Instructions

INS-PRO-00

Tests de mycotoxines: Avec les réactifs Indice de ré vision :00

Cré ation : 16/01/2023
Aflatoxine et Fumonisin Modification :XX /XX /XX
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Suivi des modifications

Modifications Date Motif de modification

Date Nom et fonction Emargement

Rédacteur 16/01/2023 Ammena Ndoungou

Marlène KAMBOU
Laborantine
Vérificateur Mfoutou Mouzita Ryvalan
Coordinatrice QHSE

Approbateurs Romuald Njangou

Directeur Industriel et des
Systèmes d’information
Jean Luc Maret
Directeur Général

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Tests de mycotoxines: Avec les réactifs Indice de ré vision :00

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Aflatoxine et Fumonisin Modification :XX /XX /XX
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1. Objet :

Ce protocole d’écrit le processus d’analyse des mycotoxines à partir de Rida Quick Fumonisin ou
Aflatoxine RQS ECO : Aflatoxine. Il s’agit d’un test quantitatif par immunochromatographie.

Domaine d’application :

Ce protocole s’applique au Responsable projet et au laborantin SGMP chargés des analyses mycotoxines.

2. Responsabilité

 Responsable projet
 Laborantine projet

Sont responsable de l’application de ce protocole.

3. Documents de références :
 Manuel d’utilisation

4. Terminologie et définitions :
 Mycotoxines : ce sont des toxines élaborées par diverses espèces de champignons microscopiques
telles que les moisissures. Difficilement dégradables, elles peuvent subsister dans les denrées
même après élimination des moisissures.

 Immunochromatographie : Test de dépistage rapide dans lequel un anticorps de capture couplé à

un réactif de détection est immobilisé à la surface d’une membrane poreuse afin de fixer
l’antigène recherché présent dans un échantillon d’urine, de plasma ou de crachat, entrainant
l’apparition d’une tache colorée en cas de positivité.

5. Entrants et sortants :

Entrants :

 Registre de suivi analyses sanitaires : tests mycotoxines ENR-PRO-00

 Smart phone avec application Rida quick scan

Sortants :

 Registre de suivi analyses sanitaires : tests mycotoxines ENR-PRO-00 renseigné.

6. Ressources nécessaires :

Ressources humaines  :
 Responsable projet
 Encadreurs
 Laborantine
Ressources matérielles  :
 Mixeur de laboratoire
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 Balance
 Agitateur
 Eprouvette graduée
 Bocal d’un litre
 Pipette de 5, 10 et 20 micro litre
 Smart phone avec application Rida quick scan
 Bécher
Réactif  :
 Aflatoxine
 Fumonisin

7. Contenu : le tableau ci-dessous explique les étapes d’analyse des mycotoxines avec le réactif
Aflatoxine. Le test se fait en 2 grandes étapes :
 La préparation du réactif : Aflatoxine
 L’analyse des mycotoxines
organisé et suivi par le/la Responsable projet et la laborantine.

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Tests de mycotoxines: Avec les réactifs
Aflatoxine et Fumonisin
Qui Quoi
Nettoyage et désinfection
de la zone de préparation
Nettoyage des mains
Préparation de la solution
d’extraction finale cas de
Aflatoxine et Fumonisin
homogénéisation
Préparation de l’analyse
Laborantine
Prélèvement de
l’échantillon
Démarrage de l’analyse
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Indice de ré vision :00
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Comment
- Pulvériser de l’alcool sur la table de préparation et
laisser sécher
- Noter que la température de la salle est de 20°C
- Toujours se laver les mains avec de l’eau chaude et du
savon
- Essuyer les mains avec du papier essuie-tout puis
désinfecter avec le gel hydro alcoolique.
- Il est toujours conseillé de mettre les gants après.
- Prélever 20 ml de la solution concentrée puis mettre
dans une bouteille d’un litre
- Ajouter 180 ml d’eau distillée dans la même
- Mettre le barreau aimanté puis poser la bouteille sur
l’agitateur pour bien mélangé la solution
- Lancer le chrono et attendre 5 minutes
- Conserver au préalable à une température ambiante
(20-25°C), les bandelettes et la solution d’extraction
sont posées sur la paillasse ;
- Sortir aussi l’échantillon du placard préalablement
codifié selon le producteur(nom et date de livraison)
renseigné dans le registre ENR-PRO-00
- Mettre dans le mixeur une poignée de main de maïs
puis démarrer le mixeur ;
Cas du réactif Aflatoxine :
- De cet échantillon écrasé, prélever 10 g et mettre dans
un bécher ;
Cas des réactifs Fumonisin :
- De cet échantillon écrasé, prélever 5 g et mettre dans
un bécher ;
Cas des réactifs : Aflatoxine et Fumonisin
- Ajouter 20 ml de la solution d’extraction finale ;
- Mettre le barreau aimanté, couvrir le bécher et mettre
sur l’agitateur pour homogénéisation pendant 3 à 5
minutes ;
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Qui Quoi Comment

Temps de latence - Laisser la solution sédimentée pendant environ 5 minutes

Identification de - Entrer dans l’application

l’échantillon dans
l’application RIDA QUICK
SCAN
- Appuyer sur scan afin d’identifier le papier argenté du réactif (dans le
carton où se trouve les bandelettes) ;
- Saisir les informations de l’échantillon précédemment codifiées (Nom/date
de livraison) ;
- Appuyer sur scan et scanner la bandelette ;

Analyse Cas du réactif Aflatoxine

- Prélève 100 µl du surnageant clair (de la solution réactif-échantillon
préparée) et déposer directement sur la zone d’application de la bandelette
test
- Lancer le minuteur immédiatement et attendre 5 minutes
Cas du réactif Fumonisin
- Dans un tube à essais, mélanger 100 µl du surnageant clair avec 700 µl de la
Laborantine
solution concentrée ;
- Prélève 100 µl du surnageant clair (de la solution réactif-échantillon
préparée) et déposer directement sur la zone d’application de la bandelette
test
- Lancer le minuteur immédiatement et attendre 5 minutes

Résultat - Après 5 minutes, la bandelette test doit être lue avec l’application RIDA
QUICK. Ainsi, scanner la bandelette avec échantillon prélevé.
- Le résultat s’affiche immédiatement sur l’écran du smart phone qui doit être
inférieur à 5.
Supérieur à 5, l’échantillon est contaminé (présence des mycotoxines),
avertir le responsable projet.

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LISTE DE DIFFUSION

Nom et Prénom Date Signature

Jean-Luc Maret

Romuald Njangou

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