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Synopsis
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La fièvre jaune dans l'État de Pará, région


amazonienne du Brésil, 1998-1999 : Résultats
entomologiques et épidémiologiques
Pedro F.C.Vasconcelos,* A m élia P.A.T. Rosa,*† Sueli G.
Rodrigues*, Elizabeth S.T. Rosa*, H a milton A.O. M onteiro*,
Ana C.R.Cruz*, Vera L.R.S.B arros*, M aria R.Souza* et Jorge
F.S.T. Rosa*.
*Institut Evandro Chagas, FUNASA, ministère brésilien de la santé, Belém, PA, Brésil ;
et †Université du Texas Medical Branch, Galveston, Texas, États-Unis

La fièvre jaune (FJ) est fréquemment associée à des taux élevés de gravité et
de mortalité dans la région amazonienne du Brésil. Au cours des saisons des
pluies de 1998 et 1999, 23 (huit décès) et 34 (huit décès) cas humains de FJ
ont été signalés, respectivement, dans différentes zones géographiques de
l'État de Pará ; la plupart des cas se trouvaient sur l'île de Marajó. Les
patients étaient âgés de 1 à 46 ans. Des études épidémiologiques et
écologiques ont été menées à Afuá et Breves sur l'île de Marajó ; les insectes
capturés ont permis d'isoler respectivement 4 et 11 souches de FJ à partir de
moustiques Haemagogus janthinomys regroupés. Les cas observés sur l'île de
Marajó en 1999 résultent de l'absence de vaccination à proximité du foyer de
la maladie et d'une migration intense, qui a amené de nombreuses personnes
non immunisées dans des zones où des vecteurs infectés étaient présents.
Nous émettons l'hypothèse que le virus de la fièvre jaune reste dans une zone
après une épidémie par transmission verticale entre les moustiques
Haemagogus.
les zones rurales de l'Amazonie (foyer naturel de la maladie),
La fièvre jaune (FJ) est une infection à arbovirus de la région Centre-Ouest et des régions occidentales des
importante chez l'homme et les primates sylvestres. États de Maranhão et de Minas Gerais (3,4,11).
L'infection chez l'homme s'accompagne de taux élevés de Nous rapportons des résultats entomologiques et
maladie et de décès. L'agent responsable, le virus de la fièvre épidémiologiques concernant une occurrence inhabituelle de
jaune, est la souche prototype du genre Flavivirus, de la cas de FJ dans une région de l'état de Pará en 1998 et 1999.
famille des Flaviviridae (1). Le virus de la fièvre jaune se
maintient dans deux cycles de transmission distincts. Le
premier est sylvatique : les singes sont les hôtes vertébrés, Adresse de correspondance : Pedro Fernando da Costa Vasconcelos,
les moustiques du couvert forestier des genres Haemagogus Instituto Evandro Chagas, Av. Almirante Barroso, 492, 66090-000,
et Sabethes (principalement Haemagogus janthinomys et, dans Belém, PA, Brésil ; fax : 5591-226-1284/226-5262 ; e-mail :
une moindre mesure, Sabethes chloropterus) sont les vecteurs, pedrovasconcelos@iec.pa.gov.br
et les infections humaines se présentent sous la forme de
cas sporadiques ou d'épidémies limitées (2-4). L'autre
cycle de transmission est urbain : Le virus de la fièvre
jaune est directement transmis d'homme à homme par la
piqûre de moustiques Aedes aegypti infectés, et les autres
animaux ne sont pas associés à la transmission. La fièvre
jaune urbaine a été éradiquée du Brésil après 1942 (3-5).
Le virus de la fièvre jaune sylvestre est encore signalé en
Amérique du Sud et en Afrique (6-9).
Au cours des dernières décennies, des cas et des
épidémies de fièvre jaune ont été signalés en Amérique du
Sud, en particulier au Pérou, en Bolivie et au Brésil, où ont eu
lieu plus de 90 % de tous les épisodes de maladie signalés
dans les années 1990 (10). Au Brésil, la fièvre jaune survient
chaque année, provoquant des cas sporadiques, de petites
flambées ou des épidémies autolimitées dans la jungle ou

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émergentes
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Matériels et méthodes

Sites de collecte
Des prélèvements de moustiques et de sang ont été
effectués dans trois sites de l'État de Pará (figure 1). Afuá
(0°06' S ; 50°20' W ; population d'environ 30 000 habitants)
et Breves (1°41' S, 50°19' W) ; population d'environ 75 000
habitants, sont des municipalités de l'île de Marajó, dans la
région nord de l'État de Pará, connues pour l'élevage de
buffles et la pisciculture. L'autre site, Altamira (2° 51' S ; 51°
57' W) (environ 80 000 habitants), se trouve dans la région
centrale de l'État, dans le delta du fleuve Xingu, près de la
Transamazonienne ; ses principaux produits sont le bois, le
bétail, la canne à sucre et le cacao.

Échantillons
Des échantillons de sang ont été prélevés sur des
personnes présentant des symptômes cliniques et des
signes compatibles avec la fièvre jaune pour tenter d'isoler
le virus, ainsi que sur des contacts (famille et voisins) pour
des examens sérologiques. Environ 5 à 10 ml de sang ont été
prélevés par ponction veineuse. Les échantillons de sérum ont
été conservés à
-20°C jusqu'à ce qu'ils soient testés. Des échantillons ont
également été prélevés sur des patients présentant de la
fièvre et d'autres symptômes cliniques pour tenter d'isoler le
virus. Les singes ont été euthanasiés et des échantillons de
sang et des fragments de foie ont été prélevés pour isoler
le virus. Tous les échantillons ont été congelés dans des
conteneurs d'azote liquide jusqu'à leur traitement en
laboratoire.

Moustiques
Des moustiques piqueurs diurnes ont été collectés à Afuá,
Breves et Altamira. Les collectes ont été effectuées à partir de
9h00
Les périodes d'activité et les lieux où se trouvent les
vecteurs potentiels du virus de la fièvre jaune sont en effet
les périodes les plus actives.

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émergentes
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Les animaux ont ensuite été soumis à un test de neutralisation
par réduction de la plaque (PRNT) pour confirmer l'infection
(15).

Critères sérologiques pour l'inclusion dans l'étude


Les critères de diagnostic positif pour l'inclusion dans notre
étude étaient les suivants
1) conversion sérologique par quadruplement des titres
d'anticorps entre les échantillons de sérum en phase aiguë et
en phase de convalescence (7 à 14 jours après le premier
prélèvement) et 2) présence d'IgM sans antécédents de
vaccination contre la fièvre jaune et réaction positive
(>1:10) par PRNT.

Pathologie
Des échantillons de foie ont été prélevés sur les cas
mortels ; les coupes histologiques ont été colorées à
l'hématoxyline et à l'éosine et examinées au microscope
optique. Des antigènes spécifiques de la fièvre jaune ont été
détectés dans les échantillons de foie inclus en paraffine des
cas mortels au moyen d'une technique d'immunohistochimie
(16). Tous les patients présentant ces antigènes ont été
considérés comme des cas YF positifs et ont été inclus dans
l'étude.

Isolement et identification des virus


Tous les échantillons (sang, viscères et moustiques) ont
été inoculés à des souris allaitantes et à des cellules C6/36
pour l'isolement du virus. Avant le traitement, les échantillons
ont été décongelés, triturés et dilués dans une solution saline
tamponnée au phosphate (pH 7,4) avec 0,75 % d'albumine
bovine et des antibiotiques (100 µg/ml de streptomycine et
100 UI/ml de pénicilline), puis centrifugés pour un temps de
10 minutes à 2 100 x g (15). Le surnageant de chaque
échantillon a ensuite été injecté à des souris allaitantes
Figure 1. Carte de l'État du Pará montrant Afuá, Breves et d'autres (0,02 ml par voie intracérébrale) et à des tubes de cellules
municipalités où la fièvre jaune a été signalée en 1998 et 1999, ainsi (0,1 ml), respectivement. Les souches isolées ont été
que la municipalité d'Altamira où le virus de la fièvre jaune a été identifiées par un test d'immunofluorescence indirecte et un
isolé chez des moustiques et des singes.
test de fixation du complément (15). L'isolement du virus de la
fièvre jaune dans le sang ou les tissus de patients humains
A Afuá, les collectes ont eu lieu du 17 au 30 mai 1998 et du sans antécédents de vaccination a été utilisé comme critère
11 au 25 mars 1999. Les collectes à Breves ont eu lieu du 11 positif pour l'inclusion dans l'étude.
au 25 mars 1999. A Altamira, les collectes ont eu lieu du 16
au 28 avril, du 20 mai au 5 juin et du 10 au 19 juillet 1998, Résultats
ainsi que du 31 janvier au 13 février (saison des pluies) et du
14 au 27 juillet (saison sèche) en 1999. Épidémiologie
Au laboratoire, les moustiques ont été classés et En 1998 et 1999, 23 et 34 cas de fièvre jaune ont été
regroupés sous réfrigération, par espèce, lieu et date de diagnostiqués dans l'État de Pará. En 1998, 17 des 23 cas sont
collecte, puis conservés à -70°C jusqu'à l'inoculation. Les survenus à Afuá et 6 dans des municipalités ne se trouvant
taux d'infection minimaux (TIM) des moustiques Hg. pas sur l'île de Marajó (Bannach, Floresta, Gurupá, Itaituba,
janthinomys ont été calculés en divisant le total des pools Óbidos et Redenção). En 1999, 15 des 34 cas diagnostiqués
positifs par le nombre total de spécimens traités (12). se sont produits à Afuá, 14 à Breves et 5 dans trois autres
municipalités (Conceição do Araguaia, 2 ; Santa Maria das
Sérologie
Barreiras, 2 ; Redenção, 1), toutes situées dans la région du
Les échantillons de sérum ont d'abord été soumis à un
sud-est (figure 1). La répartition des cas par sexe et par âge
dépistage par inhibition de l'hémagglutination (IH) contre
a été déterminée (figure 2). La comparaison du nombre
l'antigène YF (souche Be H 111). Les tests ont été effectués
total de cas et de décès pour les deux années montre un taux
selon la méthode décrite par Clarke et Casals, en utilisant
de létalité de 34,8 % en 1998 et de 23,5 % en 1999 (figure 3).
une microtechnique dans laquelle les échantillons de sérum
La plupart des cas signalés ont été diagnostiqués par
ont été extraits à l'acétone (13). Tous les échantillons positifs
sérologie ou par une autre technique combinée à la
ont ensuite été analysés par dosage immunoenzymatique
sérologie, en tenant compte des caractéristiques cliniques et
pour la capture des immunoglobulines (Ig) M (MAC-ELISA)
épidémiologiques (figure 4).
(14). Tous les échantillons positifs aux deux tests ont été

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Afuá
Un voyage scientifique a été entrepris dans la
municipalité (du 17 au 25 mai 1998). A partir des 23
échantillons humains, trois isolations du virus YF (H
603325, H 603327, et H 603797) ont été réalisées. Parmi
les échantillons de singes, deux échantillons du virus de la
fièvre jaune (AN 604552, AN 604555) ont été isolés
respectivement du sang et du foie d'un singe (PR 2968)
de l'espèce Alouatta belzebul. Les cas de fièvre jaune sont
apparus dans plusieurs régions, parmi lesquelles

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la rivière Morcego, Morceguinho, Tamanduá, Bom Jardim et
Furo da Cidade.

Entomologie

Afuá
Au total, 1 621 culicidés ont été collectés à l'aide d'appâts
humains.
pendant la journée dans la canopée et au niveau du sol, qui,
après identification, ont fourni 77 bassins pour l'inoculation.
Les espèces les plus abondantes étaient Wyeomyia sp et Hg.
janthinomys, avec respectivement 1 119 (69%) et 296
(18,3%) spécimens ; après identification, ceux-ci ont formé
respectivement 23 et 14 pools pour l'isolement du virus
dans les tissus. Quatre échantillons de virus YF ont été isolés
à partir de pools de Hg. janthinomys (AR 605158, AR 605159,
AR 605160 et AR 605161). Le MIR pour
Hg. janthinomys était de 1,35 %.

Altamira
La mort de singes dans la forêt sur les routes secondaires
agricoles de la Transamazon Highway dans le tronçon
d'Altamira à Marabá (km 20 et 27) a motivé une expédition
scientifique du 16 au 28 avril 1998. Au total, 592 insectes
hématophages ont été collectés sur des appâts humains ;
479 (80,9%) étaient des moustiques Hg. janthinomys qui,
après identification, ont fourni 38 et 24 lots,
respectivement, pour la recherche de virus. Les pools
Figure 2. Répartition des cas de fièvre jaune, État de Pará, par groupes inoculés ont permis d'obtenir 10 isolations du virus YF,
d'âge, 1998 et 1999. toutes provenant de Hg. janthinomys (MIR = 2,01%).
Le taux élevé d'infection par le virus YF observé chez Hg.
janthinomys a motivé un deuxième voyage (20 mai-5 juin)
pour déterminer la distribution spatiale et le taux d'infection
de Hg. janthinomys, ainsi que pour évaluer la dynamique de
la circulation du virus YF dans la région d'Altamira. Au total,
509 diptères hématophages (66 lots) ont été capturés ; 312
(61,3 %) (29 lots) appartenaient à l'espèce Hg. janthinomys.
Trois échantillons ont été identifiés comme étant le virus YF,
comme lors du premier voyage ; tous les échantillons
positifs provenaient de pools de Hg. janthinomys, pour un
MIR de 0,96%.
Du 10 au 19 juillet (saison sèche), un troisième
voyage a été effectué dans la même zone d'Altamira pour
surveiller la circulation du virus YF. Au cours de ce voyage,
120 insectes hématophages ont été capturés dans 14 lots ;
Figure 3. Cas de fièvre jaune et décès signalés, État de Pará, 1998-1999. 28 (23,3 %) d'entre eux étaient des Hg. janthinomys
provenant d'un seul lot. L'injection de ces lots à des souris
nouveau-nées n'a pas produit de virus.
Au cours de la saison des pluies (du 31 janvier au 13
février) de 1999, 1 105 moustiques (93 pools) ont été capturés
; 84 (5 pools) étaient des Hg. janthinomys. Pendant la saison
sèche (du 14 au 27 juillet), 133 moustiques (14 bassins) ont
été capturés ; 44 (3 bassins) étaient des Hg. janthinomys.
Aucun virus n'a été isolé.

Afuá/Breves
L'apparition de cas humains a incité l'expédition à Afuá et
Breves à réaliser des études entomologiques sur les
vecteurs potentiels du virus de la fièvre jaune. Du 11 au 25
mars 1999, des captures d'insectes hématophages ont été
Figure 4. Procédures de diagnostic utilisées pour les cas de fièvre effectuées au niveau du sol et dans la canopée de la forêt.
jaune signalés dans l'État du Pará en 1998-1999. IHC = Au total, 2 164 insectes ont été capturés sur des appâts
immunohistochimie. humains dans 126 bassins ; 546 d'entre eux étaient des Hg.

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janthinomys, qui ont fourni 23 bassins pour l'inoculation
lors des tentatives d'isolement du virus. Onze souches du
virus YF ont été obtenues à partir de pools de Hg.
janthinomys, pour un MIR de 2,01%. Aucun virus n'a été
isolé dans les autres pools de moustiques. Au cours de ce
voyage, trois singes hurleurs (Alouatta belzebul) ont été
euthanasiés. Les spécimens de ces singes ont produit trois

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isolats du virus YF, deux provenant du sang et du foie du (18-20). Dans les municipalités d'Afuá et de Breves, aucun
même singe et un autre provenant du foie d'un second singe. élément n'a permis d'incriminer des hôtes autres que les
Ces singes ont été trouvés dans un rayon de 200 à 500 m primates dans l'épidémie.
autour d'habitations humaines. Ils présentaient un La théorie actuelle pour la fièvre jaune est que la
comportement anormal, c'est-à-dire qu'ils se déplaçaient transmission se produit par vagues cycliques de 7 à 10 ans
lentement et n'essayaient pas d'échapper aux gens. qui aboutissent à des épidémies (8,18). Nos résultats, en
particulier à Altamira, ne confirment pas cette observation.
Discussion Sur la base de nos résultats, nous supposons que l'apparition
En 1998, dans la municipalité d'Afuá, le premier cas d'épidémies dans la même région géographique limitée de
humain de fièvre jaune (d'après les informations deux municipalités voisines n'a été possible que parce que
épidémiologiques) a commencé à présenter des symptômes le les moustiques sont nés infectés par transmission verticale.
3 février. La période d'incubation moyenne de la fièvre Les infections chez les singes en 1998 auraient dû immuniser
jaune étant de 3 à 6 jours, l'infection s'est probablement un grand nombre d'entre eux, et le court intervalle entre les
produite à la fin du mois de janvier. Nous nous sommes épidémies n'a pas été suffisant pour renouveler la
rendus dans la municipalité en mai, soit plus de 3 mois après population de singes. Nous émettons l'hypothèse que la
le cas index. Malgré le long intervalle entre le cas index et persistance du virus de la fièvre jaune dans une région se
notre expédition, nous avons récupéré le virus de la fièvre produit par le passage de plusieurs générations de
jaune dans des bassins de moustiques Hg. janthinomys et moustiques et qu'il s'agit là du principal mécanisme
chez des singes hurleurs. Ces résultats suggèrent fortement responsable du maintien du virus et non de la vague
un taux d'infection moyen naturel élevé des moustiques épidémique comme cela a été suggéré (11,18-20).
vecteurs dans la région. Il s'agit de la première détection du L'apparition de cas ou de foyers de fièvre jaune est donc
virus YF dans la municipalité d'Afuá. Le virus YF n'a pas été directement liée à la migration de personnes non
signalé sur l'île de Marajó depuis 1988, lorsqu'un cas immunisées. Dans des endroits comme Altamira, où la
sporadique est apparu près de Breves chez un homme qui avait population affiche des taux élevés de vaccination contre la
abattu un arbre. fièvre jaune, il est assez difficile de trouver un cas humain,
L'étude menée à Altamira en 1998 montre clairement malgré la situation de la municipalité dans la zone
comment se produisent les épidémies du virus de la fièvre endémique de circulation du virus.
jaune. La saison des pluies, au cours des premiers mois de L'absence de FJ humaine ne suffit cependant pas à
l'année, présente les indices de précipitations les plus élevés empêcher la circulation du virus, car les humains contractent
dans la région de la forêt amazonienne. Cela facilite la l'infection accidentellement et sont des hôtes sans avenir,
reproduction des moustiques, y compris le vecteur potentiel jouant un rôle peu important dans le maintien du virus dans
Hg. janthinomys, dans la forêt. Lorsque les pluies diminuent, la nature. Des études entomologiques et épidémiologiques
la quantité de moustiques dans la forêt diminue continues doivent être menées dans différents sites où des
progressivement (tableau). Lorsque la population de foyers ou des cas de fièvre jaune ont été signalés pour
moustiques vecteurs diminue, le virus YF disparaît. prouver que les moustiques Haemagogus maintiennent le
À Breves et Afuá en 1999, les cas signalés résultaient virus de la fièvre jaune verticalement.
clairement d'un échec de la campagne de vaccination, L'apparition de cas de FJ dans d'autres régions au même
puisqu'après la flambée de 1998, les habitants d'Afuá et de moment ou dans un court laps de temps soutient également
Breves ont été vaccinés. Cependant, certains habitants notre hypothèse. Étant donné que certaines municipalités
d'Afuá n'ont pas été vaccinés et ont migré vers des zones sont situées à plus de 1 500 km des municipalités d'Afuá et
proches de celles où des cas avaient été signalés de Breves (figure 1), le virus de la fièvre jaune doit y être
précédemment. L'apparition de ces cas et l'isolement du présent ; lorsque des personnes non immunisées pénètrent
virus YF chez Hg. janthinomys et des singes indiquent une dans la forêt, elles sont infectées. Par conséquent, l'apparition
circulation intense du virus. La circulation du virus pendant de cas est le résultat d'une circulation silencieuse et
deux ans dans la même zone limitée est probablement restreinte du virus dans la forêt d'une région.
due au fait que les œufs des moustiques infectés sont restés D'autre part, les cas de fièvre jaune en Amérique du Sud
dans la région. Lorsque la saison des pluies a commencé, n'ont jusqu'à présent été transmis que par des vecteurs
les œufs de Hg. janthinomys ont éclos, et probablement sylvatiques, en particulier Hg. janthinomys (3,11,21). La
beaucoup d'entre eux sont nés infectés par transmission sensibilité de la population d'Ae. aegypti d'Amérique du Sud
verticale. Bien que peu de preuves de cette possibilité au virus de la fièvre jaune doit être établie, compte tenu du
aient été obtenues dans la nature, elle est plausible car on risque accru de réapparition de la transmission urbaine (22-
pense que la population de singes n'est pas assez 24). La survenue annuelle de plusieurs cas au Brésil et de
importante pour maintenir le cycle sylvestre (17). En effet, centaines de cas au Pérou et en Bolivie peut avoir permis un
les singes qui sont gravement infectés meurent ou contact entre le virus de la fièvre jaune et Ae. aegypti. Il est
deviennent immunisés, ce qui empêche toute nouvelle surprenant de constater que la transmission urbaine n'a pas
infection (8,18). Par ailleurs, les preuves que les petits encore été signalée, à l'exception de six cas à Santa Cruz, en
mammifères (en particulier les rongeurs et les Bolivie (25). Il est donc
marsupiaux) jouent un rôle dans le cycle d'entretien n'ont
été que rarement apportées.
nécessaires pour établir le niveau d'infectivité et de
susceptibilité de l'Ae. aegypti d'Amérique du Sud au virus YF.
Tableau. Comparaison du nombre de moustiques collectés sur des capture et du taux d'infection minimal (TIM) pour Haemagogus janthinomys,
appâts humains, du nombre de souches de FJ isolées par lieu de État de Pará, Brésil, 1998-1999

Vol. 7, n° 3 Supplément, juin 2001 571 Maladies infectieuses


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Hg. L'étape la plus importante dans le contrôle de la fièvre
Souches janthinomys jaune serait une résolution à l'échelle du continent pour
Lieu Année isolé appâté MIR Saison
améliorer la vaccination contre la fièvre jaune (6,26,27). La
Afuá 1998 4 296 (14) 1.35% Pluies
protection acquise avec le vaccin 17D dure jusqu'à 10 ans ;
Altamira 1998 13 819 (54) 0,96%-2,01%
Précipitations
après cette période, l'Organisation panaméricaine de la
Altamira 1999 - 129 ( 8) - Sec santé (OPS) et l'Organisation mondiale de la santé (OMS)
Breves 1999 11 546 (23) 2.01% Pluies recommandent une nouvelle dose, bien que certaines
( )= Nombre de lots de moustiques regroupés dans lesquels l'isolement du virus a études montrent une protection de 17 à 35 ans avec une
été tenté. seule dose (28,29). Une autre mesure importante
consisterait à créer un réseau (probablement basé sur
Internet) pour tenir tous les pays du continent rapidement
informés des cas ou des épidémies de fièvre jaune, en
particulier dans les principales zones à risque.

Maladies infectieuses 572 Vol. 7, n° 3 Supplément, juin 2001


émergentes
Synopsis
Jusqu'à présent, le financement du vaccin contre la 12. Walter SD, Hildreth SW, Beaty BJ. Estimation des taux
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de la fièvre jaune et de la dengue dans le foie humain fixé au
Ce travail a été financé par la FUNASA (Fondation nationale de
formol et inclus dans la paraffine par analyse immunohistochimique).
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Vol. 7, n° 3 Supplément, juin 2001 573 Maladies infectieuses


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