Thème n°4 

:
TS Autour du lait.

Mission n°4 : Distribution des espèces acido-basiques selon le pH.

Votre mission :
 Réaliser des mesures de pH et d’absorbance (Réutiliser la loi de Beer-lambert).
 Tracer un diagramme de distribution des espèces.

Le BBT (Bleu de BromoThymol) est un indicateur coloré acido-basique. Sa forme acide (notée a) et sa forme
basique (notée b) n’ont pas la même couleur.
L’objectif du Tp est de déterminer la concentration en espèce acide et basique selon le pH de la solution.

 Sachant que le maximum d’absorption se situe à λ ~ 430 nm pour l’espèce acide « a » et λ ~ 590 nm pour
l’espèce basique « b », déterminer les couleurs de la forme acide et basique du BBT (Cf Annexe n°1).

 Au bureau, étalonner le pH-mètre puis réaliser le montage de l’Annexe n°2.

 Mesurer l’absorbance du BBT (Cf Annexe n°3) à la longueur d’onde de 590 nm au pH de votre choix (en
ajoutant goutte à goutte de l’acide chlorhydrique concentré) et noter vos mesures dans le fichier Excel intitulé
« Fichier_pKa_BBT » fourni. Les mesures obtenues sont le fichier Excel ci-joint.

 Exprimer l’absorbance de la solution « A » à un pH quelconque grâce à la loi de Beer-Lambert (Cf Annexe
n°4) en fonction de Aa et Ab puis en fonction de εa(λ), l, [a]eq, εb-(λ) et [b]eq.
 Sachant que, à un pH quelconque, C°BBT = [a]eq + [b]eq, exprimer « A » à un pH quelconque en fonction de
εa(λ), εb(λ), l, [a]eq et C°BBT puis en fonction de εa(λ), εb-(λ), l, [b]eq et C°BBT.

 Sachant que si le pH est très acide, on peut négliger l’absorbance due à la forme basique du BBT, on a alors
A ~ Aacide et [a]eq ~ C°BBT. Exprimer « Aacide » en fonction de εa(λ), l et C°BBT grâce à la loi de Beer-Lambert.
 De même, si le pH est très basique, on a alors A ~ A basique et [b]eq ~ C°BBT. Exprimer « Abasique » en fonction
de εb(λ), l et C°BBT grâce à la loi de Beer-Lambert.
 Exprimer [a]eq en fonction de A, Aacide, Abasique, et C°BBT.

 Exprimer [b]eq en fonction de A, Aacide, Abasique, et C°BBT.

On note %a = [a]eq / C°BBT . 100 et %b = [b]eq / C°BBT . 100

 Exprimer %a puis %b en fonction de A, Aacide et Abasique puis calculer %a dans la cellule E4 et %b dans la
cellule F4 du fichier Excel et recopier la formule vers le bas pour toutes les valeurs de pH effectuées.

 Tracer le diagramme de distribution des espèces (= les courbes %a = f(pH) et %b = f(pH) sur un même
graphique) puis déterminer le pH de la solution quand %a = %b = 50%.

 Pour pH ε ] 5 ; 9 [, calculer X = log ([b]eq/[a]eq) dans la colonne D du fichier Excel puis la recopier la
formule. Tracer le graphique pH = f(X) et modéliser la courbe obtrenue.
 !! La fonction log se note LOG10(...) sous Excel !!

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 Thème n°4 :
TS Autour du lait.

Annexe n°1 : L’étoile des couleurs.

 La couleur perçue par notre œil est la complémentaire des radiations absorbées

 Sur l’étoile des couleurs ci-contre, la couleur perçue par notre œil est
diamétralement opposée à la « couleur » absorbée.

Annexe n°2 : Montage expérimental.

Solution de
 Remplir le cristallisoir d’eau déminéralisé. soude
pH-mètre étalonné
 Verser de la soude de sorte que le pH soit
basique (pH entre 10 et12).
 Verser du BBT (au moins 20 gouttes) de sorte
que la solution soit assez colorée mais sans
saturer le spectrophotomètre. ~1L d’eau distillée
+ BBT

Annexe n°3: Utiliser le spectrophotomètre SecomamPrim.

Grâce à un spectrophotomètre, on peut obtenir l’absorbance (grandeur notée « A » sans unité comparant le flux
lumineux incident et le flux lumineux transmis) en fonction de la longueur d’onde pour λ є [330 ; 800] nm.

 Entrer la longueur d’onde d’étude choisie puis valider

 Réaliser un « blanc » (mesure l’absorbance de la cuve et de la solution sans l’espèce chimique étudiée)

 Rincer la cuve avec la solution puis placer la cuve contenant la solution dans le spectrophotomètre
Attention : Tenir la cuve tout en haut afin de ne pas salir les faces où entre et sort le faisceau lumineux.

 Lire l’absorbance.

Annexe n°4 : Rappel de la loi de Beer-Lamber.

 On rappelle que l’absorbance « A » d’une solution est la somme des absorbances dues à chaque espèce
absorbante présente en solution.
 L’absorbance « Ai(λ) » d’une espèce chimique « Xi » à la longueur d’onde « λ » est donnée par la loi de Beer-
Lambert : Ai(λ) = εi(λ) . l . [Xi ]
avec  « l » la largeur de la solution traversée par la lumière
 [Xi ] la concentration de l’espèce absorbante
 εi(λ) le coefficient d’extinction molaire de l’espèce « Xi » à la longueur d’onde « λ »

 En théorie, la loi de Beer-Lamber est vérifiée quelque soit la longueur d’onde « λ » mais en pratique, pour une
plus grande précision, on travaille vers le maximum d’absorption.

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