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Journal de recherche horticole 2020, vol. 28(2) : 71-82

DOI : 10.2478/johr-2020-0015
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PRODUCTION DE PLANTES DE SOJA POUR LA CULTURE HYDROPONIQUE

A PARTIR DE BOUTURE DE SEMIS DANS UN MILIEU CONTENANTR.HIZOBIUM
INOCULUM EN FONCTION DE DIFFÉRENTES CONCENTRATIONS DE
SOLUTION NUTRIMENTANTE ET DIFFÉRENTES SOURCES D'AZOTE

Naoki HATA*, Haruko FUTAMURA

École des sciences de l'environnement, Université de la préfecture de Shiga
2500, Hassaka-cho, Hikone-City, Shiga 522-8533, Japon

Reçu : janvier 2020 ; Accepté : juin 2020

ABSTRAIT
La culture du soja dans les systèmes hydroponiques suscite un intérêt croissant. Parce que les plants de soja peuvent
utiliser l'azote dérivé du N biologique2la fixation, l'utilisation deRhizobiumles plantes inoculées peuvent éliminer ou diminuer
le besoin de fertilisation azotée minérale dans les systèmes hydroponiques. Ainsi, l’objectif de cette étude était d’établir des
méthodes efficaces pour réaliser des plants de soja inoculés pour un système hydroponique à base de substrat. Les plantes
inoculées ont été efficacement produites en enracinant des boutures de tiges de semis dans un milieu contenant un
Rhizobiuminoculant. Nous avons également étudié les effets de différentes formes d'azote et de concentrations de solutions
nutritives subrriguées sur la croissance et la formation de nodules racinaires des plantes inoculées. L’application d’une
solution nutritive sans azote a eu des effets positifs minimes sur la croissance et la nodulation des plantes inoculées. Les
plantes nourries à l'ammonium manquaient de nodules racinaires, quelle que soit la concentration en ammonium. De plus,
une solution nutritive à 50 % combinée à du nitrate ou de l'urée comme source d'azote n'a pas favorisé la nodulation des
racines. Par conséquent, les plantes inoculées doivent être soumises à une solution nutritive à environ 25 % complétée par
du nitrate ou de l'urée pour induire une croissance précoce et une nodulation avant la transplantation.

Mots clés: ammonium, nitrate, urée, subirrigation, système hydroponique sur substrat

INTRODUCTION pour la culture du soja en serre, notamment pour

La culture hydroponique permet aux producteurs de
contrôler les conditions environnementales, tout en
réduisant la quantité d'eau d'irrigation nécessaire à la
croissance des plantes, en augmentant la productivité et en
prévenant les infections (Palerme et al. 2012). Le soja (Glycine
max(L.) Merr.) est traditionnellement cultivée en plein champ
et les plants de soja cultivés en culture hydroponique ont
principalement été utilisés pour examiner les caractéristiques
physiologiques plutôt que pour la production commerciale
(Paradiso et al. 2014a). Cependant, des expériences spatiales
ont évalué l'adaptation des plants de soja aux systèmes
hydroponiques dans des environnements contrôlés et les
réponses des plantes aux paramètres climatiques et culturels
changeants afin d'identifier le protocole de culture optimal
pour la production alimentaire dans des systèmes de survie
bio-régénératifs. Au Japon, on a récemment constaté un
intérêt croissant pour l'application de systèmes de culture
hydroponique.
la production de soja végétal (edamame), qui
consiste à récolter des graines immatures.
Lorsqu'ils sont cultivés dans le sol, une partie de l'azote
absorbé par les plants de soja provient de la fixation
symbiotique de l'azote atmosphérique.2parRhizobiumespèces
bactériennes dans les nodules des racines des plantes (Cooper &
Scherer 2012 ; Ciampitti & Salvagiotti 2018). Parce que ce N2la
fixation peut fournir aux plantes des quantités suffisantes
d'azote, certaines études se sont concentrées sur la culture
hydroponique de plantes inoculées avecRhizobiumespèces pour
éviter ou diminuer le besoin de fertilisation azotée minérale
(Shoji et al. 1991 ; Paradiso et al. 2014b, 2015 ; Kontopoulou et al.
2015). Paradiso et coll. (2014b) ont rapporté que, par rapport à la
technique du film nutritif (NFT), la culture du soja sur laine de
roche influence positivement la nodulation des racines ainsi que
la croissance et le rendement des plantes, sans affecter la
composition immédiate des graines. Dans un tel système
hydroponique basé sur un substrat, l'inoculation des plants

hata.n@ses.usp.ac.jp
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peut être supérieure à l'inoculation du lit de culture en ce MATÉRIELS ET MÉTHODES

qui concerne la technologie requise et le coût. Par
conséquent, une méthode efficace pour inoculer des plantes Matériel végétal et conditions de croissance Les graines

cultivées dans un système hydroponique basé sur un du cultivar de soja Tambaguro ont été semées dans des

substrat doit être développée, mais les informations plateaux en plastique de 30 × 40 cm remplis de terre de

disponibles sont actuellement insuffisantes pour le faire. pépinière disponible dans le commerce (Type S ; Yanmar,

Les graines de soja sont sujettes aux blessures par Japon). Les plateaux ont ensuite été recouverts de journaux

imbibition, qui font référence à la perturbation physique du tissu humides jusqu'à la levée des plants. Tous les plateaux ont
de la graine causée par une absorption trop rapide de l'eau, été placés dans un incubateur réglé à 25 °C, dans l'obscurité.
entraînant une émergence médiocre et instable des plantules Après la levée (3 jours après le semis), les plants ont été
(Nakayama & Komatsu 2008 ; Sato et al. 2019). Étant donné que transférés dans une serre de l'installation agricole
les graines de soja sont très grosses et sensibles aux blessures expérimentale de l'université de la préfecture de Shiga. Au
par imbibition, il est difficile de les semer directement dans des stade de la feuille primaire (8 jours après le semis), des
substrats hydroponiques (par exemple, des cubes de laine de plants à croissance uniforme ont été sélectionnés dans les
roche). Par conséquent, nous avons proposé que les graines plateaux et leurs hypocotyles ont été coupés à 4 cm sous le
soient semées et germées dans un sol de pépinière sans nœud cotylédonaire.
quantités d’eau excessives pour la transplantation ultérieure de Les tiges hypocotylédones des boutures ont été
plantes saines dans un système hydroponique. insérées individuellement dans des tubes en polychlorure de
La transplantation de plants directement du sol de la vinyle (PVC) (45 mm de hauteur et 56 mm de diamètre
pépinière dans des substrats ou des plates-bandes interne), contenant 100 ml de sable de silice (n° 4F ; Toyo
hydroponiques peut être possible, mais il existe un risque de Matelan, Japon) mélangé à 200 mg deRhizobium inoculant,
contamination par divers micro-organismes, même si les racines qui contenait des rhizobiums mélangés à de la tourbe
sont soigneusement lavées pour éliminer la terre attachée. De (Mamezo; Tokachi Federation of Agricultural Cooperative
plus, le lavage des racines est également un processus long et Association, Japon). Le fond de chaque tube en PVC était
laborieux. Par conséquent, on peut supposer que les plants recouvert d'une feuille résistante aux racines et perméable à
doivent être cultivés à partir de boutures de tiges de semis, ce l'eau (BKS9812 ; Toyobo, Japon) pour permettre l'arrosage
qui nécessite uniquement de planter la tige coupée dans des capillaire sans effondrer le milieu d'enracinement (sable de
substrats hydroponiques, comme dans la production silice avec unRhizobiuminoculant). Dix tubes en PVC avec des
hydroponique de roses. Ce processus permet d'économiser du boutures ont été placés sur un plateau pour la subirrigation à
travail en raison de l'absence d'étape de lavage des racines et partir du côté inférieur de chaque tube en PVC avec un
permet de produire des plants moins contaminés.. bouchon de 2 dm.3bouteille en plastique remplie d'une
En conséquence, nous avons émis l’hypothèse que des solution fraîche si nécessaire. La bouteille en plastique avait
plants de soja inoculés peuvent être produits efficacement un petit trou (8 × 8 mm) à la base, à environ 2 mm du fond,
via l’enracinement de boutures de tiges de semis dans un pour maintenir un niveau d'eau relativement constant
milieu contenant unRhizobiuminoculant. Une étude des d'environ 1 cm de profondeur dans le bac (Fig. 1). Les plantes
effets de divers facteurs environnementaux sur la croissance ont été soumises à une irrigation avec de l'eau du robinet
des racines et la nodulation a révélé que du sable de silice pendant la première semaine, puis avec les solutions
propre devrait être utilisé comme substrat d'enracinement nutritives respectives pendant encore 2 semaines.
au lieu de cubes de laine de roche, car il peut être facilement Expérience 1. Applicabilité d'une solution
éliminé du système racinaire et se caractérise par une très nutritive sans azote
faible teneur en éléments nutritifs. les niveaux. En outre, de Les graines ont été semées comme décrit ci-dessus le 27 mai
nombreuses recherches ont été menées sur la relation entre 2016 et des boutures de tiges de semis ont été insérées
la fertilisation azotée et la nodulation (Dogra & Dudeja 1993 ; dans le milieu d'enracinement le 4 juin 2016. Les plantes ont
Bhagu & Virk 2019). Par conséquent, dans cette étude, nous été cultivées pendant 3 semaines sous la lumière naturelle
avons examiné les effets de différentes formes d'azote et de du soleil sans ombrage dans une serre, et des irrigations
concentrations de solutions nutritives sur la croissance et la avec la solution nutritive ont été initié après la première
formation de nodules racinaires de boutures de soja semaine. Les traitements consistaient en une solution
plantées dans du sable siliceux contenant unRhizobium nutritive Enshi sans azote diluée à six concentrations (0, 10,
inoculant. 25, 50, 75 et 100 % de la concentration totale).
Amélioration de la nodulation dans les boutures racinées de soja. .................................................................. .................................................................. .........73
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La solution nutritive complète Enshi à pleine puissance Expérience 2. Applicabilité d'une solution nutritive
contenait les niveaux de sels suivants pour 1 000 dm3 contenant de l'azote
eau du robinet : 950 g Ca(NON3)2· 4 heures2O, 810 g KNO3, 500 g Les dates de semis et de coupe étaient respectivement les 20 et

MgSO4· 7H2O, 155 g NH4H2PO4, 3 g H3BO3, 2 g ZnSO4· 7H2O, 2 g 28 juin 2016. La gestion culturelle des boutures était la même

MnSO4· 4 heures2O, 0,05 g de CuSO4· 5 heures2O, 0,02 g Na2 que dans l'expérience 1, sauf que des solutions nutritives

Meuglement4, et 25 gNaFe-EDTA. Dans la solution sans azote, contenant de l'azote ont été utilisées (tableau 1). Les plantes ont

Ca(NO3)2· 4 heures2OK NON3, et NH4H2PO4ont été remplacés par été irriguées avec des solutions nutritives Enshi à quatre

CaCl2· 2 heures2D'ACCORD2DONC4, et KH2PO4. Chaque solution a concentrations (0, 10, 25 et 50 % de la concentration totale), avec

été préparée en mélangeant la solution complète et l'eau du une source d'azote sous forme de nitrate (NO3-N), l'ammonium

robinet (la solution à 0 % était constituée uniquement d'eau du (NH4-N), ou de l'urée (Urée-N). Des solutions nutritives à moitié

robinet). Comme contrôle normal de la croissance, des boutures concentrées ont été préparées pour chaque source d’azote et

de tiges de semis supplémentaires cultivées dans un milieu
d'enracinement sans leRhizobiumLes inoculants ont été irrigués
de la même manière avec une solution nutritive Enshi complète à
moitié concentrée. Toutes les solutions nutritives ont été ajustées
à pH 6,0 avec H2DONC4Avant utilisation.
diluées avec de l’eau du robinet. Semblable à l'expérience 1, des
plantes non inoculées cultivées avec une solution nutritive
complète Enshi à moitié concentrée ont été utilisées comme
contrôle de croissance normal. Toutes les solutions nutritives ont
été ajustées à pH 6,0 avec H2DONC4Avant utilisation.

Fig. 1. Vue d'ensemble d'un système de subirrigation. Si le niveau d'eau dans le bac diminue parce que l'eau est absorbée par les plantes (1), l'air entre dans la
bouteille en plastique par un petit trou (2), après quoi le niveau d'eau dans la bouteille diminue à mesure que le liquide sort (3), ce qui entraîne une augmentation du
niveau d'eau dans le bac sur une profondeur d'environ 1 cm (4). Une fois le niveau d'eau dans le bac rétabli, l'air cesse de pénétrer dans la bouteille et le niveau d'eau
dans la bouteille cesse de diminuer.

Tableau 1. Composition de la solution nutritive Enshi standard et modifiée avec différentes formes d'azote à une
concentration d'azote total constante de 17,3 mM

Nutriment Enshi Composition chimique (mM)

solution Ca(NON3)2 CONNAÎTRE3 NaNO3 NH4ClNH4H2PO4 KH2PO4 K2DONC4 CaCl2 MgSO4
Standard 8 8 0 0 1.3 0 0 0 2
Modifié
NON3-N 100 % 8 6.7 2.6 0 0 1.3 0 0 2
NH4-N 100 % 0 0 0 16 1.3 0 4 2 2
Urée-N 100% 0 0 0 0 0 1.3 3.35 4 2
Nutriment Enshi Composition nutritionnelle (mM)

solution NH4+ NON

3 − Urée-N PO43− K+ Californie2+ Mg2+ N / A+ DONC
4 2− Cl−
Standard 1.3 16,0 0 1.3 8 4 2 0 2 0
Modifié
NON3-N 100 % 0 17.3 0 1.3 8 4 2 2.6 2 0
NH4-N 100 % 17.3 0 0 1.3 8 4 2 0 6 20
Urée-N 100% 0 0 17.3 1.3 8 4 2 0 5h35 8
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Collecte et analyse de données Les feuilles sont devenues jaunes de la base vers le sommet des

Trois semaines après la coupe, les paramètres suivants ont plantes, ce qui se reflète dans l'intensité de la couleur verte des

été mesurés pour 10 individus par traitement : longueur de feuilles.

la tige principale, nombre de feuilles trifoliées, intensité de la Contrairement à la croissance des pousses, la croissance

couleur verte des feuilles et nombre de nodules par système des racines n'a pas été stimulée de manière significative par

racinaire. L'intensité de la couleur verte des deuxièmes l'application de la solution nutritive complète Enshi à moitié
concentrée (Fig. 4E). Les plantes inoculées traitées avec la
feuilles trifoliées entièrement développées a été mesurée
solution nutritive sans azote, à l'exception de la dilution à 0 %
avec le compteur de chlorophylle SPAD-502 (Minolta
(eau du robinet), avaient tendance à développer davantage de
Camera, Japon). Après avoir retiré le milieu d'enracinement,
racines adventives que les plantes témoins non inoculées, avec
le nombre de nodules ≥ 2 mm de diamètre a été déterminé.
le poids sec des racines le plus élevé pour une dilution à 25 %.
Les racines et les pousses ont été séparées et séchées dans
Étant donné que les conditions de culture semi-aseptiques
une étuve à 60 °C, après quoi le poids sec constant a été
étaient assurées par la combinaison de sable de silice et de
enregistré. Les différences dans les valeurs des échantillons
boutures, les plantes témoins non inoculées n'ont jamais formé
(n = 10) ont été analysées avec le test de comparaison
de nodules racinaires (Fig. 4F). Une fois inoculés, le nombre de
multiple de Tukey-Kramer suite à une ANOVA.
nodules par système racinaire était plus élevé pour les dilutions
à 0 % et à 10 %, et diminuait avec l'augmentation des
concentrations de solution nutritive.
RÉSULTATS

Expérience 1. Applicabilité d'une solution

nutritive sans azote
Le taux d’enracinement adventif des boutures atteignait 100
% sans aucun traitement aux auxines. Dans tous les milieux
d'enracinement contenant un inoculant, des racines
adventives nodulées sont issues de la base des boutures
(Fig. 2). Les nodules sur les racines adventives étaient
principalement répartis à la base de la tige voisine, bien que
Fig. 2. Répartition spatiale des racines adventives et des nodules
certains se soient formés sur les racines adventives en
racinaires sur un plant de soja inoculé 3 semaines après la coupe.
dehors de la tige ou de la surface du milieu d'enracinement.
Certains nodules sont indiqués par des flèches rouges
La croissance des boutures enracinées variait, mais les valeurs
les plus élevées pour les paramètres de pousse enregistrés ont été
obtenues pour les échantillons de contrôle de croissance normale
(Fig. 3 et 4A – D). La longueur de la tige principale, le nombre de
feuilles trifoliées, l'intensité de la couleur verte des feuilles et le poids
sec des pousses étaient significativement plus élevés pour les plantes
non inoculées alimentées en azote que pour les plantes inoculées
non alimentées en azote. En ce qui concerne les traitements sans
azote, il n'y avait que de petites différences dans la longueur de la
tige principale et le nombre de feuilles trifoliées entre les
traitements. Les poids secs de pousses les plus bas et les plus élevés
résultent des traitements avec des dilutions de 0 % et 25 %,
Fig. 3. Différences entre les pousses et les racines des plants de soja
respectivement, alors qu'ils n'étaient pas significativement différents
inoculés traités avec diverses concentrations de solution nutritive
entre les plantes des autres dilutions. Cependant, l’intensité de la sans azote. Les plantes ont été photographiées 3 semaines après la
couleur verte des feuilles diminuait considérablement avec coupe. Les plantes témoins aux deux extrémités ont été irriguées soit
l’augmentation des concentrations de solution nutritive. avec de l'eau du robinet (0 %), soit avec la solution nutritive complète
sansRhizobiuminoculant (suite)
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Fig. 4. Effets des différentes concentrations de solution nutritive sans azote sur la longueur de la tige principale (A), le nombre de feuilles trifoliées (B), l'intensité de la

couleur verte des feuilles (C), le poids sec des pousses (D), le poids sec des racines ( E), et le nombre de nodules racinaires (F) des plants de soja inoculés 3 semaines

après la coupe. Les valeurs représentent les moyennes ± SE (n = 10). Différentes lettres au-dessus des barres représentent des différences significatives déterminées

par le test de plage multiple de Tukey-Kramer (p < 0,05).

Expérience 2. Applicabilité d'une solution nutritive
contenant de l'azote
La solution nutritive a eu un effet considérable sur la
croissance des plantes, en fonction de la concentration (Fig.
5). Plus précisément, la solution nutritive favorisait la
croissance lorsque du nitrate ou de l’urée était utilisée
comme source d’azote. La fertilisation ammoniacale a inhibé
la croissance des pousses et des racines par rapport aux effets
des traitements au nitrate, à l'urée et à l'eau du robinet. Les
feuilles des plantes nourries à l’ammonium sont devenues
chlorotiques et/ou nécrotiques, ce qui était plus prononcé dans
les parties supérieures de la plante. La gravité de ces
symptômes augmentait avec l’augmentation des concentrations
de nutriments.
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La composition de la solution nutritive appliquée au Le nombre de nodules racinaires sur les racines
contrôle normal de la croissance était presque la même que adventives était le plus élevé pour les plantes traitées avec la
celle de la dilution à 50 % avec du nitrate comme seule source solution à base de nitrate à 10 %, suivies par les plantes ayant

d'azote, à l'exception du fait que la première contenait une subi les traitements à 25 % de nitrate, 10 % d'urée et 25 % d'urée

petite quantité d'ammonium. Par conséquent, les paramètres de (Fig. 6F). Moins de nodules racinaires ont été détectés suite aux

croissance des pousses étaient très similaires pour ces deux traitements de contrôle (c.-à-d. eau du robinet) et à 50 % de

traitements, qu'un inoculant soit ou non inclus dans le milieu nitrate. La fertilisation à 50 % d'urée a inhibé de manière

d'enracinement (Fig. 6A – D). La longueur de la tige principale, le significative la formation de nodules racinaires. En plus des

nombre de feuilles trifoliées et le poids sec des pousses avaient plantes témoins non inoculées, toutes les plantes nourries à

tendance à augmenter avec des concentrations croissantes de 0 l'ammonium étaient dépourvues de nodules racinaires, bien

% à 50 % pour les plantes traitées au nitrate, tandis que la qu'elles aient été inoculées de la même manière que les plantes

longueur de la tige atteignait un maximum avec une dilution de ayant subi les traitements au nitrate et à l'urée.

25 %. Ces tendances ont également été observées pour les

plantes traitées à l'urée, mais il n'y avait pas de différences
significatives dans le nombre de feuilles trifoliées et le poids sec
des pousses pour les concentrations comprises entre 10 % et 50
%. Pour les traitements au nitrate et à l'urée, les feuilles des
plantes avec des dilutions de 0 à 25 % étaient significativement
moins vertes que les feuilles des plantes témoins, mais
l'intensité de la couleur verte des feuilles était la même pour les
plantes traitées avec une dilution de 50 % et le plantes témoins à
un niveau de signification de 5 %. À la même concentration, le
poids sec des pousses des plantes nourries à l'urée était
inférieur à celui des plantes nourries au nitrate, en particulier à
des concentrations plus élevées. Concernant le traitement à
l'ammonium, il n'y a pas eu d'augmentation significative de la
longueur de la tige principale et du nombre de feuilles trifoliées
pour des dilutions allant jusqu'à 50 %. De plus, des niveaux
d'ammonium supérieurs à 25 % diminuent significativement
l'intensité de la couleur verte des feuilles et le poids sec des
pousses, avec des valeurs inférieures à celles des plantes
traitées à l'eau du robinet.

Les poids secs des racines des plantes exposées au

traitement sans nutriments et des plantes témoins n'étaient
pas significativement différents (Fig. 6E). Les effets positifs
du nitrate ont été observés pour des concentrations allant
jusqu'à 25 %, avec un poids maximum de 0,81 g, soit environ
28,5 % de plus que celui résultant du traitement à 0 %. La
fertilisation à l'urée n'a pas favorisé la croissance des
racines, et le poids sec des racines était inférieur pour les
Fig. 5. Différences entre les pousses et les racines des plants de soja
plantes nourries à l'urée que pour les plantes nourries au
inoculés traités avec diverses formes d'azote et concentrations de
nitrate, à toutes les concentrations. Les plantes traitées au
solutions nutritives. Les plantes ont été photographiées 3 semaines après
nitrate et à l'urée ont produit plus de matière sèche racinaire
la coupe. Pour les trois images présentant les effets des différentes formes
que les plantes traitées à l'ammonium. L'augmentation de la d'azote, les plantes témoins aux deux extrémités étaient identiques et
concentration en ammonium de la solution nutritive a irriguées avec de l'eau du robinet (0%) ou la solution nutritive complète
entraîné une diminution linéaire du poids sec des racines. sansRhizobiuminoculant (suite)
Amélioration de la nodulation dans les boutures racinées de soja. .................................................................. .................................................................. .........77
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Fig. 6. Effets de la forme azotée et de la concentration de la solution nutritive sur la longueur de la tige principale (A), le nombre de feuilles trifoliées (B), l'intensité de

la couleur verte des feuilles (C), le poids sec des pousses (D), le poids sec des racines (E). ), et le nombre de nodules racinaires (F) des plants de soja inoculés 3

semaines après la coupe. Les valeurs représentent les moyennes ± SE (n = 10). Différentes lettres au-dessus des barres représentent des différences significatives

déterminées par le test de plage multiple de Tukey-Kramer (p < 0,05).

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DISCUSSION nodulation, qui peut aider à induire la croissance de plantes

inoculées qui obtiennent l’azote généré par la fixation
Système de subirrigation pour l'enracinement et symbiotique de l’azote. Cependant, nous avons observé de
l'inoculation Le récipient de culture utilisé dans cette étude, manière inattendue que l'intensité de la couleur verte des
composé d'un tube en PVC et d'une feuille résistante aux feuilles et le nombre de nodules par système racinaire
racines et perméable à l'eau, a été utilisé pour cultiver des diminuaient avec l'augmentation des concentrations de
plants de tomates (Suzuki et al. 2011) et de melon (Kawahara solution nutritive sans azote, ce qui implique que la solution
& Masuda 2012) dans un système de subirrigation. . Les nutritive sans azote ne favorisait pas la croissance des
résultats de la présente étude indiquent qu’un tel système plantes inoculées (Fig. 3 et 4). ).
peut également être utilisé pour produire des plants de soja Les graines de soja sont grosses et les composés de
à partir de boutures de tiges de semis. La formation de stockage dans les cotylédons peuvent fournir les nutriments
racines fortuites a été détectée sur toutes les boutures dans nécessaires à la croissance initiale des racines et des
les 7 jours suivant la coupe sans aucun traitement auxines, pousses (Ohyama et al. 2017). La quantité relativement
ce qui suggère que l'enracinement fortuite des boutures de importante de composés de stockage peut expliquer en
soja est favorisé par de grandes quantités de composés de partie pourquoi les plantes inoculées et irriguées avec de
stockage dans les cotylédons et n'est pas inhibé par l'état l'eau du robinet ont pu pousser sans aucun symptôme
d'humidité du sable de silice sous irrigation. système avec associé à une carence en minéraux essentiels, dont l'azote,
une profondeur de 1 cm. pendant 3 semaines (Fig. 3). Cependant, lorsqu'elles sont
LeRhizobiumle biofertilisant 'Mamezo' est généralement traitées avec une solution nutritive sans azote à une
appliqué comme traitement des semences avant le semis, mais concentration de 25 % ou plus, le jaunissement des feuilles
cette étude a indiqué qu'il peut être incorporé dans le substrat augmente de la base jusqu'au sommet des plantes, ce qui
d'enracinement sous irrigation comme inoculant. Dans une présente des symptômes généralement associés à une
étude précédente sur des plants de soja soumis à des carence en azote. Ces résultats suggèrent que le rapport
inondations, les racines adventives représentaient environ 90 % interne de l'azote aux autres minéraux essentiels dans les
de la longueur totale des racines, avec des nodules racinaires plantes après un traitement avec une solution nutritive sans
sur les racines adventives, mais pas sur les racines primaires et azote pourrait être inférieur à celui résultant du traitement
latérales (Hattori et al. 2013). En conséquence, il peut être de l'eau du robinet. Cette diminution du rapport peut
préférable d’inoculer les racines adventives des boutures de déclencher des réactions de stress liées à une carence en
tiges des semis plutôt que d’inoculer les racines des semis. De azote.
plus, aucune racine nodulée n’a été détectée sur les plantes non La diminution du nombre de nodules racinaires était
inoculées, ce qui implique que le sable de silice utilisé dans cette corrélée à la diminution de l'intensité de la couleur verte des
étude, fabriqué par concassage de roches, était presque stérile, feuilles (Fig. 4). Le jaunissement des feuilles indique une
y compris les bactéries rhizobiennes. De telles conditions perte de chlorophylles, ce qui entraîne une diminution de la
pourraient fournirRhizobiumespèce possédant une niche capacité photosynthétique. Étant donné que la formation et
écologique propice à la nodulation des racines. l'activité des nodules nécessitent une abondance
considérable de produits photosynthétiques fournis par la
Sur la base de nos résultats, nous avons conclu que plante hôte (Finn & Brun, 1982), le nombre de nodules
le système de subirrigation peut être utilisé pour racinaires et la croissance n'ont pas augmenté pour les
l'enracinement et l'inoculation de boutures de soja afin plantes inoculées traitées avec des concentrations élevées
de produire des plants dans un système hydroponique de solution nutritive sans azote. Pour éviter l'inhibition de la
basé sur un substrat. Nécessité des applications croissance due au jaunissement des feuilles accompagné
d'azote Selon Saito et al. (2014), l’application d’azote d'une diminution de la formation et de l'activité des nodules,
combiné, en particulier de nitrate, inhibe la formation de nous proposons queRhizobium-les plantes inoculées doivent
nodules racinaires, la croissance et l’activité de fixation être subirrigées avec une solution nutritive contenant
de l’azote des plants de soja. Par conséquent, nous avons suffisamment d'azote pour maintenir un taux d'azote
supposé qu’une solution nutritive sans azote peut fournir interne approprié et favoriser une croissance précoce
d’autres minéraux essentiels sans inhiber jusqu'au niveau des plantes témoins non inoculées.
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Forme et concentration optimales d'azote Comme prévu,
l'intensité de la couleur verte des feuilles des plantes inoculées
n'a pas diminué avec l'augmentation des concentrations de
solution nutritive lorsque l'azote était fourni sous forme de
nitrate (Fig. 5 et 6C). De plus, l’urée a également amélioré
l’intensité de la couleur verte des feuilles. Chez les plantes
nourries avec du nitrate et de l'urée, le statut interne en azote,
reflété par la verdure des feuilles, peut être suffisant pour
maintenir la capacité photosynthétique. Cependant, les lésions
chlorotiques et/ou nécrotiques des feuilles supérieures des
plantes nourries à l'ammonium augmentaient en gravité avec
l'augmentation des concentrations de solution nutritive,
probablement en raison de la toxicité de l'ammonium (Tadano &
Tanaka 1976 ; Ikeda & Osawa 1979 ; Yoneyama et al. 1985) plutôt
que que la carence en azote. Bien que Xia et al. (2017) ont
rapporté que la croissance des plants de soja dans un substrat
de sable était favorisée par l'irrigation avec une solution nutritive
contenant jusqu'à 100 ppm de NH.4-N (7,14 mM), nos résultats
suggèrent que le sable siliceux est presque stérile, avec un
minimum de bactéries nitrifiantes qui convertissent l'ammonium
en nitrate, et que l'excès d'ammonium restant dans la
rhizosphère avant l'absorption pourrait entraîner une toxicité de
l'ammonium, même lorsque les plantes sont subrriguées. avec
une solution de traitement à 25 % (4,33 mM NH4-N).
Étant donné que le nombre de nodules racinaires suite au
traitement à l'eau du robinet a peut-être été davantage sous-
estimé dans l'expérience 2 que dans l'expérience 1, il n'est pas
clair si une fertilisation à base de nitrate de 10 à 25 % entraînera
plus de nodules racinaires que le traitement à l'eau du robinet.
Cependant, nos données indiquent que des concentrations de
solution nutritive allant jusqu'à 25 % (4,33 mM NO3- N)
n'influencent pas négativement la nodulation (Fig. 6F). Bien que
l'on sache depuis longtemps que le nitrate inhibe fortement la
nodulation et le N2activité de fixation dans les légumineuses, de
faibles concentrations de nitrate (1 à 2 mM) favorisent en fait la
nodulation en assurant une croissance précoce et rapide de la
plante et le développement d'un système racinaire sain capable
de noduler abondamment (Giller & Wilson 1991; Ohyama et al.
2011 ). De plus, Xia et al. (2017) ont rapporté que la nodulation et
N2L'activité de fixation des plants de soja augmente initialement,
puis diminue avec l'augmentation des concentrations de nitrate,
l'activité culminant à 50 ppm de nitrate (3,57 mM). Ces résultats
impliquent que la concentration en nitrate peut être augmentée
jusqu'à environ 4 mM pour favoriser la croissance précoce des
plantes et
nodulation de plants de soja inoculés dans des conditions de
subirrigation. Un traitement avec 5 mM de nitrate inhiberait
la croissance et l'activité de fixation de l'azote des nodules
de soja en diminuant la quantité de produits
photosynthétiques fournis aux nodules (Ohyama et al. 2011 ;
Saito et al. 2014). Ainsi, il est raisonnable que le nombre de
nodules racinaires ait diminué lorsque les plantes ont été
traitées avec une dilution à 50 % (8,65 mM NO3-N). En
conséquence, les concentrations de nitrate supérieures à 5
mM ne conviennent pas à la culture de plants de soja
inoculés, même si elles favorisent la croissance des pousses
(Fig. 6A – D).
Selon Yoneyama et al. (1985) et Ohyama et al. (2013),
l’effet inhibiteur du nitrate est plus fort que celui de l’ammonium
ou de l’urée sur l’activité de nodulation et de fixation de l’azote
des plants de soja. Cependant, à notre grande surprise, les
plantes nourries à l'ammonium n'ont jamais formé de nodules
racinaires, quelle que soit la concentration en ammonium (Fig.
6F), bien que les plants de soja cultivés dans un substrat de sable
puissent former de nombreux nodules, même lorsqu'ils sont
irrigués avec 100 ppm de NH.4-N (7,14 mM) (Xia et al.2017).
L'excès d'ammonium dans la rhizosphère dû à la nitrification
limitée dans le sable siliceux semi-aseptique pourrait avoir
contribué aux dommages causés aux plantes observés sous la
forme d'une diminution de la biomasse végétale (Fig. 6A – D) en
plus de la chlorose et/ou de la nécrose des feuilles. Ceci est
corroboré par les rapports précédents décrivant les dommages
graves causés aux plants de soja cultivés en culture
hydroponique par la toxicité de l'ammonium, même à de faibles
concentrations (2 à 3 mM de NH4-N) (Tadano et Tanaka 1976 ;
Ikeda et Osawa 1979). Par conséquent, la diminution de la
croissance due à la toxicité de l’ammonium perturbe
probablement gravement la nodulation, même si l’ammonium
inhibe faiblement la nodulation.
Contrairement aux effets de l'ammonium, le traitement à
l'urée favorisait la croissance des pousses (Fig. 6A – D) et la
nodulation (Fig. 6F) des plantes inoculées, mais moins
efficacement que le nitrate. Le retard de croissance des plantes
nourries à l'urée peut s'expliquer en partie par un rapport
précédent indiquant que la réduction de la croissance des
plantes au début du cycle de croissance est probablement liée à
la faible efficacité d'utilisation de l'urée dans les semis de soja
(Paradiso et al. 2014b). De plus, l'apport à long terme d'urée
comme seule source d'azote entraîne une biomasse végétative
et un rendement en graines inférieurs pour les plants de soja
cultivés en culture hydroponique par rapport aux effets du
nitrate (Paradiso et al. 2014b, 2015).
80.................................................................. .................................................................. ........................ .......................... ..................N. Hata, H. Futamura
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Concernant la nodulation, plusieurs rapports ont indiqué que les Remerciements

plantes nourries à l'urée formaient des nodules racinaires plus Nous remercions Edanz Group pour avoir édité une ébauche de
nombreux et plus gros que les plantes nourries au nitrate ce manuscrit (https://en-author-services.edanzgroup.com).
(Yoneyama et al. 1985; Paradiso et al. 2014b, 2015), mais ces
observations faisaient suite à des traitements avec des LES RÉFÉRENCES
concentrations élevées d'azote (7,5 –20 mM), qui sont fortement
inhibiteurs de la nodulation, en particulier lorsqu'ils sont fournis Bhagu R., Virk HK 2019. Gestion de l'azote dans
sous forme de nitrate. Par conséquent, l’urée peut être utilisée soja: une revue. Revues agricoles 40 : 129-135.
comme source d’azote pour favoriser la croissance précoce des
DOI : 10.18805/ag.r-1894.
plants de soja inoculés, mais elle n’est pas nécessairement
Cafaro La Menza N., Monzon JP, Lindquist JL,
supérieure au nitrate pour la nodulation à des concentrations
Arkebauer TJ, Knops JMH, Unkovich M. et al. 2020. Un apport
d’azote relativement faibles.
insuffisant d'azote provenant de la fixation symbiotique réduit
Dans cette étude, la fertilisation au nitrate ou à l'urée à
la croissance saisonnière des cultures et la mobilisation de
une dilution de 25 % a amélioré la croissance et la nodulation
l'azote pour les semences de cultures de soja hautement
des plantes inoculées, mais la croissance des pousses au stade
productives. Plante, cellule et environnement DOI : 10.1111/
du repiquage n'était pas comparable à la croissance des plantes
pce.13804.
non inoculées traitées avec la solution nutritive à 50 % (Fig. 6). .
Ciampitti IA, Salvagiotti F. 2018. Nouvelles connaissances sur le soja
La diversité dans la croissance des pousses peut avoir été causée
fixation biologique de l’azote du haricot. Journal d'agronomie
par des différences dans l'apport de minéraux essentiels autres
110 : 1185-1196. DOI : 10.2134/agronj2017.06.0348. Cooper JE,
que l'azote. En conséquence, il convient de déterminer le rapport
optimal entre la teneur en azote de la solution à 25 % et la Scherer HW 2012. Chapitre 16 – azote

teneur en autres minéraux essentiels. Cependant, si le retard de fixation. Dans : Marschner P. (Ed.), La nutrition minérale

croissance est principalement dû à un apport limité d’azote fixe des plantes supérieures de Marschner, 3e éd. Academic

provenant des nodules au début de la phase de croissance Press, États-Unis, pp. DOI : 10.1016/c2009-0-63043-9.

(Hamawaki & Kantartzi 2018 ; Cafaro La Menza et al. 2020), il Dogra RC, Dudeja SS 1993. Engrais N et azote
peut être restauré dans les stades ultérieurs de croissance en fixation dans la légumineuse–Rhizobiumsymbiose.
augmentant la quantité d'azote biologiquement fixé fournie aux Annales de biologie 9 : 149-164.
plantes, et d'autres améliorations, à l'exception d'une nodulation Finn GA, Brun WA 1982. Effet du CO atmosphérique2
améliorée, peuvent ne pas être nécessaires pour la gestion des enrichissement sur la croissance, la teneur en glucides non
plantes inoculées, au moins pendant la première étape de structuraux et l'activité des nodules racinaires du soja.
croissance. Physiologie végétale 69 : 327-331. DOI : 10.1104/pp.69.2.327.

Giller KE, Wilson KJ 1991. Fixation de l'azote dans les trop-

systèmes de culture classiques. CABI, Royaume-Uni, p.

CONCLUSIONS
167-237. Hamawaki RL, Kantartzi SK 2018. Fixateur de di-azote

tion aux premiers et derniers stades de croissance du

Dans cette étude, nous avons prouvé que des plants
soja. Acta Scientiarum. Agronomie 40 ; e36372 ; 22h.
de soja inoculés peuvent être produits efficacement dans un
DOI : 10.4025/actasciagron.v40i1.36372.
système hydroponique en enracinant des boutures de semis
Hattori R., Matsumura A., Yamawaki K., Tarui A., Dai-
dans un milieu contenant unRhizobiuminoculant. De plus,
mon H. 2013. Effets des inondations sur la colonisation
les plantes inoculées doivent être soumises à une solution
nutritive Enshi d'environ 25 % complétée par du nitrate ou mycorhizienne arbusculaire et la formation de nodules

de l'urée pour favoriser une croissance précoce et une racinaires dans différentes racines de soja. Sciences

nodulation avant la transplantation. Cependant, d'autres agricoles 4 : 673-677. DOI : 10.4236/as.2013.412090.

améliorations du rapport entre l'azote et les autres Ikeda H., Osawa T. 1979. Comparaison de l'adaptabilité à
minéraux essentiels dans la solution nutritive pourraient source d’azote parmi les cultures maraîchères. I. Réponse de

être possibles. croissance et assimilation de l’azote des légumes-fruits

Amélioration de la nodulation dans les boutures racinées de soja. .................................................................. .................................................................. .........81
________________________________________________________________________________________________________________________________________________

cultivé dans une solution nutritive contenant de l’azote qualité du soja et de ses produits. Journal de
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