. En fait, le terme synapse ne dsigne pas uniquement les connexions entre neurones (synapses interneuronales) mais aussi celles entre neurones et cellules effectrices comme les cellules musculaires et glandulaires (synapses neuro-effectrices) et celles entre cellules rceptrices et neurones (fig. 1). C'est au niveau de ces contacts que s'effectue la transmission des informations d'une cellule une autre : la transmission synaptique. On distingue, selon des critres morphologiques et fonctionnels, plusieurs types de synapses parmi lesquelles : Les synapses chimiques qui se caractrisent morphologiquement par la prsence d'un espace entre les membranes plasmiques des cellules connectes, espace appel fente synaptique. Dans ce cas, une molcule chimique, le neurotransmetteur, transmet les informations de la cellule prsynaptique la cellule postsynaptique. Ce sont ces synapses que nous tudierons dans ce chapitre (fig. 2A), Parmi les synapses chimiques, certaines ont une organisation particulire : - les synapses rciproques formes par la juxtaposition de deux synapses chimiques orientes en sens inverse l'une de l'autre (fig. 2D) ; - les glomrules forms par un ensemble de synapses chimiques. Dans certains cas, c'est un axone qui se trouve entour par un ensemble de dendrites avec lesquelles il effectue des synapses chimiques (fig. 2E). Dans d'autres cas, c'est une dendrite qui se trouve entoure par plusieurs terminaisons axonales. Les synapses lectriques ou jonctions communicantes qui se caractrisent morphologiquement par l'accolement des membranes plasmiques des rgions cellulaires ainsi connectes. Dans ce cas, les signaux lectriques sont directement transmis d'une cellule l'autre sans intermdiaire chimique. Il faut prciser cependant que les jonctions communicantes sont aussi le lieu d'change de molcules intracellulaires de petit diamtre (fig. 2B). Ces synapses sont rares dans le systme nerveux central de mammifres. Les synapses mixtes formes par la juxtaposition d'une synapse chimique et d'une jonction communicante (fig. 2C). Chez les mammifres, ces synapses sont plus frquentes que les synapses lectriques. La synapse est une zone de contigut et non de continuit entre 2 cellules. On a tout d'abord cru que l'axone tait en continuit anatomique avec la cellule sur laquelle il se termine ; s'il en tait ainsi, l'influx propag se transmettrait sans interruption. Cependant, les recherches lectrophysiologiques et histologiques ont montr que ce type de synapse, dnomm synapse lectrique, est rare. C'est un autre type qui se rencontre plus communment, particulirement chez les mammifres et donc chez l'homme dans lequel la terminaison axonique excite rejette une substance qui produit un effet excitateur ou inhibiteur sur la membrane cellulaire voisine. On nomme synapse chimique ce type de jonction que nous tudierons ci-dessous. Il est ncessaire de souligner que les synapses jouent un rle fondamental dans la physiologie nerveuse et ce, pour plusieurs raisons. D'abord, qu'il s'agisse de synapses lectriques ou de synapses chimiques, les signaux sont toujours transmis de l'lment prsynaptique (axone) l'lment postsynaptique. Ceci fait que les synapses sont des relais univoques aussi bien entre neurones qu'entre neurones et organes effecteurs. En second lieu, les synapses sont susceptibles de voir leur efficacit se modifier : lorsqu'une synapse est frquemment utilise, son fonctionnement est plus rgulier et plus prcis que lorsqu'elle est peu ou pas utilise. Cette plasticit fait qu'on prte aux synapses un rle dans les phnomnes d'apprentissage et de mmorisation. Enfin, disons que les synapses sont les sites d'action de nombreuses substances pharmacodynamiques. DANS CE COURS NE SERONT ETUDIEES QUE LES SEULES SYNAPSES CHIMIQUES On classe les synapses chimiques en deux catgories: les synapses ou jonctions neuro-musculaires celles qui existent entre les terminaisons axonales d'un neurone moteur et les fibres musculaires (ex: entre le motoneurone et les fibres musculaires stries d'une unit motrice); les synapses neuro-neuronales du systme nerveux cental. Dans ce chapitre, seule la transmission neuro-musculaire sera envisage.

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Fig. 1 - Diffrents types de cellules connectes par des synapses chimiques. A : Synapses interneuronales. Exemple des synapses entre un motoneurone rachidien (neurone de type Golgi I qui innerve les fibres musculaires stries) et une cellule de Renshaw (neurone de circuits locaux localis dans la moelle pinire). Jonction neuromusculaire : synapse entre motoneurone et cellules musculaires stries. B : Synapse entre rcepteur sensoriel et neurone. Exemple des synapses entre une cellule rceptrice de l'audition (cellule cilie localise dans la cochle) et un neurone sensoriel primaire (dont le corps cellulaire est localis dans le ganglion spiral). Ce neurone est dpourvu de dendrites et prsente un axone en T qui conduit les informations sensorielles de la priphrie vers le systme nerveux central. A : D'aprs Eckert R, Randall D, Augustine G. Animal physiology. New York : W.A. Freeman, 1988 : 683 (avec autorisation). I - DANS TOUTES LES SYNAPSES CHIMIQUES, LE COMPLEXE SYNAPTIQUE COMPREND TROIS PARTIES: L'ELEMENT PRESYNAPTIQUE, LA FENTE SYNAPTIQUE ET, L'ELEMENT POST-SYNAPTIQUE. IL PRESENTE UNE ASYMETRIE DE STRUCTURE ET UNE ASYMTRIE FONCTIONNELLE. Nous prendrons pour exemple les synapses chimiques interneuronales. Lorsqu'on observe au microscope lectronique une coupe de tissu nerveux effectue dans une rgion du systme nerveux central riche en corps cellulaires et dendrites (substance grise, on observe la surface d'une dendrite ou d'une pine dendritique la prsence d'un ou de plusieurs contacts synaptiques (fig. 3, flches). C'est prcisment un seul de ces contacts synaptiques qui reprsente le complexe synaptique (fig. 4). Le complexe synaptique comprend trois parties : l'lment prsynaptique, la fente synaptique et l'lment post-synaptique. Le complexe synaptique est l'unit de base non rductible de chaque synapse chimique car il renferme le minimum requis pour qu'une transmission synaptique soit efficace. 1. Les lments fonctionnelle pret post-synaptiques prsentent une spcialisation morphologique et

L'lment prsynaptique se caractrise par la prsence de vsicules synaptiques, organites de stockage du neurotransmetteur et de nombreuses mitochondries (fig. 3 et 4). Il existe deux types de vsicules de stockage du neurotransmetteur : les vsicules claires (40-50 nm de diamtre) et les vsicules coeur dense ou granule dense, qui prsentent un centre dense aux lectrons (40-60 nm de diamtre). Parfois on distingue sous la membrane prsynaptique une zone dense aux lectrons avec une gomtrie plus ou moins apparente, la grille prsynaptique (voir fig. 8). Elle correspond une organisation particulire du cytosquelette lie l'exocytose des vsicules synaptiques. L'lment post-synaptique se caractrise, dans le cas des synapses interneuronales, par la prsence d'une rgion sous-membranaire dense aux lectrons qui reflte une organisation particulire du cytosquelette, sans doute lie

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l'ancrage des rcepteurs post-synaptiques dans cette rgion (fig. 3 et 8). Lorsque l'lment post-synaptique n'est pas neuronal, nous verrons que diverses autres spcialisations post-synaptiques existent.

Fig. - 2 Diffrents types de synapses. A D : D'aprs Bodian D. Neuronal junctions : a revolutionnary dcade. Anat Rec 1972 ; 174: 73-82. E: D'aprs Steiger U. Uber den Feinbau des Neuropils im Corpus pedunculatum des Waldaneise. Z Zelforsch 1967; 81: 511-36,

Fig. 3 - Synapses axo-pineuses dont l'une (au centre) est une synapse "perfore ".

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Micrographie d'une coupe effectue au niveau de l'hippocampe (couche molculaire de la fascia dentata) et observe au microscope lectronique. On distingue deux boutons synaptiques (term. ax) remplis de vsicules synaptiques (Ves) et effectuant un ou plusieurs contacts synaptiques asymtriques (flches, voir aussi fig. 8) avec des pines (Ep) de dendrites de neurones pyramidaux. Photo Olivier Robain. Le complexe synaptique prsente une asymtrie de structure tout fait caractristique, les vsicules synaptiques n'tant prsentes que dans l'lment prsynaptique. Cette asymtrie de structure reflte une asymtrie fonctionnelle que nous allons tudier. 2. Schma gnral du fonctionnement d'un complexe synaptique

Le schma gnral du fonctionnement d'une synapse chimique est le suivant (fig, 4A) : le neurotransmetteur est stock dans les vsicules synaptiques de l'lment prsynaptique. En rponse l'arrive des potentiels d'action (1) dans l'lment prsynaptique, on observe une entre d'ions a2* (2) dans l'lment prsynaptique et la fusion d'une vsicule avec la membrane plasmique. La vsicule libre ainsi par un processus d'exocytose (3) le neurotransmetteur dans la fente synaptique. Les molcules de neurotransmetteur peuvent alors se fixer sur la membrane de l'lment postsynaptique au niveau de rcepteurs qui lui sont spcifiques (4a) et entraner un passage d'ions travers la membrane post-synaptique (5). A ce stade, la transmission synaptique est effectue. De faon concomitante, les molcules neurotransmetteur prsentes dans la fente synaptique sont recaptes vers l'lment prsynaptique (4b) et la membrane prsynaptique est recycle (4c).

Fig. 4A - Spcialisations pr- et post-synaptiques. A ; Schma gnral de la transmission synaptique (voir texte pour explication). Ainsi, l'lment prsynaptique renferme la machinerie ncessaire la synthse, au stockage, la libration et l'inactivation du (ou des) neurotransmetteur. On appelle zone active l'ensemble form par les vsicules prsynaptiques et la membrane axonale prsynaptique o s'effectue l'exocytose (fig. 4B). L'lment post-synaptique, spcialis dans la rception des messages, renferme dans sa membrane plasmique les protines rceptrices du neurotransmetteur : rcepteurs-canaux et rcepteurs lis aux protines G (fig. 4B). Ceci fait que, dans la majorit des cas, la transmission synaptique est unidirectionnelle (on dit aussi polarise) : elle n'a lieu que de l'lment prsynaptique, qui contient le neurotransmetteur, vers l'lment post-synaptique la surface duquel se trouvent les rcepteurs du neurotransmetteur (fig.4B). Dans le cas des synapses dendro-dendritiques (bulbe olfactif de rat), on distingue deux complexes synaptiques juxtaposs et fonctionnant avec des polarits opposes : ce sont les synapses rciproques (flg. 2D). Mais il faut noter, ici encore, que la transmission synaptique est polarise au niveau de chacun des complexes synaptiques.

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3.

Complmentarit entre le neurotransmetteur stock et libr par l'lment prsynaptique et la nature des rcepteurs prsents dans la membrane post-synaptique

On observe trs gnralement une complmentarit entre le ou les neurotransmetteurs stocks et librs par l'lment prsynaptique et les protines rceptrices qui sont prsentes en forte densit dans la membrane de l'lment post-synatique, et ceci mme lorsque les cellules pr- et post- synaptiques ont des origines embryologiques diffrentes (comme dans le cas des synapses nerf-muscle, par exemple). Cette complmentarit est primordiale pour que la transmission synaptique soit efficace. Les mthodes permettant l'identification des neurotransmetteurs prsents dans l'lment prsynaptique et celles permettant la localisation des rcepteurs post-synaptiques sont varies. Nous citerons plus particulirement : - pour l'identification des neurotransmetteurs : les mthodes immunocytochimiques qui permettent de mettre en vidence la prsence d'une enzyme de synthse du neurotransmetteur dans tout le neurone et la technique d'hybridation in situ qui permet de mettre en vidence la transcription de l'ARNm codant pour l'enzyme de synthse du neurotransmetteur. Dans ce dernier cas, seuls les somas sont mis en vidence; - pour la localisation des rcepteurs : les techniques de marquage par autoradiographie, par les anticorps monoclonaux ou encore plus rarement par les anticorps anti-idiotypes.

Fig. 4B - Spcialisations pr- et post-synaptiques. B : Vues transversales en microscopie lectronique au niveau du complexe synaptique ( gauche, synapse inhibitrice affrente la cellule de Mauthner de poisson et, droite, synapse inhibitrice affrente un motoneurone de moelle pinire de rat). A gauche: une figure d'exocytose (grande flche) entre deux projections denses prsynaptiques et une vsicule entoure d'un feutrage (flche barre) caractristique du recyclage membranaire sont visibles dans ce plan de coupe. A droite: localisation post-synaptique du rcepteur glycinergique l'aide d'un anticorps monoclonal. Les particules d'or sont alignes distance de la membrane. Cet espace a principalement pour origine l'encombrement des anticorps utiliss dans le marquage indirect des rcepteurs (voir annexes 2-1 et 2-2). D'aprs Triller A et Korn H. Activity dpendent dformations of presynaptic grids at central synapses. J Neurocy-tol 1985 ; 14 : 177-92 ( gauche) et Triller A, Cluzeaud F, Pfeiffer F, Korn H. Distribution and transmembrane organi-zation of glycine receptor at central synapses : an immunocytochemical touch. In : Levi-Montalcini R et al, eds. Mole-cular aspects of neurobiology. Berlin : Springer Verlag, 1986 :101-5 ( droite, avec autorisation). Une telle adquation entre neurotransmetteur et rcepteur requiert l'expression des gnes codant pour les protines complmentaires pr- et post-synaptiques que sont les enzymes de synthse du neurotransmetteur et les rcepteurs de ce neurotransmetteur. Il faut envisager aussi que le neurone post-synaptique, recevant de nombreuses affrences, synthtise par consquent un large ventail de ces rcepteurs. Ces rcepteurs doivent tre ensuite dirigs et accumuls dans les rgions membranaires post-synaptiques complmentaires de l'affrence qui leur correspond. Ceci fait apparatre le problme qui se pose gnralement ds qu'une fonction est rgionalise, celui du ciblage (targeting) des protines. Plusieurs hypothses ont t envisages pour expliquer la complmentarit pr- post-synaptique : - les divers types de rcepteurs seraient exprims par la cellule post-synaptique et insrs au hasard dans sa membrane plasmique avant que les contacts synaptiques soient tablis et fonctionnels. Un signal antrograde (de l'lment prsynaptique vers l'lment post-synaptique) contribuerait ensuite la slection au niveau transcriptionnel des rcepteurs exprims par la cellule post-synaptique et accumuls dans la membrane post-synaptique. Ce signal, qui ne semble pas tre le neurotransmetteur, pourrait tre un peptide libr en mme temps que lui ; - de la mme faon, un signal rtrograde serait mis par la cellule post-synaptique une fois le contact synaptique tabli. Ce signal contrlerait le type de neurotransmetteur prsent dans l'lment prsynaptique. Ainsi, la complmentarit pr-post rsulterait d'une slection rciproque des gnes et des produits de ces gnes exprims par les cellules en contact. Cependant, la complmentarit pr- post-synaptique ne concerne pas seulement la nature du neurotransmetteur et des rcepteurs de ce neurotransmetteur mais aussi la prsence, du ct prsynaptique, d'une membrane spcialise dans la fonction d'exocytose (pour la libration du neurotransmetteur) et dans le recyclage membranaire. En effet, l'exocytose des vsicules synaptiques n'a lieu que dans une rgion membranaire trs restreinte, la membrane prsynaptique. Ceci ncessite la reconnaissance entre membrane vsiculaire et membrane plasmique prsynaptique. Les mcanismes hypothtiques impliqus dans cette reconnaissance sont exposs ultrieurement. De plus, lors de chaque exocytose, la membrane prsynaptique voit sa surface augmenter par addition de membrane vsiculaire, or cette membrane doit rester de surface constante. Cet excs de surface membranaire est corrig par un processus compensatoire de recyclage de la membrane plasmique. Ce processus correspond la reformation de vsicules par endocytose. Les mcanismes de ce recyclage sont encore hypothtiques et posent, entre autres, le problme suivant : la

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composition en protines de la membrane des vsicules synaptiques diffrant de celle de la membrane plasmique prsynaptique, quelle est la membrane recycle ? celle qui correspondait exactement la membrane des vsicules ou bien n'importe quelle autre membrane de la rgion prsynaptique ? Dans le premier cas, il faut envisager que la membrane est recycle avant que la membrane vsiculaire ne se soit tota lement mlange la membrane plasmique. Cela se ferait par un processus de pinocytose au niveau de la membrane prsynaptique. Dans le deuxime cas, le recyclage se ferait au niveau de la membrane priphrique par formation de vsicules recouvertes d'un feutrage, la clathrine (coated vesicles) (fig. 4A). Il faut envisager ensuite une ou plusieurs tapes de transformation de la membrane recycle en membrane vsiculaire adapte au stockage du neurotransmetteur. La rponse cette question ncessite l'emploi de marqueurs spcifiques de la membrane des vsicules et de la membrane plasmique. II - LES SYNAPSES INTERNEURONALES 1 Dans le systme nerveux central, les synapses les plus couramment observes sont celles o l'lment prsynaptique est une terminaison axonale

On dsigne par terminaison axonale, les boutons terminaux (flg. 5) qui sont les terminaisons des branches axonales d'une arborisation terminale et les boutons en passant (voir fig. 13) qui se prsentent sous la forme de renflements situs tout le long des axones non myliniss ou au niveau des noeuds de Ranvier des axones myliniss. Ces deux types de terminaisons axonales tablissent des contacts synaptiques avec divers lments post-synaptiques neuronaux : une rgion dendritique (synapse axo-dendritique), une rgion soma-tique (synapse axo-somatique), ou une rgion axonale (synapse axo-axonique) (flg. 5). Plus rares sont les synapses o l'lment prsynaptique est une rgion dendritique (synapse dendro-dendritique, voir flg. 2D et 14C, ou une rgion somatique (synapses somato-somatique ou somato-dendritique).

Fig. 5 - Divers types de synapses interneuronales. A : Boutons terminaux effectuant des synapses axo-somatiques. B (de haut en bas) : Synapses entre boutons terminaux et une branche dendritique lisse (synapse axo-dendritique) et deux exemples de synapses indentes entre boutons terminaux et pine dendritique (synapses axo-pineuses). C ; Synapse entre une terminaison axonale et une collatrale axonale terminale (synapse axo-axonique). La terminaison axonale " post-synaptique " est elle-mme " prsynaptique " d'une dentrite. D'aprs Hamlyn LH. The fine structure of th mossy fiber endings in th hippocampus of th rabbit. J Anat 1972 : 96 : 112-20 (avec autorisation).

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Observs un faible grossissement, les contacts synaptiques axo-dendritiques prsentent des arrangements trs varis. Consquences fonctionnelles de ces diffrents arrangements

Nous prendrons l'exemple du cortex crbelleux, structure trs organise en couches (flg. 6) et dont les affrences sont bien caractrises. On distingue les cellules de Purkinje, seules cellules de sortie du cortex crbelleux (neurones de type Golgi I) dont l'axone projette aux noyaux crbelleux profonds. Elles ont un corps cellulaire de grand diamtre (20-30 nm) duquel merge un seul tronc dendritique qui s'arborise dans la couche molculaire en de trs nombreuses branches dendritiques pineuses. L'arbre dendritique est plan, les branches dendritiques s'tendant essentiellement dans le plan transversal (fig.6). Ces neurones reoivent deux grands types d'affrences excitatrices : les fibres grimpantes (axones des neurones de l'olive infrieure) et les fibres parallles (axones des neurones en grains du cortex crbelleux). Les affrences inhibitrices viennent des nombreux neurones de circuits locaux prsents dans cette structure : cellules panier, cellules toiles, neurones de Golgi (fig. 6). Une seule fibre grimpante innerve une cellule de Purkinje. Cette innervation est tout fait caractristique : la fibre se divise en de nombreuses collatrales axonales qui pousent la forme de l'arbre dendritique, ces collatrales grimpant le long des dendrites (fig. 7A et B). La fibre grimpante tablit ainsi de trs nombreux contacts synaptiques avec le soma et les dendrites d'une cellule de Purkinje. Ces contacts sont de type axo-dendritique et axo-pineux, l'lment prsynaptique tant un bouton terminal. Une telle organisation synaptique rend cette affrence excitatrice trs efficace : ainsi, un seul potentiel d'action le long de la fibre grimpante est capable d'entraner une rponse de la cellule de Purkinje .

Fig. 6 - Connexions synaptiques des neurones du cortex crbelleux. Sur une coupe effectue au niveau du cortex crbelleux, on observe les diffrentes couches du cortex : partir de la surface (pie-mre), on distingue vers la profondeur, la couche molculaire (mol), la couche des cellules de Purkinje (cP), la couche granulaire (gr) et la substance blanche. Dans le plan sagittal, en bas gauche, sont dessines quatre cellules en grains localiss dans la couche granulaire, qui envoient leurs axones vers la couche molculaire o ils bifurquent en T pour donner les fibres parallles. Ces fibres cheminent paralllement au grand axe du folium, dans le plan transversal. Deux cellules de Purkinje sont montres dans le plan sagittal ainsi qu'une cellule panier dont l'axone donne plusieurs collatrales qui entourent le soma (panier) de plusieurs cellules de Purkinje. Une fibre grimpante s'arborise le long des dendrites d'une des cellules de Purkinje. En comparant les dessins des cellules de Purkinje dans les plans sagittal et transverse, on remarque que l'arbre dendritique des cellules de Purkinje est plan. D'aprs Chan-Palay V et Palay S. Cerebellar cortex. Cytology and organization. Berlin, Heidelberg, New York : Springer Verlag, 1974 (avec autorisation). Les axones des cellules des grains tablissent avec les cellules de Purkinje des contacts tout fait diffrents. Les axones montent dans la couche molculaire o ils bifurquent et s'tendent sur environ 2 mm selon un plan

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perpendiculaire au plan de l'arbre dendritique des cellules de Purkinje et forment ce que l'on appelle les fibres parallles (fig, 6). Ces fibres parallles tablissent quelques synapses en passant avec de nombreuses cellules de Purkinje (environ 50) et chaque cellule de Purkinje reoit des synapses venant d'environ 200 000 fibres parallles. Ce sont des synapses axo-pineuses, entre varicosits axonales et pines dendritiques distales. La consquence d'une telle organisation synaptique est la suivante : l'activation d'une fibre parallle ne peut entraner une rponse de la cellule de Purkinje, l'activation d'une ou mme quelques synapses excitatrices ne permettant pas de dclencher des potentiels d'action postsynaptiques. Il faut l'activation de plusieurs fibres parallles convergeant vers une mme cellule de Purkinje pour dclencher une rponse de cette cellule.

Fig. 7 - Varits des arrangements synaptiques au niveau d'une cellule de Purkinje. Reprsentation sur un mme dessin (A) et sur deux schmas spars (B et C) des arrangements synaptiques entre une fibre grimpante et une cellule de Purkinje (A et B) et entre une cellule panier et une cellule de Purkinje (A et C). A : D'aprs Chan-Palay V et Palay S (voir rf. fig. ?-6). B : D'aprs Scheibel ME et Scheibel AB. Electroencephalogr Clin Neurophysiol 1958 ; Suppl 10 : 43-50 (avec autorisation). C : D'aprs Hamori J et Szentagothai J. The Purkinje cell baskets : ultrastructure of an inhibitory synapse. Acad Biol Hung 1965 ; 15 : 465-79 (avec autorisation). Les cellules en panier sont des neurones de circuits locaux (neurones de type Golgi II) qui inhibent l'activit des cellules de Purkinje. L'axone de ces neurones projette plusieurs cellules de Purkinje et donne de nombreuses collatrales axonales qui s'entourent d'une manire trs caractristique autour du soma des cellules de Purkinje, formant ainsi les paniers . Les branches axonales continuent ensuite leur trajet et se terminent en pinceau autour du segment initial de l'axone des cellules de Purkinje (fig.6 et 7A et C). Une telle organisation permet une inhibition des cellules de Purkinje au point stratgique o naissent les potentiels d'action sodiques, le segment initial. Ceci permet de contrecarrer de faon trs efficace les potentiels excitateurs conduits le long des diffrentes branches dendritiques jusqu'au segment initial de l'axone. 3 Les synapses interneuronales prsentent des caractristiques ultrastructurales qui varient entre deux extrmes, les types 1 et 2 (fig. 8)

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Un classement des synapses d'aprs la forme de leur complexe synaptique a t propos par Gray (1959). En prenant pour modle d'tude le cortex crbral, cet auteur a dfini deux types de complexes synaptiques, les types 1 et 2. Les synapses de type 1 sont asymtriques du fait de la prsence d'un matriel dense aux lectrons plus important du ct post-synaptique. Ces synapses se situent le plus souvent la surface des pines dendritiques ou des branches dendritiques distales. L'lment prsynaptique renferme des vsicules rondes et la fente synaptique est large de 30 nm environ. Les synapses de type 2 sont symtriques du fait de la prsence de rgions denses aux lectrons quivalents des cts pr- et post-synaptiques. L'lment prsynaptique renferme des vsicules ovodes et la fente synaptique est troite. Ces synapses se situent prfrentiellement la surface des troncs dendritiques et du soma. En corrlant les donnes morphologiques aux donnes lectrophysiologiques obtenues au niveau du cortex crbelleux, Gray proposa que les synapses de type 1 seraient des synapses excitatrices et les synapses de type 2 seraient des synapses inhibitrices. Les rgions denses aux lectrons localises du ct cytoplasmique de la membrane prsynaptique reprsentent la grille prsynaptique. Observes sur une coupe transversale au niveau d'une synapse, ces projections denses ont une forme triangulaire, leur base tant appose contre la membrane plasmique. Elles sont relies entre elles par des ponts filamenteux. Sur une coupe parallle au plan de la synapse, elles apparaissent organises en un rseau triagonal et les vsicules les plus proches de la membrane plasmique sont loges entre les projections denses comme des oeufs dans une bote oeufs . La grille prsynaptique pourrait tre une structure dynamique implique dans les processus d'exocytose. Dans le systme nerveux central, les types 1 et 2 reprsentent les extrmes d'un continuum morphologique car les complexes synaptiques peuvent prsenter des formes intermdiaires, ayant la fois des traits appartenant l'un ou l'autre des deux types, par exemple une fente synaptique large (type 1) et peu ou pas de densit post-synaptique (type 2). De plus, il a t montr que la forme des vsicules synaptiques dpend aussi de la technique de fixation utilise.

Fig. 8 - Reprsentation schmatique des synapses de type 1 (synapse asymtrique) et de type 2 (synapse symtrique) selon Gray. III - LA JONCTION NEUROMUSCULAIRE EST L'ENSEMBLE DES CONTACTS SYNAPTIQUES ENTRE L'ARBORISATION TERMINALE D'UN AXONE MOTEUR ET UNE CELLULE MUSCULAIRE STRIE Les motoneurones ou neurones moteurs ont leur corps cellulaire localis dans les noyaux moteurs du tronc crbral ou dans la corne ventrale de la moelle pinire. Les axones de ces neurones sont myliniss et forment les nerfs moteurs crniens ou rachidiens qui innervent les muscles stris squelettiques. En gnral, une cellule musculaire strie est innerve par un seul motoneurone mais un motoneurone peut innerver plusieurs cellules musculaires stries. La gaine de myline de chaque axone s'interrompt lorsque l'axone s'arborise la surface de la cellule musculaire. Les fines branches axonales non mylinises prsentent alors de nombreuses varicosits qui se logent dans une dpression la surface de la cellule musculaire : la gouttire synaptique. Les terminaisons axonales sont recouvertes par des cellules de Schwann non mylinisantes (fig.-9).

Fig. 9 - La jonction neuromusculaire.

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A gauche, photographie d'une jonction neuromusculaire de rat observe au microscope lectronique balayage. La partie terminale de l'axone (ax) est dtache de la cellule musculaire (m) afin de montrer la gouttire synaptique (g) ; c : capillaire sanguin ; n : nerf moteur ; s : noyau de la cellule de Schwann. D'aprs Matsuda Y et al. Scanning lectron microscopic study of denervated and reinnervated neuromuscular junction. Muscle Nerve 1988 ; 11 ; 1266-71 (avec autorisation). A droite, Micrographie d'une fibre musculaire (strie) mettant en vidence l'appareil sous-neural d'une plaque motrice (partie sombre: mise en vidence de l'activit actylcholinestrasique de la plaque motrice par la technique de Kolle)(X 650). 1 Dans les terminaisons axonales, les vsicules synaptiques sont concentres au niveau de barres denses aux lectrons. Elles renferment de l'actylcholine (fig. 10)

La jonction neuromusculaire est forme par la juxtaposition de la terminaison d'un axone moteur et du domaine sous-synaptique de la fibre musculaire strie, ces deux lments tant spars par une fente de 50 100 nm de large. Sur une coupe transversale effectue au niveau de la jonction neuromusculaire, on observe en microscopie lectronique une organisation trs particulire. Les vsicules synaptiques prsentes dans l'lment prsynaptique sont petites (40 60 nm de diamtre), peu denses aux lectrons et renferment de l'actylcholine. D'autres vsicules plus grandes (80 120 nm de diamtre) et contenant un matriel dense aux lectrons sont aussi prsentes mais dans une proportion trs faible (1% de la population totale). Les vsicules sont concentres dans des rgions o se situe un matriel dense aux lectrons, les barres denses, rgions fonctionnellement homologues de la grille prsynaptique des synapses interneuronales. Ces barres denses ont une largeur de 100 nm et sont disposes perpendiculairement au grand axe de chaque branche axonale, les vsicules tant alignes le long de chacun de leurs cts. L'ensemble barre denses-vsicules synaptiques forme une zone active prsynaptique (Couteaux 1960). Il existe plusieurs zones actives par varicosit. Elles sont situes en face des replis de la membrane plasmique post-synaptique. Chaque zone active avec les replis du sarcolemme qui lui font face forme un complexe synaptique. La jonction neuromusculaire est ainsi constitue d'un grand nombre de complexes synaptiques. Le neurotransmetteur de la jonction neuromusculaire est l'actylcholine.

Fig. 10 - Ultrastructure de la jonction neuromusculaire. En haut, Microphotographie d'une section longitudinale d'une fibre musculaire passant par la zone quatoriale d'une plaque motrice montrant les axones terminaux (Ax) et les replis de la membrane postsynaptique (sarcolemmique; RMPS) qui forment l'appareil sous-neural; FM, fibre musculaire; VS, vsicules synaptiques. Microphotographie X 7 000.

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En bas, microphotographie d'une coupe effectue au niveau de la jonction neuromusculaire de batracien observe au microscope lectronique. Dans la terminaison axonale, on distingue des mitochondries et de trs nombreuses vsicules. La membrane plasmique axonale prsente des figures d'exocytose. Dans la fente synaptique se situe la membrane basale. La membrane musculaire post-synaptique prsente de nombreux replis. Photo Pcot-Dechavassine. 2 La fente synaptique est troite et occupe par une membrane basale qui renferme l'enzyme de dgradation de l'actylcholine, l'actylcholinestrase

La membrane musculaire (sarcolemme) post-synaptique est couverte, du ct extracellulaire, d'une couche de matriel dense aux lectrons, la membrane basale (flg. 10). Cette membrane qui suit les replis du sarcolemme, est un tissu conjonctif scrt parles cellules de Schwann non mylinisantes qui recouvrent les terminaisons de l'axone. Elle est compose, entre autres, de collagne, de protoglycanes, de laminine. C'est au niveau de la membrane basale qu'est localise une des formes de l'enzyme de dgradation de l'actylcholine, la forme asymtrique de l'actylcholinestrase. Les molcules d'actylcholine libres dans la fente synaptique, lors de l'activit des synapses neuromusculaires, traversent cette membrane basale, dont la structure est faite de mailles lches, pour aller se fixer sur leurs rcepteurs post-synaptiques. Une partie des molcules d'actylcholine est donc dgrade avant d'atteindre la membrane post-synaptique. Les autres molcules sont dgrades aprs s'tre fixes. Ce systme de dgradation de l'actylcholine est un systme d'inactivation du neurotransmetteur particulirement efficace. 3 Les rcepteurs nicotiniques de l'actylcholine sont situs en forte densit au niveau des crtes des replis membranaires post-synaptiques

Au niveau post-synaptique, la membrane plasmique musculaire, le sarcolemme, prsente chez les mammifres, de nombreux replis. En utilisant un ligand radioactif des rcepteurs nicotiniques de l'actylcholine, l'-bungarotoxine marque avec un isotope radioactif ou avec une molcule fluorescente, on a pu mettre en vidence une accumulation de matriel radioactif au niveau des crtes des replis du sarcolemme. Les techniques immunocytochimiques ont donn les mmes rsultats. Ainsi, dans la jonction neuromusculaire, les rcepteurs de l'actylcholine, qui sont des rcepteurs de type nicotinique, sont accumuls dans la membrane musculaire post-synaptique, et plus prcisment au niveau des crtes des replis membranaires. Ils sont ancrs au rseau complexe du cytosquelette par l'intermdiaire d'une protine. Le rcepteur nicotinique est une glycoprotine transmembranaire forme de 5 sous-units. Sa structure et ses caractristiques fonctionnelles sont donnes plus loin. 4 Mcanismes responsables de l'accumulation des rcepteurs post-synaptiques au niveau des replis de la membrane musculaire post-synaptique

Les rcepteurs nicotiniques de l'actylcholine sont, dans la jonction neuromusculaire adulte, localiss en forte densit (environ 10 000 molcules/(j.m2) uniquement au niveau des rgions post-synaptiques et ne sont prsents qu'en trs faible densit (environ 10 molcules/p.m2) dans la membrane musculaire non synaptique (membrane extrajonctionnelle). Sous la terminaison nerveuse, la cellule musculaire est dpourvue de myofilaments d'actine et myosine. A ce niveau, 4 8 noyaux cellulaires sont accumuls, ce sont les noyaux fondamentaux. Les noyaux cellulaires, situs en dehors de la rgion post-synaptique, sont les noyaux sarcoplasmiques. L'tablissement de ce domaine soussynaptique trs organis se fait en plusieurs phases. On observe au cours de la maturation de la jonction neuromusculaire (fig. 11) : L'augmentation du nombre de rcepteurs nicotiniques (1 et 2) lors de la fusion des myoblastes en myotubes due une nosynthse de ces rcepteurs. Ceci est indpendant de l'activit musculaire. La formation d'aggrgats de rcepteurs nicotiniques sous la terminaison nerveuse (3). Ceci est indpendant de la transmission synaptique car les bloquants de la transmission nicotinique, comme le curare, n'ont pas d'effet sur cette phase. Quel est alors le signal antrograde transmis par le nerf? Existe-t-il aussi des signaux post-synaptiques ? La disparition des rcepteurs extrajonctionnels (4 et 5). Ceci rsulte de la rpression au niveau transcriptionnel de la synthse des rcepteurs dans ces rgions musculaires. C'est l'activit lectrique des cellules musculaires (et non leur activit contractile) qui est responsable de cette phase. Mais quels sont les messagers qui lient l'activit lectrique la rgulation de l'expression des gnes du rcepteur nicotinique ? La stabilisation des rcepteurs nicotiniques dans la membrane post-synaptique (5). Ceci est d au fait que l'expression du rcepteur nicotinique serait restreinte la partie sous-synaptique des cellules musculaires. Ainsi seuls les noyaux fondamentaux exprimeraient, dans les cellules musculaires adultes, le rcepteur nicotinique. Ainsi, on a pu mettre en vidence une rgulation au niveau transcriptionnel de l'expression des gnes du rcepteur nicotinique dans les phases 1 et 3. De plus, l'activit synaptique peut affecter des processus posttranscriptionnels comme ceux de la phase 2. Enfin, des seconds messagers seraient impliqus dans la rgulation positive de l'expression du rcepteur nicotinique dans la rgion jonctionnelle et dans sa rgulation ngative dans les rgions extrajonctionnelles. Ces rsultats reprsentent une base d'tude des mcanismes d'tablissement et de maintien de la complmentarit pr- post-synaptique dans les autres types de synapse. IV - LA SYNAPSE ENTRE NEURONE POST-GANGLIONNAIRE VGTATIF ET CELLULE MUSCULAIRE LISSE Les cellules musculaires lisses se trouvent dans la plupart des organes viscraux (appareil digestif, utrus, vessie...), mais aussi dans la paroi des vaisseaux sanguins et autour de la racine des poils et cheveux. Elles sont innerves par les neurones post-ganglionnaires du systme nerveux autonome (neurones orthosympathiques et neurones parasympathiques. 1. L'lment prsynaptique est une varicosit de l'axone post-ganglionnaire

Les axones des neurones post-ganglionnaires ne sont pas myliniss. A l'approche des muscles lisses, les axones se divisent en de nombreux et fins filaments de 0,1-0,5 rn de diamtre qui cheminent seuls ou en faisceaux sur de longues distances, le long des cellules musculaires lisses (fig. 13A). Chacun de ces filaments prsente le long de son

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trajet des renflements ou varicosits de 0,5 2 m de diamtre, espacs les uns des autres de 3 5 m. Les varicosits renferment des mitochondries et de nombreuses vsicules synaptiques alors que les rgions axonales intervaricosits renferment principalement des lments du cytosquelette (fig. 13B). Ces varicosits sont les lments prsynaptiques. On ne distingue pas de rgions denses aux lectrons au niveau de la membrane prsynaptique, ce qui fait penser qu'il n'existerait pas, dans ces synapses, de zone prfrentielle d'exocytose.

Fig. 11 - Expression du rcepteur nicotinique au cours de la formation de la jonction neuromusculaire. Les points noirs symbolisent le rcepteur nicotinique (nAChR). (1) et (2): fusion des myoblastes en myotubes et approche du cne de croissance de l'axone. (3) : le cne de croissance contacte le myotube et entrane une accumulation de rcepteurs nicotiniques ce niveau. (4) : plusieurs terminaisons motrices convergent vers un mme aggrgat de rcepteurs nicotiniques mas (5) une seule terminaison se stabilise et les replis du sarcolemme apparaissent. D'aprs Laufer R et Changeux JP. Activity dpendent rgulation of gne expression in muscle and neu-ronal cells. Mol Neurobiol 1989; 3: 1-53 (avec autorisation).

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Le neurotransmetteur des neurones post-ganglionnnaires orthosympathiques est la noradrnaline (fig. 12A). Les varicosits de ces axones renferment essentiellement des petites vsicules synaptiques granulaires, c'est--dire prsentant une rgion centrale dense aux lectrons (30 50 nm de diamtre), mais aussi des grandes vsicules granulaires (60 120 nm de diamtre) et des petites vsicules agranulaires. La noradrnaline est stocke dans les petites et grandes vsicules granulaires. Le neurotransmetteur des neurones post-ganglionnaires parasympathiques est l'actylcholine (fig. 12). Les varicosits de ces axones renferment essentiellement des petites vsicules agranulaires mais aussi de grandes vsicules granulaires. L'actylcholine est stocke dans les petites vsicules agranulaires.

Fig.12 - Neurones effrents du systme orthosympahique (A) et parasympathique (B) et les synapses entre neurones post-ganglionnaires et fibres musculaires lisses. Les terminaisons axonales des neurones post-ganglionnaires sont des varicosits et les contacts synaptiques sont de type boutons en passant . ACh : actylcholine, NA : noradrnaline, flches : sens de propagation des potentiels d'action. 2. La largeur de la fente synaptique est trs variable

Dans les cas o elle est la plus faible, au niveau du vas deferens ou de la pupille par exemple, elle est de l'ordre de 15-20 nm. Par contre, au niveau de la paroi des vaisseaux, les contacts les plus proches sont espacs de 50 100 nm. . 3. La synapse autonome post-ganglionnaire est spcialise pour assurer un large effet du neurotransmetteur

La grande largeur de la fente synaptique entrane un effet du neurotransmetteur sur une surface membranaire post-synaptique plus tendue que dans le cas de la jonction neuromusculaire ou des synapses centrales o la scrtion du neurotransmetteur est trs focalise vers une petite rgion post-synaptique. De plus, dans certaines synapses autonomes, on ne distingue pas de spcialisation de la membrane prsynaptique, cela laissant supposer que la zone active est tendue, les vsicules n'ayant alors pas d'orientation prfrentielle pour l'exocytose. Enfin, l'arrangement des axones post-ganglionnaires en un plexus dense contribue aussi la diffusion large des messages prsynaptiques. Ainsi, l'activation d'un neurone post-ganglionnaire prsynaptique entrane l'activation de nombreuses cellules musculaires lisses post-synaptiques. Ces cellules musculaires tant connectes entre elles par de nombreuses jonctions communicantes, cette excitation se transmet encore d'autres cellules musculaires travers ces jonctions.

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Fig. 13 - Synapse nerf-muscle lisse. A : Microphotographie de cellules musculaires lisses de l'intestin (M) et de faisceaux d'axones post-ganglionnaires (systme nerveux parasympathique, Ax) demi recouverts par une cellule de Schwann (S), coups transversalement et observs au microcospe lectronique. Noter la largeur de la fente synaptique. B : Coupe longitudinale d'un axone post-ganglionnaire montrant une varicosit remplie de vsicules et une rgion intervaricosit. La cellule musculaire lisse post-synaptique renferme de nombreuses mitochondries. Documents Jacques Taxi. V - EXEMPLE D'UNE SYNAPSE NEURO-GLANDULAIRE LA SYNAPSE ENTRE ORTHOSYMPATHIQUE ET CELLULE CHROMAFFINE DE LA MDULLOSURRNALE (fig. 14) NEURONE PRGANGLIONNAIRE

La mdullosurrnale est la partie centrale de la surrnale, glande endocrine situe au-dessus de chaque rein. Elle est forme de cellules scrtrices, les cellules chromaffines ainsi appeles car elles sont colores par les sels de chrome. La mdullosurrnale est innerve par des neurones prganglionnaires orthosympathiques dont les axones forment le nerf splanchnique. Lorsque ce nerf est stimul, les cellules chromaffines scrtent dans le sang essentiellement de l'adrnaline mais aussi de la noradrnaline et des enkphalines. Ces hormones transportes par le sang agissent sur de nombreux tissus cibles et notamment sur le coeur et les vaisseaux sanguins. L'lment prsynaptique de cette synapse est la terminaison axonale des neurones prganglionnaires orthosympathiques splanchniques. Les corps cellulaires de ces neurones sont situs dans la corne intermdiaire de la moelle pinire. Les axones sont en grande majorit non myliniss et sont entours par les prolongements des cellules de Schwann non mylinisantes. Cette gaine est prsente jusqu' ce que les collatrales axonales pntrent dans l'espace jonctionnel. Les terminaisons axo-nales sont essentiellement des boutons terminaux et prsentent un diamtre de 1 3m. Elles renferment des vsicules claires (de 10 60 nm de diamtre) et quelques vsicules coeur dense ou granulaires (de 25 115 nm de diamtre). Le neurotransmetteur de cette synapse est l'actylcholine. Les boutons terminaux effectuent avec les cellules chromaffines des contacts synaptiques de formes varies. Ils se caractrisent par une fente synaptique troite (15-20 nm) et la prsence de zones pr- et post-synaptiques denses aux lectrons semblables celles observes au niveau des synapses interneuronales centrales. Dans la rgion post-synaptique, le cytoplasme des cellules chromaffnes est dpourvu de granules chromaffines, organites de stockage des hormones de la mdullosurrnale. Dans le reste du cytoplasme, on observe par contre de trs nombreux granules chromaffnes. Ces granules sont colors par les sels de chrome, ceux-ci ragissant

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avec l'adrnaline pour former un prcipit jaune brun. La morphologie de ces contacts synaptiques, espace extracellulaire troit et espace de diffusion du neurotransmetteur limit par la prsence des cellules de Schwann non mylinisantes qui recouvrent les terminaisons axonales, laisse supposer que l'actylcholine libre par les terminaisons axonales orthosympathiques agit trs localement au niveau des cellules chromaffines. L'actylcholine, en se fixant sur des rcepteurs nicotiniques postsynaptiques, entrane une dpolarisation de la cellule chromaffine et une entre d'ions a2*. Ces ions vont permettre le dclenchement de l'exocytose des granules chromaffines et la libration des hormones dans le sang.

Fig. 14 - Synapses entre neurone prganglionnaire orthosympathique et cellules chromaffnes de la mdullosurrnale. A : Les neurones prganglionnaires ont leurs corps cellulaires localiss dans la moelle pinire et leurs axones forment le nerf splanchnique orthosympathique. Ces neurones innervent les cellules chromaffines. B : Terminaison axonale post-ganglionnaire effectuant des synapses multiples avec des cellules chromaffnes. B : D'aprs Coupland RE. Electron microscopic observations on th structure of th rat adrenal medulla. II. Normal innervation. J Anat (Lond) 1965 ;99 : 255-72 (avec autorisation).

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