PROCEDURE OPERATIONNELLE STANDARD

No. de Contrôle: HDCP-BCT-POS-

PROCEDURE DE REALISATION DU 006
version: 01
MYCOPLASME Section : Bactériologique
Page 1sur 5

Signature et Date
Rédigé par: BILE Sandra 02/08/2023
Corrigé par: - Dr NGO YONGA Martine 20/08/2023
- NZOYEM Raoul
Approuvé par:
Date de mise en service
Document Remplacé: Nil

Date de Relecture (sans Date de Révision (avec modification): Noms et signature

modification):

DISTRIBUTION:
1) Laboratoire

Date d’arrêtd ‘utilisation:

 1. RESUME

Le mycoplasme est l’un des principaux pathogènes responsable des infections

urogénitales à type de : cervicale, pelvienne, epididymite etc. et peut être la cause d’infertilité.
Ces infections sont dues principalement à Mycoplasma hominis et ureaplasma urealiticum.

2. RESPONSABILITE

La recherche du mycoplasme peut se dérouler dans n’importe quel laboratoire

d’analyse médicale agréé et par des personnels de santé qualifiés.

3. ABREVIATION

UU : ureaplasma uralyticum

MH : Mycoplasma Hominis

°C : degrés Celsius

C+ : control positif

CLSI : Clinical and laboratagy Standard Institute.

4. DOMAINE D’APPLICATION
Le dépistage du mycoplasme cible les personnes ayant un problème de
conception, des douleurs pendant l’acte sexuel, et qui ont des métrorragies.

5. REACTIFS, MATERIELS ET EQUIPEMENTS

 Des gants de soins
 L’échantillon
 L’huile de paraffine
 L’incubateur
 Micropipette de (10 – 100)
 Cassette du mycoplasme et réactifs
 La flamme
 Marqueur pour étiquette
  Diluant
6. PRINCIPE

Mycoplasme et un antibiogramme en milieu liquide ou chaque antibiotique est

présent à deux concentrations différentes son principe repose sur l’inhibition métabolique.

La croissance des mycoplasmes est objectivée par leur activité par leur activité
métabolique : hydrolyse de l’urée en souillon UG par ureaplasma SPP et hydrolyse de
l’origine en souillon arginine par MH avec libération d’ammoniaque qui alcalinise le
milieu et fait du virer du jaune au rouge l’indicateur de PH (rouge de phénol)

Si le germe est sensible à l’antibiotique testé, son métabolisme est inhibé et le

milieu reste jaune.

Si le germe est résistant, il se développe et le milieu vire au rouge.

7. PROCEDURE
7.1. PREPARATION ET MANIPULATION DES ECHANTILLONS

Le test se fait directement après un relèvement cervical chez les femmes et urétral chez
les hommes. Les mycoplasmes adhèrent fortement aux cellules muqueuses. Les échantillons
peuvent être conservés pendant un à température de 18 – 25°C et 48h à 2-8°C. suivez
l’instruction d’utilisation avec soin. La fiabilité des résultats de l’analyse ne peut pas être
garantie s’il y a des écarts entre les instructions du contenu dans la notice. Considerez les
échantillons, les flacons de réactifs et les bandes pour tester comme matériel potentiellement
infectieux et les traiter conformément aux pratiques de laboratoire de biosécurité.

7.2. TECHNIQUE

Après avoir étiqueter la casette a mycoplasme (nom du patient, âge, sexe, et date)
derrière la flamme mélangez le diluant à la poudre lyophilisée et secouer ; inoculé ensuite
l’échantillon dans le mélange. Pipetter 100 ml de l’inoculum et introduire dans les puits de la
casette pour dissoudre les matériaux revêtus. A joutez une goutte d’huile de paraffine dans
chaque puits ; sinon le bouillon de cuture peut s’évaporer conduisent à des résultats inexacts.
Couvrir la bande à mycoplasme avec un couvercle et incuber à 36 38°C pendant 24h puis lire
les résultats.
 8. PRESENTATION ET INTERPRETATION DES RESULTATS
L’interprétation des résultats se fait par changement de couleur.
 Si le control (C+) situé sur la bande ne change pas de couleur (reste jaune) : le
test est négatif.
 Si le control (C+) situé sur la bande de couleur (devient rouge) : le test est
positif.
 Les antimicrobiens sensibles seront perceptibles par des puits de
couleurs ֞jaune֞
 Les antmicrobiens resistants seront perceptibles par des puits de coule
֞rouge֞
 les antimicrobiens intermediaires seront perceptibles par des puit de
couleurs ֞orange֞

9. LIMITES

L’abus clinique des antimicrobiens provoque l’émergence d’un nombre de soudre de

résistance aux médicaments, les résultats de faux positifs pourraient être obtenus malgré
l’adoption de divers antimicrobiens dans le milieu mélangé pour inhiber les bactéries non
pertinentes, donc nous recommandons de confirmer les échantillons positifs avec une plaque
d’agar mycoplasme lorsque l’onibysasl est applicable.

10.REMARQUES

L’espèce ureaplasma uralyticum a été divisée en 02 nouvelles espèces ; - ureaplasma

parvum et ureaplasma uralyticum. Ils sont considérés comme l’ureaplasma spp. Lorsque vous
utilisez la bande, le symbole UU dans les différentes tables, ainsi que sur la bande et la feuille
de résultats représentent ureaplasma spp ;

11.REFERENCES
Institut des normes cliniques et de laboratoire (CLSI). 2011 méthodes de test
de sensibilité antimicrobienne pour les mycoplasmes humains ligne directrice
approuvée. Document CLSI D 43 – A. Vol. 31
 ATTESTATION DES UTILISATEURS
J'ai lu et compris la procédure sur la GESTION DES DECHETS

SN NOM SIGNATURE DATE