Evaluation de la génotoxicité dans

des mélanges complexes :

Cas des produits de phytothérapies

Dr Fabrice NESSLANY
Chef du service de toxicologie génétique
Institut Pasteur de Lille
Fondation
reconnue
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 -1-
 Les plantes médicinales :
Une utilisation ancestrale…

 Les traces de leur première utilisation remontent à 2100 avant J-C, en

Chine et Inde.
Le premier écrit date de 600 avant J-C en Inde

Le Susruta-samhita décrit

- 1120 maladies,
- 700 plantes médicinales,
- 64 préparations de substances minérales
- 57 préparations à base de substances
animales.

Shennong bencao jing (神农本草经),

le Classique de la matière médicale
Fondation
reconnue
du Laboureur Céleste
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 -2-
 Phytothérapie, un nouvel engouement?

Depuis la fin du 20ème siècle, la phytothérapie est particulièrement en

vogue en Europe occidentale et en Amérique de Nord

 Environ 42 % des américains usent régulièrement de médecines

alternatives et 67 % avouent s’être déjà tournés vers les médecines
parallèles

 En Europe, 35 % des médicaments prescrits par les médecins

sont d'origine naturelle

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reconnue
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 -3-
 Plantes médicinales inoffensives?

 En France, les végétaux sont en cause dans environ 5 % des cas

donnant lieu à un appel à un centre antipoison et de toxicovigilance.

 Entre 1985 et 1994 aux Etats-Unis, ce type d’intoxication était classé

au 4ème rang derrière les médicaments, les produits d’entretien
ménagers et les cosmétiques.

 Dans la majeure partie des cas ces intoxications restent mineures,

elles peuvent néanmoins être graves et mettre en jeu le pronostic
vital.

Fondation
reconnue
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 -4-
 Plante : Rarement toxique dans sa totalité

Fruits

Racines,
Graines Bulbes,
Rhizomes
Partie
incriminée

Tiges,
Fleurs
Feuilles

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reconnue
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 -5-
 Formes d'utilisation des plantes
médicinales

Plantes médicinales

Extraits et
Huiles
Infusions poudres de Constituants purs
essentielles
plante

Tisanes
Phytomédicaments
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reconnue
d’utilité
publique
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 Formes d'utilisation des plantes
médicinales
 If  Taxol (Taxotère)
 Pervenche de Madagascar  vinblastine

Plantes Pavot
médicinales  Morphine, Codéine
 Colchique  Colchicine
 Ipéca  Emétine
 Quinquina  Quinine
 Etc….

Extraits et
Huiles
Infusions poudres de Constituants purs
essentielles
plante

Tisanes
Phytomédicaments
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reconnue
d’utilité
publique
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 Formes d'utilisation des plantes
médicinales

Plantes médicinales

Extraits et
Huiles
Infusions poudres de Constituants purs
essentielles
plante

Tisanes
Phytomédicaments
Fondation
reconnue
d’utilité
publique
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 Les produits à base de plantes médicinales :
Des mélanges (très) complexes …

Groupes de constituants Exemples

Glucides
Mycopolysaccharides Shiitake ou lentin du Chêne (Lentinus edodes)
Inuline Grande Aunée (Inula helenium)
Mucopolysaccharides Guimauve officinale (Althaea officinalis)
Lipides
Acides gras Huile d'onagre (Œnothera biennis)
Glucosides
Glucosides cyanogéniques Ecorce de cerisier sauvage (Prunus serotina)
Glucosides cardiotoniques (et Muguet (Convallaria majalis)
digitaliques) Digitale (Digitalis purpurea)
 Intoxication par la digitale

Vincent van Gogh

« La maison jaune »
Van Gogh aurait souffert de Xanthopsie, une
distorsion dans la vision des couleurs

 Les objets apparaissent plus jaune qu’ils le

sont réellement, un signe habituel de toxicité de la
digitale

T.C. Lee, Van Gogh's vision, Digitalis intoxication ?

« Le Docteur Gachet » (1890) Journal of the American Medical Association, 8, 727 (1981)
Musée d’Orsay
 Les produits à base de plantes médicinales :
Des mélanges (très) complexes …
Groupes de constituants Exemples
Terpènoïdes
Monoterpènes Huile de menthe poivrée (Mentha piperita)
(a-, mono-, bi-cycliques, irréguliers)
Iridoïde Gentiane jaune (Gentiana lutea)
Sesquiterpènes Giroflier (Syzygium aromaticum)
Sesquiterpènes lactones Grande Camomille (Tanacetum parthenium)
Diterpènes (résines) Marrube blanc (Marrubium vulgare)
Taxol
Triterpènes (saponines, stérols, Igname sauvage (Dioscorea villosa)
stéroïdes)
Tétraterpènes (pigments Très nbx exemples…
caroténoïdes)
Polyprènes (isoprènes) Hevea (Hevea brasiliensis)
 Les produits à base de plantes médicinales :
Des mélanges (très) complexes …
Groupes de constituants Exemples
Phénoliques
Phénoliques simples Reine-des-prés (Filipendula ulmaria)
Phénopropanoïdes Curcuma (Curcuma longa)
Coumarines Angélique officinale (Angelica archangelica)
Naphtoquinones Droséra (Drosera rotundifolia)
Anthraquinones Nerprun purgatif (Rhamnus cathartica)
Flavonoïdes Aubépine (Crataegus laevigata)
Isoflavonoïdes Trèfle (Trifolium pratense)
Lignanes Chardon-Marie (Silybum marianum)
Tannins Aigremoine eupatoire (Agrimonia eupatoria)
 Leur nombre avoisine 5000 molécules [1]

Différentes classes de flavonoïdes

Flavonols (kaempférol, quercétine, myricétine, isorhamnétine …)

Flavanolols (taxifoline)
Flavones (apigénine, lutéoline)
Isoflavones (daidzéine, génistéine …)
Flavanones (hespérétine, naringénine, ériodictyol …)
Flavan-3-ols (catéchines, épicatéchines, théaflavines et théarubigines …)
Anthocyanidines (cyanidine, delphinidine, malvidine, pélargonidine, …)
Chalcones (Lutéine),
Dihydrochalcones (Phlorétine)
Aurones (Sulfurétine)….

[1) : USDA Database for the Flavonoid:

http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/Flav02-1.pdf
 Les produits à base de plantes médicinales :
Des mélanges (très) complexes …
Groupes de constituants Exemples
Alcaloïdes
Pipéridines Tabac indien (Lobelia inflata)
Tropanes Jusquiame noire (Hyoscyamus niger)
Purines Guarana (Paullinia cupana)
Isoquinolines Sanguinaire du Canada (Sanguinaria canadensis)

Indoles Éphédra chinois (Ephedra sinica)

Quinolizidines Genêt à balais (Cytisus scoparius)
Plus de 10 000 molécules ont été identifiées…

Différentes classes d’alcaloïdes

Pyrroles (méthylpyrrylcétone de la Valériane Officinale) &
Pyrrolidines (hygrine de la Coca)
Pipéridines (lobéline de la lobélie)
Tropanes (alcaloïdes des Solanacées)
Pyrrolizidines (alcaloïdes des Sèneçons)
Isoquinolines et dérivés (morphine, codéine, papavérine du Pavot)
Indoles (ergotamine de l’Ergot de Seigle)
Β-Carbolines (harmine, l'harmaline,etc de la liane Banisteriopsis caapi)
Quinolines (quinine, quinidine du Quinquina)
Quinolizidines (spartéme du Genêt à balai)
USDA Database for the Flavonoid:
http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/Data/Flav/Flav02-1.pdf
Une plante (extrait, poudres) est composée de plusieurs
centaines de constituants différents.

Intervention de plusieurs constituants de la plante simultanément

 Interaction, synergie d’action

Profils HPLC-DAD des extraits d’Asteracée halophyte obtenus par MAE (a), SFE (b) et ASE (c) dans les
conditions optimales pour chacune des trois techniques.
L. Gourguillon et al. / C. R. Chimie 19 (2016) 1133-1141
 Plantes médicinales : Différents types
d’interaction possible…
Altération de la biodisponibilité d’un médicament

• En diminuant l’absorption (plantes contenant fibres, mucilages, ou

tannins, par ex guimauve officinale, plantain, et thé)
• Changements du taux d’élimination du médicament (plantes laxatives,
plantes contenant de la caféine; exemple café, kola nut, maté et guarana)

• Par augmentation du taux d’absorption (poivre noir et de Cayenne) ou

par ralentissement du métabolisme (agrumes et réglisse)
 Plantes médicinales : Différents types
d’interaction possible…
Interaction avec les effets d’un médicament
Effets additifs
• Interactions les plus communes et les plus potentiellement « toxiques » qui
surviennent lorsqu’une plante et un médicament ont des mécanismes d’action
similaires (Extrait de Gingko biloba et inhibiteurs de PAF)
Koch E. Phytomedicine. 2005 Jan;12(1-2):10-6

Effets antagonistes
• Millepertuis et réglisse interagissent pharmacodynamiquement, par opposition
des effets, avec tous les antagonistes calciques à activité anti hypertensive (action
sur CYP 3A4  dim. [plasmatique])
• Réduction de l’efficacité d’un traitement anticoagulant de type AVK (plantes
avec quantités significatives de vitamine K : Griffe du diable, Ginseng,
Angélique de Chine…).
 Réglementation et instances officielles

Phytomédicament

Critères pour
l’enregistrement

Agence européenne des

médicaments

Efficacité Sécurité
Qualité
 Réglementation européenne
Directive 2004/24/CE relative aux médicaments
traditionnels à base de plantes
 Depuis le 1er mai 2011, seuls les médicaments enregistrés ou
autorisés peuvent se trouver sur le marché de l’Union

 Procédure d’enregistrement plus simple (ancienneté de l’usage

des médicaments traditionnels à base de plantes + garanties requises
quant à la qualité, la sécurité et l’efficacité),

 Fournir une documentation démontrant l’innocuité du produit

concerné dans les conditions d’emploi spécifiées et apporter la
preuve d’un historique de qualité avéré du produit (au moins 30
années d’utilisation en toute sécurité, dont 15 dans l’Union).
 Directive sur la documentation non clinique pour les
médicaments à base de plantes :
EMEA/HMPC/32116/2005
= Ligne directrice sur la documentation non clinique pour les
médicaments à base de plante pour obtenir l’AMM
 Les caractéristiques botaniques et phytochimiques des substances
/ préparations végétales;

 Documentation toxicologique (revue de la littérature scientifique ou

études) :
- Potentiel
 génotoxique
Rapport d’expert
doit être(Données
évalué toxicologiques publiées, interactions
- Etudesmédicamenteuses,
de cancérogenèseessais non cliniques,...)
(pas nécessaires quand il n'y a pas de suspicion d'un potentiel
cancérogène),
- Études de toxicité pour la reproduction, fertilité (pas nécessaires sauf si source de
préoccupation ou si le produit est explicitement indiqué durant la grossesse)
Ex activité hormono-mimétique décrite dans la littérature ou usage traditionnel de régulation de la fécondité

HMPC : Comité européen des médicaments à base de plantes

 Stratégie d’évaluation de la génotoxicité des substances
végétales :
EMEA/HMPC/107079/2007

Step 1 : Test d’Ames

Si résultats négatifs
Si étude réalisés conformément aux lignes directrices ICH et que le résultat est
clairement négatif, aucun autre test de génotoxicité n'est requis sur la base de la
Ligne directrice du HMPC
 Stratégie d’évaluation de la génotoxicité des substances
végétales :
EMEA/HMPC/107079/2007

Step 1 : Test d’Ames

Si résultats Positif
L'étape suivante dépend de la présence ou non de certains composés génotoxiques
connus dans la préparation végétale.
Step 1a : Une substance génotoxique bien caractérisée et évaluée est
identifiée comme responsable de l'activité génotoxique
Step 1b : Réponse génotoxique non attribuée à des constituants spécifiques
S'il n'y a pas de connaissance sur le(s) principe(s) actif(s), la substance à base de
plantes ou la préparation doit être étudiée selon étape 2
Step 2 : Essai de lymphome de souris ou autre essai sur cellules de
mammifères
Si le résultat du test est clairement positif, procéder au test du micronoyau chez le
rongeurs ou autres tests de génotoxicité in vivo
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Test d’Ames
(OCDE 471)
-
OK (STOP)
(Guideline EMEA) +

Recherche de l’origine
de la significativité

Revient parfois à chercher ….

Parfois on la
trouve!
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Test d’Ames
(OCDE 471)
-
OK (STOP)
(Guideline EMEA) +
Présence de substances mutagènes in vitro
non à risque génotoxique pour l’homme
Flavonoïdes ubiquitaires
(Quercétine, kaempférol,…) ?
Tests complémentaires (tests +/- ) Recherche de l’origine
de la significativité

Mutagenèse de la quercétine sur S typhimurium TA100 avec

et sans S9 mix
(Schimmer et al, 1988)

Involvement of rat cytochrome 1A1 in the

biotransformation of kaempferol to quercetin: relevance
to the genotoxicity of kaempferol
(Silva ID et al, Mutagenesis. 1997)
 Exemples de résultats + Ames test sur extrait de
plantes
Podophylline extraite des rhizomes et des racines de plantes vivaces du genre
Podophyllum  Émétique & Stimulant laxatif

Test d’Ames sur 3 souches de Salmonella typhimurium sur

podophylline (PD) avec et sans activation métabolique (S9).

Lin, M.C. 2009

 Exemples de résultats + Ames test sur extrait de
plantes

Test d’Ames sur 3 souches de Salmonella typhimurium sur podophylline (PD) &
podophyllotoxine (extrait de la podophylline) Quercétine, Kaempférol, avec et sans
activation métabolique (S9).

Lin, M.C. 2009

 Exemples de résultats + Ames test sur extrait de
plantes

Test d’Ames sur 3 souches de Salmonella typhimurium sur podophylline (PD) &
podophyllotoxine (extrait de la podophylline) Quercétine, Kaempférol, avec et sans
activation métabolique (S9).

 Implication Quercétine (et kaempferol) dans l’effet mutagène observé avec

PD (NB : manque co-exposition)
Lin, M.C. 2009
 Nombreux exemples publiés implication (+/-
exclusive) quercétine / kaempférol

Faible activité mutagène d'un extrait éthanol d’Alchémille (lady’s mantle) observée
dans TA98. L'activité mutagène de cet extrait de plante correspond aux taux de
quercétine dans les plantes  activité mutagène attribuée à la quercétine (Schimmer
et al., 1988).

Extrait de Marronnier d'Inde (Horse chestnut) faiblement mutagène avec activation

métabolique et non mutagène sans activation (Schimmer et al., 1994). Les effets
mutagènes sont probablement dus à la quercétine.

BOTANICAL SAFETY HANDBOOK Second Edition 2013 Edited by Zoë Gardner & Michael McGuffi
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Test d’Ames
(OCDE 471)
-
Plante OK
(Guideline EMEA) +
Présence de substances mutagènes in vitro
non à risque génotoxique pour l’homme (Ex.
Flavonoïdes ubiquitaires (Quercétine,
kaempférol,…)
 Tests complémentaires (tests +/- ) Recherche de l’origine
de la significativité

Interférence avec le système d’essai (Ames) (Ex.

Histidine [0.2 µM], AA libres, peptides) ? :
Aminogramme
 Tests complémentaires (T&W)[1]

[1] : Thompson C et al, Mutagenesis. 2005

 Souche TA98 / S9 +
Herbal extract XXX
3,0

2,5

2,0
Induction ratio

1,5 TA98 Assay 1 S9+ PI-

TA98 Assay 2 S9+ PI-
1,0 TA98 Assay 2 S9+ PI+

0,5
Standard vs. Treat & Wash S9+
3,0
0,0
50 150 500 1500 3000 5000
2,5
Doses µL/plate

Induction ratio 2,0

Test Item
1,5
Test item: Treat & Wash
Histidine
1,0 Histidine: Treat & Wash

0,5

0,0
50 150 500 1500 3000 5000
Doses µg/plate
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Test d’Ames
(OCDE 471)
-
Plante OK
(Guideline EMEA) +
Présence de substances mutagènes in vitro
non à risque génotoxique pour l’homme (Ex.
Flavonoïdes ubiquitaires (Quercétine,
kaempférol,…)
 Tests complémentaires (tests +/- ) Recherche de l’origine
Évaluation du
risque Explique la positivité
de la significativité
et avis d’expert
Interférence avec le système d’essai (Ames)
(Ex. Histidine [0.2 µM], AA libres, peptides) :
Aminogramme
 Tests complémentaires (T&W)
 Mais parfois,…
TA 98 / S9 +
Extrait PdR
7,0
6,0
Induction ratio

5,0
4,0
3,0 TA98 Assay 1
2,0 TA98 Assay 2
1,0
0,0
15 50 150 500 1500 5000 TA 98 / S9+
Doses µg/plate Extrait PdR vs. Quercétine
7,0

6,0
Induction ratio

5,0

4,0

3,0 Test Item

2,0
Quercétine

1,0

0,0
50 150 500 1500 5000
Doses µg/plate
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Test d’Ames
(OCDE 471)
-
Plante OK
(Guideline EMEA) +
Présence de substances mutagènes in vitro
non à risque génotoxique pour l’homme (Ex.
Flavonoïdes ubiquitaires (Quercétine,
kaempférol,…)
 Tests complémentaires (tests +/- ) Recherche de l’origine
Évaluation du
risque Explique la positivité
de la significativité
et avis d’expert
Interférence avec le système d’essai (Ames)
(Ex. Histidine [0.2 µM], AA libres, peptides) :
Aminogramme
 Tests complémentaires (T&W)

Recherche des constituants

spécifiques N’explique pas la
 Recherches bibliographiques positivité
(Mono, Pharmacognosie & phytochimie)
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes

Recherche des constituants spécifiques Test d’Ames

 Recherches bibliographiques N’explique pas la
(OCDE 471) positivité
(Mono, Pharmacognosie & phytochimie)
-
Plante OK
(Guideline EMEA) +
Présence de substances mutagènes in vitro
Existe-t-il une (ou plusieurs) non à risque génotoxique pour l’homme
(Ex. Flavonoïdes ubiquitaires (Quercétine,
substances connues mutagènes in kaempférol,…)
vitro (Ames !) ?  Tests complémentaires (tests +/- )
Évaluation du Recherche de l’origine
risque
oui Explique la positivité
de la significativité
et avis d’expert
Interférence avec le système d’essai (Ames)
Une (ou plusieurs) sont-elles (Ex. Histidine, AA libres, peptides) :
génotoxiques in vivo Aminogramme
 Tests complémentaires (T&W)
(cancérogènes) ?

Recherche des constituants

spécifiques N’explique pas la
positivité
 Données bibliographiques
 Liste non exhaustive de substances cancérogènes1
1,8-Cinéole Capsaïcine
1-Hydroxyanthraquinone Catéchine
8-Méthoxy-Psoralen Catéchol
Acronycine Cis-Isosarone
Alcaloïdes pyrrolizidiniques Citral
Anthraquinone Clivorine
Aquilide A Colchicine
Arecaïdine Coumarine
Arécoline Cycasine
Acides aristolochiques Diéthylamine
Ascaridole Estradiol
Asiaticoside 5-Methoxy-Psoralen
Bergapten Danthron
β-Asarone Méthyl-Eugénol
1 Dr. Duke's Phytochemical and Ethnobotanical databases
https://phytochem.nal.usda.gov/phytochem/search/list
Liste non exhaustive de substances génotoxiques1

Méthyl chavicol
Emodin,
Aloe-emodin
1-Hydroxyanthraquinone
Acides aristolochiques
Alcaloïdes pyrrolizidiniques
β-Asarone
Indole-3-Cabinol
Lucidine
Psoralen

Etc, .....
1 Dr. Duke's Phytochemical and Ethnobotatical databases
https://phytochem.nal.usda.gov/phytochem/search/list
Liste non exhaustive de substances génotoxiques1

Méthyl chavicol
Emodin,
Aloe-emodin
1-Hydroxyanthraquinone
Acides aristolochiques
Alcaloïdes pyrrolizidiniques
β-Asarone
Indole-3-Cabinol
Lucidine
Psoralen

Etc, .....
1 Dr. Duke's Phytochemical and Ethnobotatical databases
https://phytochem.nal.usda.gov/phytochem/search/list
 Liste des plantes contenant du méthyl-chavicol
(Dr. Duke's Phytochemical and Enthnobotantical Databases)

Acorus calamus
Agastache foeniculum Hyacinthus orientalis
Anethum graveolens Hyssopus officinalis Ocimum gratissimum
Artemisia dracunculus Illicium verum Ocimum canum
Boswellia serrata Magnolia denudata
Cinnamomum aromaticum Magnolia fargesii
Origanum majorana
Cinnamomum verum Persea americana
Magnolia kobus
Cuminum cyminum Pimenta dioica
Micromeria congesta
Dictamnus albus Pimenta racemosa
Micromeria myrtifolia
Dictamnus hispanicus Pimenta dioica
Myrtus communis
Dictamnus albus Pimpinella anisum
Ocimum basilicum Ravensara aromatica
Foeniculum vulgare Ocimum tenuiflorum Satureja hortensis
Ocimum sanctum Syzygium aromaticum
Tarragon
(E)-2-DIHYDROXY-4-METHOXY-4-METHOXYCINNAMIC-ACIDMETHYL-ETHER BETA-MYRCENE GLYCINE POLYPHENOL-OXIDASE PLANT --

Substances chimiques retrouvées dans ‘Tarragon’ (Artemisia dracunculus)

(E)-ARTEMIDIN BETA-PHELLANDRENE GLYCINE POTASSIUM
BETA-PINENE
(Z)-ARTEMIDIN HEPTA-4,6-DIYNE-1,3-DIOL PROLINE
BETA-SITOSTEROL
1,2-DIMETHOXY-4-ALLYLBENZENE HERNIARIN PROTEIN
BIOQUERCETIN SHOOT --
1,8-CINEOL HESPERETIN PROTOCATECHUIC-ACID
6 BUTYRIC-ACID PLANT --
1-(BUT-2-YNYL)-ISOCOUMARIN HEX-CIS-3-EN-1-OL-BETAD-GLUCOSIDE
QUERCETIN
102 CAFFEIC-ACID
1-(BUT-2-YNYL)-ISOCOUMARIN HISPIDULIN
CALCIUM 2 QUERCETIN-3'-METHYLETHER
TRIMETHOXYCINNAMYLALCOHOL HYPEROSIDE
QUERCETIN-3-(BETA-DGALACTOFURANOSYL-6-BETA-
CAMPESTEROL
2-CARBOXYARABINITOL INULOBIOSE LRHAMNOPYRANOSIDE)
CAMPHENE
2-HEPTANONE IRON 0 QUERCETIN-3-(DGALACTOFURANOSYL-6-BETA-
CAMPHOR LRHAMNOPYRANOSIDE
2-HYDROXY-4-METHOXYTRANS-CINNAMIC-ACID ISOEUGENOL
CAPILLARIN 0 QUERCETIN-3-(DGLUCOFURANOSYL-6-BETA-LRHAMNOPYRANOSIDE
3',5'-DIHYDROXY-4',7-DIMETHOXY-FLAVANONE ISOFRAXIDIN
CAPILLENE 0 QUERCETIN-3-GLYCOGALACTOSIDE

 360 substances (toutes parties)

3,4',5-TRIHYDROXY-3',7-DIMETHOXY-FLAVANONE ISORHAMNETIN
CAPILLIN QUERCETIN-3-O-BETA-DGLUCOSIDE
3,4',5-TRIHYDROXY-7-METHOXY-FLAVANONE ISOTHUJONE
CAR-3-ENE RHAMNETIN
3-(BUT-CIS-1-YNYL)-ISOCOUMARIN ISOVITEXIN
CAR-4-ENE RHAMNOSE
3-(BUT-TRANS-1-YNYL)-5-HYDROXY-ISOCOUMARIN KAEMPFEROL-3-ORHAMNOGLUCOSIDE
CARBOHYDRATES RIBOFLAVIN
3-(BUT-TRANS-1-YNYL)-8-HYDROXY-ISOCOUMARIN L-PINITOL
CARVONE RIBOSE
3-(BUT-TRANS-1-YNYL)-ISOCOUMARIN LEUCINE
0 CHAVICOL-METHYL-ETHER ROSMARINIC-ACID
3-BUT-CIS-1-ENYLISOCOUMARIN LIMONENE
CHLOROGENIC-ACID RUTIN
3-BUT-TRANS-1-ENYL-5-HYDROXY-ISOCOUMARIN LINALOL
CHRYSOERIOL RUTIN
3-BUT-TRANS-1-ENYL-8-HYDROXY-ISOCOUMARIN LINOLENIC-ACID
CINNAMIC-ACID-ACETATE SABINENE
3-BUT-TRANS-1-ENYLISOCOUMARIN LUTEOLIN
CINNAMIC-ACID-ETHYLESTER SALICYLATES
4-ALLYL-1,2-DIMETHOXYBENZENE LUTEOLIN-7-O-BETA-DGLUCOSIDE
CIRSIMARITRIN SALICYLIC-ACID
4-HYDROXY-BENZOICACID LYSINE
CIS-ALLO-OCIMENE SCOPARIN
4-METHOXYCINNAMALDEHYDE MAGNESIUM
CIS-ALPHA-OCIMENE SCOPARONE
6,7-DIMETHOXYCOUMARIN MALTOSE
CIS-ALPHA-OCIMENE SCOPOLETIN
7-(ALPHA-DGALACTOPYRANOSIDE)-PHYDROXYBENZOATEISORHAMNETIN MENTHOL
CIS-BETA-OCIMENE SERINE
7-METHOXYCOUMARIN MENTHOL
CIS-LINALOOL-OXIDE SINAPIC-ACID
7-OMETHYLAROMADENDRIN MENTHONE
CIS-OCIMENE SODIUM
9-HYDROXYGERANIOL METHYL-AMYL-KETONE

AESCULETIDIN-DIMETHYLETHER CITRAL METHYL-CHAVICOL SPATHULENOL

AESCULETIDIN-DIMETHYLETHER
COPPER
METHYL-EUGENOL SQUALENE

AESCULETIN STIGMASTEROL
COSTUNOLIDE MYRCENE
ALANINE SUCROSE
N-HENTRIACONTANE SHOOT --
ALLO-OCIMENE COUMARIN NARINGENIN
SYRINGIC-ACID

0 ALPHA-ALANINE TANNIN
CYCLOHEXENONE NEROL
ALPHA-CEDRENE THIAMIN
DEHYDROFALCARINDIOL NEROLIDOL
ALPHA-PHELLANDRENE THUJONE
DI-O-CAFFEOYL-QUINICACID NIACIN
ALPHA-PINENE - THUJONE
DIACETYLENE O-CRESOL
ALPHA-PROSTAGLANDINF-2 TRANS-ALLO-OCIMENE
DIHYDROCOUMARIN OCIMENE
ANETHOLE TRANS-ALPHA-OCIMENE
DIPHENYL-GLYOXAL OLEIC-ACID
ANISALDEHYDE TRANS-ANETHOLE
ELEMICIN P-COUMARIC-ACID
ANISIC-ACID TRANS-BETA-OCIMENE
EO P-CRESOL
ANISIC-ALCOHOL TRANS-ISOELEMICIN
ERIODICTYOL P-CYMENE
ANISOLE TRANS-LINALOOL-OXIDE
ESCULETIN P-HYDROXY-BENZOICACID
ANNAGENIN TRANS-METHYL-ETHERISOEUGENOL
ESCULETIN-DIMETHYLETHER P-HYDROXYCOUMARICACID
ARGININE TRANS-METHYLISOEUGENOL
P-MENTHA-1,8-DIENE
ARTEMEDINAL
ESTRAGOLE TRANS-OCIMENE
PMETHOXYCINNAMALDEHYDE
ARTEMEDINOL ESTRAGONOSIDE TYROSINE
P-METHOXYCINNAMYLALCOHOL
ARTEMIDIN EUGENOL VALDINOL-F
PATULETIN-3-OGLUCOSIDE
ARTEMIDINAL EUGENOL-4-O-BETA-DGLUCOSIDE VALINE
PATULETIN-3-ORHAMNOGLUCOSIDE
ARTEMIDINOL EUGENOL-METHYL-ETHER VANILLIC-ACID
PECTOLINARIGENIN
ARTEMIDIOL FAT XYLOSE
0 PEROXIDASE
ARTEMISIA-KETONE FERULIC-ACID ZINC
PHELLANDRENE
ARTIMIDINAL FIBER PHENOL
ARTIMIDINE FRUCTOSE PHENOLASE
ASCORBIC-ACID GABA PHENYLALANINE
ASPARAGINE GALLIC-ACID PHLOROGLUCINOL
ASPARTIC-ACID GAMMA-AMINOBUTYRICACID PHOSPHORUS
ATEMITIN GAMMA-TERPINENE PHYTOSTEROLS
BENZYL-DIACETYLENE GENTISIC-ACID PINOCEMBRIN
BETA-CAROTENE GERANIOL POLYACETYLENES
GLUTAMIC-ACID

GLUTAMINE

Dr. Duke's Phytochemical and Ethnobotanical Databases

HOXYCOUMARI CIS-BETA-OCIMENE MALTOSE POTASSIUM

A- CIS-LINALOOL-OXIDE MENTHOL PROLINE

TOPYRANOSI CIS-OCIMENE MENTHOL PROTEIN
PROTOCATECHUI
OXYBENZOATE CITRAL MENTHONE
MNETIN METHYL-AMYL- ACID
COPPER
KETONE QUERCETIN
XYCOUMARIN COSTUNOLIDE
METHYL- 2 QUERCETIN-3'-
COUMARIN
YLAROMADEN CHAVICOL METHYLETHER
CYCLOHEXENONE METHYL- QUERCETIN-3-(BE
OXYGERANIOL DGALACTOFURAN
ERIODICTYOL EUGENOL
ETIDIN-
YL
HYLETHER ESCULETIN MYRCENE
0 QUERCETIN-3-
ESCULETIN- N-
(DGLUCOFURANO
HENTRIACONTAN
DIMETHYLETHER
-6-BETA-
E SHOOT --
ESTRAGOLE
NARINGENIN
ESTRAGONOSIDE
 Risk assessment of consumption of methylchavicol and tarragon:
The genotoxic potential in vivo and in vitro. Mutation Research 696
(2010) 1–9. F Nesslany, D Parent-Massin, D Marzin
In vivo bone marrow micronucleus formation in Methylchavicol
the rat treated orally with methychavicol
9 80
1,2 3 8 NNG/cell 70
7
6 % cells in repair 60

% cells in repair
1 2,5
5 50

NNG/cell
4
Micronuclei/1000 PCE

40
0,8 2 3

PCE/NCE Ratio
2 30
1 20
0,6 1,5 0
Males 10
-1
Females -2 0
0,4 1
0/0 0/250 0/800 0/2000

0,2 0,5 Doses Methylchavicol alone (mg/kg)

0 0 Tarragon/MC
0 250 500 1000 9 80
Doses (mg/kg (x2)) 8 NNG/cell 70
7

% cells in repair
6 % cells in repair 60

NNG/cell
5 50
In vivo UDS in rat hepatocytes with methylchavicol 4
3 40
(MC), desiccated tarragon and desiccated tarragon 2
1
30
20
enriched with methylchavicol (*). 0
-1 10
-2 0

Percentage of cells in repair (>5 NNG/cell) and net nuclear

grains (NNG) (sampling time 12–16 h).
Doses Tarragon Leaves / Methylchavicol (mg/kg)
 Les Anthraquinones …

Aloe vera Plant

Cassia marilandica Leaf
Fallopia japonica Root S9 -
Frangula alnus Bark Extrait de plante contenant des
Anthraquinones
Frangula purshiana Bark 50,0

Galium odoratum Plant 45,0

Guarea rusbyi Plant 40,0

35,0
Morinda citrifolia Root

Induction ratio
30,0 TA1535
Polygonum multiflorum Root 25,0 TA1537
Rheum palmatum Root, Rhizome
20,0 TA98

Rheum officinale Root, Rhizome

15,0 TA100
TA102
10,0
Rubia cordifolia Root 5,0
Rumex crispus Root 0,0

Rumex acetosella Plant 312,5 625 1250 2500

Doses µg/plate
5000

Senna obtusifolia Seed

Senna occidentalis Root

Dr. Duke's Phytochemical and Enthnobotantical Databases

Aloe-emodin-induced DNA fragmentation in the mouse in vivo comet
assay. Mutation Research 678 (2009) 13–19
F Nesslany, S Simar-Meintières, H Ficheux, D Marzin

Aloe-emodin-induced DNA fragmentation in the

mouse in vivo comet assay on kidney and colon cells.
12

*
Mean of medians of OTM (4 animals)

10
*
*
8

* Kidney
4 Colon

* p<0.05
2

0
0
500
1000
2000
Doses (mg/kg)
 Génotoxicité des acides aristolochiques
Les acides aristolochiques (dérivés phénanthréniques nitrés) possèdent des activités
toxicologiques remarquables.
 Arbre de décision concernant la génotoxicité d’extraits de plantes
Inconvénients majeurs du MLA/TK (OCDE 490)
Recherche des constituants  Cellules d’origine murine, p53- (Honma, 2011)
ubiquitaires & spécifiques  Faiblement spécifique et peu sensible aux aneugènes

 Données bibliographiques Avantages majeurs du µnoyau (OCDE 487)

 Type cellulaire d’origine humaine, efficiente p53
 Spécifique & sensible (+aneugènes)
Existe-t-il une (ou plusieurs) Test du micronucleus
substances connues mutagènes in in vitro sur Lc
vitro (Ames !) ?
Humains (OCDE 487)
+
oui
Non
Identification de la (des) Test du micronucleus in vivo
Une (ou plusieurs) sont-elles -
substances responsables ? sur MO couplé au TdC
génotoxiques in vivo (2 organes : systémique et
(cancérogènes) ? local, e.g. foie + organe TGI)

oui non oui Évaluation du

Explique risque
la positivité in vitro?
Risque Non acceptable et avis d’expert
TTC (< 1,5 µg/j), Phase analytique & biblio : Certains
MOE (TD50, BMDL10) constituants pour lesquels tout risque ne peut
pas être exclu
 Project Name:
DEVELOPPEM ENT ANALYTIQUE Dosage 254 nm
Reported by User: MFE (MelanieF)
Developpement_AMM\TEST AMES\19 Hamamélis New Reported by User: MFE (MelanieF) Project Name:
System Name HPLC_15 Developpement_AMM\T EST AMES\19 Hamamélis New

Cas des poudres de plantes

System Name HPLC_15

SAMPLE INF O R MAT IO N

SAMPLE INF O R MAT IO N

Spectres phytochimiques (très) complexes et variables quali et quanti…

Sample Name: Hamamelis eau Date Acquired: 23/11/2011 18:27:03 CET
Sample Name: Hamamelis EtOH30% Date Acquired: 23/11/2011 19:23:02 CET
Sample Type: Unknown Acq. Method Set: Dosage Pharmeuropa Zorbax
Date Processed: 14/12/2011 12:18:22 CET Sample T ype: Unknown Acq. Method Set: Dosage Pharmeuropa Zorbax
Vial: 6 14/12/2011 12:22:39 CET
Processing Method:Dosage Pharmeuropa Zorbax Vial: 7 Date Processed:
Injection #: 1

en fonction des conditions d’extraction...

Injection #: 1 Processing Method:Dosage Pharmeuropa Zorbax
Injection Volume: 20,00 ul Channel Name: 254 nm
Run Time: 55,0 Minutes Proc. Chnl. Descr.: PDA 254,0 nm Injection Volume: 20,00 ul Channel Name: 254 nm
Run T ime: 55,0 Minutes Proc. Chnl. Descr.: PDA 254,0 nm
Sample Set Name:Dosage_231111 SampleWeight 1,00000 Dilution 1,00000 Sample Set Name:Dosage_231111 SampleWeight 1,00000 Dilution 1,00000

Auto-Scaled Chromatogram
Auto-Scaled Chromatogram

0,24 0,24
Acide gallique - 7,318

0,22 0,22

Acide gallique - 7,150

0,20 0,20

Gallotannin 1 - 26,588

Gallotannin 2 - 28,757
0,18 0,18

Flavonoide - 25,655

Gallotannin 4 - 30,792
0,16 0,16

Gallotannin 3 - 29,056
Flavonoide - 25,420
0,14 0,14

DEVELOPPEM ENT ANALYTIQUE Dosage 254 nm DEVELOPPEMENT ANALYTIQUE Dosage 254 nm

AU
AU

0,12 0,12
- 16,432

- 16,267
Reported by User: MFE (MelanieF) Project Name: Reported by User: MFE (MelanieF) Project Name:

28,245 2 - 28,027
0,10 0,10

Gallotannin 1 - 26,348

28,241
Developpement_AMM\TEST AMES\19 Hamamélis New Developpement_AMM\TEST AMES\19 Hamamélis New
acide chlorogenique

acide chlorogenique
Gallotannin 4 - 30,664
System Name HPLC_15

Hamamelitannin - 15,314
System Name HPLC_15

16,519
0,08

32,657
Hamamelitannin - 15,541

16,664

0,08

Gallotannin 3 -Gallotannin

32,480
25,268
0,06

31,100
0,06

Quercetol - 36,988
SAMPLE INF O R MAT IO N SAMPLE INF O R MAT IO N

Kaempferol - 42,974
24,179

27,346
Catéchine - 15,949

29,53129,339
28,461
24,806 25,043
Catéchine - 16,136

31,231
23,215 23,386

24,446
Quercetol - 36,846
32,596

14,703
23,980

32,404

33,071
0,04

22,511

26,948

34,133
25,008

33,291
31,606
14,868

5,783 5,905
0,04
24,231

27,119

7,578 7,768
6,176

12,456
7,949

25,979

34,454
12,611

22,311

27,770
20,900
26,710
23,206

28,567

30,498
22,721
23,648

31,988
32,281

34,817
8,601

24,761

30,348
22,202

29,845

36,881
30,986

19,143
29,160

33,077

11,298
25,733

34,169
20,722

33,287
8,826

31,422 0,02
28,874

6,646

13,520
23,460

31,148
22,980

10,719
22,562
22,005

4,426

9,812
19,119

30,481
11,466

4,483
24,567

27,547

3,828

6,412
2,663
30,262

8,143
3,133
3,299

6,206
4,858
5,025
10,038

0,02
6,854

10,907
3,816
2,722

4,887

6,648

7,753
3,916

Hamamelis EtOH60%
5,307
5,404

Sample Name: Date Acquired: 23/11/2011 22:11:02 CET

6,446
3,187

4,750

Sample Name: Hamamelis EtOH90% Date Acquired: 23/11/2011 23:07:01 CET

0,00
Sample Type:
0,00 Unknown Acq. Method Set: Dosage Pharmeuropa Zorbax Sample Type: Unknown Acq. Method Set: Dosage Pharmeuropa Zorbax
0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00
Vial:
0,00 5,00 8 10,00 15,00 20,00 Date Processed:30,00 14/12/2011
25,00 35,00 13:49:19 CET
40,00 45,00 Vial: 9 Date
Minutes Processed: 14/12/2011 13:55:37 CET
Injection #: 1 Processing Method:Dosage Pharmeuropa Zorbax
Minutes Injection #: 1 Processing
Hamamelis EtOH30%; Injection Volume 20,00; Date Acquired Method:
23/11/2011 19:23:02Dosage Pharmeuropa
CET; Channel Name 254 nm Zorbax
Hamamelis
Injection Volume: 20,00 ul
Run Time: 55,0 Minutes
eau; Injection Volume 20,00; Date Acquired 23/11/2011
Channel Name: 18:27:03 CET; Channel
254 nm
Proc. Chnl. Descr.: PDA 254,0 nm
Name 254 nm
Extrait eau Injection Volume: 20,00 ul
Run Time: 55,0 Minutes Peak Results
Channel Name:
Extrait éthanol 30%
254 nm
Proc. Chnl. Descr.: PDA 254,0 nm
SampleName RT Area Height USP Plate Count USP Tailing USP Resolution Processed Channel Descr.
Peak Results
Sample Set Name:Dosage_231111 SampleWeight 1,00000 Dilution 1,00000 Set Name:Dosage_231111 SampleWeight 1,00000 Dilution 1,00000
Name RT Area Height USP Plate Count USP Tailing USP Resolution Processed Channel Descr.
1 2,663 23740 3017 2812 0,96 PDA 254,0 nm
1 2,722 24470 3918 4388 PDA 254,0 nm
2 3,133 15483 2138 PDA 254,0 nm
2 3,187 12105 1716 4858 1,44 2,62 PDA 254,0 nm
Auto-Scaled Chromatogram 3 3,299 17932 1968 Auto-Scaled Chromatogram PDA 254,0 nm
3 3,816 37384 4917 4143 PDA 254,0 nm 4 3,828 20346 3296 9179 PDA 254,0 nm
0,24

Gallotannin 1 - 26,408
4 3,916 16757 2694 PDA 254,0 nm
0,24
5 4,426 30203 4183 PDA 254,0 nm

Acide gallique - 7,224

Acide gallique - 7,179

5
0,22 4,750 7762 1845 PDA 254,0 nm 0,22
Report Method: Hamamelis 254 nm Printed 15:45:03 Europe/Paris 14/12/2011
Gallotannin 4 - 30,600
Gallotannin 1 - 26,482

Gallotannin 2 - 28,629

SampleName Hamamelis EtOH30%

0,20
Report Method: Hamamelis 254 nm Printed 15:46:22 Europe/Paris 14/12/2011 0,20

Flavonoide - 25,485
Flavonoide - 25,551

Gallotannin 4 - 30,606
SampleName Hamamelis eau

Gallotannin 2 - 28,580
0,18 0,18
Gallotannin 3 - 28,918

0,16 0,16

Gallotannin 3 - 28,879
0,14 0,14
AU

AU

0,12 0,12
16,514 - 16,273

28,131

28,078
32,322 32,489

- 16,407

32,32832,492
0,10 0,10

acide chlorogenique16,639
acide chlorogenique
Hamamelitannin - 15,354

0,08

Hamamelitannin - 15,527
0,08
25,154

25,109
Quercetol - 36,846
31,01430,894

Quercetol - 36,809
0,06

30,913
27,244

0,06
24,079

Kaempferol - 42,856
28,347

27,182
29,388 29,195

Kaempferol - 42,780
33,944

28,295
24,042
23,563 23,308
Catéchine - 15,966

32,907

23,254
Catéchine - 16,108

33,928
24,860
24,653 24,896

29,36529,169
24,337

32,911
31,048
33,129
14,740

14,912

24,306

33,123
26,847

31,421
22,63722,420

0,04
34,246

0,04

26,776

31,433
22,348
5,929

34,232
34,604
12,497
7,611 7,797

27,656

30,331

5,972
36,747
25,877

34,586
20,799

32,114
31,789

36,714
23,132

27,587
30,198

12,629

25,802
29,688

30,331
8,622

22,116

20,729

31,821
22,585
23,048
23,515

30,198
19,076

7,6797,866

24,620

29,688
22,042
8,721
11,309

20,565

19,058
11,407

0,02
14,138
13,576
6,693

20,528
0,02
10,726

14,345
9,819

6,746

13,776
10,836
4,559

6,455
3,824
2,675

9,951
8,167
3,250
3,129

6,507

8,254
3,854
4,614
3,151

0,00 0,00
0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00 0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00 45,00
Minutes Minutes

Extrait éthanol 60%

Hamamelis EtOH60%; Injection Volume 20,00; Date Acquired 23/11/2011 22:11:02 CET; Channel Name 254 nm Hamamelis EtOH90%; Injection Volume 20,00; Date Acquired 23/11/2011 23:07:01 CET; Channel Name 254 nm

Name RT Area Height USP Plate Count

Peak Results
USP Tailing USP Resolution Processed Channel Descr.
Extrait éthanol 90% Peak Results
Name RT Area Height USP Plate Count USP Tailing USP Resolution Processed Channel Descr.
1- Un extrait éthanolique de coriandre + dans le test d'Ames dans les souches
TA98 et TA100 de Salmonella typhimurium (Mahmoud et al., 1992) mais
aucune activité mutagène des extraits dans l'eau, le méthanol ou l'hexane (Bersani
et al., 1981, Higashimoto et al., 1993).

2- Activité mutagène d'un extrait aqueux de citronnelle (Rivera et al., 1994) alors
qu’inversement, un extrait à l'éthanol était antimutagène (Vinitketkumnuen et al.,
1994).

3- Un extrait à l'éthanol de clou de girofle présentait une forte activité mutagène

dans la souche TA100 et une faible activité dans TA98 (Mahmoud et al., 1992) alors
qu’un extrait aqueux n'a montré aucune activité mutagène (dos Santos et al., 2008).

BOTANICAL SAFETY HANDBOOK 2nd Edition 2013 Edited by Zoë Gardner & Michael McGuffin
 Conséquence dans l’évaluation de la génotoxicité de
poudres de plantes…

Directive EMEA/HMPC/67644/2009

« Lorsque toute la substance végétale est incorporée directement dans le

médicament à base de plantes (capsules, comprimés), le matériel d'essai pour les tests
de génotoxicité, devrait, en théorie, couvrir l'ensemble du spectre des constituants
phytochimiques, y compris les constituants polaires et non polaires.
Les matériaux d'essai pour les essais de génotoxicité devraient donc inclure des
solvants d'extraction qui englobent l'ensemble du profil
phytochimique. Le choix des solvants devrait être justifié. »

Nécessité de couvrir totalement le spectre des constituants phytochimiques

 Utilisation de solvants polaires et non polaires (compatibles avec les tests) : 2/3
tests d’Ames
Exemple de solvants à polarité étendue : eau, éthanol 50%, éthanol absolu
 S9 +/- TA98
Polar extract Apolar extract
5,0 3,0
Induction ratio

4,0
3,0 TA1537 S9- 2,5
2,0 TA1537 S9+
1,0 2,0

Induction ratio
TA98 S9-
0,0
TA98 S9+ TA98 S9- Assay 2
1 3 10 30 100 1,5
Quercetin S9-
Doses µL/plate
1,0 TA98 S9+ Assay 2
Quercetin S9+
S9 +/- 0,5

Mid-range extract
0,0
5,0
1 3 10 30 100
Induction ratio

4,0
TA1537 S9- Doses µL/plate
3,0
2,0 TA1537 S9+
1,0 TA1537
TA98 S9-
0,0
TA98 S9+
Apolar extract
1 3 10 30 100 5,0

Doses µL/plate Présence de substances mutagènes in

4,5
4,0 vitro non à risque génotoxique pour
S9 +/- 3,5
l’homme : Quercétine
Induction ratio

Apolar extract 3,0

5,0 TA1537 S9- Assay 2
2,5
4,0 Quercetin S9-
Induction ratio

2,0
3,0 TA1537 S9- TA1537 S9+ Assay 2
1,5
2,0 TA1537 S9+ Quercetin S9+
1,0
1,0 TA98 S9- 0,5
0,0 TA98 S9+ 0,0
1 3 10 30 100 1 3 10 30 100
Doses µL/plate Doses µL/plate
 Conclusions
Les 20 dernières années ont montré que la phytothérapie n'est pas sans risque!
Inconnues concernant la composition d’un grand nb de préparations (milliers de
substances différentes / espèce)
Grande diversité des extraits de plantes (partie, solvant(s), teneur,...)!

Extrapolation des données existantes (EMEA/HMPC/67644/2009 &

EMEA/HMPC/32116/2005 Rev.1 du 22 Août 2017)

Données sur des extraits produits à partir de la même substance végétale avec des
solvants d'extraction étroitement apparentés (ratio éthanol/eau ≠)

 S'il existe des données sur la génotoxicité (positive ou négative) d'une substance
végétale ou d'une préparation à base de plantes, elles peuvent être extrapolées à
d'autres substances végétales ou à des préparations à base de plantes au cas par cas
(comparaison du profil phytochimique)
 Justification complète démontrant que les différences ne devraient pas modifier la
génotoxicité.
 Conclusions
Les 20 dernières années ont montré que la phytothérapie n'est pas sans risque!
Inconnues concernant la composition d’un grand nb de préparations (milliers de
substances différentes / espèce)
Grande diversité des extraits de plantes (partie, solvant(s), teneur,...)!

Poudres de plantes : Nécessité de couvrir tout le spectre phytochimique (≠ polarité)

Existence de résultats positifs détectés confirme la pertinence de l'évaluation du
potentiel de génotoxicité des plantes médicinales :  Importance de l’expertise
 Challenge analytique!
Quid des substances « anti-mutagènes » qui « masquent » la mutagenèse d’autres!
Selon EMEA/HMPC/32116/2005 & /107079/2007 : évaluation de génotoxicité par
le seul test Ames...
Nécessité d’évaluer les différents événements génétiques (induction de mutations,
clastogenèse et aneuploïdie)  Inclure des tests sur cellules de mammifères?
Quid d’1 seul test in vivo (même couplé) qd l’origine de la mutagenèse in vitro est
inconnue!? Validité sans réelle preuve d’exposition ?
 Merci à Sophie Simar
Merci pour votre attention

Fabrice.nesslany@pasteur-lille.fr
Fondation
reconnue
d’utilité
publique
Congrès SFT – Maison de la RATP – 23/24 novembre 2017 - 55 -
 Plantes médicinales  Hépatotoxicité

Chardon à glu

Impila

Alcaloïdes pyrrolizidiniques

Germandrée petit-chêne

Jin Bu Huan

Extraits hydro-alcooliques
de thé vert

Kava

L Peyrin-Biroulet et al (‎2004)
 Conclusions : Non, la nature ne fait pas
que du bon...

Atractyloside
(Chardon à glu, Impila)
Les 15 dernières années ont montré que la phytothérapie n'est pas sans
risque!

Les atteintes toxiques concernent la plupart des organes

(insuffisance rénale liée aux plantes chinoises, atteintes cardiaques
par intoxication à l'aconit ou atteintes pulmonaires liées à certaines
menthes....)
Liées à des substances chimiques parfois identifiées
EGCG
Extrait HA de thé vert)

Ac aristolochiques
(Aristolochiaa)

MéthylChavicol
Diterpènes (Tarragon,…) Aloe Emodine
(Germandrée) (Aristolochiaa)
 Conclusions

Problématique PE… phytooestrogènes

(isoflavone, phytostérols, lignanes!...
Resvératrol, forskoline, Génistéine,....