La technique de réaction en chaine de la

polymérase (PCR)
Définition :

La réaction en chaîne par polymérase (PCR), aussi appelée amplification en chaîne par
polymérase (ACP), est une technique de biologie moléculaire permettant d'obtenir
rapidement, in vitro, un grand nombre de segments d'ADN identiques, à partir d'une séquence
initiale.

Principe de la PCR

La PCR est une technique basée sur une répétition de cycles de transition de température.
Sauf pour certaines méthodes (par exemple l'utilisation de sondes d'hydrolyse), chaque cycle
contient trois étapes détaillées ci-dessous:

1. Dénaturation (95°C) : la double chaine d’ADN est séparée en deux brins

indépendants.
2. Hybridation: En abaissant la température (50-70 °C), des amorces constituées de
courts fragments d'ADN viennent s'hybrider sur les brins d’ADN.
3. Extension (72°C): Une enzyme, la Taq polymérase, complète la synthèse du brin
d'ADN à partir de l'amorce grâce aux oligonucléotides présents dans le milieu de
réaction.

Applications de la PCR

La PCR est très utile pour de nombreuses applications, telles que :

- Le clonage et le séquençage génétique.
- Le diagnostic de maladies génétiques.
- La détection de mutations.
- Le dosage protéique.
- L'identification d'individus (science médico-légale).
- La détermination de filiation.
- La mutagenèse dirigée (à l'aide d'amorces mutées).
- Le marquage de l'ADN (pour la recherche fondamentale).

Avantages de la PCR

La PCR présente plusieurs avantages qui en font une technique de biologie moléculaire
très précieuse :

 Sensibilité: La PCR est extrêmement sensible et permet de détecter de très faibles

quantités d'ADN.
 Spécificité: La PCR est très spécifique et permet d'amplifier un seul segment d'ADN
cible parmi un mélange complexe d'ADN.
 Rapidité: La PCR est une technique relativement rapide qui permet d'obtenir des
résultats en quelques heures.
  Reproductibilité: La PCR est une technique reproductible qui donne des résultats
cohérents d'une expérience à l'autre.

Limites de la PCR

Malgré ses nombreux avantages, la PCR présente également quelques limites :

 Coût: La PCR peut être une technique relativement coûteuse, en particulier lorsqu'elle
est utilisée pour des applications à grande échelle.
 Contamination: La PCR est sensible à la contamination, ce qui peut conduire à des
résultats erronés.
 Erreurs de polymérisation: L'enzyme polymérase peut introduire des erreurs lors de
la synthèse de l'ADN, ce qui peut affecter la qualité des résultats.

Conclusion

La PCR est une technique de biologie moléculaire puissante et polyvalente qui a

révolutionné la recherche en biologie et la médecine. Elle est utilisée dans un large éventail
d'applications et continue d'être un outil essentiel pour les scientifiques et les cliniciens du
monde entier.