République Algérienne Démocratique et Populaire

Ministère de l'Enseignement Supérieur et de la Recherche Scientifique

Université M'hamed Bougara - Boumerdès

Faculté des Sciences

Département chimie

Domaine : Chimie
Filière : SM
Spécialité : Chimie matériaux

TP n°01 , 02et 03
Chromatographique
TP

Présenté par : Amrani Hassina

1. PRINCIPE DE LA CHROMATOGRAPHIE
Le principe de la chromatographie est basé sur les différences d’affinité des composés d’un
mélange entre une phase mobile et une phase fixe. De manière plus précise, les différents
constituants du mélange sont entraînés par la phase mobile et sont séparés graduellement sur
la phase fixe (ou stationnaire) en fonction de leur adsorption ou de leur solubilité
(→ solution), selon la technique chromatographique utilisée la face fixe et phase mobile

2. LES DIFFÉRENTS TYPES DE CHROMATOGRAPHIE

On peut classer globalement les différentes techniques chromatographiques en deux grandes
familles : les chromatographies en phase liquide

CHROMATOGRAPHIE SUR PAPIER

En chromatographie sur papier, le mélange à analyser est préalablement mis en solution. On
dépose une goutte de ce mélange liquide sur une feuille de papier. Le solvant migre
par capillarité, entraînant avec lui les différents constituants du mélange, qui s'arrêtent plus ou
moins loin de la tache formée par la goutte initiale selon leur interaction avec la cellulose du
papier.

 CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (CCM)

La chromatographie sur couche mince, est très semblable à la chromatographie sur papier, la
phase fixe étant une fine couche d'adsorbant (généralement de silice) déposée sur une plaque
de verre. Le mélange à étudier est déposé à l’aide d’un capillaire à environ un centimètre du
bord, puis placé dans une cuve contenant l’éluant. L’éluant migre sur la plaque de silice par
capillarité et entraîne les composés du mélange étudié, qui seront séparés s’ils possèdent des
vitesses de migration différentes. La plaque de chromatographie est ensuite lue directement si
les composés sont visibles, ou placé sous une lumière ultraviolette (UV).

Le principal intérêt de la CCM est l’identification rapide des composés d'un mélange, mais
cette technique ne permet pas le dosage d'un composé

Chromatographie sur colonne

La chromatographie sur colonne est fondée sur le même principe que la chromatographie
sur couche mince, sauf que la silice ne se trouve pas sur une plaque mais dans une colonne.
Cette technique est très utilisée dans la purification en chimie organique. La séparation des
composés est provoquée par l'écoulement continu d'un éluant passant dans la colonne par
gravité ou sous l'effet d'une faible pression. Les composés sont entraînés par l’éluant à des
vitesses différentes en fonction de leurs affinités avec la silice et avec l’éluant. Ce procédé
permet de séparer les différents composants d’un produit mais aussi de purifier le produit
d’une réaction

TP n01 : chromatographie sur papier

But ce travaille : séparation les colorants contenus dans diverses de feutre

Partie expérimental :

1- Produits et matériel

Matériel produits

-papier filtre - Butanol

- les feutre différents - Ethanol

Couleurs - solution ammoniacale 2M

-Bécher de 800ml - eau salée

Mode opératoire :

 Dans bécher ,verser 6ml de butanol , 2ml d’etanol et2ml de solution

ammoniacale 2M . et ferme le bécher
 On tracer au crayon noir sur papier filtre une ligne de haut 0 ,5 cm inférieur du
papier.
 Déposer sur chaque croix , une goutte d’encre à l’aide des proposé
 Placer le papier dans le bécher
 Observer le comportement des tache de marqueurs pendant 20min
 En fin laisser le papier sécher déroulé à l’aire libre
Le résultat dans la figure n01 :
 Figure n°01 : les résultat d’analyse chromatographie sur papier .

La réponse sur les questions :

a-schéma annoté du montage

b- parce que :
Fermer le récipient (la cuve doit être saturée de vapeur de solvant). Pour que la saturation et
l'élution soient plus rapides, on peut placer une bande de papier filtre contre les parois de la
cuve chromatographie

c-les tache que ne migrent pas toutes de la même façon parce que

d- calcul le rapport frontal Rf :

Tache n°01(point H= 6cm
noir) Rf
hb= 1,5cm Rf= h/H
Couleur bleu 0,25 cm
Couleur rouge 0,75cm hr=4,5cm

- point verte :

Point verte Rf hbleu=1,5cm

Couleur bleu 0,25cm
hjaune= 4,5cm
Couleur jaune 0,75cm

-point rouge

Point rouge Rf
Couleur orange 0,13
horange=0,8cm
Couleur rouge 0,73
hrouge=4,4cm

TP n°02 : Chromatographie sur couche mince

But de ce travaille : séparation et identification des constituants de sirop de

menthe par CCM .

Matériels produits

Plaque CCM sirop de menthe

Cuve chromatographique Ethanol

Verre de montre pouvant couvrir le bécher Mélange éthanol / eau salée saturée
Mode Opératoire :

 on préparer la plaque
 prendre une bouillie épaisse de gel de silice (100g dans 110ml d’eau )
 la répartir sur les plaques et en utilisant un étayeur spécifique , sur une épaisseur de
0 ,25 à 0,3 cm

 on porte les plaques dans l’étuve et conserver

Figure n°02 : les plaques dans l’étuve .

On remarque qu’il ya migration de point et aussi une seul couleur c’est la couleur vert, donc
il ya un constituant

Conclusion :
La chromatographie sur couche mince c’est plus rapide et donné la pureté d’un
composé organique plus utilisé par les rechercher.

TP n°03 : Chromatographie sur colonne

But de travail : Identification des constituants d’un sirop de menthe

Partie expérimentale

Produits Matériels
Gel de silice coton

L’eau distillée la colonne

Sirop pipette

Ethanol / eau salée

Mode opératoire :

1er étape : Préparation de la colonne

 On place tout d’abord un morceau de coton au fond de la colonne que l’on recouvre
d’éluant, afin d’éliminer l’aire emprisonné dans le coton .on rajoute 10g de gel de
silice au dessus du coton, afin que la phase stationnaire ne puise pas s’échapper de la
colonne

 Enfin, on remplit la colonne avec la phase stationnaire en réalisant une suspension de

silice dans le premier éluant qui est l'eau salée. Le gel ainsi formé est introduit dans
la colonne grâce à l'entonnoir. On rince avec l'éluant et on le laisse s'écouler
 Figure n°03 : chromatographie sur colonne.

les réponse :
a_ la première couleur c’est couleur jeune et la deuxième colorant c’est le vert claire

b_ Explication : quelque minute on observer une couleur jeune et on suit la couleur vert donc
o dit que le sirop de menthe définit par deux constituants.

C_la couleur jeune c’est le plus grand affinité pour le gel

D_ La chromatographie sur colonne est fondée sur le même principe que la chromatographie

sur couche mince, sauf que la silice ne se trouve pas sur une plaque mais dans une colonne.
Cette technique est très utilisée dans la purification en chimie organique.

Conclusion :
La technique de la chromatographie sur colonne permet la séparation des différents
constituants d'un mélange, mais elle peut être utilisée couplée à un moyen de détection,
comme par exemple une spectroscopie UV – visible ou une spectrométrie de masse et on
obtient ainsi une chaîne complète automatisable d'analyse.