Hba1c Notice D'utilisation

12000447
VARIANT™ II TURBO
HbA1c Kit - 2.0
Notice d’utilisation
2500
États-Unis :
Décembre 2016 UNITED STATES, Bio Rad Laboratories, Inc., 4000 Alfred Nobel Drive,
12005531FRrevB Hercules, CA 94547
FRANCE, Bio‑Rad, 3 boulevard Raymond Poincaré, 92430
Marnes‑la‑Coquette
VARIANT™ II TURBO HbA1c Kit - 2.0
Traductions
La documentation du produit est fournie dans d’autres langues sur support électronique.
Lexique des symboles
Fabricant Représentant agrée au sein de l’Union

Conformité européenne européenne
Numéro de lot À utiliser avant Utilisation comme test de diagnostic in vitro
Référence Consulter la notice d’utilisation

Limite de température
À utiliser avec
Contient du latex Nombre de tests
À utiliser uniquement sur < 0,05 % Colonne analytique

prescription
Tampon d’élution A Tampon d’élution B Calibrateur Niveau 1
Calibrateur Niveau 2 Diluant calibrateur Coffret de calibration/diluant
Coffret de calibration CD-ROM Eau déionisée
Préfiltre Reconstituer avec Microtubes échantillons
Azide de sodium Solution de lavage/dilution Coffret de solution de lavage/dilution
Sang total de conditionnement Identification unique du dispositif-

Identificateur du dispositif
INFORMATIONS SUR LA SÉCURITÉ DU PRODUIT

Calibrateurs 1 et 2 de l’HbA1c et sang total de conditionnement
AVERTISSEMENT : Ces produits contiennent une substance chimique reconnue par l’État de Californie comme
provoquant des anomalies congénitales ou ayant d’autres effets néfastes sur la reproduction. Contient moins
de 0,1 % de sulfate de gentamicine et moins de 0,1 % de tobramycine.
ii Notice d’utilisation 12005531FRrevB

Table des matières

Informations sur la sécurité du produit................................................................................................ ii
Utilisation..............................................................................................................................................3
Généralités et description du test........................................................................................................3
Principe de la procédure......................................................................................................................4
Composants.........................................................................................................................................5
Matériel supplémentaire disponible auprès de Bio‑Rad......................................................................6
Matériel supplémentaire nécessaire, non disponible auprès de Bio‑Rad...........................................6
Précautions/Mises en garde................................................................................................................6
Prélèvement et manipulation des échantillons....................................................................................7
Type d’échantillon........................................................................................................................7
Additifs et agents conservateurs des échantillons ....................................................................7
Conservation des échantillons....................................................................................................8
Préparation des échantillons.......................................................................................................8
Expédition des échantillons........................................................................................................8
Préparation et conservation des réactifs.............................................................................................8
Signes d’instabilité ou de détérioration des réactifs..........................................................................10
Mode opératoire.................................................................................................................................10
Installation d’un nouveau lot de kit [CD Update Kit (mise à jour du kit)]..................................10
Installation d’une nouvelle colonne analytique.........................................................................10
Installation d’un nouveau préfiltre.............................................................................................11
Calibration.................................................................................................................................11
Contrôle qualité.........................................................................................................................12
Préparation d’une série.............................................................................................................12
Certification/Traçabilité par rapport à un produit et une méthode de référence......................12
Recommandations pour l’interprétation des résultats.......................................................................13
Limites de la procédure.....................................................................................................................14
Dilution des échantillons...........................................................................................................14
Considérations particulières......................................................................................................14
Variants de l’hémoglobine.........................................................................................................14
Interférences.............................................................................................................................15
Valeurs attendues/Plage de référence...............................................................................................16
Diagnostic du diabète...............................................................................................................16
Surveillance de l’HbA1c chez les patients diabétiques..............................................................16
12005531FRrevB Notice d’utilisation 1

Paramètres de performance..............................................................................................................17
Précision....................................................................................................................................17
Exactitude..................................................................................................................................19
Linéarité.....................................................................................................................................19
Comptes-rendus d’échantillons.................................................................................................20
Informations sur les marques commerciales.....................................................................................31
Références bibliographiques..............................................................................................................31
2 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

UTILISATION
Le VARIANT™ II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est conçu pour permettre la détermination quantitative de l’hémoglobine
A1c (en mmol/mol IFCC et en % NGSP) dans le sang total humain par chromatographie liquide à haute
performance (CLHP) par échange d’ions à l’aide du VARIANT II TURBO Hemoglobin Testing System et du
VARIANT II TURBO Link Hemoglobin Testing System.
Ce test sert au diagnostic du diabète ainsi qu’à l’identification des patients présentant un risque de développer
un diabète.
Le dosage de l’hémoglobine A1c se révèle efficace pour la surveillance à long terme du contrôle glycémique des
personnes atteintes de diabète sucré.
Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est conçu uniquement pour un usage professionnel.
Le système de prélèvement d’échantillons capillaires (HCCS) est conçu pour prélever des échantillons de sang
total humain afin d’en déterminer le pourcentage d’hémoglobine A1c à l’aide des méthodes CLHP de Bio‑Rad.
GÉNÉRALITÉS ET DESCRIPTION DU TEST

Le diabète sucré (diabetes mellitus) se caractérise par une hyperglycémie due à l’incapacité de l’organisme à
utiliser le glucose sanguin comme source d’énergie. Dans le diabète de type 1, le pancréas ne parvient plus
à fabriquer d’insuline et par conséquent, le glucose sanguin ne peut pas pénétrer dans les cellules pour être
utilisé comme source d’énergie. Dans le diabète de type 2, soit le pancréas ne fabrique pas suffisamment
d’insuline, soit l’organisme ne parvient pas à utiliser correctement l’insuline.1 Les effets directs et indirects de
l’hyperglycémie sur le système vasculaire humain sont la principale cause de morbidité et de mortalité liées
au diabète, qu’il soit de type 1 ou de type 2. Les complications macrovasculaires (maladie coronaire, maladie
artérielle périphérique et accident vasculaire cérébral) et les complications microvasculaires (néphropathie,
neuropathie et rétinopathie diabétiques) font partie de ces effets.2 Le diabète sucré touche plus de 8 % de la
population mondiale.3
Le dosage de l’HbA1c a été recommandé pour le diagnostic du diabète de type 2 par l’International Expert
Committee (IEC), l’American Diabetes Association (ADA) et l’Organisation mondiale de la santé (OMS) qui ont
recommandé un seuil de diagnostic ≥ 6,5 % (≥ 48 mmol/mol) d’HbA1c.4–6 Le dosage de l’HbA1c a également
été recommandé pour l’identification des sujets pré-diabétiques (c’est-à-dire présentant un risque accru de
développer un diabète). L’ADA a défini la plage de valeurs de l’HbA1c pour les états pré-diabétiques entre 5,7
et 6,4 % (entre 39 et 47 mmol/mol).4 Le dépistage et le traitement des états pré-diabétiques peut réduire, voire
éliminer le risque de développer un diabète de type 2 et les complications associées.
Le traitement du diabète exige le maintien à long terme d’un taux de glucose sanguin (glycémie) aussi proche
que possible de la normale afin de limiter les risques de complications vasculaires à long terme.7,8 Un simple
dosage de la glycémie à jeun fournit des informations sur le passé immédiat de l’état d’un patient (les quelques
heures précédentes), mais pas nécessairement un aperçu réel de la régulation glycémique de ce dernier.9,10 Le
dosage de l’hémoglobine A1c (HbA1c) tous les deux à trois mois a été reconnu comme une modalité de contrôle
glycémique dans la prise en charge et le traitement des patients atteints de diabète sucré.
La glycohémoglobine en question, l’HbA1c, résulte d’une réaction de glycation non enzymatique de l’HbA
en deux étapes. La première étape comprend la formation d’une aldimine instable (A1c labile ou pré-A1c),
par réaction réversible entre le groupement carbonyle du glucose et la valine N-terminale de la chaîne β de
l’hémoglobine. La quantité d’A1c labile formée est directement proportionnelle au taux de glucose sanguin.
Lors de la circulation des globules rouges, une partie de l’A1c labile subit une conversion (« réarrangement
d’Amadori ») pour former une cétoamine stable, l’HbA1c.11

Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 utilise une séparation chromatographique de l’HbA1c sur une colonne
échangeuse de cations. La séparation est optimisée afin de réduire au maximum les interférences dues
aux variants d’hémoglobine, à l’A1c labile et à l’hémoglobine carbamylée. Pour plus d’informations, voir la
section Limites de la procédure. Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 permet également un échantillonnage
automatique à partir d’un tube primaire de sang total, suivi d’une dilution des échantillons.
PRINCIPE DE LA PROCÉDURE
Le Bio‑Rad VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 repose sur le principe de la chromatographie liquide à haute
performance (CLHP) par échange d’ions. Les échantillons sont automatiquement dilués dans la station
d’échantillonnage VARIANT II TURBO (VSS), puis injectés dans la colonne analytique. Les pompes à double
piston de la station chromatographique (VCS) du système VARIANT II TURBO envoient un gradient programmé
de tampon de force ionique croissante dans la colonne où les molécules d’hémoglobine sont alors séparées
en fonction de leur interaction ionique avec le matériau contenu dans la colonne. Les molécules d’hémoglobine
séparées traversent ensuite la cuve à circulation du photomètre filtre où sont mesurés les changements
d’absorbance à 415 nm. Un filtre supplémentaire à 690 nm permet de corriger le résultat pour tenir compte de
l’absorbance due au bruit de fond.
Le logiciel Clinical Data Management (CDM™) du système VARIANT II TURBO collecte les données brutes
issues de chaque analyse et calcule les valeurs de l’HbA1c à l’aide d’une courbe de calibration à deux
niveaux. Ce logiciel génère ensuite un compte rendu d’analyse pour chaque échantillon, comprenant un
chromatogramme et les temps de rétention des pics détectés. Le pic A1c est indiqué en gris. Cette surface est
calculée à l’aide d’un algorithme de Gauss exponentiellement modifié (GEM).
Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est conçu pour être utilisé uniquement avec le VARIANT II TURBO
Hemoglobin Testing System et le VARIANT II TURBO Link Hemoglobin Testing System de Bio‑Rad.

COMPOSANTS
12000447, VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0
Ce kit contient le matériel nécessaire à la réalisation de 2 500 tests :
Quantité Description
270-0350* 2 de chaque Sang total de conditionnement. Chaque flacon contient un hémolysat
lyophilisé de globules rouges humains, ainsi que de la gentamicine, de la
tobramycine et de l’EDTA en tant qu’agents conservateurs. Le volume de
reconstitution est de 1,0 ml par tube.
270-2456 5 de chaque Tampon d’élution A. Chaque flacon contient 2 500 ml d’un tampon de
succinate/perchlorate de sodium. Contient moins de 0,05 % d’azide de
sodium en tant qu’agent conservateur.
270-2457 1 de chaque Tampon d’élution B. Chaque flacon contient 2 000 ml d’un tampon de
succinate/perchlorate de sodium. Contient moins de 0,05 % d’azide de
sodium en tant qu’agent conservateur.
270-2458 1 de chaque Coffret de calibration/diluant. Chaque gamme comprend 2 flacons
d’étalon de niveau 1, 2 flacons d’étalon de niveau 2 et 1 flacon de diluant
d’étalon. Les flacons de calibrateur contiennent un hémolysat lyophilisé de
globules rouges humains, ainsi que de la gentamicine, de la tobramycine et
de l’EDTA en tant qu’agents conservateurs. Le volume de reconstitution est
de 7 ml par flacon.
Le flacon de diluant pour calibrateur contient 100 ml d’eau déionisée, et
moins de 0,05 % d’azide de sodium en tant qu’agent conservateur.
12000997* 1 de chaque CD contenant les paramètres de test du VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0.
270-2462* 1 de chaque Colonne analytique. Colonne échangeuse de cations (2 500 tests),
DI 4,6 mm x 27,5 mm. Cinq (5) préfiltres (500 tests chacun) sont fournis
avec la colonne.
12005138 1 de chaque Microtubes échantillons. 50 microtubes en polypropylène avec capuchons
perforables, 1,5 ml.
* Les composants ne sont pas vendus séparément.
REMARQUE : Le kit permet une utilisation minimum de 800 tests/mois quand 1 à 2 séries/jour sont
effectuées 5 ou 6 jours/semaine. D’autres séquences d’utilisation impliquant un plus petit nombre moyen de
séries peuvent exiger des tampons supplémentaires.
270-2730, Coffret de solution de lavage/dilution

Un coffret comporte 4 flacons de solution de lavage/dilution. Chaque flacon contient 2 500 ml d’eau
déionisée, et moins de 0,05 % d’azide de sodium en tant qu’agent conservateur.

MATÉRIEL SUPPLÉMENTAIRE DISPONIBLE AUPRÈS DE BIO‑RAD

Description
196-2051† Hemoglobin Capillary Collection System (Système de prélèvement d’échantillons
capillaires) (HCCS), 5 tests
capillaires) (HCCS), 100 tests
capillaires) (HCCS), 5 000 tests
270-0351 Sang total de conditionnement, 10 x 1,0 ml
270-0352 Sang total de conditionnement, 6 x 1,0 ml
270-2464 Préfiltres, paquet de 2
740 Lyphochek® Diabetes Control Bilevel, 6 x 0,5 mL
740X Lyphochek® Diabetes Control Bilevel MiniPak, 2 x 0,5 ml
12000070 Lyphochek® Hemoglobin A1c Linearity Set (1 pour chacun des 6 niveaux), 6 x 0,5 ml
171 Liquichek™ Diabetes Control, Niveau 1, 6 x 1,0 ml
172X Liquichek™ Diabetes Control, Trilevel MiniPak, 3 x 1,0 ml
†À
utiliser uniquement sur certains systèmes ; pour plus d’informations, se reporter au Manuel d’utilisation
du système correspondant.
MATÉRIEL SUPPLÉMENTAIRE NÉCESSAIRE, NON DISPONIBLE AUPRÈS DE

BIO‑RAD
Pipettes, 5 µl, 0,5 ml, 1 ml, 1,5 ml, 7 ml
Eau déionisée
Gants jetables
PRÉCAUTIONS/MISES EN GARDE
• Utilisation comme test de diagnostic in vitro.
• Traiter toutes les substances d’origine humaine comme potentiellement infectieuses et les manipuler en
appliquant les procédures de biosécurité d’usage.
• Chaque unité de sang total utilisée dans la fabrication de l’étalon et du sang total de conditionnement a été
analysée à l’aide de méthodes approuvées par la FDA et a présenté des résultats négatifs pour les anticorps
du VIH-1 et VIH-2, de l’hépatite B (VHB), de l’hépatite C (VHC) et de la syphilis. Aucune méthode d’analyse
ne peut entièrement garantir qu’un produit contenant des substances d’origine humaine soit exempt de ces
agents ou d’autres agents infectieux. Conformément aux bonnes pratiques de laboratoire, toute substance
d’origine humaine doit être considérée comme potentiellement infectieuse pour tous les agents infectieux ; en
conséquence, il convient de manipuler les calibrateurs et le sang total de conditionnement avec les mêmes
précautions que les échantillons provenant de patients.
• Tout déchet contenant des échantillons prélevés sur des patients ou des produits d’origine biologique doit
être considéré comme présentant un danger biologique lors de son élimination ou de son traitement.
• Jeter tous les déchets conformément aux réglementations nationales et/ou locales en vigueur.

• Porter un matériel de protection individuelle adéquat lors de toute manipulation de réactifs et d’échantillons
et lors de l’utilisation du système.
• Les réactifs chimiques doivent être manipulés conformément aux bonnes pratiques de laboratoire.
• Certains réactifs contiennent de l’azide de sodium pouvant réagir avec le cuivre ou le plomb des
canalisations pour former des azides métalliques explosifs. Prendre toutes les précautions nécessaires lors
de l’élimination de ces réactifs. Si l’élimination se fait à l’évier, faire couler de grandes quantités d’eau pour
éviter l’accumulation d’azide.
• Nettoyer immédiatement et minutieusement tout déversement accidentel de produit. Désinfecter la zone en
cas de déversement de substances présentant un danger biologique. Éliminer toute substance contaminée
en respectant les pratiques d’usage.
• Ne pas échanger les bouchons et les capuchons des flacons ou des tubes car cela entraînerait une
contamination croisée des réactifs. Ne jamais mélanger le contenu de différents flacons du même réactif.
Cela risque de contaminer les réactifs et de détériorer les performances du produit.
• Le respect du protocole présenté dans ce document est essentiel pour assurer une bonne performance de
ce produit.
• Les bouchons des flacons de calibration contiennent du caoutchouc naturel sec.
• Pour obtenir toutes les consignes de sécurité concernant la manipulation d’un réactif, consulter les fiches de
sécurité (FDS) disponibles sur le site Web www.bio-rad.com.
PRÉLÈVEMENT ET MANIPULATION DES ÉCHANTILLONS

Type d’échantillon
Sang total et sang capillaire.
Additifs et agents conservateurs des échantillons

• Les échantillons de sang total doivent être recueillis dans des tubes sous vide contenant de l’EDTA-K2 ou de
l’EDTA-K3.
• Les échantillons de sang capillaire doivent être prélevés à l’aide du système de prélèvement d’échantillons
capillaires (HCCS).
Une étude comparative de matrice a été menée afin d’évaluer les anticoagulants et les agents conservateurs
contenus dans les tubes de prélèvement à utiliser avec le test. Des échantillons de sang total provenant de
48 patients et présentant des taux d’HbA1c compris dans la plage de valeurs indiquées du test ont été prélevés
dans les tubes d’évaluation et dans les tubes utilisés pour l’étude comparative (contenant de l’EDTA-K3). Les
résultats de cette étude comparative sont résumés dans le Tableau 1.
Anticoagulant/ Coordonnée à
Pente R2
Agent conservateur l’origine
EDTA-K2 0,9974 0,0306 0,9995
HCCS 0,9915 0,0573 0,9993
Tableau 1 : Analyse de régression du pourcentage d’HbA1c concernant les tubes d’évaluation et les tubes
contenant de l’EDTA-K3

Conservation des échantillons

Les échantillons de sang total peuvent être conservés dans les conditions suivantes :
• 1 jour à température ambiante (entre 15 et 30 °C)
• Jusqu’à 7 jours entre 2 et 8 °C
• Jusqu’à 12 mois à -70 °C
Préparation des échantillons

Échantillons de sang total :
Les échantillons ne requièrent aucune préparation particulière. Il n’est pas nécessaire d’agiter les tubes
d’échantillon avant le chargement.
Échantillons prédilués :
Si l’échantillon se trouve dans un tube de taille ou de type anormal, ou si son niveau dans le tube semble
inférieur à 25 mm, il doit être prédilué à 1/300 avant l’analyse.
1. Avant de pipeter, bien mélanger l’échantillon en retournant doucement le tube.
2. Pour prédiluer, pipeter 1,5 ml de solution de lavage/dilution dans un microtube étiqueté, puis ajouter 5 µl
d’échantillon de sang total.
3. Boucher le microtube et bien mélanger.
REMARQUE : Les échantillons dont la surface totale se trouve en dehors de la plage prévue doivent être à
nouveau dilués et analysés afin d’obtenir des valeurs de surface totale comprises entre 1,0 et 3,5 millions.
Expédition des échantillons

Tous les échantillons d’origine humaine doivent être expédiés conformément aux réglementations nationales et
internationales en vigueur en matière de transport.
PRÉPARATION ET CONSERVATION DES RÉACTIFS

Pour installer ou remplacer les tampons d’élution et la solution de lavage/dilution, suivre les instructions fournies
dans le Manuel d’utilisation du système correspondant.
Tampons d’élution et solution de lavage/dilution

• Laisser les tampons d’élution et la solution de lavage/dilution revenir à température ambiante (entre 15 et
30 °C) avant de procéder à l’analyse. Mélanger le contenu de chaque flacon en retournant doucement le
flacon sur lui-même avant installation.
• Les tampons d’élution et la solution de lavage/dilution restent stables jusqu’à la date de péremption s’ils sont
conservés dans des flacons fermés entre 15 et 35 °C. Une fois les flacons ouverts, le tampon d’élution A
reste stable pendant 30 jours, le tampon d’élution B reste stable pendant 90 jours et la solution de lavage/
dilution reste stable pendant 60 jours s’ils sont conservés entre 15 et 30 °C.
• Avec un nouveau kit, charger un flacon de chaque réactif et suivre la procédure décrite au paragraphe
Installation d’un nouveau lot de kit de la section Mode opératoire.
• Les tampons d’un même lot de résine sont compatibles. Les étiquettes des tampons et des cartouches
comportent des codes utilisant des lettres de l’alphabet pour indiquer la compatibilité. Un jeu compatible de
tampons et de cartouches présente le même code alphabétique sur chaque étiquette. Ne pas utiliser des
combinaisons de tampons et de cartouches présentant des codes alphabétiques différents.
• La solution de lavage/dilution est interchangeable d’un lot de kit à l’autre.

Sang total de conditionnement

• Utiliser de nouveaux aliquots de sang total de conditionnement lors du chargement d’une nouvelle colonne
analytique.
• Le sang total de conditionnement reste stable jusqu’à la date de péremption s’il est conservé en flacon fermé
entre 2 et 8 °C.
• Le sang total de conditionnement est fourni sous forme lyophilisée pour assurer une meilleure stabilité.
1. Reconstituer le sang total de conditionnement en ajoutant 1,0 ml d’eau déionisée dans chaque flacon.
2. Reboucher les flacons et laisser reposer pendant 10 minutes entre 15 et 30 °C.
3. Agiter doucement pour assurer la dissolution et le mélange complet du produit.
• Une fois reconstitué, le sang total de conditionnement reste stable pendant 1 jour s’il est conservé entre 2 et
8 °C.
• Le sang total de conditionnement est interchangeable d’un lot à l’autre.
Coffret de calibration/diluant
• Le coffre de calibration/diluant reste stable jusqu’à la date de péremption s’il est conservé en flacons fermés
entre 2 et 8 °C.
• Le diluant pour calibrateur est prêt à l’emploi. Le diluant reste stable pendant 60 jours après ouverture du
flacon quand il est conservé entre 2 et 8 °C. Le diluant est interchangeable d’un lot à l’autre.
• Les calibrateurs sont fournis sous forme lyophilisée pour assurer une meilleure stabilité.
1. À l’aide d’une pipette volumétrique, reconstituer chaque calibrateur en ajoutant 7 ml de diluant pour
calibrateur à chaque flacon.
2. Reboucher les flacons et laisser reposer pendant 2 minutes.
3. Agiter légèrement pour assurer la dissolution.
• Les calibrateurs reconstitués restent stables pendant 24 heures lorsqu’ils sont conservés en flacons bouchés
entre 2 et 8 °C. Ne pas utiliser les calibrateurs reconstitués après un délai de 24 heures.
• Ne pas congeler les calibrateurs reconstitués.
• Consulter la carte des valeurs incluse dans le lot actuel des calibrateurs pour l’affectation des valeurs. Les
valeurs sont saisies automatiquement via le CD Update Kit (mise à jour du kit). Les valeurs doivent être
saisies manuellement si un lot différent est utilisé ; voir le Manuel d’utilisation du logiciel CDM pour saisir
manuellement les valeurs dans l’écran Setup/Sample Types/Calibrator (Paramétrage/Types d’échantillon/
Calibrateur).
Étalons extraits
Cette méthode CLHP n’utilise pas d’étalons extraits.
Produits de contrôle
Reconstituer et conserver les produits de contrôle conformément aux instructions indiquées dans la notice du
fabricant. Si aucune instruction de dilution n’est fournie, prédiluer les produits de contrôle tel qu’indiqué à la
section Préparation des échantillons de la présente Notice d’utilisation.
Colonne analytique et préfiltres

• La colonne analytique doit être conservée entre 2 et 8 °C. Elle reste stable pendant 90 jours ou 2 500 tests
après son chargement dans l’appareil.
• Les préfiltres doivent être conservés entre 2 et 30 °C.

SIGNES D’INSTABILITÉ OU DE DÉTÉRIORATION DES RÉACTIFS

• Si les réactifs ont été congelés pour leur expédition, mélanger le contenu de chaque flacon en retournant
doucement le flacon avant son chargement dans l’appareil.
• Ne pas utiliser de réactif présentant des signes d’altération de la couleur, de trouble ou de précipité.
• Ne pas utiliser de réactif présentant des signes de fuite.
• Ne pas utiliser le calibrateur ou le sang total de conditionnement en cas d’agglomérat de couleur marron
ou si le tube est cassé. Si le produit lyophilisé contient des matières insolubles, le jeter et procéder à la
reconstitution d’un nouveau flacon.
• En cas de surpression du système entraînée par un excédent de particules (par ex., coagulation ou précipité
d’échantillons), le préfiltre de la colonne doit être remplacé. Remplacer le préfiltre tous les 500 tests jusqu’à
la fin de la durée de vie de la colonne (2 500 tests ou 90 jours). Si ce problème de surpression persiste
après le remplacement du préfiltre, le remplacement de la cartouche peut s’avérer nécessaire ; contacter le
service technique de Bio‑Rad pour tout conseil de dépannage.
MODE OPÉRATOIRE
Installation d’un nouveau lot de kit [CD Update Kit (mise à jour du kit)]
• Lorsqu’un nouveau lot de réactifs et/ou de cartouches est utilisé, les paramètres du CD correspondant
doivent être chargés pour assurer le fonctionnement optimal du programme.
• Le numéro du jeu de réactifs qui s’affiche sur l’écran Setup/Test (Paramétrage/Test) du logiciel CDM est
identique au du CD. Vérifier la concordance de ces numéros pour être certain d’utiliser le bon CD.
Depuis l’écran Setup/Test :
1. Insérer le CD Update Kit dans le lecteur.
2. Cliquer sur Update Kit.
3. Sélectionner le lecteur e:\.
4. Sélectionner le test à mettre à jour.
5. Cliquer sur OK.
Installation d’une nouvelle colonne analytique

Toute nouvelle colonne analytique doit être conditionnée et calibrée avant la première analyse.
1. Remplacer la colonne (installer la neuve avec la flèche dirigée vers le haut.) Pour plus d’informations, se
reporter au Manuel d’utilisation du système correspondant.
2. Aller à l’écran Maintain/Instruments (Entretien/Appareils). Sélectionner Do Startup Actions (Opérations
de démarrage) dans la liste Execute Commands (Exécution des commandes). Cliquer sur Start (Démarrer).
3. Vérifier qu’il n’y a pas de fuites et serrer progressivement les raccords qui en ont besoin.
4. Une fois les opérations de démarrage terminées, cliquer sur Return to READY state (Revenir à l’état
PRÊT) pour ramener l’appareil à l’état Ready (Prêt).
5. La colonne est désormais prête pour le conditionnement.

Ordre des échantillons pour le conditionnement de la colonne*
Étiquette de
Position du tube Réactif
l’adaptateur
1 PRIMER Sang total de conditionnement reconstitué (1 ml)
2 PRIMER Sang total de conditionnement reconstitué (1 ml)
3 BLANK Eau déionisée
6 STOP -----
* Pour le VARIANT II TURBO Link System, voir le Manuel d’utilisation ou le Guide rapide correspondant
pour en savoir plus sur la configuration de la série et l’ordre des échantillons.
Installation d’un nouveau préfiltre

Remplacer le préfiltre au bout de 500 injections. Pour plus d’informations, se reporter au Manuel d’utilisation du
système correspondant.
Mettre à jour le compteur des injections dans le logiciel CDM :
1. Accéder à l’écran Setup/Test/Cartridges (Paramétrage/Test/Colonnes).
2. Dans la colonne In Use (En cours d’utilisation), remplacer Yes (Oui) par No (Non) pour le préfiltre utilisé.
Une nouvelle ligne est générée dans le tableau pour le nouveau préfiltre.
3. Sur la ligne du nouveau préfiltre, saisir « N/A » (S/O) dans la colonne Lot # (Lot n°) et 500 dans la
colonne Inj. Limit (Limite d’injections).
4. Dans la colonne In Use, choisir Yes.
Calibration
Une calibration doit absolument être effectuée après le conditionnement d’une colonne analytique neuve.
Ordre des échantillons pour la calibration*
Étiquette de
l’adaptateur
Échantillon prédilué (échantillon prélevé sur un
1 BLANK
patient ou contrôle, pas d’eau) (1 ml)
Calibrator Level 1
2 Calibrateur reconstitué niveau 1 (1 ml)
(Calibrateur Niveau 1)
3 Calibrator Level 2 Calibrateur reconstitué niveau 2 (1 ml)
Control Level 1
4 Contrôle prédilué niveau 1
(Contrôle Niveau 1)
5 Control Level 2 Contrôle prédilué niveau 2
6àN ----- Échantillons de patients
N+1 Control Level 1 Contrôle prédilué niveau 1 (facultatif)
N+3 STOP -----

Contrôle qualité
Comme l’exigent les bonnes pratiques de laboratoire, au moins un échantillon de contrôle diabétique et un
échantillon de contrôle non diabétique doivent être testés chaque jour où des échantillons de patients sont
analysés. Chaque laboratoire doit établir sa propre méthodologie en matière d’action corrective si les valeurs
obtenues ne correspondent pas aux valeurs de contrôle attendues.
Préparation d’une série

Une fois la calibration terminée, préparer les séries selon la configuration.
Ordre des échantillons pour une série régulière*
Étiquette de
l’adaptateur
Échantillon prédilué (échantillon prélevé sur un
1 BLANK
patient ou contrôle, pas d’eau) (1 ml)
4àN ----- Échantillons de patients
N+3 STOP -----
Certification/Traçabilité par rapport à un produit et une méthode de référence

Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est traçable par rapport aux méthodes de référence du National
Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP) et de l’International Federation of Clinical Chemistry and
Laboratory Medicine (IFCC).
Le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est certifié par le NGSP comme ayant fait la preuve de sa traçabilité
par rapport à la méthode de référence du « Diabetes Control and Complications Trial » (DCCT) qui a établi la
relation entre le résultat du dosage de la glycémie moyenne et les risques de complications vasculaires.12
Le groupe de travail de l’IFCC sur la standardisation du dosage de l’HbA1c a développé et actualise
régulièrement la procédure de dosage de référence utilisée comme base analytique de la traçabilité de l’HbA1c.13
Cette méthode de référence est utilisée pour attribuer les valeurs IFCC aux matériaux de référence secondaire
employés par les fabricants pour attribuer les valeurs des calibrateurs.14
En mai 2007, l’American Diabetes Association, l’European Association for the Study of Diabetes, l’International
Diabetes Federation et l’IFCC ont publié une déclaration de consensus sur la standardisation mondiale du
dosage de l’HbA1c. Ces organismes ont recommandé l’utilisation des unités SI de l’IFCC (mmol/mol).15

Les équations maîtresses utilisées pour la conversion des valeurs IFCC en valeurs NGSP13 (et inversement),
ainsi que des exemples de résultats de patients sont indiqués ci-dessous :
IFCC NGSP
NGSP = (0,09148 × IFCC) + 2,152 39 mmol/mol 5,7%
IFCC = (10,93 × NGSP) − 23,50 48 mmol/mol 6,5%
64 mmol/mol 8,0%
108 mmol/mol 12,0%
RECOMMANDATIONS POUR L’INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS

Suivre les recommandations suivantes pour assurer l’acceptabilité des résultats obtenus :
1. La calibration du système doit avoir été effectuée.
2. La surface totale de chaque analyse doit être comprise entre 1,0 million et 3,5 millions d’unités. Ne pas
prendre en compte le résultat si la surface se trouve en dehors de cette plage.
3. Les pics A1c et A0 doivent être correctement identifiés.
4. Les valeurs du contrôle qualité doivent être comprises dans la plage indiquée.
5. La plage indiquée pour l’HbA1c a été déterminée sur la base des données présentées à la section
Paramètres de performance, Linéarité. Si le résultat d’HbA1c se trouve en dehors de la plage indiquée, il ne
doit pas être utilisé.
Plage indiquée
Valeur NGSP d’HbA1c en % 3,4-20,6
mmol/mol HbA1c IFCC 14-203
6. Tout échantillon dont les valeurs d’HbA1c sont > 15 % ou > 140 mmol/mol doit être considéré comme
pouvant présenter un variant de l’hémoglobine.16
7. Tout échantillon ayant une surface combinée ≥ 50 % dans la fenêtre d’élution de Variant ou la fenêtre C
doit être considéré comme l’indication d’un variant homozygote ou double hétérozygote, ou du phénotype
d’une β-thalassémie.17,18 Le résultat d’HbA1c pour ces échantillons ne doit pas être transmis.
8. Les échantillons de sang total qui ont été conservés ou expédiés sans respecter les directives du fabricant
peuvent révéler une augmentation dans la surface des pics P3 et P4. Les concentrations de pic suivantes
n’interfèrent pas avec le test :
• pic P3 ≤ 5 % pour les échantillons présentant des variants de l’hémoglobine (porteurs du trait de l’HbS,
de l’HbC, de l’HbD et de l’HbE)
• pic P3 ≤ 10 % pour les échantillons ne présentant pas de variant
• pic P4 ≤ 10 %
Si l’un ou l’autre pic dépasse le seuil, le résultat d’HbA1c ne doit pas être transmis ; un nouvel échantillon
doit être obtenu pour l’analyse.
9. À des fins de diagnostic, les résultats doivent être interprétés à la lumière des antécédents et des résultats
cliniques du patient.

Interprétation des pics « Unknown » (non identifiés)

Il se peut que plusieurs composants mineurs de l’hémoglobine A soient établis et répertoriés comme pics
« Unknown » (non identifiés) dans le compte rendu d’échantillon. Le nombre de pics mineurs de type
« Unknown » et leur surface intégrée varient selon les échantillons. Se reporter à la figure 11 pour un exemple
typique de l’intégration et de la consignation des pics mineurs « Unknown ». Les deux composants mineurs les
plus importants de l’hémoglobine A ont des fenêtres désignées de pics P3 et P4.19 Dans tous les cas, tous les
composants de l’hémoglobine A (par ex., P3, P4, Unknown) sont inclus de façon appropriée dans la surface
totale pour déterminer exactement le pourcentage relatif d’HbA1c.
LIMITES DE LA PROCÉDURE
Dilution des échantillons
Le taux normal d’hémoglobine totale correspond à une surface totale d’environ 2,5 millions d’unités. La plage
de surface totale requise du VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 est comprise entre 1,0 million et 3,5 millions
d’unités.
Si la surface de l’échantillon est en dehors de la plage prévue, prédiluer manuellement l’échantillon en suivant
les directives de la section Préparation des échantillons. Si la surface de l’échantillon se trouve toujours en
dehors de la plage prévue, l’échantillon doit être à nouveau dilué et analysé afin d’obtenir des valeurs comprises
entre 1,0 million et 3,5 millions.
Considérations particulières
• Le test HbA1c n’est pas conçu pour analyser des échantillons prélevés chez des nouveaux-nés.
• Le test HbA1c ne doit pas être utilisé pour remplacer le dosage de la glycémie chez les patients pédiatriques,
les femmes enceintes ou les patients atteints de diabète de type 1.
• Dans le cas de diabète de type 1 à évolution rapide, il peut arriver que l’augmentation du taux d’HbA1c soit
retardée par rapport à l’augmentation aiguë du taux de glucose. Dans ces conditions, le diabète sucré peut
être diagnostiqué sur la base du taux de glucose plasmatique et/ou de symptômes cliniques classiques.
• Le test HbA1c ne doit pas être utilisé pour le diagnostic du diabète en cours de grossesse (diabète
gestationnel).
• Le test HbA1c ne doit pas être utilisé pour le diagnostic du diabète chez les patients présentant les conditions
suivantes :
|| Toute condition altérant la durée de vie des globules rouges [notamment perte de sang récente,
transfusion, anémie due à une carence en fer importante, anémie hémolytique (y compris la
maladie de Minkowski-Chauffard ou sphérocytose héréditaire) ou autres pathologies hémolytiques,
hémoglobinopathies et thalassémies], dans la mesure où le renouvellement des globules rouges altérés
interfère dans la relation entre la glycémie sanguine moyenne et le taux d’HbA1c.
|| Malignités ou pathologies hépatiques ou rénales chroniques graves.16,20−22
Variants de l’hémoglobine
Les variants hétérozygotes les plus courants de l’hémoglobine (HbAS, HbAC, HbAD et HbAE) n’interfèrent pas
avec le test. Les chromatogrammes caractéristiques de ces variants sont représentés par les figures 5 à 8.
REMARQUE : L’élution des hémoglobines E, D et S se produit dans la fenêtre Variant (Variant Window).
Dans le cas où les variants d’hémoglobine se présentent sous la forme homozygote et double-hétérozygote
(SS, CC ou SC, par ex.), il n’y a pas d’HbA et aucune valeur d’HbA1c ne peut donc être déterminée.

L’effet des variants courants de l’hémoglobine sur les résultats de l’HbA1c a été évalué en s’appuyant sur la
directive EP07-A2 du CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) intitulée « Interference Testing in
Clinical Chemistry ». Le biais relatif (en %) par rapport à la méthode comparative est résumé dans le tableau 2.
Biais relatif (%) par rapport à la méthode comparative

Variant de observé aux taux d’HbA1c faible et élevé
l’hémoglobine Biais relatif en % (E-T) Biais relatif en % (E-T)
pour l’HbA1c à ~6,5 % pour l’HbA1c à ~8,0 %
HbS 1,9 (± 2,8) 2,8 (± 1,8)
HbC −0,3 (± 3,5) −2,5 (± 2,5)
HbD −1,1 (± 1,7) −1,2 (± 1,0)
HbE 0,7 (± 3,0) 2,2 (± 1,4)
Tableau 2 : Résultats de l’étude d’interférence des variants de l’hémoglobine

Les autres variants anormaux de l’hémoglobine n’ont pas fait l’objet d’une évaluation avec le VARIANT II
TURBO HbA1c Kit - 2.0. Pour confirmer la présence d’un variant particulier de l’hémoglobine, d’autres méthodes
sont nécessaires.
Interférences
Des études d’interférence ont été menées conformément à la directive EP07-A2 du CLSI intitulée « Interference
Testing in Clinical Chemistry ». Chaque interférence a été évaluée à partir d’échantillons présentant des
concentrations d’hémoglobine d’environ 6,5 % (48 mmol/mol) et ≥ 8,0 % (≥ 64 mmol/mol). Ces études
d’interférence ont donné les résultats ci-après.
• Les concentrations d’hémoglobine F allant jusqu’à 25 % n’interfèrent pas avec le test. Tout échantillon ayant
un taux d’HbF > 5 % doit être considéré comme pouvant présenter une hémoglobinopathie.23
• Le trait β-thalassémique, indiqué par l’augmentation du taux d’HbA2, n’interfère pas avec le test.
Biais relatif (%) par rapport à la méthode de

référence observé aux taux d’HbA1c faible et élevé
Hémoglobine
Biais relatif en % (E-T) Biais relatif en % (E-T)
pour l’HbA1c à ~6,5 % pour l’HbA1c ≥ 8,0%
HbF −1,9 (± 3,1) −0,1 (± 2,1)
HbA2 1,4 (± 2,3) 2,0 (± 4,1)
• Lorsqu’elles sont présentes à des concentrations physiologiques, l’A1c labile, l’hémoglobine carbamylée et
l’hémoglobine acétylée n’interfèrent pas avec le test.24
• Lorsqu’ils sont présents à des concentrations thérapeutiques, les médicaments courants n’interfèrent pas
avec le test.24
• Aucune interférence significative n’a été observée avec les substances endogènes suivantes jusqu’aux
concentrations indiquées :

Concentration
Substance endogène Unités
conventionnelles Unités SI
(États-Unis)
Lipidémie (Intralipid®) 6 000 mg/dl 60 g/l
Bilirubine conjuguée 60 mg/dl 712 µmol/L
Bilirubine non conjuguée 60 mg/dl 1 026 µmol/L
Glucose 2 000 mg/dl 111 mmol/L
Facteur rhumatoïde 750 IU/ml 750 kIU/l
Protéine totale 21 g/dl 210 g/l
VALEURS ATTENDUES/PLAGE DE RÉFÉRENCE

Diagnostic du diabète
Les plages de valeurs de l’HbA1c recommandées par l’American Diabetes Association (ADA) peuvent être
utilisées comme support pour le diagnostic du diabète sucré.
Hémoglobine A1c
Diagnostic suggéré
% NGSP mmol/mol IFCC
≥ 6,5 ≥ 48 Sujet diabétique4–6
5,7-6,4 39-47 Sujet pré-diabétique4
< 5,7 < 39 Sujet non diabétique
Surveillance de l’HbA1c chez les patients diabétiques

Les plages de valeurs de l’HbA1c indiquées ci-dessous peuvent être utilisées pour interpréter les résultats.
Cependant, d’autres facteurs tels que la durée du diabète, le respect du traitement et l’âge du patient doivent
également être pris en compte pour évaluer le contrôle glycémique. Les valeurs indiquées ne s’appliquent pas
en cas de grossesse.
Hémoglobine A1c
Objectif glycémiquel22
% NGSP mmol/mol IFCC
<8 < 64 Objectif moins strict*
<7 < 53 Objectif général†
< 6,5 < 48 Objectif plus strict‡
*P
eut convenir à des patients présentant des antécédents d’hypoglycémie grave, une espérance de vie limitée,
des complications microvasculaires ou macrovasculaires poussées et de nombreux états comorbides, et à
ceux atteints de diabète de longue durée pour qui l’objectif général est difficile à atteindre.
†A
montré une réduction des complications microvasculaires et neuropathiques ; est en outre associé à une
réduction sur le long terme de la pathologie macrovasculaire si la mise en œuvre se produit aussitôt après le
diagnostic de diabète.
‡P
eut convenir à certains patients (qui ont un diabète de courte durée, une longue espérance de vie et aucun
trouble cardiovasculaire par exemple) si l’objectif peut être atteint sans hypoglycémie significative ni aucun
autre effet indésirable du traitement.

PARAMÈTRES DE PERFORMANCE
Précision
La précision du VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 a été évaluée dans une étude dont la conception a été
modifiée et qui s’appuie sur la directive EP05-A2 du CLSI intitulée « Evaluation of Precision Performance of
Quantitative Measurement Methods ». Les résultats de l’HbA1c ont été obtenus pour une série d’échantillons
couvrant la plage des valeurs cliniques du test en analysant chaque échantillon en double dans le cadre de
2 séries par jour, sur 3 instruments et pendant 20 jours. L’étude a été répétée à l’aide de 3 lots de kits différents,
et a abouti à un total de 720 résultats par échantillon sur une période de 60 jours. Les résultats de cette étude
de précision sont résumés dans les tableaux 3a (% NGSP) et 3b (mmol/mol IFCC).
Instrument 1 - CV % par échantillon
Origine de la variation Patient 1 Patient 2 Patient 3 Patient 4 Contrôle 1 Contrôle 2
(5,1 %) (6,7%) (8,0%) (12,0%) (5,5 %) (9,9%)
Répétabilité 0,5 0,6 1,0 0,3 0,5 0,3
Inter-essais 0,3 0,0 0,2 0,3 0,4 0,0
D’un jour à l’autre 0,8 0,7 0,6 0,5 0,8 0,6
Inter-lots 1,0 0,8 0,6 0,6 0,8 0,6
Précision totale 1,4 1,2 1,3 0,9 1,4 0,9
(5,1 %) (6,6%) (7,9%) (12,0%) (5,5 %) (9,8%)
Répétabilité 0,6 0,6 0,5 0,4 0,5 0,3
Inter-essais 0,5 0,0 0,3 0,4 0,4 0,2
D’un jour à l’autre 0,4 0,5 0,7 0,3 0,5 0,3
Inter-lots 0,9 0,7 0,6 0,4 0,9 0,7
(5,1 %) (6,6%) (8,0%) (12,1%) (5,4%) (9,7%)
Répétabilité 0,8 0,8 0,5 0,4 0,6 0,5
Inter-essais 0,1 0,0 0,0 0,2 0,2 0,0
D’un jour à l’autre 0,6 0,5 0,5 0,4 0,6 0,3
Inter-lots 1,6 1,4 1,0 0,7 2,0 0,9
CV % combiné par échantillon
(5,1 %) (6,6%) (7,9%) (12,1%) (5,4%) (9,8%)
Répétabilité 0,7 0,7 0,7 0,4 0,5 0,4
Inter-essais 0,4 0,0 0,2 0,3 0,3 0,0
D’un jour à l’autre 0,6 0,5 0,6 0,4 0,7 0,4
Inter-instruments 0,4 0,0 0,4 0,6 1,3 1,1
Inter-lots 1,2 1,0 0,8 0,6 1,4 0,8
Tableau 3a : Résultats de l’étude de précision (% NGSP)


(33 mmol/mol) (49 mmol/mol) (64 mmol/mol) (108 mmol/mol) (37 mmol/mol) (85 mmol/mol)
Répétabilité 0,8 1,0 1,3 0,4 0,9 0,4
Inter-essais 0,5 0,0 0,3 0,4 0,6 0,0
D’un jour à l’autre 1,4 1,0 0,9 0,6 1,4 0,7
Inter-lots 1,7 1,1 0,8 0,7 1,4 0,8
Répétabilité 1,1 1,0 0,7 0,4 0,8 0,4
Inter-essais 0,9 0,0 0,5 0,5 0,6 0,2
D’un jour à l’autre 0,6 0,7 1,0 0,4 0,9 0,4
Inter-lots 1,6 1,0 0,9 0,5 1,5 1,0
Répétabilité 1,4 1,2 0,7 0,5 1,1 0,6
Inter-essais 0,2 0,0 0,0 0,3 0,3 0,0
D’un jour à l’autre 1,0 0,7 0,6 0,4 1,0 0,4
Inter-lots 2,8 2,1 1,4 0,9 3,4 1,2
CV % combiné par échantillon
Répétabilité 1,1 1,0 1,0 0,5 0,9 0,5
Inter-essais 0,6 0,0 0,3 0,4 0,5 0,0
D’un jour à l’autre 1,1 0,8 0,8 0,5 1,1 0,6
Inter-instruments 0,8 0,0 0,5 0,7 2,1 1,5
Inter-lots 2,1 1,5 1,1 0,7 2,2 1,0
Tableau 3b : Résultats de l’étude de précision (mmol/mol IFCC)

Exactitude
Le test VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 a été comparé à la méthode du laboratoire de référence
complémentaire NGSP dans le cadre d’une étude s’appuyant sur la directive EP09-A2-IR du CLSI intitulée
« Method Comparison and Bias Estimation Using Patient Samples ». Les échantillons ont été analysés en
un exemplaire pendant 4 jours sur 1 appareil. La plage des valeurs obtenues avec le VARIANT II TURBO
HbA1c Kit - 2.0 était comprise entre 3,4 et 20,0 % d’HbA1c (14 et 195 mmol/mol). Les résultats de cette
étude comparative sont présentés dans les figures 1a (% NGSP) et 1b (mmol/mol IFCC). Le biais estimé du
VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 par rapport à la méthode du laboratoire de référence complémentaire NGSP
est présenté dans le tableau 4.
Corrélation entre le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 et la Corrélation entre le VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 et la
VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0 vs NGSP SRL VARIANT II TURBO HbA1c complémentaire
méthode du laboratoire de référence
Kit - 2.0 vs NGSP SRL
NGSP
méthode du laboratoire de référence complémentaire NGSP
%HbA Correlation mmol/mol HbA1c Correlation
pour le test de 1c
l’HbA 1c (en %)
pour le test de l’HbA1c (en mmol/mol)
21 210
2.0
190
2.0
1c -- 2.0
19
1c -- 2.0
170
1c Kit
17
1c Kit
(en mmol/mol)
HbAHbA
HbA
HbA1c 150
15
HbA
II TURBO
II TURBO
130
HbA1c1c
13
%HbA
II TURBO
II TURBO
mmol/mol
110
11
90
HbA1c
Kit VARIANT
Kit VARIANT
9 70
VARIANT
n = 130
VARIANT
n = 130
7 y = 1.0327x
1,0327x - 0.2691
0,2691 50 y = 1.0327x
1,0327x - 2,1710
2.1710
R²
R2 = 0.9984
0,9984 R2 = 0,9984
R² 0.9984
5 30
3 10
3 5 7 9 11 13 15 17 19 21 10 30 50 70 90 110 130 150 170 190 210
Méthode du laboratoire de référence
Méthode du laboratoire de référence
NGSPcomplémentaire
SRL %HbA NGSP (HbA1c en %) NGSP SRL mmol/mol HbA1c
1c complémentaire NGSP (HbA1c en mmol/mol)
Figure 1a : Corrélation entre le VARIANT II TURBO Figure 1b : Corrélation entre le VARIANT II TURBO
HbA1c Kit - 2.0 et la méthode du laboratoire HbA1c Kit - 2.0 et la méthode du
de référence complémentaire (% NGSP) laboratoire de référence complémentaire
(mmol/mol IFCC)
HbA1c (en %) Biais (% HbA1c) Biais %

5,0 -0,11 -2,11 n 130
6,5 -0,06 -0,87 Différence moyenne -0,03%
8,0 -0,01 -0,09 IC 95 % inférieur -0,32%
12,0 0,12 1,03 IC 95 % supérieur 0,22%
Tableau 4 : Biais estimé du VARIANT II TURBO HbA1c Kit - 2.0
Linéarité
Pour montrer la linéarité des dosages de l’HbA1c sur l’ensemble de la plage indiquée, deux échantillons de sang
total contenant de l’HbA1c prélevés l’un sur un patient normal et l’autre sur un patient diabétique ont été utilisés
pour préparer les dilutions ; les échantillons dilués ont ensuite été analysés avec le VARIANT II TURBO HbA1c
Kit - 2.0. La linéarité a été évaluée conformément à la directive EP06-A du CLSI « Evaluation of the Linearity
of Quantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach ». Les résultats de l’étude ont montré une
linéarité de l’HbA1c comprise entre 3,4 et 20,6 % (14 et 203 mmol/mol) avec une différence maximale mesurée
de ± 0,03 % (ou ± 0,38 mmol/mol) dans cet intervalle.

Comptes-rendus d’échantillons
Examiner tous les chromatogrammes d’échantillons avant de communiquer les résultats. Se reporter au Guide
rapide pour un récapitulatif des critères d’acceptation et des directives concernant l’examen des résultats.
Veuillez noter ces caractéristiques lors de l’examen des chromatogrammes :
• Forme du pic A1c : Pointu et uniforme (NON large, SANS épaulement NI traînée).
• Ligne de base : Démarre à 0,00 sur l’axe des ordonnées, stable et sans rampe.

COMPTES-RENDUS D’ÉCHANTILLONS
Unknown
Figure 2 : Résultats de patient non diabétique (valeurs normales)

Unknown
Figure 3 : Résultats de patient diabétique présentant un taux d’HbA1c élevé

Unknown
Figure 4 : Résultats de patient non diabétique présentant un taux d’HbF élevé

Unknown
Figure 5 : Résultats de patient diabétique porteur du trait de l’hémoglobine S ou trait drépanocytaire (AS)

Unknown
Figure 6 : Résultats de patient diabétique porteur du trait de l’hémoglobine C (AC)

Unknown
Figure 7 : Résultats de patient diabétique porteur du trait de l’hémoglobine D (AD)

Unknown
Figure 8 : Résultats de patient porteur du trait de l’hémoglobine E (AE)

Unknown
Figure 9 : Résultats de patient diabétique présentant un taux d’A1c labile (LA1c) élevé

Unknown
Figure 10 : Résultats de patient non diabétique présentant un taux d’hémoglobine carbamylée élevé
REMARQUE : L’élution de l’hémoglobine carbamylée se produit dans la fenêtre LA1c.

Unknown
Figure 11 : Résultats de patient diabétique avec intégration de plusieurs composants mineurs [pics
« Unknown » (non identifiés)]

INFORMATIONS SUR LES MARQUES COMMERCIALES

VARIANT, CDM et Liquichek sont des marques commerciales de Bio‑Rad Laboratories, Inc.
Lyphochek est une marque déposée de Bio‑Rad Laboratories, Inc.
Toutes les autres marques commerciales sont la propriété de leurs sociétés respectives.
RÉFÉRENCES BIBLIOGRAPHIQUES
1. American Diabetes Association. Diabetes Basics. http://www.diabetes.org/diabetes-
basics/?loc=GlobalNavDB (accessed November 2016).
2. Fowler, M. J. Microvascular and Macrovascular Complications of Diabetes. Clin. Diabetes 2008, 26 (2),
77–82.
3. Whiting, D. R.; Guariguata, L.; Weil, C.; Shaw, J. IDF Diabetes Atlas: Global Estimates of the Prevalence of
Diabetes for 2011 and 2030. Diabetes Res. Clin. Pract. 2011, 94, 311–321.
4. American Diabetes Association. Diagnosis and Classification of Diabetes Mellitus. Diabetes Care 2010, 33
(Suppl. 1), S62–S69.
5. International Expert Committee. Report on the Role of the A1c Assay in the Diagnosis of Diabetes. Diabetes
Care 2009, 32 (7), 1327–1334.
6. World Health Organization. Use of Glycated Haemoglobin (HbA1c) in the Diagnosis of Diabetes Mellitus.
http://www.who.int/diabetes/publications/diagnosis_diabetes2011/en/ (accessed November 2016).
7. Forsham, P. H. Diabetes Mellitus: A Rational Plan for Management. Postgrad. Med. 1982, 71, 139–154.
8. Hollander, P. The Case for Tight Control in Diabetes. Postgrad. Med. 1984, 75, 80–87.
9. Baynes, J. W.; Bunn, H. F.; Goldstein, D.; Harris, M.; Martin, D. B.; Peterson, C.; Winterhalter, K. National
Diabetes Data Group: Report of the Expert Committee on Glucosylated Hemoglobin. Diabetes Care 1984,
7, 602–606.
10. Nathan, D. M.; Singer, D. E.; Hurxthal, K.; Goodson, J. D. The Clinical Information Value of the Glycosylated
Hemoglobin Assay. N. Engl. J. Med. 1984, 310, 341–346.
11. Mayer, T. K.; Freedman, Z. R. Protein Glycosylation in Diabetes Mellitus: A Review of Laboratory
Measurements and of Their Clinical Utility. Clin. Chim. Acta 1983, 127, 147–184.
12. Rohlfing, C. L.; Little, R. R.; Wiedmeyer, H. M.; England, J. D.; Madsen, R.; Harris, M. I.; Flegal, K. M.;
Eberhardt, M. S.; Goldstein, D. E. Use of GHb (HbA1c) in Screening for Undiagnosed Diabetes in the U.S.
Population. Diabetes Care 2000, 23, 187–191.
13. International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine Home Page. http://www.ifcchba1c.
net (accessed July 2014).
14. Hoelzel, W.; Weykamp, C.; Jeppsson, J. O.; Miedema, K.; Barr, J. R.; Goodall, I.; Hoshino, T.; John, W.
G.; Kobold, U.; Little, R.; Mosca, A.; Mauri, P.; Paroni, R.; Susanto, F.; Takei, I.; Thienpont, L.; Umemoto,
M.; Wiedmeyer, H. M.; IFCC Working Group on HbA1c Standardization. IFCC Reference System for
Measurement of Hemoglobin A1c in Human Blood and the National Standardization Schemes in the United
States, Japan, and Sweden: A Method-Comparison Study. Clin. Chem. 2004, 50 (1), 166–174.
15. American Diabetes Association, European Association for the Study of Diabetes, International Federation of
Clinical Chemistry and Laboratory Medicine, and International Diabetes Federation. Consensus Statement
on the Worldwide Standardization of the Hemoglobin A1c Measurement. Diabetes Care 2007, 30 (9),
2399–2400.

16. National Academy of Clinical Biochemistry. Hb A1c. In Guidelines and Recommendations for Laboratory
Analysis in the Diagnosis and Management of Diabetes Mellitus [Online]; Sacks, D. B., Ed.; 2011; Chapter
9, pp 25–30. https://www.aacc.org/~/media/practice-guidelines/diabetes-mellitus/diabetesmellitusentirelmpg.
pdf?la=en (accessed November 2016).
17. Safko, R. Anemias of Abnormal Globin Development—Hemoglobinopathies. In Clinical Hematology:
Principles, Procedures, Correlations, 2nd ed.; Stiene-Martin, E. A., Lotspeich-Steininger, C. A., Koepke, J.
A., Eds.; Lippincott-Raven Publishers: Philadelphia, PA, 1998; Chapter 14, pp 192–216.
18. NHS Sickle Cell and Thalassemia Screening Programme. Interpretation and Reporting of Antenatal
Screening Results. Sickle Cell and Thalassemia Handbook for Laboratories, 2nd ed.; London, 2009;
pp 30–33.
19. Bissé, E.; Huaman-Guillen, P.; Hörth, P.; Busse-Grawitz, A.; Lizama, M.; Krämer-Guth, A.; Haehnel, W.;
Wieland, H. Heterogeneity of Hemoglobin A1d: Assessment and Partial Characterization of Two New Minor
Hemoglobins, A1d3a and A1d3b, Increased in Uremic and Diabetic Patients, Respectively. J. Chromatogr. B,
Biomed. Appl. 1996, 687, 349–356.
20. NIH National Heart, Lung, and Blood Institute. Types of Hemolytic Anemia.
http://www.nhlbi.nih.gov/health/health-topics/topics/ha/types.html (accessed November 2016).
21. National Glycohemoglobin Standardization Program (NGSP). Factors that Interfere with HbA1c Test Results.
http://www.ngsp.org/factors.asp (accessed November 2016).
22. American Diabetes Association. Standards of Medical Care in Diabetes—2014. Diabetes Care 2014, 37
(Suppl. 1), S14–S80.
23. Traeger-Synodinos, J.; Old, J. M.; Petrou, M.; Galanello, R. Best Practice Guidelines for Carrier
Identification and Prenatal Diagnosis of Haemoglobinopathies. European Molecular Genetics Quality
Network Best Practice Workshop [Online], Manchester, UK, March 2, 2002. https://www.emqn.org/emqn/
digitalAssets/0/235_HB_eu.pdf (accessed November 2016).
24. Data on file at Bio-Rad Laboratories, Inc.

REMARQUES :

ASSISTANCE TECHNIQUE
Aux États-Unis et à Porto Rico : composer le 1 800 2BIORAD (224 6723), numéro d’appel gratuit disponible
24 heures sur 24 et 7 jours sur 7.
En dehors des États-Unis : contacter la filiale Bio‑Rad régionale.
Les coordonnées sont disponibles sur www.bio-rad.com.

Hba1c Notice D'utilisation

Transféré par

Informations du document

Titre original

Copyright

Formats disponibles

Partager ce document

Partager ou intégrer le document

Options de partage

Avez-vous trouvé ce document utile ?

Ce contenu est-il inapproprié ?

Droits d'auteur :

Formats disponibles

Hba1c Notice D'utilisation

Transféré par

Droits d'auteur :

Formats disponibles

12000447

Lexique des symboles

Fabricant Représentant agrée au sein de l’Union

Numéro de lot À utiliser avant Utilisation comme test de diagnostic in vitro

Référence Consulter la notice d’utilisation

À utiliser uniquement sur < 0,05 % Colonne analytique

Tampon d’élution A Tampon d’élution B Calibrateur Niveau 1

Calibrateur Niveau 2 Diluant calibrateur Coffret de calibration/diluant

Coffret de calibration CD-ROM Eau déionisée

Préfiltre Reconstituer avec Microtubes échantillons

Azide de sodium Solution de lavage/dilution Coffret de solution de lavage/dilution

Sang total de conditionnement Identification unique du dispositif-

INFORMATIONS SUR LA SÉCURITÉ DU PRODUIT

ii Notice d’utilisation 12005531FRrevB

Table des matières

12005531FRrevB Notice d’utilisation 1

2 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

GÉNÉRALITÉS ET DESCRIPTION DU TEST

12005531FRrevB Notice d’utilisation 3

4 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

270-2730, Coffret de solution de lavage/dilution

12005531FRrevB Notice d’utilisation 5

MATÉRIEL SUPPLÉMENTAIRE DISPONIBLE AUPRÈS DE BIO‑RAD

MATÉRIEL SUPPLÉMENTAIRE NÉCESSAIRE, NON DISPONIBLE AUPRÈS DE

6 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

PRÉLÈVEMENT ET MANIPULATION DES ÉCHANTILLONS

Additifs et agents conservateurs des échantillons

12005531FRrevB Notice d’utilisation 7

Conservation des échantillons

Préparation des échantillons

Expédition des échantillons

PRÉPARATION ET CONSERVATION DES RÉACTIFS

Tampons d’élution et solution de lavage/dilution

8 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

Sang total de conditionnement

Colonne analytique et préfiltres

12005531FRrevB Notice d’utilisation 9

SIGNES D’INSTABILITÉ OU DE DÉTÉRIORATION DES RÉACTIFS

Installation d’une nouvelle colonne analytique

10 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

Ordre des échantillons pour le conditionnement de la colonne*

Installation d’un nouveau préfiltre

Ordre des échantillons pour la calibration*

12005531FRrevB Notice d’utilisation 11

Préparation d’une série

Ordre des échantillons pour une série régulière*

Certification/Traçabilité par rapport à un produit et une méthode de référence

12 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

RECOMMANDATIONS POUR L’INTERPRÉTATION DES RÉSULTATS

12005531FRrevB Notice d’utilisation 13

Interprétation des pics « Unknown » (non identifiés)

14 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

Biais relatif (%) par rapport à la méthode comparative

Tableau 2 : Résultats de l’étude d’interférence des variants de l’hémoglobine

Biais relatif (%) par rapport à la méthode de

12005531FRrevB Notice d’utilisation 15

VALEURS ATTENDUES/PLAGE DE RÉFÉRENCE

Surveillance de l’HbA1c chez les patients diabétiques

16 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

12005531FRrevB Notice d’utilisation 17

Instrument 1 - CV % par échantillon

18 Notice d’utilisation 12005531FRrevB

HbA1c (en %) Biais (% HbA1c) Biais %