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mode opératoire du TP
sur la chromatographie
de couche mince
d'alternanthera

Le mode opératoire du TP
sur la chromatographie de
couche mince d'Alternanthera
comprend les étapes
suivantes :

1. Préparation de l'échantillon :
prélever des feuilles
d'Alternanthera et les broyer
dans un mortier avec un
solvant approprié (comme
l'acétone ou le méthanol)
pour extraire les composés
souhaités.

2. Préparation de la plaque de
chromatographie : prendre une
plaque de chromatographie
de couche mince (CCM) et
marquer une ligne de départ
avec un crayon.

3. Application de l'échantillon :
déposer une petite quantité de
l'extrait d'Alternanthera sur la
ligne de départ à l'aide d'une
micropipette ou d'une pipette
Pasteur.

4. Développement de la
plaque : placer la plaque
de CCM dans un bécher
contenant un solvant
approprié (par exemple, un
mélange de chloroforme et
de méthanol) de manière à ce
que le bas de la plaque soit
immergé dans le solvant sans
toucher le fond du bécher.
Fermer le bécher pour éviter
l'évaporation du solvant.

5. Visualisation des spots :

laisser la CCM se développer
jusqu'à ce que le solvant
atteigne environ 2/3 de la
hauteur de la plaque. Retirer la
plaque du bécher et marquer
le front du solvant avec un
crayon. Laisser sécher la
plaque.

6. Révélation des taches :

placer la plaque de CCM sous
une lampe UV pour révéler les
composés fluorescents. Les
taches apparaissent comme
des points fluorescents.

7. Marquage des taches :

marquer les taches révélées
sous UV avec un crayon ou un
stylo pour les rendre visibles à
l'œil nu.

8. Mesure des Rf : mesurer

la distance parcourue par
chaque spot à partir de la ligne
de départ et calculer le facteur
de rétention (Rf) en divisant
cette distance par la distance
totale parcourue par le solvant.

9. Analyse des résultats :

comparer les Rf obtenus
avec ceux de composés
de référence connus pour
identifier les composés
présents dans l'échantillon
d'Alternanthera.