Cinétique de rinçage et recherche de traces des

ingrédients des détergents pour LDI:

validation du choix des traceurs et optimisation
des temps de cycles

Dr. Gaétan RAUWEL– Direction scientifique – Laboratoires ANIOS

Journées Internationales Francophones de Stérilisation – 28 septembre 2012

 Traitement des dispositifs médicaux
Contexte
Une préoccupation majeure
Lutte contre le risque des EST

Minimiser les risques de transmissions

inter-humaines des prions

1. Contexte

5 4 Laveur
Stérilisation désinfecteur
Traitement des D.M

1 réutilisables

3
2
Bloc opératoire Rinçage

Nettoyage
pré-désinfection
 Optimisation des cycles de lavage en LDI

Objectifs

1. Evaluer le risque chimique associé à l’emploi du détergent prionicide

ACTANIOS® LDI en laveurs désinfecteurs pour les instruments de chirurgie et de
cœliochirurgie
• Cycles « standards (I)»
• Cycles « Prion (P)» selon instruction N°DGOS/R13/2011/449 du 01/12/2011
2. Proposer une méthode expérimentale destinée à mesurer le risque chimique associé
aux résidus du détergent prionicide ACTANIOS ® LDI en laveur désinfecteur
Belimed ® WD250

3. Objectiver les principaux paramètres influençant la qualité du rinçage:

minimalisation des phases de rinçage, baisse de la température d’eau de rinçage
et par conséquent du temps total des cycles « standard (I)» et « prion (P) »
2. Matériels et méthodes
 Optimisation des cycles de lavage en LDI

Matériels et méthodes
ACTANIOS ® LDI : détergent alcalin prionicide
• Formule renforcée en intensité et en cinétique de détergence.
• Recommandé en présence de souillures organiques importantes.
• pH alcalin.
• Dilution, Température et Temps de Contact adaptés selon la
performance recherchée (Détergence / Détergence - Désinfection -
Inactivation des prions).
• Ne contient ni phosphate, ni EDTA, ni NTA.
• Activité sur prion : Inactivant total à 1%-10 min-55°C (selon PSP)

ANIOS RHW
• Activateur de séchage
• Lubrifiant de l’instrumentation

ANIOS RN
• Rinçant neutralisant de l’instrumentation
• Effet complexant des minéraux
 Optimisation des cycles de lavage en LDI

Matériels et méthodes

Laveur désinfecteur BELIMED® WD250

Emploi d’un échantillon d’ ACTANIOS® LDI de « validation »

• Ajout d’un chromophore « tracker » dans le détergent (concept breveté)

Méthodes analytiques spécifiques et validées (modèle pharmaceutique)

• Chromatographie Liquide Haute Performance (HPLC)
• Carbone Organique Total (COT)
• Conductimétrie
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Description des cycles «standard I» et «prion P»

Cycle « standard I » Cycle « Prion P »

1 min 1 min
1. Prélavage
Eau de réseau
Eau Froide Eau Froide

5 min 10 min
2. Lavage 55°C 55°C
Eau adoucie
Actanios LDI 0.5% Actanios LDI 1 %

1 min 1 min

3. Rinçage 40°C 40°C

Eau adoucie
Sans neutralisant Anios RN 0.2%

1 min 1 min
4. Rinçage
Eau osmosée 40°C 40°C

1 min 1 min
5. Rinçage
Eau osmosée 40°C 40°C

3 min 3 min
6. Rinçage
Eau osmosée 93°C 93°C
+ Anios RHW
Anios RHW 0.2% Anios RHW 0.2%
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Méthode séparative Carbone provenant du détergent, du

Suivi du Tracker contenu dans le détergent rinçant ou des salissures résiduelles
Méthode spécifique Méthode non spécifique

Résidus de détergent Electro analyse : mesure des propriétés

Méthode spécifique (COT et HPLC) conductrices d’une solution
Méthode non spécifique
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Chromatogrammes
m AU m AU

5.812
260nm ,4nm (1.00) 2.75 260nm ,4nm (1.00)

3.464
60
2.50

55
2.25
50
2.00
45
10 ppm de tracker 1.75
40
= 1000 ppm d’ACTANIOS LDI 1.50
0,02 ppm de Tracker
35

= 2 ppm d’ACTANIOS LDI

1.25
30
1.00
25
0.75
20
0.50
15

5.888
2.590

0.25
10
2.475

3.458

0.00
5
2.933
3.136
3.285

-0.25
0

-5 -0.50

0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 m in 0.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 m in

•Colonne : HyPURITY (HYPERSIL) C18, 5µm, 4.6x250mm

•Détection : 260 nm
•Phase mobile : H2O / Acétonitrile (70/30)
•Débit : 1 mL/min
•Température de colonne : 30°C
•Injections : 50µL
•Temps de rétention : environ 6 minutes
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Le COT est la quantité de carbone lié à un composé organique.

COT
Carbone
Organique
Total
Sucres,
CT
Carbone Total - CIT
Carbone Inorganique Total =
Carbonates, acides carboniques, etc..
détergent,
graisses,
alcools, etc…
…

Principe du COT
1. Elimination du Carbone Inorganique Total (CIT) par agitation
2. Minéralisation du CT en CO2
3. Photométrie : dosage du CO2 et détermination du COT
4. Seuil de détection à 2 ppm
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Le COT est la quantité de carbone lié à un composé organique.

Composition de l’ACTANIOS ® LDI en %
Hydrotrope
Tensio-actif

Antifloculant

Anticorrosif

Agent alcalin

Contribution des composants au COT

Composants COT (mg/l)
Anticorrosif <2
Agent alcalin <2
Antifloculant 49
Tensioactifs 54
Hydrotropes 218
Actanios LDI 326
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Le COT est la quantité de carbone lié à un composé organique.

Composition de l’ACTANIOS ® LDI en %
Hydrotrope
Tensio-actif

Antifloculant

Anticorrosif

Agent alcalin

Contribution des composants au COT

Composants COT (mg/l)
Anticorrosif <2
Agent alcalin <2
Antifloculant 49
Tensioactifs 54
Hydrotropes 218
Actanios LDI 326
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Le COT est la quantité de carbone lié à un composé organique.

Composition de l’ACTANIOS ® LDI en % Répartition du carbone dans l'ACTANIOS ® LDI
Hydrotrope Antifloculant
15%
Tensio-actif

Antifloculant

Anticorrosif Tensio-actif
17%
Hydrotrope
Agent alcalin 68%

Contribution des composants au COT Cinétique de rinçage des composants carbonés

Composants COT (mg/l) 350
300 Détergent
Anticorrosif <2

COT (mg/l de C)
250 prionicide
Agent alcalin <2 Hydrotrope
200
Antifloculant 49 150
Antifloculant
Tensioactifs 54 100
50 Tensio-actif
Hydrotrope 218
0
Actanios LDI 326 L R1 R2 R3 R4
 Optimisation des cycles de lavage en LDI
Les techniques de recherches de traces

Principe :
Une solution ionique, aussi appelée électrolyte, est conductrice de l'électricité. La présence d’ions,
chargés électriquement, assure le caractère conducteur de la solution. La conductimétrie est une
méthode d’electro-analyse qui permet de mesurer les propriétés conductrices d'une telle solution.

Courbes de conductivité
des détergents et rinçants machine
7000
ACTANIOS LDI
Conductivité (µS/cm)

6000
ANIOS RN
5000 ANIOS RHW
4000

3000

2000

1000

0
0 20 40 60 80 100
Concentration de produit (ppm)
3. Résultats
 Résultats : cycle « standard » (I.2 à I.6)
Méthode A B C Moyenne Ecart Type
54.07 55.95 54.21
RT HPLC (ppm) 54.7 0.87
I.2 53.57 55.27 54.58
Lavage COT (mg/L de C) 310.0 310.0 280.0 300.0 17.3
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 3450 3570 3370 3463 101

2.32 2.41 2.38

RT HPLC (ppm) 2.38 0.04
I.3 2.347 2.41 2.39
Rinçage COT (mg/L de C) 11 12.1 12.2 11.8 0.7
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 621 623 613 619 5

0.13 0.13 0.16

RT HPLC (ppm) 0.14 0.02
I.4 0.13 0.13 0.17
Rinçage COT (mg/L de C) 3.1 2.1 2.5 2.6 0.5
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 51 49 60 53 6

0.02 < Seuil 0.02

RT HPLC (ppm) 0.02 0.00
I.5 0.13 < Seuil 0.02
Rinçage COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 17.8 15.7 16.8 17 1

I.6 RT HPLC (ppm)

< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil < Seuil
Rinçage
COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée
+ Anios RHW Conductivité (µS/cm) 12.8 12.9 13.9 13 1
 Résultats : cycle « standard » (I.2 à I.6)
Méthode A B C Moyenne Ecart Type
54.07 55.95 54.21
RT HPLC (ppm) 54.7 0.87
I.2 53.57 55.27 54.58
Lavage COT (mg/L de C) 310.0 310.0 280.0 300.0 17.3
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 3450 3570 3370 3463 101

2.32 2.41 2.38

RT HPLC (ppm) 2.38 0.04
I.3 2.347 2.41 2.39
Rinçage COT (mg/L de C) 11 12.1 12.2 11.8 0.7
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 621 623 613 619 5

0.13 0.13 0.16

RT HPLC (ppm) 0.14 0.02
I.4 0.13 0.13 0.17
Rinçage COT (mg/L de C) 3.1 2.1 2.5 2.6 0.5
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 51 49 60 53 6

0.02 < Seuil 0.02

RT HPLC (ppm) 0.02 0.00
I.5 0.13 < Seuil 0.02
Rinçage COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 17.8 15.7 16.8 17 1

I.6 RT HPLC (ppm)

< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil
< Seuil < Seuil
Rinçage
COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée
+ Anios RHW Conductivité (µS/cm) 12.8 12.9 13.9 13 1
 Résultats : cycle « Prion » (P.2 à P.6)
Méthode A B C Moyenne Ecart Type
114.1 110.9 116.2
RT HPLC (ppm) 113.30 2.53
P.2 113.3 110.4 116.3
Lavage COT (mg/L de C) 540.0 600.0 490.0 543.3 55.1
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 7040 6870 7370 7093 254

6.5 6.45 5.42

P.3 RT HPLC (ppm)
6.51 6.44 5.44
6.13 0.54
Rinçage
COT (mg/L de C) 24 27.6 23.5 25.0 2.2
Eau adoucie
+ Anios RN Conductivité (µS/cm) 672 675 722 690 28

0.37 0.40 0.37

RT HPLC (ppm) 0.38 0.02
P.4 0.34 0.4 0.37
Rinçage COT (mg/L de C) 3.1 3.5 3.1 3.2 0.2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 68.5 73.4 67.9 70 3

0.04 0.04 0.04

RT HPLC (ppm) 0.04 0.00
P.5 0.04 0.04 0.004
Rinçage COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 18.4 18.9 15.4 18 2

P.6 RT HPLC (ppm)

0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0,02 0,00
Rinçage
COT (mg/L de C) <2 13.8 <2 <2 <2
Eau osmosée
+ Anios RHW Conductivité (µS/cm) 12.9 18.7 13 14 3
 Résultats : cycle « Prion » (P.2 à P.6)
Méthode A B C Moyenne Ecart Type
114.1 110.9 116.2
RT HPLC (ppm) 113.30 2.53
P.2 113.3 110.4 116.3
Lavage COT (mg/L de C) 540.0 600.0 490.0 543.3 55.1
Eau adoucie Conductivité (µS/cm) 7040 6870 7370 7093 254

6.5 6.45 5.42

P.3 RT HPLC (ppm)
6.51 6.44 5.44
6.13 0.54
Rinçage
COT (mg/L de C) 24 27.6 23.5 25.0 2.2
Eau adoucie
+ Anios RN Conductivité (µS/cm) 672 675 722 690 28

0.37 0.40 0.37

RT HPLC (ppm) 0.38 0.02
P.4 0.34 0.4 0.37
Rinçage COT (mg/L de C) 3.1 3.5 3.1 3.2 0.2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 68.5 73.4 67.9 70 3

0.04 0.04 0.04

RT HPLC (ppm) 0.04 0.00
P.5 0.04 0.04 0.004
Rinçage COT (mg/L de C) <2 <2 <2 <2 <2
Eau osmosée Conductivité (µS/cm) 18.4 18.9 15.4 18 2

P.6 RT HPLC (ppm)

0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0.02
0,02 0,00
Rinçage
COT (mg/L de C) <2 13.8 <2 <2 <2
Eau osmosée
+ Anios RHW Conductivité (µS/cm) 12.9 18.7 13 14 3
 Optimisation du cycle « Prion »
Suppression du neutralisant acide
Cycle Prion

1. Prélavage 1 min
Eau de réseau
Eau Froide

10 min
2. Lavage
Eau adoucie 55°C

Actanios LDI 1 %

1 min
3. Rinçage
Eau adoucie 40°C

Anios RN 0,2%

4. Rinçage 1 min
Eau osmosée
40°C

5. Rinçage 1 min
Eau osmosée
40°C

3 min
6. Rinçage
Eau osmosée 93°C

Anios RHW 0.2%

 Optimisation du cycle « Prion »
Suppression du neutralisant acide
Cycle Prion

1. Prélavage 1 min
Eau de réseau
Eau Froide

10 min
2. Lavage
Eau adoucie 55°C

Actanios LDI 1 %

1 min
3. Rinçage
Eau adoucie 40°C

Anios RN 0,2%

4. Rinçage 1 min
Eau osmosée
40°C

5. Rinçage 1 min
Eau osmosée
40°C

3 min
6. Rinçage
Eau osmosée 93°C

Anios RHW 0.2%

 Optimisation du cycle « Prion »
Suppression du neutralisant acide
Cycle Prion sans rinçant acide Résultats analytiques

1. Prélavage 1 min
Eau de réseau
Eau Froide
Moyenne Ecart Type
10 min
RT HPLC (ppm) 106,8 2,20
2. Lavage
Eau adoucie 55°C COT (mg/L de C) 364,6 31,07

Actanios LDI 1 %

RT HPLC (ppm) 5,14 0.68

COT (mg/L de C) 19,7 1,63

RT HPLC (ppm) 0,18 0,14

1 min COT (mg/L de C) 2 0.2

4. Rinçage
Eau osmosée
40°C
RT HPLC (ppm) 0,02 0
5. Rinçage 1 min
COT (mg/L de C) <2 <2
Eau osmosée
40°C

3 min
6. Rinçage
Eau osmosée 93°C

Anios RHW 0.2%

 Optimisation du cycle « Prion »
Suppression du neutralisant acide
Recherche de traces du détergent Actanios ® LDI sur l’instrumentation

1- Analyse après désorption des résidus hydrosolubles

Immersion de chaque instrument testé dans 100mL d’eau ultra pure
Exposition 15 min aux US (45 HZ)
Analyse de l’eau de rinçage par HPLC et COT

Instruments

Cycle A Cycle B Cycle C

Base Digestive 4 Curetage Gynéco 5 Base Ortho 4
RT HPLC (ppm) < seuil* < seuil* < seuil*
COT (mg/L de C) < 2mg/L < 2mg/L < 2mg/L
Conductivité (µS/cm) 4µS/cm 2µS/cm 2µS/cm
4. Conclusion
 4. Conclusion

L’emploi de l’ACTANIOS® LDI avec tracker permet la validation

de la séquence des cycles en laveurs désinfecteurs (modèle pharmaceutique)
Techniques analytiques spécifiques (seuil de détection 2 ppm de détergent)
Maitrise du risque chimique (résidus chimiques et matériovigilance)
Meilleure connaissance du comportement des produits
Optimisation du nombre de produits
Selon méthode ISO 10993-5
Effet cytotoxique de l’Actanios ® LDI: > 10 ppm
Optimisation de la durée des cycles

Durée des Cycle Cycle

Gain
cycles Initial Optimisé
«Standard» 63 min 52 min 17,4%
«Prion» 68 min 58 min 14,7%