Université « Dr.

Moulay Tahar » SAIDA

Faculté des sciences 2020/2021
Master II : Chimie Inorganique et Environnement

TP N° 5 : CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE (C.C.M)

La chromatographie est une technique d’analyse chimique utilisée pour séparer et
d’identifier les substances chimiques présentes dans un mélange. Elle nécessite un
support comme du papier ou une plaque à chromatographie et une phase liquide
appelée éluant.
L'éluant est un solvant pur ou mélange de solvants qui entraîne les espèces à analyser
par capillarité, alors que la phase fixe (matériau de la plaque : cellulose ou gel de
silice) les retient. Les corps purs migrent plus ou moins vite, ce qui permet leur
séparation.

Objectif
Savoir réaliser et interpréter une chromatographie sur couche mince (mélanges colorés et
incolores).

I/ Principe d’une chromatographie sur couche mince

Dans cette partie, on se propose d’identifier les colorants présents dans un colorant vert et de
vérifier si ce colorant est pur.
On dispose également de deux colorants purs le jaune et le bleu.

1.1/ Protocole expérimental

 Préparation de la cuve à élution :

L’éluant : (1V d’Ethanol pour 5V d’eau salée (NaCl) à 20g/L)
Placer l’éluant dans la cuve à élution. La hauteur de l’éluant dans la cuve doit être inférieure à
1 cm.
Couvrir la cuve d’un verre de montre afin de saturer l’intérieur en vapeur d’éluant.

 Préparation de la plaque de chromatographie

Prendre une plaque aux dimensions 4cm¿ 6cm en faisant attention de ne pas mettre les doigts
sur le gel de silice (la saisir par la tranche). Tracer un léger trait de crayon à 1cm du bord
inférieur (ligne de dépôts) puis un autre à 1cm du bord supérieur (ligne d’arrivée du front de
l’éluant).
A l’aide d’un cure dent, placer une tâche de chaque colorant sur la ligne de dépôt. Les dépôts
devant être rapides, placés à 1 cm des bords et espacés de 1 cm. Repérer en haut de la plaque
la position et la nature des dépôts (J pour jaune et V pour vert…). Sécher alors vos dépôts en
soufflant dessus.

 L’élution
Placer la plaque dans la cuve à élution le plus verticalement possible et
placer dessus le verre de montre.
Laisser l’élution se produire sans bouger la cuve. Vous retirerez la
plaque de la cuve lorsque le front du solvant sera à 1 cm du bord

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supérieur de la plaque (ligne d’arrivée du front du solvant). Sécher alors la plaque en soufflant
dessus.

 Révélation du chromatogramme
- Dans le cas de composés colorés, le chromatogramme est directement exploitable.
- Pour les composés incolores, il est nécessaire de faire apparaître les taches : c'est
l'étape de révélation.
On peut pour cela utiliser une lampe à ultraviolet, des vapeurs de diiode ou une solution de
permanganate de potassium. Attention! Ne pas regarder directement la lumière d'une lampe à
ultraviolet.

 Exploitation de la C.C.M.
- La distance parcourue entre la ligne de dépôt et le centre de
la tache dans des conditions données (phase fixe et éluant
connus) est caractéristique de l'espèce chimique : elle est
identique que l'espèce soit pure ou dans un mélange.
- Pour identifier une espèce d'un mélange, on peut donc
comparer la distance parcourue pour une tache d'un mélange
avec celle obtenue pour l'espèce chimique pure.
Les espèces qui ont migré à des hauteurs identiques sont les
mêmes.
On peut aussi calculer le rapport frontal (noté Rf) pour chaque tache
observée :

Questions :

1/ Pourquoi la hauteur de l’éluant doit-elle être inférieure à 1 cm ?

2/ Que se produit-il lorsqu’on introduit la plaque dans la cuve ?
3/ Le colorant jaune est-il pur ? (Justifier)
4/ Quelle est la composition du colorant vert ?
5/ Quel est le colorant qui migre le plus vite ? Pourquoi ?
6/ Calculer le rapport frontal (Rf) de la tâche bleue sur le chromatogramme.

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1.2. Chromatographie sur couche mince (Etude des substances incolores)

Identification des principes actifs dans quatre médicaments

On dispose de quatre médicaments : le Paralgan, le Co-paralgan, le Panadol-Extra et le

Xydol classés tous quatre dans la catégorie des antalgiques et antipyrétiques. On se propose
de mettre en évidence certaines espèces chimiques présentes dans ces médicaments.
2.1. Mode opératoire
- Saturer une cuve chromatographique avec l’éluant suivant :
Méthanol / acide acétique / H2O (60/30/10).
- Dans un bécher, écraser le quart d’un comprimé de Paralgan et le dissoudre partiellement
dans environ (5 -10) mL d’éthanol. Procéder de même avec un quart de comprimé de Co-
paralgan, Panadol-Extra et Xydol.
- Sur une plaque chromatographique, faire un dépôt de chaque solution.
- Développer le chromatogramme.
- Révéler en exposant la plaque sous une lampe UV.
2.2. Exploitation des résultats:
Répondre aux questions suivantes :
1 – Combien de taches apparaissent au dessus des dépôts ? Combien d’espèces chimiques
sont mises en évidence dans chaque médicament ?
2_ Schématiser le chromatogramme obtenu et noter les observations ?
3 – Comparer la hauteur des taches obtenues. Existe-t-il une substance commune aux quatre
médicaments ? Justifier.
4– En conclusion : La chromatographie est-elle une technique de séparation ou
d'identification d'une espèce chimique ? Justifier.