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Hémoglobine glyquée
Turbidimétrie latex
DIV Détermination quantitative de l'hémoglobine glyquée (HbAB1Bc)

EMBALLAGE 4. Pipeter dans une cuvetteÿ:

Réf. : 101-0771 Cont.ÿ: 1 x 30 / 1 x 10 / 1 x 125 mL

R1 (µL) 360
Conserver 2 - 8º C.

CalibrateurP (0 à 4) ou échantillon (µL) dix

SIGNIFICATION CLINIQUE Tout au
long de la vie circulatoire du globule rouge, l'hémoglobine A1c est formée en continu par l'adduction de glucose à 5. Mélanger et incuber 5 minutes.
l'extrémité N-terminale de la chaîne bêta de l'hémoglobine. Ce processus, non enzymatique, reflète l'exposition
6. Pipeter dans la cuvetteÿ:
moyenne de l'hémoglobine au glucose sur une période prolongée.
Dans une étude classique, Trivelli et al1 ont montré que l'hémoglobine A1c chez les sujets diabétiques était élevée à 2-
R2 (µL) 120
3 fois plus que les niveaux trouvés chez les individus normaux. Plusieurs chercheurs ont recommandé que
l'hémoglobine A1c serve d'indicateur du contrôle métabolique du diabétique, puisque les niveaux d'hémoglobine
A1c se rapprochent des valeurs normales pour les diabétiques dans le contrôle métabolique.2,3,4 7. Mélangez et lisez l'absorbance après 5 minutes (ABB) d'ajout de R2.
L'hémoglobine A1c a été définie sur le plan opérationnel comme les hémoglobines de la "fraction rapide" (HbA1a,
A1b, A1c) qui s'éluent en premier lors de la chromatographie sur colonne avec des résines échangeuses de cations. Chronolab dispose de fiches d'instructions pour plusieurs analyseurs automatiques. Les instructions pour beaucoup
L'hémoglobine non glycosylée, qui constitue la majeure partie de l'hémoglobine, a été désignée HbA0. La présente d'entre eux sont disponibles sur demande.
procédure utilise une réaction d'antigène et d'anticorps pour déterminer directement la concentration de l'HbA1c.
CALCULS
Concentration d'HbA1c (%)
PRINCIPE DE LA METHODE Tracé (ABB) obtenu par rapport à la concentration en HbA1c de chaque calibrateur (niveau 1 à 4). Le pourcentage
d'HbA1c dans l'échantillon est calculé par interpolation de son (AB) dans la courbe d'étalonnage.
Cette méthode utilise l'interaction de l'antigène et de l'anticorps pour déterminer directement l'HbA1c dans le sang
total. L'hémoglobine totale et l'HbA1c ont le même taux d'absorption non spécifique aux particules de latex. Lorsque
CONTRÔLE QUALITÉ Le
l'anticorps monoclonal anti-HbA1c humain de souris est ajouté (R2), un complexe latex-anticorps anti-HbA1c humain
contrôle HbA1c (réf. : 101-0770) est recommandé pour surveiller les performances des procédures de dosage
de souris anti-HbA1c se forme. L'agglutination se forme lorsque l'anticorps polyclonal de chèvre anti-IgG de souris
manuelles et automatisées. Les contrôles nécessitent un prétraitement d'hémolyse après avoir été reconstitués.
interagit avec l'anticorps monoclonal. La quantité d'agglutination est proportionnelle à la quantité d'HbA1c absorbée
Chaque laboratoire doit établir son propre programme de contrôle de la qualité et des actions correctives si les
à la surface des particules de latex. La quantité d'agglutination est mesurée en absorbance. La valeur HbA1c est
contrôles ne respectent pas les tolérances acceptables.
obtenue à partir d'une courbe d'étalonnage.

VALEURS DE RÉFÉRENCE

RÉACTIFS Valeurs recommandées : moins de 6 % pour un non diabétique, moins de 7 % pour le contrôle glycémique d'une
personne diabétique. Chaque laboratoire doit établir ses propres valeurs attendues. Lors de l'utilisation de
R1 Latex 0,13%, Tampon, stabilisant. l'hémoglobine A1c pour surveiller les patients diabétiques, les résultats doivent être interprétés individuellement.
C'est-à-dire que le patient doit être surveillé par rapport à lui-même. Il y a un délai de 3 à 4 semaines avant que
Anticorps monoclonal de souris anti-HbA1c humaine 0,05 mg/ml, anticorps
R2 l'hémoglobine A1c ne reflète les changements de la glycémie.
polyclonal de chèvre anti-IgG de souris 0,08 mg/dl, tampon, stabilisants.

CARACTÉRISTIQUES DE PERFORMANCE Plage de

R3 (réactif d'hémolyse) Eau et stabilisants mesure : De la limite de détection de 2 % à la limite de linéarité de 16 %.
Précision:
Réf : 101-0773 Calibrateur HbA1c.
Optionnel
Réf : 101-0774 Contrôle HbA1c. Intra-essai (n=20) 5,95 Inter-essai (n=20) 5,97
Moyenne (%) 12,15 12,21
PRÉCAUTIONS Dakota du Sud 0,19 0,18 0,14 0,15
Tous les échantillons humains doivent être considérés comme potentiellement dangereux sur le plan biologique. Par CV (%) 3,20 Sensibilité : 1 % = 0,056 1,47 2.31 1.24
conséquent, des précautions universelles doivent être utilisées lors de la manipulation des échantillons (gants, vêtements
(A)
de laboratoire, éviter la production d'aérosols, etc.).
Précision : Les résultats obtenus avec les réactifs CHRONOLAB (y) n'ont pas montré de différences par rapport aux
autres réactifs commerciaux (x). Les résultats obtenus sur 40 échantillons sont les suivants : Coefficient de
PREPARATION R1,
corrélation (r)2 0,995 Équation de régression : y= 0,989x -0,047 Les résultats des caractéristiques de performance
R2 et R3 sont prêts à l'emploi. Mélanger délicatement avant utilisation.
dépendent de l'analyseur utilisé.

ÉTALONNAGE
L'HbA1c est traçable aux normes de référence de la Fédération internationale de chimie clinique (IFCC).
STOCKAGE ET STABILITÉ
Tous les composants du kit sont stables jusqu'à la date de péremption indiquée sur l'étiquette lorsqu'ils sont conservés
hermétiquement fermés à 2-8 °C et les contaminations sont évitées pendant leur utilisation. Les réactifs ne doivent pas
rester à l'intérieur de l'analyseur après utilisation, ils doivent être conservés au réfrigérateur entre 2 et 8 °C. Le latex peut
sédimenter. Mélanger délicatement les réactifs avant utilisation. Ne pas utiliser de réactifs au-delà de la date de péremption.
R1 et R2 sont stables au moins un mois après ouverture conservés à 2-8°C.
Détérioration des réactifs : Des altérations de l'apparence physique des réactifs ou des valeurs des matériaux de
contrôle en dehors de la plage acceptable du fabricant peuvent être une indication de l'instabilité des réactifs.
ÉQUIPEMENT SUPPLÉMENTAIRE -
Bain thermostatique à 37º C.
- Spectrophotomètre ou photomètre thermostable à 37º C avec un filtre de 660 nm.
(Note 1)
- Equipement général de laboratoire
ÉCHANTILLONS
Une préparation spéciale du patient n'est pas nécessaire. Les spécimens à jeun ne sont pas nécessaires. Aucun
additif ou conservateur spécial autre que les anticoagulants n'est requis. Recueillir le sang veineux avec EDTA en
utilisant une technique aseptique.
Pour déterminer l'HbA1c, un hémolysat doit être préparé pour chaque échantillon : 1.
Distribuer 1 ml de réactif d'hémolyse dans des tubes étiquetés : calibrateur, contrôle, patients, etc.
Remarque : Des tubes en plastique ou en verre de taille appropriée sont acceptables.
2. Placer 20 µL de sang total bien mélangé dans le tube de réactif de lyse correctement étiqueté.
Mélanger.
3. Laisser reposer pendant 5 minutes ou jusqu'à ce que la lyse complète soit évidente. Les hémolysats peuvent
être conservés jusqu'à 10 jours à 2-8°C.
INTERFÉRENCES
1. La bilirubine à 50 mg/dL, l'acide ascorbique à 50 mg/dL, les triglycérides à 2000 mg/dL, l'Hb carbamylée à 7,5
mmol/L et l'Hb acétylée à 5,0 mmol/L n'interfèrent pas dans ce dosage.
2. Il a été rapporté que les résultats peuvent être incohérents chez les patients présentant les conditions suivantesÿ:
dépendance aux opiacés, empoisonnement au plomb, alcoolisme, ingestion de fortes doses d'aspirine.6, 7, 8,
9
3. Il a été signalé que des taux élevés d'HbF peuvent entraîner une sous-estimation de HA1c et que l'urémie n'interfère
pas avec la détermination de l'HbAB1c par immunodosage.10 Il a été signalé que les intermédiaires labiles
(base de Schiff) ne sont pas détectés et, par conséquent, ne interférer avec la détermination de l'HbAB1c par
dosage immunologique.5
4. Il a été déterminé que les variantes de l'hémoglobine HbA2, HbC et HbS n'interfèrent pas avec
cette méthode.
5. D'autres variants très rares de l'hémoglobine (p. ex. HbE) n'ont pas été évalués.
REMARQUES
1. Afin d'éviter toute contamination, il est recommandé d'utiliser du matériel jetable.
2. Utilisez une pipette jetable propre pour sa distribution.
3. CHRONOLAB dispose de fiches d'instructions pour plusieurs analyseurs automatiques.
BIBLIOGRAPHIE 1. 2.
3. Trivelli, LA, Ranney, HM, et Lai, HT, New Eng. J. Med. 284 353 (1971).
Gonen, B. et Rubenstein, AH, Diabetologia 15, 1 (1978).
Gabbay, KH, Hasty, K., Breslow, JL, Ellison, RC, Bunn, HF et Gallop, PM, J.
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PROCÉDURE 1.
7. Little, RR, et al, Clin. Chim. 32, pages 358-360 (1986).
Amener les réactifs R1 et R2 et le photomètre (porte-cuve) à 37º C. 8. Fluckiger, R., et al., New Eng.J. Avec. 304 pages 823-827 (1981).
2. Conditions de 9. Nathan, DM, et al, Clin. Chim. 29, p. 466-469 (1983).
dosage : Longueur d'onde : 660
10. Engbaek, F., et al, Clin. Chim. 35, pages 93-97 (1989).
nm Température : 37º C
11. American Diabetes Association : Recommandations de pratique clinique (Position
Trajectoire lumineuse de la
Déclaration). Diabetes Care 24 (Suppl. 1): S33-S55, (2001).
cuvette : 1 cm 3. Ajuster l'instrument à zéro avec de l'eau distillée.

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