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Résumé
Contexte : Les produits alimentaires laitiers constituent une part importante de notre alimentation courante et sont
fondamentaux pour l'industrie alimentaire au niveau mondial. Cependant, on ne saurait trop insister sur la nécessité d'un
contrôle de la qualité. Une directive microbiologique doit être utilisée pour définir les différences entre les produits
alimentaires acceptables et inacceptables, car les maladies d'origine alimentaire ont été associées au lait et aux produits
laitiers. But de l'étude : L'étude vise à évaluer la cinétique de croissance des fromages préparés en laboratoire à partir de
différents types de lait sur une période de 96 heures afin de déterminer leur qualité bactériologique et d'évaluer l'effet du
temps de stockage sur le pH des différents fromages. Méthodes : Le fromage de laboratoire a été préparé à partir de lait
frais de chèvre, de vache, de brebis et de soja selon la méthode traditionnelle. Ensuite, 10g des échantillons de fromage
ont été stockés dans des flacons coniques stériles de 250 ml à une température de 28±2o C pendant 96 heures. Les
échantillons ont été analysés toutes les 12-24 heures à l'aide de Nutrient Agar, MacConkey Agar, Mannitol Salt Agar et
De Mann Rogosa and Sharpe Agar pour leur charge bactérienne, coliforme, staphylococcique et lactobacille
respectivement. Résultats : Après 96 heures, la charge bactérienne hétérotrophe la plus élevée, le nombre de coliformes,
de staphylocoques et de bactéries lactiques ont été observés dans le fromage de brebis (8,27 ± 0,02 Log10 cfu/g), (7,10 ±
0,33 Log10 cfu/g), (7,40 ± 0,34 Log10 cfu/g) et le fromage de vache (8,19 ± 0,05 Log10 cfu/g), respectivement. À 0 h, le
pH le plus élevé a été enregistré dans le fromage de lait de soja (5,76±0,01), tandis que le plus faible a été enregistré dans
le fromage de lait de vache (4,97±0,11). Le pH le plus élevé à 96 h était celui du fromage de lait de soja (6,96±0,01),
tandis que le pH le plus faible était celui du fromage de lait de brebis (6,12±0,00). En comparant les résultats de cette
étude avec ceux de la réglementation microbiologique de l'Union européenne (EUMR) et de l'Organisation des normes
du Golfe (GSO) pour les aliments, la charge bactérienne de tous les échantillons de fromage à 12 h se situait dans la
limite acceptable ou permise. Conclusion : La présente étude indique que le fromage préparé en laboratoire contient un
répertoire de micro-organismes importants pour la santé publique en nombre supérieur à la limite admissible. Il est
recommandé que les manipulateurs de produits laitiers respectent strictement les procédures aseptiques appropriées tout
au long de la chaîne de valeur de la production de fromage.
Mots clés : Fromage préparé en laboratoire, cinétique de croissance, isolats de bactéries et différentes sources de lait.
Copyright © 2023 L'auteur (s) : Ceci est un article en libre accès distribué selon les termes de la licence Creative Commons Attribution 4.0
International License (CC BY-NC 4.0) qui permet l'utilisation, la distribution et la reproduction sans restriction sur n'importe quel support pour un
usage non commercial, à condition que l'auteur original et la source soient mentionnés.
MÉTHODES
Prélèvement d'échantillons sur des animaux laitiers
Le lait de chèvre, de vache et de brebis a été
acheté à Auchi auprès des bergers locaux qui exploitent
des fermes laitières locales communément appelées
"Zongo" dans un récipient propre. Les différents
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37 identifier les bactéries lactiques sont l'hydrolyse de la
Les fèves de soja (482 g) ont été pesées dans un bol
propre et couvert. Les graines de soja (482 g) ont été bile, l'hémolyse, le test du phosphate, la croissance et
pesées dans un bol propre et couvert, 500 ml d'eau l'utilisation du tréhalose, du lactose, du ribose, du
stérile ont été ajoutés pour les couvrir et laissés à sorbitol, du raffinose et du mannitol à 15 °C, 35 °C et
tremper pendant 8 45 °C. Toutes les analyses ont été effectuées en trois
h. Après le trempage, le soja a été lavé pour enlever la exemplaires.
couche extérieure. Les graines de soja lavées (959 g)
ont été mélangées à 1000 ml d'eau jusqu'à obtention Détermination du pH
d'un mélange homogène à l'aide d'un blanchisseur Un pH-mètre PyeUnicam (modèle PW9409) a
Marlex Electroline (IS 4250 ; CM/L 7962804). Le été utilisé pour déterminer le pH de chaque homogénat.
mélange de soja a été filtré à l'aide d'une étamine Deux (2)
stérile. Le filtrat liquide obtenu est le lait de soja cru
(Suleiman et al., 2022).
Préparation du fromage
Selon la méthode traditionnelle, 800 ml
d'échantillons de lait cru obtenu à partir de chèvre, de
vache, de brebis et de soja ont été chauffés
directement jusqu'à ébullition et coagulés
immédiatement avec l'ajout de 0,22 g/l de chaux
comme épaississant à raison de 22 ml pour 100 L de
lait. Le caillé obtenu a été filtré à travers un tissu de
mousseline stérile et on l'a laissé s'égoutter
correctement en le pressant soigneusement dans
l'ouverture d'un bécher de 500 ml pour faciliter
l'expression du lactosérum restant (Pintado et al.,
2008 ; James et al., 2016). Après préparation, les
échantillons ont été stockés dans des béchers stériles à
une température de 28±2o C pendant 96 heures. Les
échantillons ont été analysés pour la charge
microbienne et le pH toutes les 12-24 heures.
RÉSULTATS
Tableau 1 : Dénombrement des coliformes dans le fromage préparé au cours du stockage (Log10 cfu/g)
Fromage Durée du stockage (h)
0 12 24 48 72 96
Lait de 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00a 5.30±0.32b 4.70±1.01a 6.39±0.05b
vache
Lait de 0.00±0.00 0.00±0.00 4.06±0.18b 4.59±0.10a 5.22±1.31b 7.10±0.33a
brebis
Lait de 0.00±0.00 0.00±0.00 0.00±0.00a 5.12±0.04b 5.53±0.09b 6.70±0.24b
chèvre
Lait de soja 0.00±0.00 0.00±0.00 4.08±0.10b 5.20±0.08b ND ND
*une similarité significative entre les types de lait en fonction du moment de l'expérimentation
*b significativement similaires pour tous les types de lait en fonction du moment de l'expérimentation
KEY : ND : Non Déterminé
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Figure 2 : Dénombrement des staphylocoques dansOleghe et al ; Saudi
le fromage J Pathol
préparé Microbiol,
au cours Feb, 2023 ; 8(2) : 30-
du stockage
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Tableau 2 : Dénombrement des bactéries lactiques dans le fromage préparé au cours du stockage (Log10 cfu/g)
Fromage Durée du stockage (h)
0 12 24 48 72 96
Lait de 6.53±0.07b 6.75±0.06 b 6.93±0.08 b 7.19±0.04b 7.71±0.13a 8.19±0.05a
vache
Lait de 6.61±0.07b 6.88±0.03 b 6.82±0.31 b 6.97±0.03a 7.58±0.09b 7.60±0.15b
brebis
Lait de 6.40±0.03a 6.24±0.33 a 6.93±0.07 b 7.25±0.02b 7.69±0.08b 7.55±0.12b
chèvre
Lait de soja 6.28±0.14a 6.87±0.52 b 7.16±0.02 a 7.51±0.02c ND ND
*une similarité significative entre les types de lait en fonction du moment de l'expérimentation
*b significativement similaires pour tous les types de lait en fonction du moment de l'expérimentation
*c significatif pour le type de lait en fonction du moment de l'expérimentation
KEY : ND : Non Déterminé
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37 l'Organisation des normes du Golfe (GSO) pour la
entraînant une décoloration rougeâtre nauséabonde a
été observée dans le fromage de lait de soja à 72 numération des plaques aérobies et les entérobactéries
heures, entraînant une charge bactérienne trop dans les produits laitiers sont respectivement <3 x 104
importante pour être dénombrée. cfu/g et <3 cfu/g, tandis que les fromages frais, à pâte
molle, à pâte semi-dure et à pâte dure sont rappelés à une
Le tableau 2 montre le nombre de bactéries numération ≥ 103 . La comparaison des résultats de cette
lactiques dans les fromages préparés au cours de étude avec ceux de l'EUMR et de l'OSG a révélé que des
l'entreposage. Le nombre de bactéries lactiques a numérations plus élevées dépassant les limites de la
également augmenté progressivement dans les norme ont été enregistrées. Selon ces normes, Listeria
échantillons de fromage tout au long de la période monocytogenes et les espèces de Salmonella ne devraient
d'étude, avec une différence significative (p>0,05) pas être détectées (0 cfu/g) dans tous les types de
observable à 0, 48, 72 et 96 h. Le nombre le plus élevé fromage. En comparant la charge bactérienne de tous les
de bactéries lactiques a été observé dans le fromage de fromages
lait de vache à 96 h (8,19 ± 0,05 Log10 cfu/g), tandis
que le nombre le plus faible a été observé dans le
fromage de lait de chèvre à 12 h (6,24 ± 0,33 Log10
cfu/g). Une détérioration complète conduisant à une
décoloration rougeâtre nauséabonde a été observée
dans le fromage de lait de soja à 72 h, entraînant une
charge bactérienne trop importante pour être
dénombrée.
La caractérisation morphologique,
biochimique et moléculaire des espèces bactériennes
isolées des fromages de vache, de brebis, de chèvre et
de soja dans cette étude a déjà été rapportée par
(Oleghe, et al., 2020). Les isolats bactériens ont été
identifiés comme Enterobacter cloacae, Lactobacillus
plantarum, Myroides odorantimimus, Bacillus cereus,
Escherichia coli, Lactobacillus reuteri, Enterobacter
hormaechei, Kosakonia cowanii, Klebsiella
quasipnuemonia, Lactobacillus delbrueckii,
Staphylococcus aureus, Staphylococcus sciuri et
Lactobacillus fermentum.
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37 monocytogenes et de Salmonella à survivre aux
L'analyse des échantillons de cette étude avec
l'EUMR et le GSO a révélé que tous les fromages conditions de transformation du fromage. Selon Kessel
répondaient à la norme à 12 h mais présentaient des et al. (2011), la fréquence élevée de Salmonella sp.
numérations ≥5 Log10 cfu/g à 24 h, ce qui les rendait dans les échantillons de lait cru en vrac s'élevait à 10,5
inacceptables pour la consommation à ce moment-là. %, comme l'a rapporté le Département de l'agriculture
Pour la numération des coliformes des États-Unis (USDA) en 2007, tandis que 3,8 % des
(Enterobacteriaceae), les fromages au lait de vache et laiteries américaines ont été testées positives pour L.
de chèvre répondaient aux normes requises de 0 ufc/g monocytogenes.
même après 48 h, tandis que les fromages au lait de
brebis et de soja devenaient inacceptables après 12 h. La plupart des aliments fermentés sont
De même, pour les numérations après 48 h, la généralement considérés comme sûrs et nutritifs, mais
numération des staphylocoques dépassait la limite la consommation d'un certain nombre d'aliments
acceptable de ≥5 Log10 ufc/g. Staphylococcus aureus fermentés peut avoir des conséquences négatives sur la
peut produire une toxine lorsqu'il atteint 105 à 106 cfu santé.
par gramme d'aliment (Prates et al., 2017). Il convient
donc d'éviter de conserver le fromage à des
températures susceptibles de permettre à S. aureus de
se développer et d'atteindre des concentrations
cellulaires suffisantes pour produire des toxines
staphylococciques.
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37 l'environnement et des matériaux utilisés. La présence
La présence de bactéries lactiques dans
toutes les variantes de fromage utilisées dans cette de certaines de ces souches bactériennes dans le
étude pourrait être attribuée au fait documenté qu'elles fromage suggère que l'ingestion de ce produit laitier
proviennent de lait cru ou frais, étant donné que des pourrait présenter un risque potentiel pour la santé des
numérations élevées ont été observées tout au long de consommateurs lorsqu'il est consommé dans un tel état
la période de cette étude. Cependant, la présence et de contamination. Par conséquent, il est recommandé
l'augmentation des lactobacilles dans le fromage sont qu'avant la fabrication du fromage, toutes les
bénéfiques, car ils font partie des bactéries lactiques procédures de traite standard qui garantissent la qualité
(LAB) qui sont des probiotiques pertinents, ainsi que du lait soient conformes aux normes.
des microbes biotechnologiques dans l'industrie
laitière (Mehra et al., 2022), ils sont souvent des
organismes généralement considérés comme sûrs
(GRAS). Le résultat de ce travail pour Lactobacillus
est en accord avec les rapports de Luiz et al. (2017)
qui ont documenté que le nombre moyen de bactéries
lactiques dans le fromage était de 7,5 unités
logarithmiques lorsqu'il était fabriqué avec du lait cru.
Elles jouent un rôle majeur dans l'affinage des
fromages traditionnels et industriels dans lesquels
elles synthétisent des composés aromatiques volatils
qui ajoutent au profil sensoriel du fromage (Sgarbi et
al., 2013). Parmi les bactéries lactiques identifiées, L.
plantarum est la plus fréquemment isolée. Bamgbose
et al. (2022) ont montré que L. plantarum et quelques
autres espèces de Lactobacillus sont avantageuses
dans la production de fromage car elles sont liées à la
synthèse de propriétés sensorielles exceptionnelles et
présentent un potentiel probiotique et antibiotique
grâce à la production de métabolites secondaires tels
que les bactériocines. En outre, Lactobacillus
plantarum DR7 atténue le stress et l'anxiété chez les
adultes (Chong et al., 2019a) et améliore les
infections des voies respiratoires supérieures en
renforçant les paramètres immunitaires et
inflammatoires (Chong et al., 2019b).
CONCLUSION
La présente étude indique donc que le
fromage préparé en laboratoire contient divers micro-
organismes qui peuvent provenir du processus de
traite, de la préparation du fromage, de
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37 • Cancino-Padilla, N., Fellenberg, M. A., Franco, W.,
devraient être respectées. Le pis de l'animal devrait être
stérilisé avant la traite, et le processus de traite devrait Ibañez, R. A., & Vargas-Bello- Pérez, E. (2017).
être effectué à l'aide de machines pour faciliter la traite Bactéries d'origine alimentaire dans les produits
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pendant la traite manuelle minimiseront la propagation • Choi, K. H., Lee, H., Lee, S., Kim, S. et Yoon, Y.
des organismes responsables de la mammite et (2016). Cheese microbial risk assessment. Asiatique
protégeront la peau des travailleurs. Le matériel et
l'équipement utilisés pour la préparation du fromage
doivent être stérilisés de manière adéquate. Enfin,
comme le lait peut être un substrat très utile pour la
croissance de diverses bactéries, l'environnement utilisé
pour la préparation doit être hygiénique.
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2023 | Publié par Scholars Middle East Publishers, Dubaï, Émirats arabes unis 37
Peace Omoikhudu Oleghe et al ; Saudi J Pathol Microbiol, Feb, 2023 ; 8(2) : 30-
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