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Gynécologie Obstétrique & Fertilité 40 (2012) 490–493

Disponible en ligne sur

www.sciencedirect.com

Dix-septièmes Journées nationales de la Fédération française d’étude de la reproduction


(Paris, 19–21 septembre 2012)

Prostatite, fertilité : le point de vue du biologiste


Prostatitis and fertility: The biologist’s point of view

N. Le Foll, J.-C. Pont, J.-P. Wolf *, A. Ziyyat, J.-C. Juillard, V. Barraud-Lange


Service d’histologie embryologie–biologie de la reproduction, hôpital Cochin, AP–HP, 123, boulevard Port-Royal, 75014 Paris, France

I N F O A R T I C L E R É S U M É

Historique de l’article : Il y a deux leucospermies. La leucospermie inférieure à 106 leucocytes/mL est d’origine épididymaire.
Reçu le 9 juillet 2012 Elle est physiologique, améliore les qualités du sperme et de l’Assistance médicale à la procréation et doit
Accepté le 9 juillet 2012 donc être respectée. Les leucospermies supérieures à 106 leucocytes/mL sont, elles, d’origine prostatique
Disponible sur Internet le 17 août 2012
et témoignent d’une prostatite chronique. Les résultats de la FIV et de l’ICSI avec de tels spermes sont
toujours améliorés, de façon surprenante par rapport aux spermes sans leucocytes du tout, mais cette
Mots clés : amélioration est effacée par une augmentation très importante du taux de fausse couche. Faut-il traiter
Syndrome inflammatoire
cette leucospermie ou sa cause ? Un essai thérapeutique est mené à Cochin dans le cadre du PHRC Sigma
Leucospermie
Sperme de donneur
(Syndrome inflammatoire génital masculin) qui nous aidera à répondre à cette question. Il nous semble,
a priori, qu’il vaut mieux traiter la cause et respecter la leucospermie qui, elle, améliore les résultats des
Assistances Médicales à la Procréation.
ß 2012 Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.

A B S T R A C T

Keywords: There are two leukocytospermia: the leukocytospermia below 106 cells/ml comes from the epididymis. It
Inflammatory syndrome is physiological, improves sperm quality and ART outcomes and therefore must be respected.
Leucospermia Leukocytospermia above 106 cells/ml are of prostatic origin and reflect a chronic prostatitis. The results
Donor semen
of IVF and ICSI with these sperm are always surprisingly improved when compared to those obtained
using semen without leukocytes at all. But this improvement is offset by a dramatic increase in the
miscarriage rate. Should we treat this leukocytospermia or its cause? A clinical trial is conducted in
Cochin hospital with the PHRC Sigma (Male Genital Track Inflammatory Syndrome) that will help us
answer this question. It seems, a priori, that it is better to treat the cause and to respect the leukospermia.
ß 2012 Elsevier Masson SAS. All rights reserved.

1. Introduction qualité du spermatozoı̈de est un élément essentiel mais trop


souvent ignoré de la réussite de la prise en charge du couple infertile.
La prostate est une énigme pour les biologistes. Le plus souvent C’est la raison pour laquelle nous parlerons d’abord de la prostate
elle est ignorée, et si elle intéresse parfois, c’est en raison des saine et de son rôle dans la fécondance du sperme, puis du sperme
infections chroniques dont elle est le siège et qui, on le pense, doivent utilisé au laboratoire d’AMP.
obligatoirement dégrader la qualité du sperme et ses capacités À ce propos, il nous faut introduire une distinction essentielle
fécondantes. Mais pour s’y intéresser, encore faut-il s’intéresser à la entre les données qui ont été acquises in vitro et ce qu’il en est de la
fécondité naturelle des hommes et s’attacher avant tout à la qualité du sperme porté par un homme dont l’appareil génital
restaurer, ou du moins à l’améliorer, avant toute prise en charge en possède ses défenses immunitaires, ses défenses anti-oxydantes et
Assistance médicale à la procréation (AMP), ce qui est trop rarement ses défenses antibactériennes. Comme on le verra plus loin, cette
le cas. Pourtant, pour que l’AMP débouche sur une grossesse, il faut distinction est essentielle car les effets du syndrome inflammatoire in
que l’embryon soit de qualité, ce qui exige trois conditions vivo sont bien différents de ce qui a lieu dans un tube de laboratoire.
préalables : que l’ovocyte le soit, que le travail de laboratoire le
soit et que la qualité du gamète mâle soit optimum. C’est dire que la 2. La prostate saine

* Auteur correspondant. Les spermatozoı̈des sortis du testicule ne sont pas fonctionnels.


Adresse e-mail : jean-philippe.wolf@cch.aphp.fr (J.-P. Wolf). Ils sont immobiles et incapables de féconder les ovocytes. Leurs

1297-9589/$ – see front matter ß 2012 Elsevier Masson SAS. Tous droits réservés.
http://dx.doi.org/10.1016/j.gyobfe.2012.07.028
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interactions avec l’épididyme et la prostate leur fait acquérir les In vitro, tout concourt à faire penser au caractère délétère des
propriétés indispensables à l’apparition de leur pouvoir fécondant. radicaux libres sécrétés par les leucocytes. La mobilité spermatique
La prostate agit entre autre par l’intermédiaire de la sécrétion s’effondre in vitro lorsqu’on met des leucocytes activés en présence
d’exosomes appelés prostasomes. Il s’agit de vésicules membra- d’un sperme de donneur [13]. Les paramètres même du mouve-
naires de 100 à 150 nm sécrétées par la prostate [1,2]. Leur ment sont effondrés [14]. La fragmentation de l’ADN spermatique
composition lipidique est particulière : elle comprend de grandes ainsi que les capacités fusiogènes du sperme évaluées par le test de
quantités de cholestérol et de sphingomyéline alors que les pénétration des ovocytes de hamster sont détériorés par les
phosphatidylcholine y sont moins abondants. Ces microvésicules radicaux libres [15,16]. Pour ces deux derniers paramètres, il faut
interagissent avec les spermatozoı̈des soit par fusion avec leur toutefois noter une légère amélioration passagère de ces para-
membrane soit par simple « docking » des vésicules sur la mètres due au fait que les radicaux libres sont également des
membrane spermatique suivi d’échanges. Ils augmentent la seconds médiateurs de l’homéostasie cellulaire. Ainsi, la compac-
mobilité spermatique [3]. Ils stabilisent les membranes et tion de l’ADN est améliorée par les taux bas de ROS avant d’être
préviennent la réaction acrosomique [4] ou au contraire l’induisent gravement perturbée par leur augmentation. C’est la même chose
à pH légèrement acide [5]. Toutefois ce pH n’étant pas le pH pour la capacité fusiogène. Ces données ne sont pas nouvelles.
prostatique [6], il est possible que cette action n’ait lieu que lorsque Par contre, l’effet des radicaux libres sur les capacités
le sperme se trouve dans le vagin. fécondantes des spermatozoı̈des en AMP montre une singulière
Ils peuvent aussi avoir une action protectrices des spermato- discordance. Une seule publication de Lackner et al. [17] avait
zoı̈des vis-à-vis des attaques immunitaires en inhibant le suggéré, sur un petit nombre de tentatives d’AMP, que la
complément [7]. Quelques unes des protéines inhibitrices du leucospermie n’était pas forcément un élément péjoratif en soit.
complément sont des GPI-AP [8] et peuvent être transférées aux C’est l’étude de Barraud-Lange et al. [18] qui a eu l’intérêt d’étudier
spermatozoı̈des par des mécanismes similaires à ceux des de manière plus approfondie le problème de la leucospermie sur un
épididymosomes. De plus les prostasomes inhibent la prolifération grand nombre de cas.
lymphocytaire [9] et régulent la phagocytose par les neutrophiles Le syndrome inflammatoire a été systématiquement étudié
et les monocytes [10]. Enfin, les prostatosomes ont des actions chez les patients pris en AMP à l’hôpital Jean-Verdier par la
antibactériennes, antivirales et anti-oxydantes [7,11,12]. détection de la leucospermie à l’aide du Leucoscreen1. Ainsi,
La prostate fonctionnelle est donc un élément essentiel de la 3676 ponctions correspondant à 1572 FIV et 2074 ICSI ont pu être
fécondité de l’homme. Il est d’autant plus important d’en restaurer analysées [19]. Les résultats ont quelque peu surpris : les taux de
si possible les fonctions devant une infertilité inexpliquée par fécondations étaient légèrement mais significativement aug-
ailleurs. Il est non moins important d’essayer de prévenir les mentés chez les patients leucospermiques (p < 0,03). Les taux
stérilités masculines consécutives aux infections. C’est le sens du de clivage embryonnaire étaient également augmentés passant de
PHRC Uris mené à Cochin qui a pour but de déceler les éventuels 59,3 à 63 % environ. Le taux de grossesse clinique passait de 22 à
passages à la chronicité des infections génitales aiguës de l’adulte 28 % et 31 % selon qu’il n’y avait pas de leucocytes dans le sperme
jeune. ou que leur taux était inférieur à ou supérieur à 106/mL. Le seul
élément péjoratif retrouvé est l’existence d’une augmentation des
3. La prostate pathologique fausses couches à 40,5 % en cas de leucospermies supérieures à 106/
mL comparé à 17,7 % quand elle est inférieure. Les surprises ne
La prostate pathologique c’est l’histoire de l’infection urogé- s’arrêtaient toujours pas là. Les grossesses étaient plus longues
nitale chronique. Jamais l’on ne fait de diagnostic d’une infection (p < 0,03) et les bébés plus lourds quand le mari avait un syndrome
génitale aiguë dans le cadre d’un bilan pour infertilité. En règle inflammatoire (p < 0,05). À termes identiques les bébés étaient
dans ces cas là, les patients sont symptomatiques, se plaignent de toujours plus lourds quand le père présentait un syndrome
douleurs et de brûlures urinaires et vont consulter. inflammatoire génital. Enfin, les analyses multivariées prenant
L’infection chronique se découvre, elle, au cours d’un bilan pour en compte l’âge de la mère, le type d’AMP, FIV ou ICSI, et la
infertilité. À l’interrogatoire du patient on retrouve une gêne leucospermie montraient que le risque d’avoir un enfant était
pelvienne ou périnéale, un désagrément passager, une brûlure multiplié par 1,6 (p < 0,002) en cas de leucospermie modérée mais
urinaire intermittente, une éjaculation moins satisfaisante. Mais revenait à 1,12 si elle était supérieure à un million du fait les
rien qui dans l’univers masculin pousse malheureusement, sponta- fausses couches dont le niveau devenait très importants.
nément le sujet à consulter. Il le fait d’autant moins que l’installation Nous avons voulu voir ce qu’il en était des paramètres
de ces signes s’est faite insidieusement au fil d’années et n’a pas spermatiques qui valaient de tels résultats. Les patients ont été
brutalement perturbé la vie sexuelle du patient. Le spermogramme classés en quatre groupes selon qu’ils n’avaient pas de leucocytes,
est sans particularité. On retrouve une asthénostératospermie qu’ils en présentaient moins de 0,5106/mL, et moins ou plus de
parfois associée à une oligospermie. Ce qui doit attirer l’attention, 106/mL. Les paramètres du sperme ont été analysés ainsi que les
c’est une présence anormalement élevée de cellules rondes, une valeurs de la biochimie séminale. Les paramètres tels que volume,
asthénospermie isolée, fut-elle seulement secondaire. concentration et vitalité spermatiques ne sont pas modifiés par le
L’infection chronique, d’ailleurs est elle même décevante dans syndrome inflammatoire. Mais la mobilité est améliorée signifi-
son tableau. Un germe est rarement retrouvé aux examens cativement surtout celle de type b dans la classification de l’OMS
cytobactériologiques. La spermoculture est fréquemment négative (p < 0,003) pour les spermes avec leucocytes quand elle est
ou peu significative. Le plus souvent on ne retrouve qu’un comparée à celle des patients infertiles sans leucospermie. La
syndrome inflammatoire évoluant à bas bruit, dont le signe morphologie est aussi améliorée pour les spermes leucocytosper-
cardinal est la présence d’un taux de leucocytes spermatiques miques (p < 0,02).
augmenté. C’est la leucospermie. Les leucocytes en eux-mêmes Quand on analyse la biochimie séminale des patients, un des
sont faits pour guérir le sujet. Leur présence en soit n’est pas seuls résultats significatifs retrouvé est une baisse de la
anormale mais c’est leur taux trop élevé pendant un temps trop phosphatase acide prostatique pour les patients présentant une
long qui finit par poser un problème. Celui-ci a d’ailleurs été très leucospermie supérieure à 106/mL. Il y a également une
difficile à identifier du fait de la contradiction qu’il y a entre les augmentation de la L-carnitine pour les patients ayant une
données établies in vitro et les constations cliniques qui ont pu être leucospermie modérée, expliquant certainement l’amélioration
faites dans les quelques études cliniques menées sur le sujet. de la mobilité de type b enregistrée chez ces patients. Le fructose, le
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Tableau 1
Influence de l’élastase sur les valeurs de la biochimie séminale.

Élastase n PA (103) U Citrate Fructose Carnitine


ng/mL mmol mmol nmol

< 500 166 49,6  37,4* 85,6  55,7* 55,4  43,0 960,1  651,0
500 à 1000 31 31,5  20,7 59,0  34,2 42,8  32,7 934,4  489,5
> 1000 27 33,7  24,7 59,8  37,8 39,9  19,4** 787,7  414,7

Total 224 45,2  35,0 78,8  37,8 51,8  39,9 935,7  607,4
*
Significativement différent des valeurs obtenues pour des valeurs de l’élastase supérieure à 500 ng/mL. **Significativement différent des valeurs obtenues pour des valeurs de
l’élastase inférieures à 1000 ng/mL

zinc et le citrate sont en baisse mais pas de façon significative [20]. des sécrétions épididymaires chutent régulièrement et de façon
Une autre lecture a été faite de ce syndrome inflammatoire à partir inversement proportionnelle à l’élastase, mais la baisse n’est pas
du dosage de l’élastase. Cette enzyme est sécrétée par PN significative. De façon générale, toutes les valeurs de la biochimie
neutrophiles activés et donc constitue un marqueur biologique séminale chutent avec l’augmentation de l’élastase (Fig. 1). Ainsi
du syndrome inflammatoire. De façon surprenante, il existe des pour des valeurs de l’élastase inférieures à 1000 ng/mL toutes les
élastases élevées pour des leucospermies nulles qui pourraient valeurs sont distribuées normalement. Pour des valeurs de
s’expliquer par des infiltrats leucocytaires prostatiques. Par contre, l’élastase supérieures, tous les marqueurs de la biochimie séminale
dès que la leucospermie dépasse 106/mL, il est inutile de doser ont des valeurs basses.
l’élastase qui est constamment élevée au-dessus des valeurs Ainsi, le seul lien effectif entre la leucospermie supérieure à
normales. Chez 224 patients nous avons fait une corrélation entre 106/mL et les données de la biochimie séminale est cette altération
les valeurs de l’élastase et celles de la biochimie séminale (Tableau des fonctions prostatiques, marqueur biologique d’une prostatite.
1). De façon intéressante nous avons mis en évidence une chute Il est bien sûr essentiel de savoir si les patients infertiles sont les
significative des marqueurs prostatiques, phosphatase acide et seuls à être leucospermiques ou si des hommes fertiles sont
citrate pour des valeurs d’élastase situées entre 500 et 1000 ng/mL. susceptibles de l’être aussi. La réponse n’est pas facile à trouver car
Pour ces valeurs, le fructose sécrété par les vésicules séminales est les hommes fertiles par définition ne viennent pas dans les
normal. Mais il chute significativement pour des valeurs de laboratoires d’AMP. En revanche, ils viennent dans les CECOS
l’élastase supérieures à 1000 ng/mL (Tableau 1). Enfin, les valeurs comme donneurs de sperme puisque ceux-ci doivent avoir fait

Fig. 1. Influence de l’élastase sur le taux des marqueurs de la biochimie séminale.

Fig. 2. Rapport cellules rondes/spermatozoı̈des en fonction de la production spermatique.


N. Le Foll et al. / Gynécologie Obstétrique & Fertilité 40 (2012) 490–493 493

Tableau 2
Issues des inséminations avec sperme de donneur en fonction des cellules rondes contenues dans le sperme.

Cellules rondes 0  106 > 106 p Total

ISD (n) 445 1980 1451 3876


Grossesse n (%) 56 (12,6) 357 (18,0) 244 (16,8) < 0,02 657
Accouchements n (%) 45 (80,4) 289 (80,9) 200 (81,9) 534 (81,2)
FCS n (%) 10 (17,9) 55 (15,4) 36 (14,7) 101 (15,4)
GEU n (%) 1 (1,8) 9 (2,5) 2 (0,8) 12 (1,8)
ITG 0 2 (0,6) 3 (1,2) 5 (0,8)

Total 56 355 241 652

Tableau 3 Déclaration d’intérêts


Issues des grossesses post-IAD en fonction de la concentration des polynucléaires
dans le sperme du donneur déterminée par cytologie.
Les auteurs déclarent ne pas voir de conflits d’intérêts en
PN Accouchements FCS GEU Grossesses relation avec cet article.
0 104 (83,2) 17 (13,6) 4 (3,2) 125
< 106/mL 1 (100,0) 0 (0) 0 (0) 1
Références
 106/mL 8 (66,7) 4 (33,3)a 0 (0) 12

Total 113 (81,9) 21 (15,2) 4 (2,9) 138 [1] Stoorvogel W, Kleijmeer MJ, Geuze HJ, Raposo G. The biogenesis and functions
a
of exosomes. Traffic 2002;3(5):321–30.
Comparaison versus absence de polynucléaires p = 0,08. [2] Théry C, Amigorena S, Raposo G, Clayton A. Isolation and characterization of
exosomes from cell culture supernatants and biological fluids. Curr Protoc Cell
Biol 2006;3:3.22.
preuve de leur fécondité. Nous avons donc analysé les cellules [3] Arienti G, Carlini E, Verdacchi R, Palmerini CA. Transfer of aminopeptidase
activity from prostasomes to sperm. Biochim Biophys Acta 1997;1336(2):269–
rondes et les leucospermies des donneurs de sperme du CECOS
74.
Cochin. Pour cette étude, la leucospermie n’a été évaluée que par la [4] Cross NL, Mahasreshti P. Prostasome fraction of human seminal plasma
cytologie (Schorr), ce qui fait que les valeurs trouvées sont prevents sperm from becoming acrosomally responsive to the agonist proges-
terone. Arch Androl 1997;39(1):39–44.
comparables pour les seuls donneurs, mais ne peuvent pas être
[5] Palmerini CA, Saccardi C, Carlini E, Fabiani R, Arienti G. Fusion of prostasomes
comparées aux valeurs des patients infertiles obtenues par le to human spermatozoa stimulates the acrosome reaction. Fertil Steril
leucoscreen. De façon intéressante, les donneurs sont également 2003;80(5):1181–4.
leucospermiques mais il y en a un moins grand pourcentage que [6] Sostaric E, Aalberts M, Gadella BM, Stout TA. The roles of the epididymis and
prostasomes in the attainment of fertilizing capacity by stallion sperm. Anim
pour les hommes infertiles. Par contre, il est intéressant de noter Reprod Sci 2008;107(3–4):237–48 [Epub 2008 Apr 29. Review].
que lorsqu’on étudie le rapport des cellules rondes sur la [7] Kitamura M, Namiki M, Matsumiya K, Tanaka K, Matsumoto M, Hara T, et al.
numération spermatique en fonction de la production spermatique Membrane cofactor protein (CD46) in seminal plasma is a prostasome-bound
form with complement regulatory activity and measles virus neutralizing
(Fig. 2) on peut voir que ce rapport est massivement inférieur à 5 % activity. Immunology 1995;84(4):626–32.
chez les donneurs fertiles alors que des valeurs beaucoup plus [8] Rooney IA, Heuser JE, Atkinson JP. GPI-anchored complement regulatory
élevées sont obtenues chez les patients infertiles. proteins in seminal plasma. An analysis of their physical condition and the
mechanisms of their binding to exogenous cells. J Clin Invest 1996;97(7):
Si l’on étudie les issues des inséminations avec sperme de 1675–86.
donneur (IAD), on voit que l’absence de cellules rondes n’est pas un [9] Kelly RW, Holland P, Skibinski G, Harrison C, McMillan L, Hargreave T, et al.
facteur favorisant (Tableau 2). La valeur optimum du rapport est Extracellular organelles (prostasomes) are immunosuppressive components
of human semen. Clin Exp Immunol 1991;86(3):550–6.
donc comprise entre 0 et 5%. Le taux de grossesse obtenu avec les
[10] Skibinski G, Kelly RW, Harkiss D, James K. Immunosuppression by human
spermes sans cellules rondes n’est que de 12,6 %, alors qu’il est au- seminal plasma – extracellular organelles (prostasomes) modulate activity of
dessus de 17 % quand les cellules rondes sont présentes (p < 0,02). phagocytic cells. Am J Reprod Immunol 1992;28(2):97–103.
[11] Andersson E, Sørensen OE, Frohm B, Borregaard N, Egesten A, Malm J. Isolation
En revanche, lorsqu’on étudie les issues de grossesses après IAD en
of human cationic antimicrobial protein-18 from seminal plasma and its
fonction de la leucospermie du donneur, on retrouve l’augmenta- association with prostasomes. Hum Reprod 2002;17(10):2529–34.
tion significative du taux de fausses couches au-dessus de 30 % [12] Saez F, Motta C, Boucher D, Grizard G. Antioxidant capacity of prostasomes in
alors qu’il n’est que de 13,6 en l’absence de leucocytes (Tableau 3). human semen. Mol Hum Reprod 1998;4(7):667–72.
[13] Aitken RJ, Clarkson JS, Fishel S. Generation of reactive oxygen species, lipid
peroxidation, and human sperm function. Biol Reprod 1989;41(1):183–97.
4. Conclusions [14] Aitken RJ, Buckingham DW, Brindle J, Gomez E, Baker HW, Irvine DS. Analysis
of sperm movement in relation to the oxidative stress created by leukocytes in
washed sperm preparations and seminal plasma. Hum Reprod 1995;10(8):
Au total, Il y a deux leucospermies : la leucospermie inférieure à 2061–71.
106 leucocytes/mL est d’origine épididymaire, elle est physiolo- [15] Aitken RJ, Gordon E, Harkiss D, Twigg JP, Milne P, Jennings Z, et al. Relative
gique, améliore les qualités du sperme et doit donc être respectée. impact of oxidative stress on the functional competence and genomic integrity
of human spermatozoa. Biol Reprod 1998;59(5):1037–46.
Les leucospermies supérieures à 106 leucocytes/mL sont, elles, [16] Vogelpoel FR, van Kooij RJ, teVelde ER, Verhoef J. Influence of polymorphonu-
d’origine prostatique et témoignent d’une prostatite chronique. Les clear granulocytes on the zona-free hamster oocyte assay. Hum Reprod
résultats de la FIV et de l’ICSI avec de tels spermes sont toujours 1991;6(8):1104–7.
[17] Lackner JE, Märk I, Sator K, Huber J, Sator M. Effect of leukocytospermia on
améliorés de façon surprenante par rapport aux spermes sans fertilization and pregnancy rates of artificial reproductive technologies. Fertil
leucocyte du tout. Mais cette amélioration est effacée par une Steril 2008;90(3):869–71.
augmentation très importante du taux des fausses couches. Faut-il [18] Barraud-Lange V, Pont JC, Ziyyat A, Pocate K, Sifer C, Cedrin-Durnerin I, et al.
Seminal leukocytes are Good Samaritans for spermatozoa. Fertil Steril
traiter cette leucospermie ou sa cause ? Nous menons un essai
2011;96(6):1315–9.
thérapeutique à Cochin dans le cadre du PHRC Sigma (Syndrome [19] Barraud-Lange V, Pont JC, Pocate K, Kunstmann JM, Chalas-Boissonas C, Ducot
inflammatoire génital masculin) qui nous aidera à répondre à cette B, et al. Seminal leukocytes and clinical outcomes with donor sperm insemi-
question. Il nous semble qu’il vaut mieux traiter la cause et nation. Fertil Steril 2011;96(6):1320–13240 [Epub 2011 Oct 7].
[20] Ziyyat A, Barraud-Lange V, SiferC, Ducot B, Wolf JP, Soufir JC. Paradoxical
respecter la leucospermie qui, elle, améliore les résultats des increase of sperm motility and seminal carnitine associated with moderate
Assistances médicales à la procréation. leukocytospermia in infertile patients. Fertil Steril 2008;90(6):2257–63.

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