Institut de la nutrition de l'alimentation

Et des technologies Agro-Alimentaires.

1ere Année licence Science Alimentaire.

Rapport de stage : Analyse

Bactériologique de l’eau

 Lieu de stage :
 Periode de stage :
Presenté par l'étudiante : Encadré
Le par
laboratoire le docteur
d'hygiène :
de la wilaya de
Du 2022/12/25 au 2023/01/05 Constantine
BOUSSEBOUA RYM BENDIA

Année universitaire : 2022-2023

 Remerciements :
Je tiens à remercier toutes les personnes qui ont contribué au succès de
mon stage et qui m'ont aidé lors de la rédaction de ce rapport.

Je tiens à remercier vivement mon maitre de stage W.YOUSFI et

M.BELHAFEF ( les responsables de la paillasse alimentaire) ,
pour son accueil, le temps passé ensemble et le partage de son
expertise au quotidien. Grâce aussi à sa confiance j'ai pu
m'accomplir totalement dans mes missions. Il fut d'une aide
précieuse dans les moments les plus délicats.

Je remercie également toute l'équipe de laboratoire pour leur

accueil, leur esprit d’équipe, qui m'a beaucoup aidé à comprendre
comment sa marche

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 SOMMAIRE :

1)-INTRODUCTION.

2)- PARTIE EXPERIMENTALE :

2)-1)- Définitiondel’eau .

2)-2)- -Matériel et Réactifs .

2)-3)- Technique :

2)-3)-1)principe.

2)-3)-2)- Mode opératoire

3) CONCLUSION.

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1)- INTRODUCTION :

 Présentation de laboratoire d’Hygiène :

Le laboratoire d'hygiène de la wilaya de Constantine est des pionniers dans le domaine de la santé
publique. Il a été créé en 1948 à l'époque coloniale pour prévenir les différentes maladies
transmissibles. Ce laboratoire était situé au sein même de la direction de la santé ; sis rue Boudjrion
(ex saint jean). Depuis 1995 le laboratoire d'hygiène de la wilaya se trouve à la cité Mentouri (sidi
mabrouk).A partir de cette date, les activités du laboratoire se sont diversifiées et amplifiées
touchant plusieurs créneaux nouveaux.

 Personnel du laboratoire : Le laboratoire emploie un personnel qualifié :

- un médecin maître assistant en microbiologie.

- trois ingénieurs d'état en agro-alimentaire.

- 15 ingénieurs d'application de différentes spécialités.

- Cinq laborantins diplômés d'état.

- Un technicien de la santé.

- Un ouvrier professionnel.

- Trois secrétaires.

- Un agent en informatique.

- Trois techniciennes de sur faces .

- Cinq agents de sécurité.

- Une réceptionniste.

 Activités du laboratoire : Le laboratoire travaille en collaboration avec diverses

structures qui sont chargées des différents prélèvements des eaux et des aliments. Les
structures sont les suivantes :

-service des eaux : S'occupe des analyses de routine avec le contrôle régulier des eaux de
consommation, de sources, de puits, de barrages et des eaux usées.

-service de bactériologie alimentaire : S'occupe des analyses de routine de tous les

aliments, les analyses se font en fonction du journal officiel n° 35 du 27 mai 1998.

-service de bactériologie médicale : Prend en charge l'examen cytobactériologique des

urines.

-service de coproculture et parasitologie des selles : On y effectue la recherche des

parasites et des bactéries pathogènes dans les selles et les teignes dans le cuir chevelu.
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-service de sérologie : On y effectue la recherche de la CRP et de Latexe Waler Rose, le
TPHA.

-service de biochimie : La recherche de bilan lipidique.

2)- PARTIE EXPERIMENTALE:

1)-Définitiondel’eau : Par définition , l’eau est un corps incolore , inodore , résultant de
la

Combinaison d’un volume d’O2 et deux volumes d’H2 et qui peut

Dissimiler un certains nombres de corps.

 De point de vue chimique : est un corps de formule H2O.

 De point de vue physique : elle se solidifie à 0°C et bout à 100°C.

 De point de vue biologique : l’eau est un constituant essentiel des cellules vivantes :

animales , végétales et les microorganismes. (70% en moyenne chez le sanimaux).

 L’eau recouvre 71% de la surface terrestre avec 97% d’eau salée et 3% d’eau douce .

2)-Matériels et Réactifs :

Tubes a essais/Portoir

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Pipettes stériles Bec Bunsen

Etuve. Autoclave (stérilisation).

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 Table de MAC GRADIE

BCPL Réactif de kovacs.

Double et simple

(Bouillon lactosé au poudre exempte

d’indole. Pourpre de Bromochrésol

avec une cloche de DURHAM)

3-Technique :
Principe :
-La colimétrie est l'ensemble des méthodes permettant la recherche et le dénombrement des
coliformes (Totaux et Fécaux) en phase liquide, qui indique une contamination fécale.

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-Les coliformes ont la particularité de fermenter le lactose avec dégagement de gaz. Le
développement des coliformes totaux acidifie le milieu qui se traduit par un virage de l'indicateur
coloré. En outre, une production de gaz apparaît dans les cloches renversées.

Mode opératoire :

-Étape 1 : Test présenptif : On place 9 tubes de BCPL (Bromo chrésol pourpre) de 10ml (chaque
tube contient une cloche) répartis en 3 tubes.

-BCPL : dissoudre 13g pour simple concentration, 26g pour double concentration dans un litre
d’eau distillée ; autoclaver pendant 15min à 121°C.

-Les 3 premiers tubes de BCPL double concentration + 10 ml de prélèvement (eau à analyser).

-Les 3 secondes tubes de BCPL simple concentration + 1 ml de prélèvement.

-Les 3 derniers tubes de BCPL simple concentration + 0.1 ml de prélèvement (2 à 3 gouttes).

Mélanger et dégazifier les tubes puis les placer dans une étuve de 37°C pendant 48h

-Lecture :
virage de la couleur au jaune avec le trouble et production de gaz au niveau de la cloche dans la
série de 9 tubes. C’est à dire la présence des Coloformes Totaux (CT).

On garde que les tubes positifs et on fait la lecture sur la table de MAC GRADIS, exp: un 1 seule
tube des 3 premiers tubes, 2 tubes des 3 secondes tubes, 0 tube des 3 derniers tubes = 1 , 2 , 0 = 20
CT.

-Étape 2 : Test confirmative: On fait le repiquage sur l’eau peptonée exempte d’indole.
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L’Eau peptonée: dissoudre 25g de poudre dans un litre d’eau distillée; autoclaver 15min à 121°C;
PH=7,2

-Il faut gardé le meme ordre des tubes dans le portoire + 2 goutes des prélevements positifs dans
des tubes d’eau peptonée

. -Incuber à 44°C pendant 24h.

Après incubation on ajoutent 2 goutes de réactif de KOVACS et on attend 2 min :

-Si on observent une formation d’un anneau rouge cerise donc la présence des coliformes Fécaux
(CF) et donc cette eaux est de mauvaise qualitée.

-Absence de formation d’un anneau rouge cerise donc absence des CF et donc cette eau est de

bonne qualitée.

3 - CONCLUSION:
Sur cette planète, plusieurs habitants n’ont pas accès à l'eau potable,
malgré que l'eau ne manque pas.C'est la façon de la faire parvenir qui
cause des maladies surtout dans les pays sous-développés.
C'est pour cela que le travail des laboratoires d'hygiène permet de
savoir si l'eau est potable où non.