Dosage de l’azote dans le lait de chévre

 Prélever 10 ml de lait de chèvre dans un bécher gradué.

 Ajouter 5 ml d'acide sulfurique concentré dans le bécher gradué contenant le lait de chèvre.
Mélanger doucement à l'aide d'une baguette en verre.
 Chauffer le bécher gradué contenant le mélange lait-acide sulfurique sur un chauffe-ballon
jusqu'à ce que le mélange devienne brun foncé.
 Ajouter environ 1 g de peroxyde de potassium dans le bécher gradué et continuer de
chauffer jusqu'à ce que le mélange devienne clair.
 Laisser refroidir le bécher gradué.
 Transférer le contenu du bécher gradué dans un ballon volumétrique de 100 ml à l'aide d'une
éprouvette graduée.
 Ajouter 50 ml d'hydroxyde de sodium et quelques grains de pierre ponce dans le ballon
volumétrique. Agiter doucement pour éviter les bulles d'air.
 Installer le ballon volumétrique sur un dispositif de distillation et ajouter de l'eau distillée
dans le ballon de distillation.
 Faire bouillir le mélange à reflux pendant environ 1 heure jusqu'à ce que tout l'ammoniac
soit libéré.
 Ajouter une petite quantité de papier tournesol dans le ballon de distillation pour vérifier si
l'acide a été neutralisé. Si le papier tournesol change de couleur, ajouter quelques gouttes de
solution d'acide sulfurique pour neutraliser le mélange.
 Titrer le mélange avec une solution d'acide sulfurique jusqu'à ce que le point d'équivalence
soit atteint. Le point d'équivalence est atteint lorsque la solution devient rose pâle.
 Noter le volume de la solution d'acide sulfurique nécessaire pour atteindre le point
d'équivalence.
 Calculer la quantité d'azote en multipliant le volume de la solution d'acide sulfurique par le
facteur de conversion approprié (0,014 pour le lait de chèvre).
 Calculer la teneur en protéines en multipliant la quantité d'azote par un facteur de
conversion (6,38 pour le lait de chèvre).

Acide sulfurique concentré : 96 %

Peroxyde de potassium : 30 %

Hydroxyde de sodium : 40 %

Solution d'acide sulfurique : 0,1 N (normale)

les réactions mises en jeu dans cette méthode :

Digestion : Lors de la digestion, l'échantillon de lait de chèvre est traité avec de l'acide sulfurique
concentré (H2SO4) et chauffé jusqu'à ce que les composés organiques contenant de l'azote soient
convertis en ions ammonium (NH4+). Les protéines, les acides aminés, les bases puriques et
pyrimidiques et d'autres composés organiques contenant de l'azote sont dégradés en ammonium.

Oxydation : Le peroxyde de potassium (K2O2) est ensuite ajouté pour oxyder les ions ammonium en
ions nitrate (NO3-).

- 4 NH4+ + 4 H2SO4 + 2 K2Cr2O7 → 4 (NH4)2SO4 + K2Cr2O7 + 3 H2O + 3 S

- 4(NH4)2SO4 + 2K2Cr2O7 + 10 H2SO4 → 4(NH4)2SO4•Cr2(SO4)3 + K2SO4 + 8 H2O
Titration : L'excès de peroxyde de potassium est ensuite neutralisé en utilisant une solution d'acide
sulfurique (H2SO4) de concentration connue. La quantité d'acide sulfurique utilisée lors de la titration
permet de déterminer la quantité d'azote présente dans l'échantillon de lait de chèvre.

Voici quelques précautions à prendre pour réussir la manipulation de la méthode de Kjeldahl pour
l'analyse de l'azote dans le lait de chèvre :

- Utilisez du matériel propre et sec pour éviter toute contamination croisée entre les
échantillons.
- Assurez-vous que les volumes de réactifs et les temps de réaction sont respectés pour
obtenir des résultats précis et reproductibles.
- Utilisez une hotte pour effectuer la digestion et la manipulation des acides. Portez des gants,
une blouse de laboratoire, des lunettes de protection et un masque pour éviter les contacts
avec les acides.
- Vérifiez que le système de refroidissement de l'appareil de digestion fonctionne
correctement pour éviter toute surchauffe et toute perte de liquide.
- Utilisez une balance de précision pour mesurer l'échantillon de lait de chèvre et les réactifs.
- Évitez de dépasser la température de digestion recommandée pour éviter la décomposition
des composés azotés et la formation d'oxydes d'azote toxiques.
- Contrôlez la qualité de la solution de H2SO4 et de K2Cr2O7 utilisée pour éviter toute
contamination et assurez-vous que la solution de NaOH utilisée pour la titration est
exactement de la même concentration que la solution de H2SO4.
- Répétez les analyses en double ou en triple pour obtenir une bonne précision et évaluer la
variabilité des résultats.