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FICHE TECHNIQUE N°2 : UTILISATION DE LA PIPETTE JAUGEE ET DE LA

PIPETTE GRADUEE

Présentation :
Les pipettes sont des instruments qui permettent de prélever un volume précis de liquide. Il existe des
pipettes graduées et des pipettes jaugées. Leurs capacités sont :
- de 1 à 25 mL pour les pipettes graduées.
- de 0,5 à 200 mL pour les pipettes jaugées.
Pour les travaux analytiques, on préférera les pipettes jaugées qui sont plus précises que les pipettes
graduées.
La pipette graduée : La pipette jaugée :

Elle permet de prélever des volumes
variables car elle comporte plusieurs
graduations.
Elle permet de délivrer un volume fixe.
Elle comporte obligatoirement un trait de jauge
supérieur (haut de la pipette) et éventuellement un
trait de jauge inférieur. On distingue donc des
pipettes à 2 traits et à écoulement total.

Pour aspirer ou refouler un liquide dans une pipette, on se sert d’un dispositif d’aspiration. En TP de
biochimie, nous utiliserons la propipette.

Utilisation d’une propipette (poire d’aspiration) :

Emplacement A : permet de vider et remplir

d'Air le réservoir de la propipette.

Emplacement S : permet d'aspirer (Suck) le liquide

dans la pipette.
Emplacement E permet de vider (Empty) le
liquide de la pipette dans un récipient.

Côté à emboucher sur la pipette.

Fixer la propipette sur la pipette.

 Appuyer sur A pour faire le vide dans la propipette.
 Appuyer sur S pour faire monter le liquide dans la pipette.
Ne pas aspirer de liquide dans la propipette, (risque de détérioration).
 Faire pression sur E pour vider la pipette.
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Utilisation d’une pipette jaugée :

Rincer soigneusement la pipette à l’eau distillée 2 fois.
 Rincer une fois avec un minimum de solution de remplissage pour conditionner la pipette.
 Remplir la pipette en la tenant bien verticalement. Amener le liquide à environ 1 cm au dessus du
trait de jauge.
 Essuyer la pointe de la pipette avec un papier filtre.
 Ajuster : tenir la pipette verticalement, appuyer la pointe à 45° contre la paroi d’un récipient, laisser
couler la solution de remplissage jusqu’à ce que le bas du ménisque atteigne le trait de jauge supérieur.
Lors de l’ajustage, veiller à avoir les yeux en face du trait de jauge, pour éviter les erreurs de parallaxe.
a. Pipette à 2 traits : tenir la pipette verticalement, appuyer la pointe à 45° contre la paroi d’un
récipient, laisser couler la solution de remplissage jusqu’à ce que le bas du ménisque atteigne le trait de
jauge inférieur.
b. Pipette à écoulement total : tenir la pipette verticalement, appuyer la pointe à 45° contre la paroi
d’un récipient, laisser couler la solution de remplissage complètement et attendre encore 3s (pipette de
classe A) ou 15 s (pipette d classe AS).
 Pour les pipettes à 2 traits, terminer de vider la pipette dans un récipient poubelle.
 Avant de ranger : nettoyer soigneusement 3 fois à l’eau du robinet et 3 fois à l’eau distillée puis
ranger dans le portoir à pipettes, verticalement et pointe vers le bas.

Utilisation d’une pipette graduée :

Elle est identique à l’utilisation d’une pipette jaugée. Lorsqu’on vide la pipette, on s’arrête à la
graduation souhaitée.

Remarques :
- Pour des raisons de sécurité, on n’aspire JAMAIS à la bouche.
- On ne pipette JAMAIS dans un flacon. La pipette peut être malpropre et contaminer le
flacon de solution mère. Il faut systématiquement utiliser un bécher de prélèvement.
- On ne remet JAMAIS l’excédent de solution dans le flacon de solution mère, pour la même
raison que précédemment.

Lecture du niveau de liquide dans une pipette :

La lecture se fait au bas du ménisque. L'oeil doit

Lecture correcte être à la même hauteur que le bas du ménisque.