El foutat Sana

EL cadi Khaoula

Lachhab Wissam

El Amine Salah

Etudes des effets neuropharmacologiques d’un anxiolytique de la

famille des inhibiteurs sélectifs de recapture de la serotonine ISRS
in vivo
 MATÉRIEL ET MÉTHODES
1. LES ANIMAUX UTILISÉS :

Les animaux utilisés sont des souris adultes albino mâles (n=8 ), pesant entre 27 g et 32 g.

Chez ce modèle on va explorer l’effet du fluoxétine comme un antibiotique de famille inhibiteurs

sélectifs de recapture de la sérotonine ISRS sur les differents aspects comportementaux .

Le choix de ce modèle s’explique par différents arguments : faciles à nourrir et à soigner , résistent
à bien les expérimentations. occupe peu de place ainsi que leurs activités adultes riches en
comportements ce qui permet d'analyser les réactions et réaliser plusieurs tests expérimentaux.

2 PROTOCOLE EXPÉRIMENTAL:

Après une période d'acclimatation, les souris sont pesées et réparties en deux groupes; un contrôle
avec 2 souris injectés par solution NaCl et l’autres traités injectés par fluoxétine subdivisé en 2
groupes un de fort dose et l’autre de faible dose .

 Groupe de forte dose :

Souris Poids corporelle (g)

S6 28.6

S7 31.33

S8 27.7

 Groupe de faible dose :

Souris Poids corporelle (g)

S3 29.04

S4 28.05

S5 27.08

* preparation solution du NaCl :

900mg 1000ml
NaCl 0.09g
9mg 10ml
* preparation solution du fluoxétine :

 Groupe fort dose : on va injecter 15 mg de Fluoxétine pour 1000g ce qui permet :

15 mg 1000g
X = 0.015 PC
X PC

Et pour le volume : 15 mg pour 8ml

15 mg 8ml
V = ( X*8)/15
X V

Souris Poids corporelle (mg) Quantité (X) en mg Volume ( V ) en ml

6 28.6 0.429 0.22

7 31.33 0.46 0.24

8 27.7 0.41 0.21

  Groupe faible dose : on se basant sur le même principe

Souris Poids corporelle (mg) Quantité (X) en mg Volume ( V ) en ml

3 29.04 0.29 0.23

4 28.05 0.28 0.22

5 27.08 0.27 0.21

1. ETUDE NEUROCOMPORTEMENTALE

Les animaux de chaque groupe ont été habitués à l’expérimentateur avant le lancement des
expériences, le jour du test, les animaux sont placés dans la salle d’expérimentation pendant 30 min
avant de commencer .

Les testes utilisées : Open Filed , Rotarod ,Y Maze .

3.1 L'ACTIVITE LOCOMOTRICE : OPEN FILED

Afin d’étudier l’activité locomotrice, nous avons utilisé le test du champ ouvert ‘‘Open field test’’.
Il s’agit d’une enceinte carrée, d’une surface de
1 m2 et de 30 cm de hauteur. La réalisation du
test se fait en plaçant chaque animal au centre
du champ ouvert bien nettoyé et bien éclairé,
les mouvements de l’animal sont ensuite filmés
pendant 5 min à l’aide d’une caméra placée en
haut du dispositif. Les vidéos sont par la suite
analysées et le nombre de cases parcourues est
compté pour chaque groupe. Une case est
considérée comme parcourue quand l'animal la
traverse par toutes ses pattes y compris les
postérieures.

il faut que chaque fois nettoyée l’enceinte avant de placer l’animal suivant pour éliminer toute
perturbation qui peut résulter des traces de l’animal précédent .
 3.2 MEMOIRE : Y MAZE

Afin d’évaluer la mémoire qui correspond à la capacité de

retenir une information, à court terme , nous avons
utilisées test de “Y maze “ qui se base sur la tendance
naturelle des rats à explorer d’une façon spontanée et
alternée les différents bras du labyrinthe .

Le labyrinthe est formé de trois bras identiques , notés A,

B et C, séparés l’un de l’autre par un angle de 120° et
convergeant vers un point central.

Les souris testées ont été individuellement placées à

l’extrémité du bras « A », la tête dirigée vers la paroi et
elles ont été autorisées à explorer, librement, le labyrinthe
pendant 5min avec une camera place en haut pour filmer
les mouvements du rat ce qui permet à la suit de compter
l’alternance spontané.

Le pourcentage d'alternance spontanée était calculé selon la formule ci-dessous : Une alternance est
définie comme la visite successive, par l’animal testé, de trois bras différents constituant un triplé
(ABC, ACB, BCA…).

*Nombre des alternance correctes est considères lorsque le rat suivent les séquences ABC , CAB
ACB ,CBA , BCA + BAC)

*Nombre total d’entrées des bras : Nombre d’entrées dans la zone A + Nombre d’entrées dans la
zone B + Nombre d’entrées dans la zone C .

3.3 COORDINATION MOTRICE : TEST DU ROTAROD:

Le Rotarod est utilisé pour évaluer la coordination motrice chez les souris .Il est composé d’un
tambour à multiples voies, entraîné en mouvement de rotation autour de son axe par un moteur
électrique à vitesse réglable .
Le principe de ce test est comme suit : placer l’animal sur le cylindre rotatif suspendu au-dessus du
plancher de l’appareil, les rats tentent naturellement de rester sur le rotarod pour éviter de tomber mais
lorsque la vitesse de rotation de l’axe sera supérieure à leur capacité de coordination ils tombent.

Lorsque l’animal tombe le temps de latence est automatiquement enregistré, ce temps pendant
lequel l’animal est resté sur l’axe en rotation est une mesure de l’équilibre, de la coordination.
Chaque souris aura trois tentatives pour une durée maximale de 10min, la moyenne a été prise en
considération .