Noyau Mitoch Perox

Zone réservée pour
la vidéo
PASS/LASS
Noyau-Mitochondries-Peroxysomes
la vidéo
Le noyau:
- Enveloppe, pores nucléaires et transport nucléo-
cytoplasmique
- Organisation de l'ADN dans le noyau
- Le nucléole et la biogénèse des ribosomes
- Les caryotypes
Mitochondries
Peroxysomes
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Membrane plasmique lysosome
R.E. rugueux
Vésicule
sécrétoires
noyau
membrane
Enveloppe interne
nucléaire membrane
externe
Appareil
de Golgi
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le noyau: généralités
Présent chez tous les organismes eucaryotes

Limité par l’enveloppe nucléaire
Contient presque la totalité de l’information génétique (le génome nucléaire)
Cas général: 1 noyau par cellule (cellules multinucléées, syncitium, plasmode…)
Mise en évidence en microscopie:

- fluorescence: agents intercalant de l’ADN (DAPI, Bet…)
- colorants basiques: hematoxyline, bleu de méthylène…
- réaction de Feulgen: hydrolyse acide de l’ADN et révélation avec le
réactif de Schiff (détecte les aldéhydes)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Exemple de syncytium: fibres musculaires
(muscles striés) Myofibrille
Sarcoplasme
Coupe
transversale
Le syncytium contient
plusieurs noyaux dans un Noyaux
cytoplasme unique périphériques
Sarcolemme
Le muscle strié :
Coupe
la fibre musculaire longitudinale
PASS/LASS Planche donnée pour information
Noyau
la vidéo
Les cellules anucléées:
Organismes eucaryotes pluricellulaires peuvent contenir des cellules sans noyau,

issues de la maturation de cellules nucléées:
- érythrocyte chez les mammifères: perte du noyau de l’érythroblaste
- cellules du cristallin
- kératinocytes superficiels
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Polyribosomes libres
Nucléole
Enveloppe nucléaire
Noyau
Euchromatine
Chromatine
Hétérochromatine Reticulum endoplasmique rugueux
PASS/LASS
Noyau
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Morphologie:
Forme variable:
- arrondi: neurones, hépatocytes…
- ovoïde: cellule musculaire, fibroblaste…
- polylobé: polynucléaires
Taille: 5 à 6 µm de diamètre
6% du volume cellulaire
PASS/LASS
Noyau
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Morphologie:
6% du volume cellulaire: variable selon activité et type cellulaire
Rapport nucléo-protoplasmique:
(ou nucléo-cytoplasmique)
N/P : volume noyau/volume cellule
N/P faible: cellule différenciée adulte

N/P élevé: cellule jeune ou cancéreuse
Tableau donné pour information
PASS/LASS
Noyau
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L’enveloppe nucléaire
Description:
Enveloppe constituée de 2 membranes:
- membrane externe: en continuité avec le RE
- membrane interne Nucléole
- espace périnucléaire
Nucléoplasme
Interface entre cytosquelette (cytosol) et le
nucléosquelette (nucléoplasme)
Enveloppe « percée » par les pores nucléaires
Pore nucléaire
Réticulum endoplasmique rugueux

PASS/LASS
Noyau
la vidéo
La membrane externe:
Continuité membranaire avec le RER: contenu et fonction similaires
Interactions avec le
cytosquelette (MF d’actine,
microtubules et FI) par des
protéines transmembranaires
lamina
Récepteur
pour histones
ou protéines
PASS/LASS associées
Noyau
la vidéo
La membrane interne:
Composition différente de la mb externe:
Canaux calciques: permet

libération de Ca dans le
nucléoplasme
Protéines transmembranaires
interagissent avec les
récepteurs cytosquelette (mb.
externe) et MF nucléaires:
continuité mécanique
cytosquelette-
nucléosquelette
lamina
Récepteur
pour histones
ou protéines
Noyau
la vidéo
La membrane interne:
Interactions avec l’ADN et la lamina:
Récepteurs pour lamines:

Recrutement des lamines
Récepteurs pour histones ou

protéines associées:
Recrutement de complexes
ADN-histones-protéines
associées: rôle dans la
régulation de l’expression
des gènes
lamina
Récepteur
pour histones
ou protéines
Noyau
la vidéo
Le pore nucléaire: structure
Diamètre: 120 nm 120 nm

Hauteur: 50 nm
Cytoplasme
Organisation en 8 unités répétées
(symétrie axiale d’ordre 8 et plan de symétrie) 50 nm
Nucléoplasme
120 nm
Pore Nucléaire 120 nm
MET
coloration négative
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Diamètre: 120 nm
Hauteur: 50 nm Symétrie d’ordre 8
Organisation en 8 unités répétées
(symétrie axiale d’ordre 8 et plan de symétrie)
Protéines constituant le pore nucléaire:

Nucléoporines (Nup) Plan de symétrie
~ 30 protéines connues
PASS/LASS
Noyau
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2 anneaux centraux:
- cytosolique
- nucléoplasmique
1 petit anneau
nucléoplasmique
16 bras radiaires (2x8)
16 filaments (8 cytosoliques et
8 filaments de cage)
1 transporteur central
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le pore nucléaire: fonction
Huit canaux latéraux Transporteur central
Diffusion molécules < 40 kDa Diffusion molécules > 40 kDa
Fonctions de transport:
-Canaux latéraux: diffusion facilitée de
molécules < 40 kDa
-Transporteur central: translocation de

molécules > 40 kDa
Anneau cytosolique
Huit bras
radiaires
(face cytosolique)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Origine des nucléoporines:

-RE: protéines
transmembranaires, N-glycosylées
(coté lumière)
-Cytosol: autoassemblage de
protéines solubles, dont certaines
O-glycosylées
PASS/LASS
Noyau
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Fonctions des nucléoporines:

-Rôle structural: x 8
-Rôle de transport :
- séquence FG:
(répétition d’aa, ~ 30 % des Nup)
interactions avec complexes
import/export
- liaison à l’ADN
- sélectivité du pore
PASS/LASS
Noyau
L’enveloppe nucléaire Zone réservée pour
la vidéo
Simulation numérique
des répétitions FG au
sein d’un transporteur
central du port
nucléaire
Les répétitions FG forment un « gel »: obturation de la lumière du transporteur central

Interactions FG-transporteur nucléaire (importines/exportines) nécessaires pour le franchissement
PASS/LASS Sci. Rep. 6, 29991; doi: 10.1038/srep29991 (2016).

Noyau
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Les protéines à la périphérie du

pore:
-Importines et exportines
-Protéine G monomérique Ran
-Effecteurs de Ran:
-RanGAP: cytosolique
-RanGEF: nucléoplasmique
PASS/LASS
Noyau
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Biogénèse et rôle de l’enveloppe nucléaire
Pendant la division cellulaire:

- désassemblée en prométaphase
- réassemblée en télophase
Fonctions durant l’interphase:

- interactions avec l’ADN: contrôle de l’expression des gènes
- séparation physique et métabolique: échanges nucléo-cytoplasmiques
PASS/LASS
Noyau
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Le transport nucléo-cytoplasmique:
Le cycle de la protéine Ran:
Effecteurs de Ran:
- gradient RanGTP
- gradient RanGDP
Translocation de Ran
(transporteur central)
sous forme de complexe :
- importine
- exportine
Transporteur central:
échanges bidirectionnels
= recyclage des constituants
des complexes
Double gradient de Ran : orientation du transport
PASS/LASS
Noyau
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Complexes d’importation et d’exportation:
Importines et exportines: récepteurs à multiples affinités

-Liaison à la charge (cargo)
-Liaison aux motifs FG des Nup
Signaux d’adressage:
-NLS « classique » (Nuclear Localisation Signal), riche en aa basiques (K, R)
-NES (Nuclear Exportation Signal)
-NRS (Nuclear Retention Signal)
Translocation des protéines cargo sous forme repliées
Masquage/démasquage des signaux d’adressage par partenaires d’interaction

Modulation par modification post-traductionelles (phosphorylations)
REM: 40 % des protéines nucléaires ne possèdent pas de NLS classique…
(signaux encore inconnus)
PASS/LASS
Noyau
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Formation du complexe d’importation (cytosol)
Imp. a Imp. b
Imp. b
Imp. a Imp. a
cargo cargo cargo
Importine a Importine b reconnaît l’imp. a Complexe compétent

reconnaît le NLS liée à la protéine à transporter pour translocation
PASS/LASS
Noyau
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L’importation:
3: interaction RanGTP- imp. b

induit dissociation imp. a-cargo
cargo
Imp. a
Imp. b
cytosol
nucléoplasme RanGTP
RanGTP Imp. b
Imp. b
Imp. a
1: interactions 2: translocation cargo

Imp. a
imp. b – motifs FG par transporteur
central cargo
PASS/LASS
Noyau
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Le recyclage des importines
RanGDP 2: hydrolyse du GTP après translocation:

libération d’imp. b à nouveau fonctionnelle
RanGTP
RanGAP
Imp. b Imp. b
cytosol
nucléoplasme
RanGTP 1: complexe RanGTP-imp. b

Imp. b
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le recyclage des importines
RanGDP
RanGTP
2: hydrolyse du RanGDP
RanGAP GTP: dissociation
exportine
exportine
du complexe et
Imp. a
Imp. a
libération de imp. a exportine
cytosol
nucléoplasme
RanGTP
RanGTP 1: RanGTP- 3: retour de
exportine exportine exportine se exportine
Imp. a
lie à imp. a
Imp. a (signal NES)
PASS/LASS
Noyau
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Transport de macromolécules: export

- ARNm
- sous-unités des ribosomes
- ARNt…
Transport de macromolécules: import

- protéines (histones, polymérase…)
Transport de petites molécules: diffusion libre à travers les pores nucléaires
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Organisation de l’ADN dans le noyau:
Exemple du génome humain:
génome haploïde = 3.2 109 pb

=> Noyau = 6,4 109 pb
23 paires de chromosomes: ADN réparti en 46 molécules

- 1 chromosome = 50.106 à 250. 106 pb
1,7 cm à 8.5 cm si l’ADN était déroulé
=> noyau cellule humaine ≈ 2 m d’ADN
=> nécessité d’un compactage
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Double
hélice d’ADN
Collier de perles
Chromatine: ADN + protéines

Fibre de 30 nm
- euchromatine: chromatine
dispersée
Repliement
en boucle -Héterochromatine: chromatine
condensée
Forme condensée -Chromosome mitotique:

Spirale
interphasique chromatine hypercondensée
Chromosome mitotique
Chromosome métaphasique
Facteur
PASS/LASScompaction = 50 000
Noyau
la vidéo
Double
hélice d’ADN
Euchromatine active
(10 % euchromatine)
Collier de perles
Fibre de 30 nm
Euchromatine
Repliement
en boucle
Hétérochromatine
Forme condensée
Spirale
interphasique
Rem: hétéro/euchromatine: termes issus d’observations microscopiques

Autres méthodes pour structure et compaction de la chromatine (biophysique, etc…)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléosome: unité de base de
la chromatine
Enroulement de l’ADN sur cœur

d’histone (octamère): 1er niveau de
compactage:
- 1,65 tour d’ADN (146 pb)
- 2 copies/octamère de
chaque histone nucléosomique
(H2A, H2B, H3, H4)
Schéma donné
pour information
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Les histones
Petites protéines basiques:

- riches en K et R (longue extrémité N- ADN enroulé Région
terminale: site d’interaction) linker
- liaison à l’ADN indépendante de la

séquence (groupement phosphate) ( 11 nm)
- liaison à protéines
transmembranaires (mb. interne enveloppe
nucléaire)
Histones nucléosomiques: H2A, H2B, H3, H4

+ histone H1 Octamère histones
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Protéines associées à l’ADN (chromatine)
- Les histones: modifications post-traductionelles modulent leur

fonctions/interactions: code histone
- Les protéines HMG (High Mobility Group): interactions avec l’ADN
- les protéines de structure : (ex: ADN topoisomérase II)
- autres protéines minoritaires
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Niveau de compaction de l’ADN: la fibre de 11 nm
Fibre nucléosomique (11 nm de diamètre):

- aspect en « collier de perles »: 1 « perle » = 1 nucléosome (1,65 tour, 146 pb)
- entre les « perles »: ADN de liaison (linker) de 0 à qqes pb
Chromatine décondensée expérimentalement: fibre de 11 nm

Barre = 50 nm
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Chromatine isolée directement à partir d’un noyau en interphase

Barre = 50 nm
Histone H1 intervient dans l’empilement de nucléosome (fibre 30 nm)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Rôle des histones dans le compactage en fibre de 30 nm:

- extrémité N-terminale: « queue » flexible des histones
- site d’interaction: entre nucléosome, autres protéines…
- modifications post-traductionnelles: code histone
Fibre de 30 nm interrompue par courtes régions

sans nucléosomes (constitutives ou régulées)
Octamère d’histone
Schéma donné pour information
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Double
hélice d’ADN
Collier de perles
Fibre de 30 nm
Repliement Niveau de compaction de

en boucle
l’ADN: les boucles
Forme condensée
Spirale
interphasique
Chromosome mitotique
Chromosome métaphasique
Facteur
PASS/LASScompaction = 50 000
Noyau
la vidéo
Niveau de compaction de l’ADN: les boucles
Nécessité du repliement en boucle:

- compaction de l’ADN
- zones décondensées permettant la transcription
Mise en évidence:
- chromosomes en écouvillon: prophase de 1ère division de
méïose (ovocytes d’amphibien)
- chromosomes polyténiques: larves de certains insectes
(drosophile, chironome…)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Chromosomes en écouvillon: prophase de 1ère division de méïose

(ovocytes d’amphibien)
PASS/LASS
Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
Noyau
la vidéo
Chromosomes polyténiques: larves de certains insectes (drosophile,

chironome…)
Nombreux cycles de réplication de l’ADN

sans division cellulaires
Chromosomes restent appariés:

chromosomes polyténiques
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Boucle fonctionnelle = boucle MAR

Mécanisme de fixation des boucles:
Fibre
- régions MAR : nucléosomique
(Matrix Attachment Region) à la base des
Unité de
boucles
transcription
- charpente protéique:
Pendant division: dans les chromosomes
En interphase: matrice nucléaire
Région
régulatrice
Position des boucles variables
MAR
(selon cycle, type cellulaire…) MAR
Réseau fibreux de la matrice

PASS/LASS
Noyau
Organisation de l’ADN dans le noyau: la vidéo
Rôle des boucles MAR

dans la régulation de
l’expression des gènes
PASS/LASS
Noyau
Organisation de l’ADN dans le noyau: Zone réservée pour
la vidéo
Position des boucles variable

au cours du cycle cellulaire
Rôle dans l’organisation de la

réplication de l’ADN
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Condensation de l’ADN en chromosomes mitotiques
Cf cours Mitose-Méïose
De la fin de prophase au début de télophase:
- condensines: condensation de l’ADN des chromosomes

interphasiques en chromosomes mitotiques
- cohésines: appariement des chromatides sœurs
- condensation maximale à la métaphase
- centromère: séquence répétée, liaison au kinétochore
PASS/LASS
Noyau
Condensation de l’ADN dans les chromosomes interphasiques
Interphase: chromosomes décondensés

pas d’enchevêtrement aléatoire: territoires
chromosomiques
-Attachement à l’enveloppe nucléaire
-Localisation selon l’activité transcriptionelle
-Condensation variable le long d’un chromosome
Transcription: zones les moins condensées Territoires

chromosomiques
PASS/LASS
Noyau
Localisation de régions de chromosomes

selon l’activité transcriptionnelle:
Pas de transcription: zones proches de

l’enveloppe nucléaire
Forte transcription: zones particulière du

nucléoplasme
Rôle de la matrice nucléaire dans la

régulation de l’expression génique

PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Hétérochromatine constitutive: centromère, télomère, constrictions secondaires

- séquences d’ADN répétées
- pas de structure génique (pas de transcription)
Hétérochromatine facultative:
- contrôle l’expression génique (hétérochromatine = pas de transcription)
- niveau variable (cycle, type cellulaire, niveau de différenciation…)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le corpuscule de Barr:
-Hétérochromatine sexuelle
-Chromosome X inactivé dans noyau
mammifères femelles
-Inactivation au hasard de l’X paternel ou de l’X
maternel
Dosage génique entre mâle et femelle
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le corpuscule de Barr:
- présent dans toutes les cellules somatiques
- mis en place après le début de

l’embryogénèse:
femelles mammifères = mosaïque
- Réversible durant l’ovogénèse

PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Séquences d’ADN nécessaires à la formation d’un
chromosome eucaryote stable
- Les origines de réplication: Télomère

- réparties le long des chromosomes
- synchronisation partielle en phase S
- Séquences centromériques:
- formation du kinétochore
- attachement de l’ADN sur le fuseau mitotique Centromère
- Les télomères:
- extrémité des chromosomes: 5-10 kpb de
séquence répétée 5’-TTAGGG-3’
- vieillissement: raccourcissement
5’ (…)TTAGGGTTAGGGTTAGGG 3’ Subtélomère
PASS/LASS 3’ (…)AATCCCAATCCCAATCCC 5’
Noyau
la vidéo
La matrice nucléaire:
La lamina nucléaire
- Organisation:
Face nucléoplasmique de la membrane interne: formation de l’enveloppe nucléaire
- Rôle des lamines (FI)

- lamine B ancrée par groupement farnésyl
- lamine A et C non ancrées
- récepteurs des lamines: prot.
transmembranaires
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
La lamina nucléaire
- rôle dans la régulation de l’expression des gènes
- Liaison avec les pores nucléaires
- au cours du cycle cellulaire (cf cours

Mitose):
- désorganisation en prométaphase
(phosphorylation des lamines…): rupture
de l’enveloppe en prométaphase
- réassemblage en début de télophase
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Constitution fibreuse du nucléoplasme
- réseau sous-membranaire:
- composition inconnue, organisation ≠ du feutrage de lamines
- englobe le petit anneau nucleoplasmique des pores nucléaires
- Réseau fibreux (+ granules aux intersections)

- occupe l’ensemble du nucléoplasme
- rôle dans l’organisation de la chromatine
- Protéines variées:
- actine (MF) et protéines associées
- lamines A et C hors lamina
- particules ribonucléoprotéiques (RNP)
- enzymes du métabolisme ADN et ARN
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Définition
Région intranucléaire bien individualisée:
- biogénèse des ribosomes
- présent à l’interphase
- contient des portions de chromosomes: régions NOR (codant pour 3
des ARNr)
Cellule eucaryote fabrique 2000-3000 ribosomes par minute
Régions NOR
PASS/LASS 5 chromosomes = 10 régions NOR

Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Notion d’organisateur nucléolaire: régions NOR
Organisation des gènes en tandem

(environ 20 copies)
Espaceur intergénique
non transcrit
ADNr ADNr ADNr ADNr
ARNr 45S
PASS/LASS
Noyau
Le nucléole: Zone réservée pour
Notion d’organisateur nucléolaire: régions NOR la vidéo
IGS: intergenic spacer

TU: transcription unit
Décondensation locale au sein des

constrictions secondaires
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Notion d’organisateur nucléolaire: régions NOR
Tous les ribosomes d’une cellule (sauf
mitoch. et chloroplastes) sont fabriqués
dans le nucléole
ADNr
Fin
Début
Transcription ADNr par ARN pol I: ARN 45S
ADN
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Structure
Microscopie photonique:
- forme, taille, nombre
- observation sur cellule
vivante ou après coloration Héterochromatine périphérique
Enveloppe
Microscopie électronique nucléaire
(MET): nucléole
- Région périphérique
granulaire
- Centre fibrillaire (1 ou pls)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Biogénèse des ribosomes
ARN 45S
Importation de Grande RNP

protéines:
-Polymérases
5S
-Protéines ribosomales Prot.
ribosomales
-Protéines de
maturation
Formation d’une Maturation

grande particule réalisée par
ribonucléoprotéique protéines et
(RNP) ARNsno (petits
ARN nucléolaires)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Le nucléole:
Biogénèse des ribosomes:
- action des 3 ARN polymérases (pol I, II et III)

- transfert des sous-unités par le pore nucléaire vers le cytosol
- assemblage des sous-unités dans le cytosol sur ARNm
Autres fonctions du nucléole:
Assurées en liaison avec d’autres régions du nucléoplasme:

- production de la PRS (Particule de Reconnaissance du Signal)
- maturation des pré-ARNt en ARNt
- etc…
PASS/LASS
Noyau
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Caryotypes:
Définitions:
L’étude du caryotype « classique » est l’étude des chromosomes dans leur état
maximal de condensation
Selon nombre de copie de chaque chromosome: espèces haploïdes, diploïdes…

(1n: haploïde, 2n: diploïde…)
Autosomes et gonosomes (chromosomes sexuels, X et Y chez mammifères)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Métaphase classée chez l’homme
Exemples :
Certaines fourmis 2n = 2
Drosophile 2n = 8
Lis 2n = 24
Homme 2n = 46
Chien 2n = 78
Carpe 2n = 104
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Définitions:
- Le caryotype est réalisé sur cellules somatiques
- Cellules isolées en mitose (généralement en métaphase)
- en biologie humaine:
- sur lymphocyte
- sur cellules fœtales (amniotiques par amniocentèse ou villosité choriales)
PASS/LASS
Noyau
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Caryotypes:
Caryotypage classique sur lymphocytes:
1: prélèvement de sang
2: mise en culture (+ mitogène):
lymphocyte en lymphoblaste
3: synchronisation des cultures
(traitement colchicine)
4: rupture des membranes cellulaires
5: coloration
6: photographie
7: appariement par paire et
classement des chromosomes
Schéma donné
pour information
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Observation après rupture des

membranes cellulaires et coloration
Métaphases à l’objectif 10X :

Culture de liquide amniotique
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Métaphase à l’objectif 100X
Photographie
Culture de
lymphocytes
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Métaphase classée chez l’homme
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Observations après coloration standard (Giemsa):
Télomère
- Taille Bras court p
- position du centromère:
- bras court p
Centromère
- bras long q
- indice centromérique: Ic= p/(p+q)
- Constrictions secondaires (NOR)

Bras long q
- satellites Chromatide
- télomères
Télomère
PASS/LASS Structure d’un chromosome métaphasique

Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Observations après coloration standard (Giemsa):
Indice centromérique: Ic= p/(p+q)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Classement d’après la longueur et l’index centromérique :
7 groupes de A–>G
métacentriques
A B
submétacentriques C
13 14 15
acrocentriques D E
21 22
F acrocentriques G C G
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Les gonosomes:
Région pseudo-autosomique 1
Chromosome Y: gène du PAR 1
déterminisme sexuel (SRY): Crossing-over obligatoire
transformation de la gonade primitive des chromatides non-soeurs
en testicule
SRY
Appariement X-X: comme
autosomes Centre d’inactivation en Xq13
Appariement X-Y partiel: régions

X Y
pseudo-autosomiques (PAR1 et
PAR2)
Méïose: crossing-over obligatoire

en PAR1 Région pseudo-autosomique 2
PAR 2
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Mise en évidence de bandes chromosomiques:
Traitement préalable à coloration Giemsa ou Molécules fluorescentes
Traitement physico-chimique (AT/GC): succession de bandes horizontales +/-

fortement colorées:
- caractéristiques d’une paire de chromosome
- reproductibles d’une mitose à l’autre
- caractéristiques d’une espèce donnée
Nombre de bande variable selon condensation de la chromatine:

métaphase: 200-500 bandes
Résolution: 5-10 Mpb
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Mise en évidence de bandes chromosomiques: Bandes Q
Bandes G et bandes Q:
-Bandes G:
- digestion enzymatique ménagée
- coloration Giemsa
-Bandes Q:
- quinacrine (fluo)
- profil Q = profil G
-ADN riche en AT
-Réplication tardive
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Idéogramme Bandes G Bandes R

Bandes R:
-Dénaturation thermique ménagée
-Coloration Giemsa
-ADN riche en GC
-Réplication précoce
Technique haute résolution

prophase, prométaphase:
synchronisation des cellules
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Bandes C NOR
PASS/LASS
Noyau
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Caryotypes:
Cytogénétique moléculaire:
Bras ou bande
Télomérique
spécifique
(TTAGGG)n
FISH: Fluorescent in situ hybridization
-Cytogénétique et biologie moléculaire Sub-télomérique
Chromosome entier
-Fondée sur l’hybridation moléculaire Centromérique
(brins d’ADN complémentaire)
-Utilisation de sondes moléculaires

(ADN ou ARN)
Locus
spécifique
Sub-télomérique
Télomérique
(TTAGGG)n
Différents types de sondes ADN
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes: Cytogénétique moléculaire:
sondes
chromosome
Longueur et nombre des sondes: résolution +/- élevée
Hybridation d’une sonde marquée sur échantillon ADN fixé sur support solide: FISH, Southern blot…
Hybridation de l’échantillon ADN marqué sur un ensemble de sondes fixées au support solide:
« puces » à ADN, hybridation génomique comparative (CGH)…
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
FISH: Fluorescent in situ hybridization:
Avantages: Inconvénients:
- Ne nécessite pas de cellules en division: Étude ciblée conditionnée par le
- noyaux en métaphase ou interphase choix de la sonde: « on ne trouve
- applicable à nbreux tissus que ce que l’on cherche… »
- Bonne résolution
- Outils de recherche
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Sondes télomériques Peintures chromosomiques
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Diagnostic Prénatal (Trisomie 18)

sur amniocytes non cultivés Multifluorescence
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
CGH: exemple de méthode basée sur l’hybridation
ADN à analyser: patient, tumeur…
ADN témoin: non malade, parents, tissus sain…
CGH au format « puce à ADN »: les 2 échantillons d’ADN sont marqués

(2 couleurs) et fragmentés avant l’hybridation sur la puce
Mesure des variations de quantité d’ADN à un locus précis par rapport

à un échantillon témoin
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
CGH: exemple de méthode basée sur l’hybridation
« puce » à ADN pour CGH après hybridation
Quantification du signal fluorescent et

comparaison avec ADN témoin
rapport de fluorescence (Intensity Ratio)
Ex: mise en évidence d’une duplication
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Différentes méthodes d’étude:
Caryotype classique: bandes après coloration

Observation
Caryotype moléculaire: FISH (hybridation de sondes) microscopique
PCR (Polymerase Chain Reaction) et méthodes Analyse par

dérivées électrophorèse ou
mesure de
Hybridation génomique comparative (et autres types fluorescence
de puces ADN)
Séquençage Analyse de séquence

(bioinformatique)
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Formulation en cytogénétique humaine: Nomenclature
internationale
ISCN
Caryotype normal: 46, XX ou 46, XY
Caryotype anormal: (nbre de chromosome,

sexe chromosomique, description des anomalies
chromosomiques)
Description des anomalies chromosomiques:

- type: délétion, translocation…
- repère chromosomique: bras, région,
bande
DIFFERENTES
RESOLUTIONS
PASS/LASS Schéma donné pour information
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Formulation en cytogénétique humaine:
Anomalies chromosomiques:
- constitutionnelles ou acquises
- homogène ou en mosaïque
Anomalies de nombre: 2n +/- 1, 2, 3,…chromosomes

47, XY, +21 45, X
Anomalies de structure:
- translocation réciproque: 46, XX, t(3;21)(p13;q22)
- translocation robertsonienne: 45, XY, der(14;21)(q10;q10)
- délétion: del(13)(q13q22)
Triploïdie (3n): 69, XXX ou 69, XXY: dispermie (accident de fécondation)
Tétraploïde, …
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Anomalies de nombre: trisomies et monosomies
Origine de ces anomalies: non disjonction des chromosomes

- méïose: organisme homogène 47,XY,+21
- mitose: organisme mosaïque
Trisomie des autosomes:

- syndrome de Down
(mongolisme): 47, XX, +21 ou 47, XY, +21
1/900 naissance
- trisomie 18
- trisomie 13
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Anomalies de structure des chromosomes:
Anomalies touchant 2 (ou +) chromosomes:
46,XX,t(7;8)(q11.1;q21.2)
-Insertions
- Translocations:
- réciproques:
- robertsonienne: fusion
centrique de chromosomes
acrocentriques q11.1 q21.2
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Anomalies de structure des chromosomes:
Anomalies touchant 2 (ou +) chromosomes:
45,XY,der(14;21)(q10;q10)
-Insertions
- Translocations:
- réciproques:
- robertsonienne: fusion
centrique de chromosomes
acrocentriques
PASS/LASS
Noyau
la vidéo
Caryotypes:
Anomalies cytogénétiques et pathologies humaines:
Anomalies présentes dans les lignées germinales (génération suivante):

- Avortements spontanés (fausses couches)
- Maladies congénitales:
- anomalies de nombre (ex: Trisomie 21)
- anomalies « visibles » de structure (ex: Cri du chat)
- anomalies identifiées au niveau génique (ex: mucoviscidose,
drépanocytose…)
- maladies autosomiques récessives
Anomalies acquises:
anomalies des cellules cancéreuses
Ex: le chromosome Philadelphie dans la Leucémie Myéloïde Chronique (LMC)
= création d’une protéine de fusion Bcr-Abl (activité kinase constitutive…)
PASS/LASS
la vidéo
PASS/LASS
MITOCHONDRIES ET PEROXYSOMES
la vidéo
Mitochondries:
- origine, caractéristiques morphologiques et biochimiques
- fonctions
- mitochondrie: source principale d’ATP
- cycle biologique des mitochondries
- adressage des protéines mitochondriales d’origine nucléaire
Peroxysomes:
- caractéristiques et biogénèse
- fonctions
- adressage des protéines aux peroxysomes
Fonctions oxydatives chez les deux organites
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: origine
Formation
du noyau
Transfert de gènes endosymbiote vers noyau
Cellule
ancestrale Cellule eucaryote Cellule eucaryote
anaérobie avec endosymbiote avec mitochondrie
Procaryote aérobie
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: caractéristiques morphologiques
Matrice
Double membrane
Formation de crêtes par la mb interne
Membrane interne
Diamètre : 0.5-1 µm
Similaire aux bactéries
Membrane externe
Espace intermembranaire
PASS/LASS Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

la vidéo
Méthodes d’étude
Fractionnement:
Lyse osmotique et centrifugation (différentielle et en gradient de densité):
Séparation des fractions:
- espace intermembranaire
- membrane interne
- membrane externe
- matrice
Analyse de la composition des différents compartiments de la mitochondrie
Microscopie:
- lumière visible: coloration au vert Janus B
- fluorescence: Rhodamine 123 et MitoTracker, GFP avec signal
d’adressage mitochondrial
Visualisation et suivi de la dynamique des mitochondries
PASS/LASS
la vidéo
Membrane externe:
- transporteurs dont porines: pores aqueux laissant passer les petites
molécules (<10 kDa) vers et du cytosol
- les porines ne laissent pas passer les protons (H+)
- protéines de régulation de la fusion/fission des mitochondries
- complexes protéiques permettant l’accolement des 2 mb
Espace intermembranaire:
- accumulation des protons venant de la matrice
- procaspases et cytochrome C (implication dans l’apoptose)
PASS/LASS
la vidéo
Membrane interne:
- crêtes: surface x3 par rapport à mb externe
- présence de crêtes liée à la présence d’ATP-synthase (morphologie et
surface dépendent de la demande en ATP, ex: cellules cardiaques +++)
- perméases pour co-transport proton-molécules
- contient de la cardiolipine: phospholipide à 4 chaînes d’acide gras
- contient les enzymes de la chaîne respiratoire
- complexe protéiques permettant l’accolement des 2 mb
Matrice:
- enzymes du cycle de Krebs
- enzymes de dégradation des acides gras et pyruvate
- ADN mitochondrial, mitoribosomes, ARNt…

la vidéo
PASS/LASS Biologie cellulaire, P. Cau, Ellipses

la vidéo
Marquage fluorescent des mitochondries Marquage fluorescent des microtubules

(rhodamine 123) (anticorps)
Mitochondries: réseau dynamique associé au cytosquelette (déplacements)

la vidéo
Mitochondries: fonctions
fonctions principales:
- « respiration cellulaire »: production d’ATP et de CO2, consommation
d’oxygène et de molécule carbonées
- dégradation des acides gras (b-oxydation)
- participation à l’apoptose
- synthèse de métabolites: hème, hormones stéroïdes, hydroxylation de
molécules par cytochrome P450…
- contrôle des concentration cytosoliques en calcium, balance redox
(cofacteurs réduits ou oxydés),…
Intégration du métabolisme procaryote ancestral chez la cellule eucaryote
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: fonction de génération d’énergie
Membrane externe
Membrane interne
Matrice: transformation du
pyruvate et des acides gras
en acétyl-CoA
Cycle de Krebs: convertit

acétyl-CoA en CO2, produit
des cofacteurs réduit NADH et
Cycle FADH2
de
Krebs Chaîne de transport
d’électron: génère gradient H+,
O2=accepteur final d’e-
AG
ATP synthase: convertit
l’énergie du gradient H+ en
ATP
pyruvate acides gras
la vidéo
Échanges avec le cytosol
Mb externe: échange
par perméases
Transport des e-
(cofacteurs réduits
cytosoliques) par
navettes passant
librement la mb ext.
Antiport ADP/ATP:
Symports
métabolite-proton:
Cotransports actifs
Différence de potentiel et gradient H+ permettent le co-transport actif à travers

mb interne: entrée ADP et métabolites (pyruvate, AG, phosphate), sortie ATP
la vidéo
Échanges avec le cytosol: les zones d’accolement
Mégacanal: rôle dans

le déclenchement de
l’apoptose
Accolement entre les

mb grâce à complexes
protéiques
Cholésterol: précurseurs d’hormones stéroïdes

la vidéo
Oxydoréduction et transfert d’électron
e- H+ 1:Transfert d’un électron du substrat

A A- AH vers un accepteur oxydé
2: un proton de l’eau neutralise la
Accepteur Intermédiaire Accepteur charge négative
d’e- oxydé transitoire d’e- réduit
1:Transfert d’un électron de l’accepteur

réduit vers une autre molécule (UQ…) AH AH+ A
2: un proton retourne à l’eau
e- H+
Glycolyse: production cytosolique de NADH
Cycle de Krebs et b-oxydation: production dans la matrice de NADH et FADH2
Accepteur final d’électron, l’oxygène: ½ O2 + H2 H20
PASS/LASS
la vidéo
Un métabolite central: l’acétylcoenzyme A
Pyruvate (glycolyse et catabolisme cytosolique des acides aminés): convertit en

acétyl CoA dans la matrice (rem: pyruvate convertit en éthanol ou acide lactique en
cas de fermentation)
Acides gras: formation cytosolique d’acyl CoA qui subit 4 réactions enzymatiques
dans la matrice (b-oxydation ou hélice de Lynen) aboutissant à une molécule
d’acyl CoA (-2 carbones) et un acétyl CoA + NADH et FADH2 par cycle
Acétyl CoA: alimente le cycle de Krebs qui aboutit à l’oxydation totale du groupe
acétyl de l’acétyl CoA en CO2 et génère des électrons de haute énergie. Ces
électrons sont captés par les cofacteurs (production de NADH et FADH2)
Les électrons sont ensuite transférés à la chaîne respiratoire de la mb interne
puis finalement à l’oxygène.
L’énergie dégagée est utilisée par l’ATP synthase pour réaliser la
phosphorylation oxydative (production d’ATP à partir d’ADP)
PASS/LASS
la vidéo
La chaîne respiratoire
Composée de 4 complexes protéiques membranaires contenant des atomes

métalliques récepteurs d’électrons (Fe, Cu et centres Fe-S) et 2 transporteurs
d’électrons (ubiquinone dans la membrane interne et cytochrome c soluble dans
l’espace intermembranaire)
Complexe I (NADH déshydrogénase): contient flavoprotéine, entrée des électrons

provenant du NADH et transfert à UQ
Complexe II (succinate déshydrogénase): enzyme du cycle de Krebs, entrée des
électrons provenant du FADH2 et transfert à UQ
Complexe III (complexe b-c1): récupération des électrons de l’ubiquinone réduit
(UQH2) et transfert au cytochrome c
Complexe IV (cytochrome c oxydase): récupère les électrons du cytochrome c
réduit et transfert à l’oxygène (formation d’eau)
Perte d’énergie des électrons à chaque étape
Complexes I, III et IV sont des pompes à proton (énergie dans gradient H+)
PASS/LASS
la vidéo
PASS/LASS Biologie cellulaire et moléculaire, Karp, de Boeck

la vidéo
3 sources d’électrons pour la chaîne respiratoire:

- transfert d’électrons du NADH cytosolique à l’ubiquinone (navette glycérol-
phosphate)
- transfert d’électrons au NAD+ de la matrice (navette malate-aspartate)
- cycle de Krebs et b-oxydation dans la matrice (NADH et FADH2)
Génération du gradient de proton: stockage de l’énergie récupérée lors du

transfert d’électrons sous forme de gradient électrochimique (ddp et concentration)
Rem: cyanure et azide se fixent au cyt c et bloquent le transport d’électrons
PASS/LASS
la vidéo
L’ATP synthase
Complexe protéique > 500 kDa

- « pied » transmembranaire : ATPase F0
- « tête »: ATPase F1
Complexe composé d’un rotor et d’un stator: passage de proton entraîne une
rotation qui active les sous-unités de la tête: phosphorylation ADP en ATP
Énergie électrochimique Énergie mécanique Énergie chimique

(gradient de proton) (rotation) (liaison phosphate ATP)
ATP synthase peut consommer de l’ATP pour pomper des protons dans
l’espace intermembranaire (régénération du gradient)
PASS/LASS
la vidéo
L’ATP synthase
Espace intermb.
matrice
Synthèse d’ATP Hydrolyse d’ATP

la vidéo
métabolites Transport des protons
H+ H+
H+ H+ H+
Espace intermb
Mb interne
matrice
H+
H+
métabolites
H+
Protéines de découplage
symports Chaîne respiratoire ATP synthase (UCP UnCoupling Protein)
PASS/LASS
la vidéo
Les protons sont transportés à travers la mb interne des mitochondries:

- par l’ATP synthase (réversible)
- par les protéines de la chaîne respiratoire (vers l’espace intermb.)
- par les symports proton-métabolites (dont phosphate, pyruvate et AG)
vers matrice
- par les protéines de découplage vers la matrice
Protéines de découplages: permettent la génération de chaleur par la « graisse

brune » chez certains animaux (hibernation…) et les nouveaux-nés
La mitochondrie fournit également au cytosol:

- citrate pour biosynthèse d’ AG et de stérols
- OAA, a-cétoglutarate pour biosynthèse (AA…)
- cofacteurs réduits (ex: NADPH) pour biosynthèse
- régénère le NADH produit par la glycolyse (balance redox)
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: synthèses et coopération avec les autres
compartiments cellulaires
Synthèse des stéroïdes: mitochondries et RE lisse
Cytochrome P450 (mitoch: site actif dans la matrice, RE: dans le cytosol) utilisent
des électrons fournit par du NADPH via 2 transporteurs:
Les hormones stéroïdes sont libérées dans le milieu extracellulaire par des
transporteurs ABC (ATP Binding Cassette)
+ importation de phospholipides depuis la face cytosolique du RE
PASS/LASS
la vidéo
Stockage du calcium (en liaison avec RE):

La mitochondrie participe à l’homéostasie calcique de la cellule (+ libération dans
l’apoptose). Calcium influence le métabolisme mitochondrial
Communication mitochondrie-noyau: activation cytosolique de facteurs de

transcriptions (ex: NF-kB)
Radicaux superoxydes (02-):

Produit et catabolise ces radicaux toxiques. Peut également générer des radicaux
libres (implication dans le vieillissement…)
Défense antivirale:
Activation par l’ARN viral double brin (dsRNA) d’une protéine à la surface des
mitochondrie: activation de NF-kB (facteur de transcription)

la vidéo
Rôle dans l’apoptose
Libération dans le cytosol de

cyt. c et procaspases
(apoptose)
Libération de calcium et de
proton (acidification cytosol)
Effondrement des gradients

et arrêt de la production
d’ATP
Ouverture des mégacanaux: parmi les premières étapes de l’apoptose

la vidéo
Mitochondries: cycle biologique
Les mitochondries sont des organites semi-autonomes
Présence d’un génome mitochondrial:

- variable selon les espèces
- circulaire (chez l’homme)
- contient les gènes pour ARNr des mitoribosomes et ARNt
- contient les gènes codant pour 13 protéines mitochondriales
Réplication de l’ADNmt indépendante du cycle cellulaire
Ribosomes mitochondriaux de type procaryote
Cycle de division/fusion régulé par GTPase sur les deux membranes
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: cycle biologique
Les mitochondries sont des organites semi-autonomes
Nombre de mitoch/cellule variable:

- type cellulaire
- demande en ATP (ex: cellule
musculaire)
Contrôle par la cellule hôte
Microscopie en fluorescence: Euglena

avec GFP mitochondriale et bromure
d’éthidium (ADN)
la vidéo
Mitochondries: adressage des protéines
Génome mitochondrial humain:

13 protéines synthétisées par mitoribosomes dans la matrice
Génome nucléaire:
400-500 protéines synthétisées par ribosomes libres dans cytosol
Les protéines mitochondriales codées par le génome nucléaire sont
adressées à la mitochondrie de manière post-traductionnelle
Majorité des protéine de la matrice: peptide signal N-terminal amphiphile (env

20 aa ) clivé après transport
Toutes les protéines de la mb externe + plusieurs de l’espace intermb et mb
interne: séquence signale interne non clivée
La translocation met en jeux des complexes protéiques:

- TOM ( Translocator Outer Membrane): à travers la mb externe
- TIM (Translocator Inner Membrane): à travers la mb interne
PASS/LASS- chaperonnes
la vidéo
+ chaperonnes
cytosol
TOM MME
Espace
intermb
TIM MMI
matrice
Clivage par signal
peptidase mitoch.
Protéines solubles de la matrice

PASS/LASS
la vidéo
cytosol
TOM MME
Protéines
Espace
Protéines solubles membranaires
intermb
TIM MMI
matrice
Protéines de la mb externe et espace intermembranaire

PASS/LASS
la vidéo
Protéines codées par le génome mitochondrial
ARNm traduit dans la matrice par les ribosomes mitochondriaux
Protéines transmembranaires:
translocation co-traductionnelle dans la mb interne grâce à la translocase (OXA)
similaire au translocon du RE , puis association avec les sous-unités d’origine
cytosolique
Ex: sous-unité de l’ATP synthase et de la chaîne respiratoire
Les protéines nécessaires à la réplication de l’ADNmt et à son expression

(protéines ribosomales, polymérases…) sont codées par le noyau
REM: les protéines de la mb interne codées par le génome nucléaire sont insérées
dans la membrane de façon post-traductionnelle
PASS/LASS
la vidéo
cytosol
TOM MME
Espace
intermb
OXA TIM MMI
matrice
Clivage par signal
ARNm peptidase mitoch.
PASS/LASS Protéine de la mb interne

la vidéo
Autres acteurs de la translocation des protéines adressées à la mitochondrie:
- chaperonnes cytosoliques (dont Hsp70): liaison au peptide signal et

maintient de la protéine sous forme dépliée
- Hsp70 mitochondriale dans la matrice: « tire » la protéine vers la matrice

(consommation d’ATP), Hsp60 mitochondriale aide au repliement de la protéine
- potentiel de membrane (interne): composante électrique du gradient de

proton, permet la translocation de la protéine à travers le complexe TIM
- signal peptidase de la matrice: clive les peptides signaux N-terminaux
PASS/LASS
la vidéo
Mitochondries: transmission et pathologies
Chez l’homme: transmission des mitochondries maternelles uniquement

(idem chez 2/3 des plantes à fleurs)
Il existe des sous-unités (codées par le noyau) de la chaîne respiratoire

spécifiques de certains tissus (ex: muscles squelettiques, cœur…)
Anomalies du génome mitochondrial (congénitales ou acquise) s’expriment

dans des cellules caractérisées par:
- forte consommation d’oxygène
- pas ou peu de renouvellement (ex: neurones et cellules musculaires)
Contribution au vieillissement: production d’ions superoxydes (O2-)
PASS/LASS
la vidéo
PEROXYSOMES
PASS/LASS
la vidéo
Peroxysomes: caractéristiques et biogénèse
Organites à simple membrane

Taille: 0,1 à 1 µm
Vésicules reliées par des canalicules
Pas de génome ni ribosomes: totalité des protéines codées par gènes nucléaires:
majorité des protéines importées du cytosol + quelques protéines membranaires
du RE
Hors du système endomembranaire
Utilisent O2 dans 3 voies métaboliques:

- b- oxydation des acides gras à très longues chaînes
- production/dégradation du peroxyde d’hydrogène H2O2
- hydroxylation des molécules
PASS/LASS
la vidéo
Vésicules + canalicules: matrice
Vésicules: peut contenir une région

paracristalline riche en protéines (ex: urate
oxydase chez le rat)
Transports à travers la mb:

- peroxines (importation des
protéines)
- transporteurs ABC (métabolites)
Rem: urate oxydase absente chez

Peroxysomes dans cellule de foie de rat les primates

la vidéo
Détection cytoenzymologique
de la catalase (x 28 600,
DAB+ H2O2)
de l’urate oxydase (x 50 400) Cellules de foie de rat
Localisation
Immunomarquage (billes d’or) d’enzymes dans
de la catalase (x 72 000) et la matrice ou
urate oxydase (x 61 600) dans la région
paracristalline
PASS/LASS
Histochem Cell Biol (2008) 129:421–440
la vidéo
Immunolocalisation par microscopie à

fluorescence
En rouge: anticorps contre SOD

mitochondriale
En vert: anticorps contre protéine de

membrane de peroxysome PMP70
Flèche: aspect « en collier de perles »

Insert: vésicules et tubules
Cellule d’hépatome humain (foie)
PASS/LASS Histochem Cell Biol (2008) 129:421–440

la vidéo
cytosol
fusion
noyau Rem: canalicules

non représentés
fission
Domaine
particulier du
RE Cycles de fusion/fission:
Bourgeonnement de Fusion (réseau) implication de Dynamin-related
vésicules et maturation protein (ex: Drp1)
Multiplication + création de peroxysomes au cours du cycle: nombre constant

PASS/LASS Prolifération en cas de changements métaboliques
la vidéo
Peroxysomes: adressage des protéines
Toutes les protéines des peroxysomes sont synthétisées dans le cytosol

Des peroxines cytosoliques prennent en charge les protéines adressées au peroxysome
Protéines solubles:
- signal PTS-1: extrémité C-terminale
- signal PTS-2: extrémité N-terminale
- translocation grâce à peroxines cytosoliques + complexe d’importation
Protéines transmembranaires:
- PTS-2 si un seul domaine transmembranaire
- signal dans boucle matricielle entre 2 domaines transmembranaires
- insertion dans la membrane grâce à des peroxines cytosoliques
Intervention de protéines chaperonnes consommant de l’ATP: maintient de la

protéine sous forme dépliée
Pas de clivage des signaux d’adressages
PASS/LASS
la vidéo
Peroxysomes: adressage des protéines
cytosol
Protéines membranaires Protéines de la matrice

Classe II
fusion
noyau
fission
Protéines membranaires
Classe I
Importation séquentielle des protéines du peroxysome:
- protéines membranaires de classe II (ou peroxines précoces) au
niveau du RE, rôle dans bourgeonnement et importation des autres protéines
- protéines membranaires de classe I, ex: transporteurs ABC
- protéines soluble de la matrice, ex: enzymes
PASS/LASS
Peroxysomes: adressage des protéines solubles Zone réservée pour
la vidéo
e: extraction de la
peroxine de la
membrane
f: déubiquitinylation
(recyclage)
a: fixation de la peroxine cytosolique (Pex5) sur la protéine cargo

b: arrimage du complexe sur un récepteur (peroxines)
c: insertion du complexe dans la membrane et relargage du cargo
d: ubiquitinylation de la peroxine cytosolique
PASS/LASS
la vidéo
noyau
Transport RE—mitochondrie-peroxysome:
- vésiculaire: protéines et lipides
- non-vésiculaire: échange de lipides par protéines porteuses
PASS/LASS
la vidéo
Peroxysomes: fonctions
Changements métaboliques: prolifération des peroxysomes (augmentation du

nombre par cellule)
ex: changement de source de carbone (glucose vers méthanol ou acides gras) chez la
levure
PPAR (Peroxysome Proliferator-Activated Receptor): famille de récepteurs nucléaires

contrôlant la prolifération des peroxysomes en réponse à différents lipides
Dynamique des peroxysomes: variable selon type de cellule, métabolisme,

médicaments, stress…
PASS/LASS
la vidéo
Peroxysomes: fonctions
Dégradations (catabolisme et détoxification, génère H2O2 consommé par catalase):

- oxydation de nombreux métabolites (ex: éthanol)
- oxydation des acides aminés D (ex: D-proline, NMDA…)
- oxydation des purines
- b-oxydation des acides gras à très longues chaînes
Synthèses:
- acides biliaires: oxydation du cholestérol
- plasmalogène: phopholipide particulier (liaison ether avec un alcool gras)
présent par exemple dans le cerveau et coeur
PASS/LASS
la vidéo
PASS/LASS

Noyau Mitoch Perox

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Noyau Mitoch Perox

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Zone réservée pour

Membrane plasmique lysosome

Présent chez tous les organismes eucaryotes

Mise en évidence en microscopie:

Organismes eucaryotes pluricellulaires peuvent contenir des cellules sans noyau,

- érythrocyte chez les mammifères: perte du noyau de l’érythroblaste

6% du volume cellulaire: variable selon activité et type cellulaire

N/P : volume noyau/volume cellule

N/P faible: cellule différenciée adulte

Tableau donné pour information

Enveloppe « percée » par les pores nucléaires

Réticulum endoplasmique rugueux

Continuité membranaire avec le RER: contenu et fonction similaires

Composition différente de la mb externe:

Canaux calciques: permet

Interactions avec l’ADN et la lamina:

Récepteurs pour lamines:

Récepteurs pour histones ou

Diamètre: 120 nm 120 nm

Pore Nucléaire 120 nm

Protéines constituant le pore nucléaire:

Le pore nucléaire: structure

16 bras radiaires (2x8)

-Transporteur central: translocation de

Origine des nucléoporines:

Fonctions des nucléoporines:

Les répétitions FG forment un « gel »: obturation de la lumière du transporteur central

PASS/LASS Sci. Rep. 6, 29991; doi: 10.1038/srep29991 (2016).

Les protéines à la périphérie du

-Protéine G monomérique Ran

Biogénèse et rôle de l’enveloppe nucléaire

Pendant la division cellulaire:

Fonctions durant l’interphase:

Importines et exportines: récepteurs à multiples affinités

Masquage/démasquage des signaux d’adressage par partenaires d’interaction

Importine a Importine b reconnaît l’imp. a Complexe compétent

3: interaction RanGTP- imp. b

1: interactions 2: translocation cargo

RanGDP 2: hydrolyse du GTP après translocation:

RanGTP 1: complexe RanGTP-imp. b

Transport de macromolécules: export

Transport de macromolécules: import

Transport de petites molécules: diffusion libre à travers les pores nucléaires

génome haploïde = 3.2 109 pb

23 paires de chromosomes: ADN réparti en 46 molécules

Chromatine: ADN + protéines

Forme condensée -Chromosome mitotique:

Rem: hétéro/euchromatine: termes issus d’observations microscopiques

Enroulement de l’ADN sur cœur

Petites protéines basiques:

- liaison à l’ADN indépendante de la

Histones nucléosomiques: H2A, H2B, H3, H4

- Les histones: modifications post-traductionelles modulent leur

- Les protéines HMG (High Mobility Group): interactions avec l’ADN

- les protéines de structure : (ex: ADN topoisomérase II)

- autres protéines minoritaires

Fibre nucléosomique (11 nm de diamètre):

Chromatine décondensée expérimentalement: fibre de 11 nm

Chromatine isolée directement à partir d’un noyau en interphase

Histone H1 intervient dans l’empilement de nucléosome (fibre 30 nm)

Rôle des histones dans le compactage en fibre de 30 nm:

Fibre de 30 nm interrompue par courtes régions

Repliement Niveau de compaction de