PROCEDURE OPERATOIRE STANDARDISEE DE L’EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE

DES URINES (ECBU)

Code : PRABactério001

LABORATOIRE DE L’HOPITAL REGIONAL Version : V1

DE MAMOU En vigueur à compter du : 06/03/2019

LHRM Date de révision :

Pages :
06/03/2021
5
Conception Date Signature
Rédaction : M’mah Jeanne MARA 01/10/2018
Vérification : Comité Qualité (Président) 06/03/2019
Approbation : Dr Ibrahima Fofana 06/03/2019

Sommaire
1. Objectifs et Portée...............................................................................................................................................2
2. Abréviations et Définitions.................................................................................................................................2
3. Tâches, autorisations et responsabilités..............................................................................................................2
4. Principe............................................................................................................................................................... 2
5. Sécurité et environnement...................................................................................................................................2
6. Echantillon..........................................................................................................................................................3
7. Equipement et fournitures...................................................................................................................................3
8. Contrôle de la qualité..........................................................................................................................................3
9. Procédure............................................................................................................................................................3
10. Références..........................................................................................................................................................4
11. Formation et diffusion........................................................................................................................................4

APPUI DU PROJET LABOGUI/FMX 1

PROCEDURE OPERATOIRE STANDARDISEE DE L’EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE
DES URINES (ECBU)
1. Objectifs et Portée
Décrire le mode opératoire de l’examen cytobactériologique des urines pour affirmer le diagnostic d’une
infection urinaire que signifie la présence de germes dans les urines qui normalement stériles. C’est
l’examen microbiologique le plus demandé en cas de suspicion d’une infection du tractus urinaire.
La réalisation d’un ECBU comprend deux étapes essentielles :

1. L’examen direct de l’échantillon au microscope qui permet de faire une cytologie (numération des
leucocytes et hématies), de noter la présence éventuelle de cristaux et de germes s’ils sont en
quantité importante ; il permet dans le cadre de l’urgence de rendre des premiers résultats pouvant
orienter la conduite du prescripteur.
2. La mise en culture de l’échantillon sur milieux spécifiques qui permet de réaliser la quantification,
l’identification et le profil de sensibilité aux antibiotiques (antibiogramme) du germe éventuel.
C’est cette seconde étape qui nécessite, selon les cas, 24h à 72 h avant de pouvoir rendre des
résultats complets.

Cette procédure se limite à la 1ere étape et s’adresse aux biologistes et techniciens de l’unité de
bactériologie
2. Abréviations et Définitions
ECBU : Examen Cytobactériologique des urines
LHRM : Laboratoire de l’Hôpital Régional de Mamou
POS : Procédure Opératoire Standardisée
3. Tâches, autorisations et responsabilités
Tâches Autorisé Responsable
Prélèvement de l’échantillon Patient RP
Centrifugation de l’échantillon Technicien RU
Numération des leucocytes et hématies Technicien RU
Enregistrement du résultat Technicien RU
4. Principe
L’examen cytobactériologique des urines consiste à recueillir d’une manière correcte une quantité
importante de l’urine dans un récipient ou flacon approprié, centrifugé et rejeté le surnageant, mettre une
goutte de dépôt sur la lame et couvrir avec une lamelle, observé directement au microscope avec l’objectif
10x puis 40x.
5. Sécurité et environnement
Le respect des mesures adéquates pour la manipulation des échantillons biologiques et les réactifs sont
obligatoires dans un laboratoire. Exemple : le port de blouse et des gants.
L’utilisation des matériels stériles est recommandée en bactériologie ou de matériels à usage unique.
Le nettoyage de la paillasse avant et après chaque manipulation avec le chlore à 0.5%, nettoyer et
recouvrir le microscope avec un plastique.
Bien trié et éliminé les déchets selon la procédure Cf. POS Gestion des déchets

APPUI DU PROJET LABOGUI/FMX 2

PROCEDURE OPERATOIRE STANDARDISEE DE L’EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE
DES URINES (ECBU)
6. Echantillon
Le technicien doit expliquer les conditions de prélèvement Cf. POS Prélèvement ECBU
 Urine

7. Equipement et fournitures
Equipement Consommables Documentation
Microscope Matériel : Registre
Etuve  Anse de platine Cahier de paillasse
Réfrigérateur  Lames porte objet
Centrifugeuse  Lamelles
Bec bunsen  Tubes à essai stériles
 Pipettes Pasteur stériles
 Marqueur
 Casseroles pour trempage
plastique/verres/ pipettes pasteurs
Réactifs :
 Eau physiologique : Solution NaCl

8. Contrôle de la qualité
Les conditions de prélèvement et transport
La qualité du microscope
Vérifier la date de péremption des réactifs
Conditions de conservation (réfrigérateur, étuve)
9. Procédure
Tous les prélèvements doivent être traités par le laboratoire dans les 2 heures suivant le recueil, examiner
tous les échantillons qui arrivent au laboratoire sur le champ ou les conservés au réfrigérateur à 4ºc
jusqu’au moment de l’examen.
L’ECBU comporte :
 L’examen macroscopique
Noter l’aspect, la couleur, l’odeur et la consistance de l’urine
Les principales anomalies d’aspect des urines sont les changements de couleur, les hématuries
macroscopiques, les pyuries…
 L’examen microscopique comporte :
o L’état frais
o Après coloration gram
o La culture

APPUI DU PROJET LABOGUI/FMX 3

PROCEDURE OPERATOIRE STANDARDISEE DE L’EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE
DES URINES (ECBU)
 Agiter bien le flacon d’urines
 Transvaser environ 10 ml d’urines dans un tube conique à centrifuger, boucher le tube avec un
bouchon ou avec du coton.
 Centrifuger l’échantillon à 3000 tours pendant 5 min au bout de ce temps retirer le tube, rejeter le
surnageant et homogénéiser le culot.
 A l’aide d’une pipette pasteur stérile déposer une goutte du culot entre lame et lamelle et examiner
à l’objectif40
 Noter l’aspect cellulaire, l’éventuel présence de parasites et mettre en évidence les bactéries d’en
observer le nombre et la mobilité.
L’examen microscopique à l’état frais du culot urinaire permet d’apprécier les cylindres urinaires, les
cellules épithéliales, les cristaux et d’autres éléments (flore bactérienne, levures, Trichomonas,
spermatozoïdes, oeufs de parasites (Schistosoma haematobium), cellules néoplasiques.
10. Références
 POS Bams 2014-2015
 POS LGA Guinée

11. Formation et diffusion

Les biologistes et les techniciens dont les noms suivent ont été formés à cette POS et sont les seuls
habilités à effectuer cette technique au LHRM. Aussi ont-ils pris connaissance du contenu de ce
document :

No Nom et Prénoms Date Signature

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

APPUI DU PROJET LABOGUI/FMX 4