SPECTROMETRIE DE MASSE

MODULE: TECHNIQUES SPECTROSCOPIQUES D’ANALYSES

COURS SMC5

Pr Btissam EL AMRANI
 PRESENTATION GENERALE
• Cours en trois parties
• Partie théorique et instrumentale
• Partie interprétation du spectre
• Partie application (A partir de spectres de molécules
connues)
• Travaux dirigés
 SPECTROMETRIE DE MASSE

La spectrométrie de masse est une des méthodes

principales d’analyse en chimie (IR,UV,RMN…) permettant
de détecter, d'identifier et de quantifier des molécules par
mesure de leur masse.

Pour cela, le spectromètre de masse transforme des

molécules en fragments projectiles (en les ionisant puis en
les accélérant avec des champs électriques et/ou
magnétiques)
Les fragments se déplacent sous vide, et on déduit leurs
masses à partir de leurs trajectoires
 SPECTROMETRIE DE MASSE
La spectrométrie de masse méthode destructive extrêmement
sensible (l’ordre du pico gramme 10-12), qui permet :

• La détermination de la masse exacte d ’une substance

(formule brute)

• l ’obtention de données structurales (formule développée)

• La compréhension du noyau atomique (physique nucléaire)
• La détermination des abondances élémentaires et des
proportions relatives d ’isotopes (Sciences de la terre: géologie,
océanographie, volcanologie, physique de l ’atmosphère,….)
 SPECTROMETRIE DE MASSE

 L’application en chimie analytique: couplage CPG/MS et HPLC/MS

 (industrie des parfums, pétrochimie, chimie des polymères,…)
 L ’analyse de la structure de biomolécules, l ’identification de protéines
(séquençage d ’acides aminés) et de microorganismes,(pharmacologie,
toxicologie)
 L ’analyse élémentaire et bactériologique de l ’air et de l ’eau (Pollution par
des pesticides ou des processus industriels)
 La datation et l ’identification d ’objet historiques ou d ’œuvres d ’art
 La détection de stupéfiants et la mise en évidence de fraudes
 La détection des anabolisants (dopage)
 La détection des explosifs dans les aéroports...
 PRINCIPE DE LA SPECTROMETRIE DE MASSE

Le principe de SM réside dans la séparation en phase gazeuse de

molécules chargées (ions) en fonction de leur rapport masse/charge (m/z).

La spectrométrie de masse permet:

•De déterminer la masse moléculaire d ’une substance avec une très grande
précision (pesée)

•D’obtenir des données structurales d’une molécule en la fragmentant

(reconstruction de la molécule à la façon d’un puzzle)
 Allure du spectre de masse
 L’ensemble des ions séparés selon le rapport m/z constitue le spectre de
masse
 Le spectre de masse est un diagramme en deux dimensions qui indique les
valeurs d’intensités (relatives) en fonction des valeurs de m/z

Pic moléculaire
Intensité relative

100

Fragments

0
m/z
 Quelles informations peut apporter un spectre de masse?
- Le pic moléculaire permet de calculer la masse moléculaire
- Les ions fragments permettent de donner des informations sur la structure moléculaire
- L’intensité des pics permet de faire une analyse quantitative

Spectre de masse de l'hexane C6H14

Comment mesurer la masse d’une molécule ?
 Pour peser une molécule il faut d’abord l’isoler

Travailler en phase gazeuse

Travailler sous vide pour éviter les interactions et les

regroupement des molécules
 Travailler avec des molécules chargées

 Utiliser les propriétés reliant :

Énergie / Trajectoire / Masse

Travailler dans un champs électrique et ou magnétique

 LE ROLE DU SPECTROMETRE DE MASSE

Le Spectromètre de Masse mesure la masse de molécules isolées en 3

étapes:
1- Volatiliser
 Séparer les molécules les unes des autres
 Passer de l’état de matière condensée à un état gazeux

2- Ioniser
 Transformer les molécules en ions
 Utilisation d’un champs magnétique ou/et électrique

3- Analyser
 Calculer masse moléculaire à partir du rapport :

m / z = masse / nb de charges
 LE SPECTROMETRE DE MASSE

Un spectromètre de masse se compose schématiquement de 4

parties : la source d’ions, l’analyseur ou séparateur d’ions, le
détecteur et le système de traitement des données.
Dans l’enceinte du spectromètre de masse règne un vide
poussé (10-6 torr soit 1,3 10-4Pa).
 Schéma du spectromètre de Masse
Faible pression

Introduction Système de
Source d’ions Analyseur Détecteur
de M → M(+/-) M(+/-) →m/z m/z → I
traitement
des données
l’échantillon

Production des ions séparation des ion conversion du courant représentation des
En phase gazeuse en fonction de m/z ionique en courant données dans le SM
électrique

• 3 étapes essentielles:
 Ionisation de l’échantillon
 Analyse des ions formés
 Détection du signal
 LA SOURCE D’IONISATION
Son rôle est de vaporiser les molécules et de les ioniser. Elle peut être
utilisée soit en mode positif (étude des ions positifs), soit en mode négatif
(étude des ions négatifs). Il existe de nombreux types de sources d’ions

Les critères de choix :

• la volatilité, la stabilité thermique et chimique du composé à
analyser
• les fonctions chimiques présentes et leur aptitude à induire une
ionisation
• la taille des molécules
• les quantités de produit disponibles
• le type d’introduction souhaitée (directe ou en couplage
chromatographique)…
 SOURCE D’IONISATION

Les critères de Choix:

• Echantillon en phase gazeuse, liquide ou en phase solide
• Energie interne acquise au moment de l'ionisation
• Les méthodes dures, qui produisent beaucoup de fragments.
• Les méthodes douces fournissent peu d'énergie aux ions et produisent peu de
fragmentation ;
• Le type d’information que l’on attend du spectre (poids moléculaire,
informations structurales, formule brute…)
 SOURCES D’IONISATION
Ionisation EI (Electronical Impact) dure

Ionisation CI (Chemical Ionisation) assez douce

Ionisation FAB (Fast Atom Bombardment)

assez douces
Ionisation LD (Laser Desorption)

Ionisation ES (electrospray)
Ionisation APCI
douces
Ionisation MALDI (Matrix Assisted
Laser Desorption Ionisation)
 SOURCES D’IONISATION

Ionisation EI (Electronical Impact)

Petites molécules volatiles
et non thermosensibles
Ionisation CI (Chemical Ionisation)

Ionisation FAB (Fast Atom Bombardment)

molécules < 6000 Da
Ionisation LD (Laser Desorption)

Ionisation ES (electrospray) Couplage LC-ES sur petites

molécules non volatiles
Ionisation MALDI (Matrix Assited
Laser Desorption Ionisation) Biomolécules (1 300 kDa)
et complexes non-covalents
 IONISATION PAR IMPACT ÉLECTRONIQUE (EI)
(Technique a été inventée par Dempster en 1922 et perfectionnée par
Bleakney en 1929)

La source à impact électronique est constituée d'une cavité sous vide

d'air dans laquelle un faisceau d'électrons est produit.
 L'impact entre ce faisceau et des molécules provenant d'un échantillon sous
forme gazeuse permet d'ioniser les molécules de l'échantillon.

 Ces ions sont ensuite extraits de la cavité, focalisés et accélérés par une
série de lentilles.
 IONISATION PAR IMPACT ÉLECTRONIQUE
Filament émet des e- par effet thermoïonique (2000°C), e- accélérés sous une tension de
70 Volts environ
La collision des e- à 70 eV et des molécules est très énergétique production des
ions
 IONISATION PAR IMPACT ÉLECTRONIQUE
Dés leurs formation dans la source, les ions sont :
 Evacués par un repousseur
 Extraits de la source par une ddp négative (ions positifs)
 Focalisés par un système de lentilles électroniques

A la sortie de la source d’ions les ions ont une énergie

Cinétique:
Ec = 1/2mv2 = zV

Remarque: en Impact Electronique z = 1

Les ions sont ensuite séparés suivant leur rapport m/z

Puis le courant ionique est collecté et amplifié
MODE D'IONISATION D'UNE SOURCE À IMPACT ÉLECTRONIQUE

La différence de potentiel apporte une certaine énergie cinétique

aux électrons accélérés. Si cette énergie cinétique est suffisante la
réaction suivante se produit:

M + e- M°+ + 2e-

 Les électrons sont accélérés avec une énergie de

70 eV (meilleure rentabilité).
 Même avec cette énergie, seulement une molécule est
transformée en ion pour 1000 molécules entrant.
 MODE D'IONISATION D'UNE SOURCE À IMPACT ÉLECTRONIQUE

L'énergie cinétique apportée augmente l'énergie interne de l'ion moléculaire M+●.

L'instabilité qui en résulte est responsable de la fragmentation de l'ion moléculaire
et produit des ions fragments.

L’ampleur de la fragmentation dépend donc de l’énergie interne

Si l’énergie est faible M°+ ion moléculaire : masse moléculaire

Si l’énergie est élevée F+ ions fragments : informations structurales
POINTS FORTS:

 Fragmentation importante, permettant l'analyse de la structure des

molécules étudiées
 Le spectre IE est une empreinte digitale de la molécule

POINTS FAIBLES

 Faible rendement d'ionisation. Du fait de la faible pression de

l'échantillon, peu de molécule subissent un impact électronique et
deviennent des ions moléculaires.
 Importance du transfert d'énergie entre les électrons et les
molécules de l'échantillon. L'importance de l'énergie interne des ions
est responsable de la fragmentation importante et complique
l'interprétation des spectres.