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QUESTIONS DE COURS :
1. Veuillez citer les différentes phases de la réaction inflammatoire
Réponse : la réaction inflammatoire est constituée de trois phases : phase vasculaire, phase cellulaire et phase
de cicatrisation
2. Donner une définition claire au terme opsonine
Réponse : l’opsonine est une protéine, qui fixe sur les bactéries de façon à rendre plus facile leur phagocytose et on
a 2 types : opsonine spécifiques (IgG) et opsonine non spécifique (C3b)
3. Veuillez citer les différentes modalités d’action des cytokines
Réponse : on a quatre modalités d’action des cytokines :
Endocrine : sécrétion dans le sang et agit sur un site d’action à distance
Paracrine : cellule cible est adjacente à la cellule sécrétrice
Autocrine : la cellule cible est la cellule sécrétrice
Intracrine : sécrétion à l’intérieur même du cytoplasme de la cellule
4. Veuillez décrire, en utilisant un schéma, les différentes étapes de la phagocytose
Réponse :
8. Représenter, à l’aide d’un schéma, le type de CMH permettant de présenter des peptides exogènes
et qui a une reconnaissance restreinte aux lymphocytes T-CD4
Réponse : c’est le CMH de type II
Réponse : les haptènes sont des molécules de faible poids possédant une antigénicité mais pas d’immunogénicité,
mais s’ils sont couplés à une molécule porteuse ils deviennent immunogènes
21. Donner les différents types de molécules et récepteurs intervenant dans la phase de
reconnaissance et d’adhésion lors de la phagocytose
Réponse : les récepteurs intervenant dans la phase de reconnaissance et adhésion de la phagocytose sont :
- les Ig : jouent un rôle d’opsonines, type IgG exposent leur Fc qui peut lier aux FcR du phagocyte
- récepteur au complément : les phagocytes possèdent un récepteur pour C3b
- récepteurs « scavenger » : lient à des polyanions sur les surfaces
- TLR : appartient au PRR, conduit à l’activation des phagocytes➔ production des cytokines inflammatoire
22. Donner le nom et décrire en détail la technique permettant de mettre en évidence un déficit
de la phagocytose d’un déficit immunitaire
Réponse : le mettre en évidence d’un déficit phagocytaire se fait par la numération des PNN ou par l’étude du
chimiotactisme utilisant la chambre de Boyden en présence de substance chimiotactique telles que la FMLP
Réponse : Syndrome de Chediak-Higashi (CHS) : autosomale récessive, gène 1q42. Associée à un déficit de la
phagocytose et l’activité NK ➔ infection avec hépatosplénomégalie (augmentation de volume du foie et rate),
l’analyse de la phagocytose montre un défaut du chimiotactisme, et l’observation microscopique révèle des
granulations géantes due à la fusion de plusieurs organites intracytoplasmiques des PN, monocytes et NK
24. Donner avec les définitions, les diffèrent types d’interaction entre les anticorps et les antigènes
Réponse :
Polyclonaux : sont un mélange d'anticorps reconnaissant différents épitopes sur un antigène donné, chaque Ac
étant sécrété par un clone de plasmocyte différent.
Monoclonaux : sont identiques car produits par un clone de cellules spécialisées du système immunitaire (les
plasmocytes)
26. Citer les différentes caractéristiques de la réponse immunitaire innée
Réponse : La réponse immunitaire innée est la première ligne de défense de l'organisme face à un agent pathogène
introduit. Elle est immédiate et active dès la naissance
Réponse : la phase cellulaire : ouverture des jonction serrées entre les endothéliocytes, avec une vasodilatation
locale. L’arrivé du sang chaud ➔ rougeur et chaleur.
Aussi on a la margination leucocytaire composé de 3 phase :
Phase de roulement : roulement des cellules a surface de la membrane endothéliale
Phase d’adhésion forte : blocage de roulement, due à l’interaction intégrines / Ig
Phase de transmigration : passage des CI à travers 2 CE par dissociation des jonctions : diapédèse
Techniques immunologiques
la technique d’immunodiffusion simple : Cette méthode consiste à incorporer
un antisérum spécifique dans la gélose et à déposer la solution d'Ag dans des
puits.
A l'équilibre, il se forme un anneau de précipitation dont le carré du diamètre est
proportionnel à la concentration de l'Ag. La concentration est exprimée par
référence à une courbe standard avec un Ag de concentration connue.
La technique d’immunodiffusion double ou (Ouchterlony) :
La méthode de double diffusion est une méthode d'immunoprécipitation
basée sur la diffusion d’antigènes et d’anticorps en milieu gélifié à partir
de puits placés en vis à vis.
Lorsque les molécules d'anticorps rencontrent les molécules d'antigènes,
la liaison antigèneanticorps conduit à la précipitation des complexes
immuns. Les précipités se présentent sous la forme d’un arc blanchâtre
visible à l’œil nu.
La technique ELISA : (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay) est une
technique immunoenzymatique de détection qui permet de visualiser
une réaction antigène-anticorps grâce à une réaction colorée produite
par l'action sur un substrat d'une enzyme préalablement fixée à
l'anticorps
Le principe du western blot :
1 - Séparation des protéines en fonction de leurs PM par
électrophorèse sur gel de polyacrylamide (page).
2 - transfert des protéines sur une feuille de nitrocellulose ou de nylon.
3 - révélation immunologique par des Ac marqués par enzyme.
4 – Bande colorée attestant de la présence des complexes Ag-Ac.
La technique de biotinylation :
- Les cellules à confluence sont incubées avec de la biotine couplée à un
groupement ester sulfonique par un pont disulfure (sulfo-NHS-SS-biotine)
- Les cellules sont lysées, centrifugées puis incubés avec de la streptavidine
Couplée à des billes d’agarose
- Les protéines biotinylées liées à la streptavidine sont purifiées par
centrifugation
- Les protéines biotinylées ainsi précipitées sont dénaturées avec un tampon
de dénaturation
- Le produit de dénaturation est déposé sur gel pour migrer puis un protocole
de western blot classique s’en suit.
La technique de cytométrie :
La cytométrie en flux permet l’étude précise de cellules
isolées entraînées dans un flux liquide. Les cellules, alignées
les uns derrières les autres et séparées d’au moins 1 mm,
défilent à grande vitesse devant une source lumineuse : un
laser ou une lampe (mercure). Grâce à des phénomènes de
diffusion lumineuse, l’appareil caractérise les cellules selon :
La taille, la granulométrie, la fluorescence.