Vous êtes sur la page 1sur 9

VOLUTIONS RCENTES

THMATIQUE
EN MICROBIOLOGIE
TAPER

Vaccins daujourdhui et de demain :


nouvelles technologies
Bertrand Bellier a,*

RSUM
SUMMARY
Les vaccins constituent aujourdhui un des moyens de lutte anti-infectieuse
les plus efficaces. La place privilgie quils occupent parmi les mesures
P resen t an d fu tu re of vaccin es: new
sanitaires prophylactiques est parfaitement illustre par leffervescence
technologies
autour des capacits de production des vaccins en cette priode de pan-
Vaccines represent the most cost-effective
dmie grippale. La majorit des vaccins produits aujourdhui drive tous
and successful approach to prevent diseases.
des prototypes tablis il y a plus dun sicle par Jenner puis par Pasteur
Mortality and morbidity due to several infectious
et plus spcifiquement de ses travaux sur les procds dinactivation ou
diseases have been dramatically affected by the
dattnuation des micro-organismes. Ces vaccins ont connu un certain
widespread use of vaccination. Smallpox has
nombre de succs dont lradication de la variole proclame en 1979.
been eradicated since three decades. Vaccines
Nanmoins, force est de constater, en ce dbut de nouveau millnaire,
available are still produced through relatively
la limite de ces vaccins, notamment pour la lutte contre les infections
conventional technologies, based on Pasteurs
virales chroniques ou infections parasitaires, ce qui met en exergue la
research, more than one century ago that leads
ncessit de gnrer de nouveaux types de vaccins. Les avances bio-
to attenuation and inactivation of pathogens.
technologiques rcentes et les nouvelles connaissances en immunologie
Nevertheless, in this third millennium vaccinology,
ont permis de proposer un ventail de stratgies vaccinales innovantes,
these conventional vaccines have not been
davenir prometteur. Aujourdhui, la dfinition mme des vaccins a volu
proven to be efficacious in preventing mortalitily
et sinscrit plus largement dans le domaine des immunothrapies. Cet
and morbitity due to chronic viral infections or
article a pour but de dresser un bilan non-exhaustif des nouvelles strat-
parasite infections. A major challenge is to develop
gies rcemment dveloppes sur lesquelles reposent les espoirs pour de
new vaccine strategies able to induce protection
futurs succs vaccinaux.
against these pathogens. Achieving such ambitious
goals in a near future will certainly require a strong
Immunologie immunothrapie vaccins vaccins ADN
vecteurs viraux VLP cellule dendritique. modification of the methods that have been used
so far. This new challenge is facing nowadays
can be approached through a comprehensive
understanding of the mechanisms behind the
1. Introduction induction and the maintenance of efficacious
immune response triggered by vaccines. This
Linvention du vaccin contre la variole en 1796 et, plus review describes the recent development of new
encore, celle du vaccin contre la rage en 1885 marquent strategies of vaccination.
le dbut dune pope sanitaire dont le XXe sicle consti-
tue ce jour lapoge. Les vaccins dvelopps ont per- Immunology immunotherapy vaccine
mis de lutter, sur des continents entiers et en quelques DNA vaccine viral vector VLP dendritic cells.
dcennies, contre des flaux tels que la peste, le ttanos,
la tuberculose ou la poliomylite. Les objectifs vaccinaux
sont passs de la protection de lindividu celle de la
socit, en passant par le souhait dradiquer certaines
a UPMC Universit Paris 06 UMR7211
pathologies virales, devenu une ralit pour la variole en
CNRS UMR7211 INSERM U959 1979. La vaccination est entre dans les murs, devenue
Laboratoire dimmunologie-immunopathologie-immunothrapie une pratique rendue obligatoire en France ds la fin de
Btiment CERVI la premire guerre mondiale, et aujourdhui considre
Groupe hospitalier Piti-Salptrire comme un pilier de la mdecine prventive.
83, bd de lHpital Toutefois, si le rsultat de plus dun sicle de vaccination est
75013 Paris incontestablement positif dans les pays dvelopps, lheure
nest plus au triomphalisme. Dabord, la menace de nouvelles
* Correspondance pandmies conduit les industriels et les chercheurs sinter-
bertrand.bellier@upmc.fr roger sur leur capacit obtenir de nouveaux vaccins dans
des dlais suffisants. Mais aussi, les nombreuses annes de
recherche dun vaccin contre le virus de limmunodficience
article reu le 27 juillet, accept le 28 septembre 2009. humaine (VIH), contre lagent responsable du paludisme
2009 Elsevier Masson SAS Tous droits rservs. et les cancers dmontrent linefficacit ou plus justement

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417 // 69


linadaptation des vaccins classiques pour lutter contre injections de rappel pour induire une immunit long ter-
ces maladies. Une nouvelle re en vaccinologie souvre me. Aussi, ces micro-organismes tus sont pris en charge
donc, celle o les ultimes connaissances en immunologie par le systme immunitaire comme tout autre antigne
et les dernires avances en biotechnologies permettent de exogne (extracellulaire) et induisent par consquent une
repenser les vaccins et de proposer de nouvelles stratgies faible activation des lymphocytes T cytotoxiques, qui sont
vaccinales. Il apparat donc lgitime aujourdhui de revisiter pourtant des cellules essentielles dans la lutte contre les
la dfinition des vaccins. germes dveloppement intracellulaire.
Avant de sintresser aux vaccins du futur, rappelons En marge, dautres types de vaccins inactivs ont t ta-
dabord les caractristiques des vaccins classiques blis, contre la diphtrie et le ttanos, partir danatoxines
(gures 1A et 1B), dont lvolution au cours du XXe sicle correspondant des toxines bactriennes, purifies puis
fut principalement guide par une volont de renforcer la inactives par traitement chimique ou la chaleur. Leffi-
scurit des vaccins. cacit de ces vaccins est satisfaisante et les mcanismes
de limmunit reposent dans ce cas exclusivement sur la
2. Les vaccins classiques persistance danticorps neutralisants.
Rpondant aussi une volont de renforcer la scurit
vaccinale, de nouveaux vaccins, dits sous-unitaires, ont
Les vaccins vivants attnus ont t les premiers vac-
vu le jour dans les annes soixante-dix. Ces vaccins acel-
cins produits. Ils sont aujourdhui utiliss pour prvenir
lulaires sont composs dun nombre restreint dantignes,
la rougeole, les oreillons, la varicelle, la rubole, la fivre
isols et purifis partir des constituants de surface des
jaune, la poliomylite (vaccin oral), la tuberculose ou les
micro-organismes (polysaccharidiques ou protiques) et
gastroentrites rotavirus et sont constitus de sou-
qui constituent les cibles des anticorps. Conjointement,
ches de virus ou de bactries qui ont perdu leur pouvoir
lessor de la biologie molculaire et les techniques de
pathogne, tout en restant capables de se dvelopper
recombinaison gntique ont permis de rvolutionner le
dans lorganisme. Lattnuation du pouvoir pathogne
mode de production de ces vaccins, produits alors par gnie
est obtenue par passage du micro-organisme sur des
gntique. Le clonage du gne codant lantigne HBs et
cultures cellulaires dans des conditions dfavorables (de
son expression en levure (Saccharomyces cerevisiae) ou
temprature, despce cellulaire) ou par voie chimique.
en cellules de mammifre (cellules ovariennes de hamster
Pour la plupart, ces vaccins sont dirigs contre des virus
chinois) a permis le dveloppement du premier vaccin
car la mise au point de vaccins antibactriens attnus
sous-unitaire dit recombinant, et a remplac dfinitivement
sest rvle problmatique (souches attnues difficile-
les vaccins hpatite B dorigine plasmatique.
ment obtenues). Ces vaccins, qui induisent une vritable
Ces nouveaux vaccins sont rvlateurs de lvolution de la
infection sans manifestation pathologique, gnrent une
vaccinologie au cours du XXe sicle. Lutilisation quasi exclu-
rponse immunitaire complte (cellulaire et humorale),
sive de ces vaccins sous-unitaires aprs les annes 1980
efficace et une protection maintenue sur le long terme, et
tmoigne galement de limportance accorde la scurit
ce le plus souvent aprs une seule injection. Cependant,
mais aussi limmunit humorale comme mcanisme pro-
ces vaccins vivants soulvent un problme dinnocuit,
tecteur des infections, seule rponse alors mesure pour
interdisant leur utilisation chez des sujets immunodpri-
valuer lefficacit des vaccins. L adjuvantisation des
ms, et rendant lapplication de cette approche vaccinale
protines recombinantes avec les sels daluminium (seuls
attnue impossible contre des cibles qui prsentent une
adjuvants autoriss) favorisant les rponses anticorps, a
forte capacit muter (VIH, virus de lhpatite C), en
galement accentu ce dsquilibre entre les rponses
raison du risque trop lev de rversion vers un phno-
induites de type humorale ou cellulaire.
type virulent. De plus, ces vaccins vivants requirent des
Un autre progrs considrable dans lvolution de la vac-
conditions de stockage et de distribution contraignantes
cinologie, en terme de simplification, dacceptabilit et
(chane du froid respecter) limitant leur distribution dans
dconomie, rside dans la possibilit dadministrer en une
les pays en voie de dveloppement.
seule injection plusieurs valences vaccinales (combinaison
Une autre mthode classique de vaccination consiste
des vaccins contre la diphtrie, le ttanos, la coqueluche,
inoculer des micro-organismes entiers inactivs (tus).
la poliomylite et les infections Haemophilus).
Ces vaccins, exempts de tout problme dinnocuit (sauf
lie des ractions immunologiques inadaptes), restent
de bons immunognes capables dinduire une rponse 3. Vers de nouveaux vaccins
humorale satisfaisante et protectrice. Plusieurs vaccins
viraux de ce type sont actuellement commercialiss : Malgr le dveloppement considrable des vaccins aux
contre la grippe, lhpatite A, lencphalite japonaise, la XXe sicle, les maladies infectieuses reprsentent encore
poliomylite (vaccin injectable) et la rage. Ces vaccins ont actuellement un problme aigu de sant publique lchelle
galement t particulirement utiliss lors du dveloppe- mondiale. Elles sont la cause de 30 % des dcs dans le
ment des vaccins antibactriens de premire gnration, monde. Ce taux signifie la mort de 14 millions dindividus
constitus de bactries entires tues : Salmonella typhi par an. Sur ces 14 millions, plus de 9 millions sont des
pour la typhode, le vibrion cholrique pour le cholra, enfants de moins de cinq ans. Des maladies que lon croyait
Bordetella pertussis pour la coqueluche. Alors que linno- matrises rapparaissent et de nouveaux germes patho-
cuit de ces vaccins est un avantage vident, labsence gnes mergent priodiquement. Il est donc une priorit
dinfection limite leur efficacit comme en tmoigne le de dvelopper de nouveaux vaccins contre ces maladies
schma vaccinal qui requiert des doses leves et des mergentes mais galement de repenser les formulations

70 // REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417


VOLUTIONS RCENTES EN MICROBIOLOGIE

Figure 1 Principe des stratgies vaccinales daujourdhui et de demain.

(A) Virus sauvage. Reprsentation schmatique du virus contre lequel les stratgies vaccinales sont destines. Les cercles noirs illustrent lantigne cible.
(B) Vaccins classiques. Les vaccins vivants attnus (figure gauche) sont des virus apathognes obtenus partir des virus sauvages, aprs mutations
(cercles blancs), induites par passage sur des cultures cellulaires dans des conditions dfavorables ou par gnie gntique. Les vaccins tus (figure du
milieu) sont obtenus par traitement chimique ou la chaleur des virus sauvages. Les vaccins sous-unitaires (figure droite) sont obtenus par purification des
antignes isols partir des constituants de surface du virus sauvage ou par production in vitro grce au gnie gntique. (C) Vaccins ADN. Les antignes
sont exprims in situ aprs administration de plasmides dADN porteurs des squences gntiques codant les antignes vaccinaux. (D) Vecteurs vivants
recombinants. Les squences gntiques codant les antignes vaccinaux sont vhicules par un vecteur viral recombinant, le plus souvent dfectifs pour
la rplication. (E) Pseudo-particules virales ou VLP. Les VLP homologues (figure gauche) sont formes par assemblage des protines de structure du
virus sauvage. Les particules, de structure comparable celles du virus sauvage, sont vides de gnome viral. Des VLP htrologues (figure droite) peuvent
tre gnres partir de protines structurales de virus htrologue sur lesquelles sont fusionns ou greffs les antignes vaccinaux. (F) PlasmoVLP. Les
plasmoVLP sont des vaccins ADN optimiss, autorisant la formation de VLP homologues ou htrologues in situ aprs expression. (G) Ciblage des cellules
dendritiques. Diffrentes stratgies visant dlivrer les antignes spcifiquement aux cellules dendritiques sont dveloppes. Lapport antignique peut
se faire ex-vivo (figure gauche) par ajout de protines recombinantes ou par transfection dun plasmide dADN porteur des squences antigniques sur une
culture de cellules dendritiques qui seront ensuite injectes au patient. Le ciblage des cellules dendritiques peut se faire in vivo (figure droite) au moyen
danticorps, de protines bactriennes ou de vecteurs viraux capables de se lier spcifiquement aux rcepteurs de surface des cellules dendritiques.

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417 // 71


vaccinales pour renforcer lefficacit des vaccins existants. Alors que seule la quantit deffecteurs (titre danticorps,
La vaccinologie moderne se doit dintgrer les nouvelles frquence de cellules mmoire) induits aprs vaccination
connaissances en immunologie fondamentale, en micro- tait value jusqu prsent, demain la qualit des rponses
biologie, ainsi que lavance des nouvelles technologies et des effecteurs induits (affinit des anticorps, caractre
pour assurer le dveloppement de vaccins nouveaux non neutralisant des anticorps, ratio entre cellules T mmoire-
seulement quant leur cible mais aussi quant leur com- effectrices et T mmoire-centrales, multifonctionnalit des
position et leur mode dadministration. lymphocytes T effecteurs et mmoire) sera systmatiquement
Il parat primordial de prendre en considration les autres considre dans les dveloppements vaccinaux [4].
composants du systme immunitaire, autres que les rpon- Les progrs extrmement rapides intervenus ces derni-
ses anticorps, pour la fabrication des vaccins. Aujourdhui, res annes en immunologie et en microbiologie ont ainsi
les tudes sont aussi axes sur limplication des lymphocy- favoris lmergence de nouvelles stratgies vaccinales
tes T CD8+ cytotoxiques (CTL), des lymphocytes T helpher innovantes et accroissent le potentiel dj immense des
(Th1 et Th2) et des cellules prsentatrices dantignes et vaccins. Parmi ces nouvelles technologies en vaccinolo-
plus particulirement les cellules dendritiques qui expri- gie, le dveloppement de vaccins vivants recombinants et
ment les molcules de costimulation indispensables multivalents, celui de la vaccination par ADN, lutilisation
lactivation des lymphocytes T nafs. Il est donc possible de pseudo-particules virales, le ciblage et lutilisation des
dimaginer le dveloppement de formulations vaccinales cellules dendritiques, occupent des places trs importantes
spcifiques, adaptes selon le pathogne cible. La mise dans les recherches acadmiques et industrielles comme
en place de rponses CTL et la gnration de cellules en tmoigne le nombre impressionnant de publications
mmoire CD8+ sont essentielles pour la lutte contre les scientifiques sur le sujet.
infections virales, parasitaires ou la lutte anti-tumorale,
car elles autorisent la destruction des cellules infectes ou 4. Vaccins ADN
tumorales. Lactivation des lymphocytes T CD8+ requiert
une prsentation efficace des dterminants antigniques La vaccination gntique ou vaccination par ADN nu est
par les molcules du complexe majeur dhistocompatibi- un concept novateur en vaccinologie, n au dbut des
lit (CMH) de classe I. Cette voie de prsentation permet annes 90 [5]. Il ne sagit plus dadministrer les antignes
classiquement de prsenter les antignes qui drivent des ports ou purifis partir des micro-organismes mais din-
constituants intracellulaires, dorigine endogne ou micro- troduire directement par injection intramusculaire ou intra-
bienne, aprs protolyse par des complexes enzymatiques dermique le gne codant lantigne vaccinal clon dans
cellulaires (protasome). Ainsi, les stratgies qui cherchent un plasmide dADN bactrien (gure 1C). Les avantages
exprimer ou introduire les antignes vaccinaux dans de lutilisation de lADN sont nombreux. Les vecteurs sont
les cellules prsentatrices gnreraient des rponses faciles construire et produire en grandes quantits. Ils
CTL fortes. Ces diffrentes stratgies seront prsentes sont trs stables y compris temprature ambiante ; en
ultrieurement. linverse, les vaccins inactivs ou sous- consquence, le stockage, le transport et la distribution sont
unitaires constituent une source dantignes extracellulaires plus pratiques et moins contraignants. Il est galement pos-
qui sont alors prsents de faon moins efficace par les sible de construire des vecteurs multiples qui comprennent
molcules de CMH classe I et ninduisent par consquent diffrents gnes codant de multiples antignes et pouvant
que de faibles rponses CTL. Ces vaccins classiques ainsi largir la valence vaccinale [6, 7].
non-vivants savrent donc inadapts pour la lutte contre Plus important, lantigne produit partir du vaccin ADN est
les pathognes intracellulaires, ce qui souligne une fois de exprim dans les cellules transfectes et sera donc directe-
plus le besoin de gnrer de nouveaux vaccins. ment prsent par les molcules du CMH de classe I. Dans
Ladquation entre le type de rponses immunitaires induites le cas o la cellule transfecte est une cellule prsentatrice
aprs inoculation du vaccin et les mcanismes immunitai- dantignes (CPA), elle aura la capacit de dclencher une
res naturels assurant la protection de lorganisme contre rponse CTL aprs migration vers les ganglions lymphodes
lagent tranger est indispensable pour le succs de la o elle prsentera lantigne associ aux molcules CMH
vaccination. Ltablissement des corrlats de protection classe I aux lymphocytes T CD8+. Lexpression de lantigne
est donc une donne dcisive pour la stratgie de dve- par dautres types cellulaires (myocytes ou kratinocytes)
loppement du vaccin. Le manque dinformations sur les semble contribuer galement au dclenchement des rpon-
corrlats immunitaires de protection a dailleurs constitu un ses immunitaires. Les modifications post-traductionnelles
des freins au dveloppement dun vaccin prventif contre apportes aux protines produites dans les cellules trans-
le virus de lhpatite C (VHC). De nombreuses donnes fectes assurent une conformation native des antignes,
obtenues chez lhomme ou chez le chimpanz aprs infec- favorisant ainsi le dveloppement de rponses anticorps
tion par le VHC sont aujourdhui disponibles et rvlent aprs leur externalisation. De plus, la capture par les CPA
la fois limportance des rponses cellulaires de type CTL de ces protines no-exprimes assure lactivation des
et CD4+ Th1 pour llimination des cellules infectes [1, lymphocytes helper T CD4+ qui renforcent les rponses
2], ainsi que lapparition des anticorps neutralisants qui immunitaires induites.
inhibent linfection virale [3]. La gnration de rponses Les vaccins ADN apparaissent donc comme une strat-
immunitaires tendues , mobilisant les diffrents effec- gie sre et simple pour induire des rponses immunitaires
teurs du systme immunitaire et ciblant diffrents consti- compltes (humorales et CTL), et font de cette approche
tuants du micro-organisme apparat ainsi favorable pour une alternative de choix lutilisation des vaccins vivants,
la gnration dune immunit relle. rpondant notamment aux problmes de rversion vers la

72 // REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417


VOLUTIONS RCENTES EN MICROBIOLOGIE

virulence des souches vaccinales attnues, et ceux des Par ailleurs, des stratgies immunostimulatrices sont propo-
vaccins protiques recombinants connus pour induire de ses pour augmenter ou orienter les rponses immunitaires
faibles rponses CTL. induites aprs vaccination ADN. Ces stratgies adjuvantes
Lefficacit de cette technologie de vaccination a rapidement consistent administrer simultanment lADN vaccinal des
amen tester les vaccins ADN chez le primate non humain squences exprimant des cytokines ou dautres molcules
et chez lhomme, pour diffrentes infections (hpatite B, immunostimulatrices [18]. Parmi ces adjuvants gntiques,
VIH, paludisme) [8, 9]. Un certain nombre de questions les oligodsoxynuclotides synthtiques de type CpG,
concernant linnocuit de ces vaccins a alors t soulev, drivs dADN bactrien et capables de se lier et dactiver
dont le risque dintgration de lADN tranger dans un des le toll-like receptor de type 9 exprim par les cellules
chromosomes du sujet vaccin. Trs peu deffets secondai- dendritiques, sont particulirement efficaces pour renforcer
res ont t observs, tmoignant de lexcellente tolrance la rponse helper de type 1 (Th1) et renforcer limmunit
ces vaccins et aucune intgration stable de lADN dans spcifique antivirale ou anti-tumorale [19].
les cellules de lhte na t rapporte [10, 11]. Au total, les nouvelles amliorations proposes pour la
Alors que les tudes ralises chez les rongeurs ont montr vaccination ADN [13], qui visent renforcer lefficacit
une efficacit remarquable de limmunisation par injection de transfection, augmenter le niveau dexpression des
directe de lADN, les rponses immunitaires obtenues lors antignes ainsi que leur immunognicit, mais aussi leur
des premiers essais cliniques ont t dcevantes [12]. Le association dautres vaccins dans des stratgies vacci-
plus souvent des immunisations rptes avec de fortes nales de type prime-boost (dcrites plus loin) feront de
doses dADN (plusieurs milligrammes) sont ncessaires ces vaccins ADN, de deuxime ou troisime gnration,
pour induire des rponses immunitaires cellulaires faibles, une ralit [15].
et peu dindividus dveloppent des anticorps contre les
antignes exprims [13]. 5. Vecteurs vivants recombinants
Suite cette premire gnration de vaccins ADN dits
prometteurs , de nombreuses recherches ont t entre- La stratgie de vaccination au moyen de vecteurs vivants
prises pour amliorer leur efficacit. Parmi les axes dve- recombinants peut tre perue comme une optimisation de
lopps, la question des modalits dadministration de la stratgie de vaccination ADN, pour laquelle ltape de
lADN a t particulirement tudie. En effet, la quantit pntration du matriel gntique dans la cellule savre tout
de cellules transfectes et la nature de celles-ci sont des particulirement efficace et non limitante. Les squences
facteurs dterminants qui sont aujourdhui incrimins dans gntiques vaccinales sont ici vhicules par des vecteurs
lchec des premiers essais. Lintroduction parentrale de bactriens ou viraux vivants non-rplicatifs. Nous nous
lADN plasmidique en simple solution saline par voie intra- intresserons ici plus particulirement ces derniers, qui
musculaire, qui fut la voie principalement utilise dans les constituent les vecteurs naturels les plus volus pour le
premiers essais, limite le niveau de transfection et en cons- transfert de matriel gntique dans la cellule hte et qui
quence la quantit dantignes exprims. Par ailleurs, cette sont majoritairement utiliss en essais cliniques.
voie cible prfrentiellement les myocytes qui, en raison de Un vecteur viral est un virus dans lequel des gnes essentiels
labsence dexpression de molcules de costimulation, ne la rplication virale ont t ventuellement supprims (le
peuvent activer directement les lymphocytes T nafs mal- virus est alors dfectif pour la rplication) et remplacs par
gr la prsentation en surface des pitopes associs aux des squences codant les antignes dintrt (gure 1D).
molcules de CMH classe I. Aujourdhui, des techniques De nombreux virus ont t modifis gntiquement afin de
alternatives sont exprimentes, ciblant prfrentiellement pouvoir les utiliser comme vecteurs de vaccination. Parmi
la peau, tissu riche en CPA professionnelles (cellules de ceux l, les adnovirus, les virus adno-associs (AAV),
Langerhans de lpiderme, cellules dendritiques du derme). les rtrovirus, le virus de la vaccine ainsi que les diffrents
Parmi les mthodes dveloppes pour augmenter in vivo virus de la famille des Poxviridae sont principalement utili-
lefficacit de transfection, des techniques biolistiques de ss. Chaque systme de transfert de gnes possde ses
type gene gun (bombardement de lpiderme par des avantages et ses limites, portant notamment sur la taille
microbilles dor recouvertes dADN), dinjection par jet des inserts vhiculs, le tropisme cellulaire du vecteur et
sans aiguille (administration cutane dADN en solution sali- son immunognicit. Comme indiqu prcdemment,
ne propulse grande vitesse) ou encore dlectrotransfert cest lefficacit dinfection des cellules et donc le fort taux
(application dun champ lectrique entre deux lectrodes dexpression des antignes, qui font de ces vecteurs des
au site dinjection) semblent les plus prometteuses [14, candidats vaccins de choix. Un autre des avantages consi-
15]. Dans nos tudes, nous avons dj compar certai- drables de ces vecteurs est que leur administration imite
nes de ces mthodes dinjection. De faon schmatique, linfection naturelle, favorable linduction dune rponse
nous avons observ que linjection intramusculaire chez immunitaire forte et durable. Leur efficacit est souligne
la souris, qui requiert au moins 100 g dADN, est 10 fois par leur capacit induire une rponse cellulaire et/ou
moins efficace quune injection intramusculaire suivie dune humorale aprs une seule injection. Lexpression intra-
lectroporation, pour linduction des rponses vaccinales, cellulaire des antignes fait de ces vecteurs des vaccins
qui est galement moins efficace que la technique de gene particulirement efficaces pour induire des rponses CTL.
gun qui ne ncessite que 0,5 g dADN [16], elle-mme Contradictoirement, leur inconvnient majeur, en plus de
moins efficace que les techniques par jet ou injection celui li la pathognicit potentielle du virus utilis suite
intradermique suivie dune lectroporation (qui ncessitent une ventuelle recombinaison avec un virus sauvage,
toutefois 10 g dADN) [17]. rside dans limmunognicit de ces vecteurs. En effet,

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417 // 73


suite linjection du vecteur viral recombinant, le systme est systmatiquement ralise par gnie gntique. Les
immunitaire ragit la fois contre lantigne nouvellement gnes codant les protines structurales sont clons puis
exprim mais galement contre le vecteur lui-mme. Faisant exprims dans des systmes dexpression procaryote ou
de cette limite une force, il a t propos de produire des eucaryote. Les VLP drives de virus non-envelopps sont
vaccins multivalents en utilisant un virus modifi contre gnralement formes des seules protines de capside ayant
lequel on cherche vacciner la personne utilis comme la particularit de sauto-assembler aprs expression in vitro
vecteur et qui expriment un ou plusieurs antignes dintrt telles les protines L1 de HPV-6, -11, -16, -18 produites
drivs dun autre pathogne. Plusieurs candidats vaccins sur levure (Saccharomyces cerevisiae) et incluses dans le
de ce type sont en cours dvaluation, notamment un vaccin vaccin Gardasil [29]. La production des pseudo-particules
recombinant rougeole-VIH, constitu dun virus de la rougeole drives de virus envelopps rsulte quant elle de las-
attnu et portant des antignes du virus du sida [20, 21]. semblage des protines de capside et des glycoprotines
Limmunognicit de ces vecteurs constitue cependant une denveloppe dans un systme dexpression cellulaire (de
limite dans la plupart des protocoles, empchant les injec- mammifre ou dinsecte). De telles VLP sont aujourdhui
tions rptes dun mme vecteur vaccinal [22]. Mais aussi dveloppes pour une application vaccinale contre le VIH
dans le cas o le sujet prsente une immunit prexistante partir des protines Pr55Gag et des glycoprotines Gp160,
contre le vecteur utilis, la rponse induite contre lantigne Gp120 ou Gp41 [30] ou pour une application vaccinale
dintrt peut alors tre significativement rduite voire abo- contre le VHC partir des protines Core et des glycopro-
lie suite la neutralisation du vecteur avant quil nait eu le tines E1E2 [31].
temps dinfecter les cellules de lhte [23, 24]. La forte immunognicit de ces vaccins a conduit utiliser
Dans les protocoles vaccinaux qui requirent des injec- les VLP comme des plateformes antigniques, en implantant
tions multiples, il est donc ncessaire dadministrer lanti- dans les protines structurales des antignes vaccinaux
gne sous des formes diffrentes. Ces stratgies dites de (pitopes ou polypeptides) htrologues [32]. Ce greffage
prime-boost consistent administrer le mme antigne antignique est principalement ralis par gnie gntique,
prsent successivement dans le contexte de deux (voire gnrant une protine de fusion entre les antignes et les
trois) vecteurs ou formulations diffrentes. Les stratgies les protines structurales. Alternativement, lassociation entre
plus rpandues combinent un vecteur viral recombinant en les deux entits peut tre ralise par couplage chimique.
primo-injection un deuxime vecteur viral diffrent ou des La socit suisse Cytos Biotechnology propose aujourdhui
protines recombinantes (produites par gnie gntique) en plus de dix candidats vaccins diffrents, tous bass sur le
injection de rappel ; mais aussi des stratgies associant lADN greffage dantignes sur des pseudo-particules drives de
un vecteur viral recombinant. Ainsi, chez le primate, une bactriophage, et ayant pour cible des extraits allergniques
immunit protectrice contre le virus de limmunodficience dacarien, des molcules de linflammation ou encore la
simienne a t rcemment obtenue aprs injections de deux nicotine ou la cocane [33].
vecteurs adnovirus rAd26/rAd5 [25]. Chez lhomme, des La remarquable immunognicit des VLP peut sexpliquer
rponses immunitaires leves contre des antignes du VIH par leur capacit tre efficacement reconnues et prises en
ont t obtenues aprs immunisation par des combinaisons charge par le systme immunitaire. La dimension des VLP,
de types ADN/vecteurs poxvirus (MVA ou NYVAC) [26, 27]. leur structure particulaire et leur capacit interagir avec des
Plusieurs essais cliniques sont en cours pour tester leffi- rcepteurs cellulaires de surface facilitent leur migration vers
cacit de ces diverses combinaisons. Le rationnel de ces les organes lymphodes drainant et leur capture par les CPA
combinaisons reste encore empirique et lefficacit sup- rsidantes. Une fois pris en charge, les antignes drivs
rieure de certaines combinaisons par rapport dautres sont dgrads et prsents efficacement par les molcules
reste mal comprise. Il semble galement vraisemblable que de CMH classe II et exceptionnellement par les molcules de
le choix de la combinaison gagnante soit dpendant de classe I (mcanisme de prsentation antignique croise).
lantigne et du pathogne cible. Il est galement propos que la rptition des motifs anti-
gniques prsents la surface des VLP facilite lactivation
6. Pseudo-particles virales des lymphocytes B et la scrtion danticorps [34].
Lensemble des donnes dimmunognicit obtenues dans
ou VLP les modles dtudes exprimentaux et chez lhomme confir-
me le potentiel des VLP induire des rponses immunitaires
Les VLP ( virus-like particle en anglais) sont des particules compltes et de forte intensit. Seule la production grande
vaccinales formes de protines recombinantes sous-unitai- chelle reste aujourdhui une des limites majeures lutilisa-
res, capables de sassembler en une structure particulaire, tion des VLP enveloppes en vaccination humaine.
reproduisant fidlement la structure des particules virales
(gure 1E). Lassemblage particulaire de ces immunog-
nes et labsence de gnome viral font deux des candidats
7. Stratgie combine :
vaccins de choix en raison de leur forte immunognicit et les plasmoVLP
de leur haut niveau de scurit. ce jour, des vaccins de
type VLP sont dj commercialiss pour les infections Sur ces conclusions, nous avons dvelopp un nou-
hpatite B et papillomavirus humains (HPV) responsables veau concept vaccinal dit plasmoVLP . Les plasmoVLP
du cancer du col de lutrus. sont des vaccins ADN capables de former in vivo des
De nombreux types de VLP sont maintenant dvelopps VLP recombinantes vhiculant les antignes vaccinaux
partir de plus de trente virus diffrents [28]. Leur production (gure 1F). Cette stratgie vaccinale combine les avanta-

74 // REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417


VOLUTIONS RCENTES EN MICROBIOLOGIE

ges des vaccins ADN et VLP offrant ainsi lavantage dune de vaccins adapts pour la gnration de rponses CTL.
production simple, rapide, peu onreuse et grande chelle Ils sont constitus de cellules tumorales ou de cellules
des vecteurs ADN plasmidiques tout en assurant une forte dendritiques charges avec les antignes tumoraux. Luti-
immunognicit des antignes exprims, vhiculs la sur- lisation de cellules tumorales inactives, associes un
face des VLP produites in situ par les cellules transfectes. adjuvant, en vaccination anti-tumorale, est conceptuel-
Nous avons choisi de gnrer des VLP qui drivent dun lement satisfaisante, puisque ces cellules constituent
rtrovirus murin (Moloney murine leukemia virus). La simpli- une source authentique dantignes tumoraux qui seront
cit de son gnome, sa facile manipulation gntique et la activement reconnus en prsence dadjuvant. La difficult
capacit de ce virus tre pseudotyp par des enveloppes daccs et de purification de ces cellules tumorales ainsi
htrologues ont dtermin ce choix. Selon lapplication que la dcouverte dantignes communs un mme type
vaccinale, il est possible dinsrer des squences gnti- de tumeur ont conduit utiliser en thrapeutique des
ques spcifiques des antignes vaccinaux dans les gnes lignes cellulaires tumorales allogniques (non-spcifiques)
codant les protines de structure rtrovirales (Gag et/ou prfrentiellement des cellules spcifiques du patient.
Env) ou de substituer lenveloppe rtrovirale par une autre Toujours dans le but de renforcer limmunognicit de ces
enveloppe virale (VHC, VIH). Nous avons pu dmontrer vaccins, des modifications gntiques des cellules tumo-
que linsertion des antignes dans gag ou env ne limitait rales ont galement t ralises, leur faisant exprimer
pas la formation des VLP, et permettait de gnrer une des cytokines immunostimulatrices et/ou des molcules
rponse efficace contre les antignes insrs, rponse plus de co-stimulation [40]. Ces modifications font de ces cel-
forte que celle induite par des constructions contrle ne lules tumorales de vritables CPA artificielles capables
formant pas de VLP. Lavantage de la formation des VLP dactiver efficacement les lymphocytes T spcifiques des
a galement t observ pour la gnration des anticorps antignes tumoraux.
neutralisants [17] et linduction dune immunit antivirale Alternativement, lutilisation de cellules dendritiques char-
protectrice [16]. Aujourdhui, nous travaillons appliquer ges avec des antignes tumoraux est une stratgie plus
la stratgie plasmoVLP pour des vaccinations prventives directe qui permet dinduire efficacement des rponses T
contre le VHC [22], le VIH et les infections Inuenza (H5N1 spcifiques chez les patients traits [41]. Les antignes
et H1N1/2009). Nous cherchons galement renforcer tumoraux peuvent tre apports sous forme de broyat
limmunognicit de nos vaccins en insrant la surface tumoral, de peptides synthtiques spcifiques de la tumeur
des VLP des molcules capables de cibler et dactiver les et pouvant tre prsents par les molcules CMH du
cellules dendritiques, ce qui devrait favoriser le dclenche- patient, ou de squences gntiques (ADN ou ARN) sp-
ment des rponses immunitaires. cifiques des antignes exprims ex-vivo dans les cellules
dendritiques (gure 1G).
8. Ciblage des antignes Malgr son efficacit dinitiation des rponses immunitaires,
force est de constater que cette stratgie na obtenu que
vers les cellules dendritiques de faibles rponses cliniques objectives. Il est aujourdhui
admis la ncessit de combiner cette stratgie des
La comprhension du rle majeur jou par les cellules den- stratgies adjuvantes, tel lajout de ligands aux toll-like
dritiques dans linduction des rponses immunitaires a fait de receptor ou la molcule CD40, qui induisent lactivation
ces cellules un acteur cl dans le dveloppement vaccinal. des cellules prsentatrices dantignes et renforcent leur
La capture et la prsentation des antignes par ces cellules capacit stimulatrice (par augmentation dexpression des
sont des tapes dcisives pour limmunognicit du vaccin. molcules de costimulation en surface). Par ailleurs, des
Aujourdhui de nombreuses stratgies cherchent dlivrer interventions complmentaires qui rglent le problme de
spcifiquement les antignes vers les cellules dendritiques la phase de reconnaissance de la cellule tumorale et celui
(gure 1G). Pour cela, les antignes peuvent tre coupls de la tolrance locale induite par la tumeur sont galement
des anticorps reconnaissant spcifiquement les molcules proposes.
de surface des cellules dendritiques [35] ou des toxines
bactriennes ayant la capacit de se fixer sur des molcules
de surface des cellules dendritiques [36, 37]. Plus rcem- 10. Nouvelles voies
ment, il a galement t propos de cibler spcifiquement
les CPA laide de vecteurs viraux recombinants (lentivirus)
dadministration
pseudotyps avec une enveloppe mute, rendue spcifique
Tout comme soulign prcdemment, le succs des stra-
des cellules dendritiques [38]. Globalement, il a t montr
tgies vaccinales repose sur la comprhension gn-
que ces stratgies favorisent la prsentation antignique par
rale des mcanismes immunologiques et lintgration de
les CPA et linduction des rponses CTL [39]. Ces strat-
ces connaissances. Ainsi, les modalits dadministration
gies sont principalement dveloppes en vaccination anti-
des vaccins sont aujourdhui dfies. Jusqu ce jour, les
infectieuse (VIH, malaria) ou anti-tumorale et sont actuelle-
vaccins taient surtout inoculs par voie sous-cutane
ment testes en clinique humaine.
ou intramusculaire. Lavantage de ces voies tient un
contrle de la dose injecte, et un dpt de lantigne,
9. Vaccins cellulaires qui, en prsence dadjuvant, sera libr progressivement
et stimulera le systme immunitaire durablement. Cepen-
Plus spcifiquement destines aux immunothrapies anti- dant, ces vaccins injectables traditionnels engendrent une
tumorales, les vaccins cellulaires sont un nouveau type bonne immunit systmique mais ninduisent pas ou peu

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417 // 75


dimmunit au niveau des muqueuses, qui reprsentent le effet secondaire), technologiques (stabilit), sociologiques
premier site dentre des pathognes dans lorganisme (via (facilit dadministration) et conomiques (faible cot du
les systmes respiratoire, intestinal et gnital). Il est donc vaccin et de la vaccination). Lidal serait une prparation
important de dvelopper de nouveaux vaccins dutilisation vaccinale stable confrant, vie, une immunit protectrice
simple et capables de confrer une protection tendue, universelle (totivalente) aprs une seule administration
muqueuse et systmique. Parmi les voies dadministra- par voie non invasive. Il est hautement vraisemblable que
tions, linjection pidermique, intradermique, transcutane,
la satisfaction de cet idal se heurtera des obstacles
intranasale, orale et rectale sont aujourdhui ltude [42,
thoriques et pratiques, dont certains seront insurmon-
43]. En plus daugmenter lefficacit des mcanismes
tables. Nanmoins, cette dfinition a le mrite de donner
protecteurs, la vaccination par voie muqueuse devrait
galement faciliter laccessibilit aux vaccins en simplifiant aux chercheurs limpulsion ncessaire pour aborder ce
leur administration. dfi, dont laccomplissement requiert la mise en jeu des
technologies les plus innovantes. Cest ainsi que beau-
coup defforts sont consacrs obtenir des formulations
11. Conclusion vaccinales innovantes, plus performantes, pouvant tre
produites aisment et assurant une valence multiple, et
Les efforts rcemment dploys pour le dveloppement de
aussi des moyens de prsentation antignique convenant
nouveaux vaccins a conduit sinterroger sur le vaccin idal,
la voie muqueuse assurant une immunit complte :
cest--dire celui qui permettrait la ralisation lchelle
locale et systmique, humorale et cellulaire.
mondiale de la couverture vaccinale la plus large et la plus
efficace. Cette ralisation implique la satisfaction dexi-
gences de plusieurs ordres: scientifiques (efficacit sans Conit dintrt : aucun.

Rfrences [14] Kendall M. Engineering of needle-free physical methods to target


epidermal cells for DNA vaccination. Vaccine 2006;24(21):4651-6.
[15] Abdulhaqq SA, Weiner DB. DNA vaccines: developing new stra-
[1] Gruner NH, Gerlach TJ, Jung MC, Diepolder HM, Schirren CA,
tegies to enhance immune responses. Immunol Res 2008;42(1-3):
Schraut WW, et al. Association of hepatitis C virus-specific CD8+ T cel-
219-32.
ls with viral clearance in acute hepatitis C. J Infect Dis 2000;181(5):
[16] Bellier B, Dalba C, Clerc B, Desjardins D, Drury R, Cosset FL, et
1528-36.
al. DNA vaccines encoding retrovirus-based virus-like particles induce
[2] Shoukry NH, Cawthon AG, Walker CM. Cell-mediated immunity
efficient immune responses without adjuvant. Vaccine 2006;24(14):
and the outcome of hepatitis C virus infection. Annu Rev Microbiol
2643-55.
2004;58:391-424.
[17] Bellier B, Huret C, Miyalou M, Desjardins D, Frenkiel MP, Despres
[3] Stoll-Keller F, Barth H, Fafi-Kremer S, Zeisel MB, Baumert TF.
P, et al. DNA vaccines expressing retrovirus-like particles are effi-
Development of hepatitis C virus vaccines: challenges and progress.
cient immunogens to induce neutralizing antibodies. Vaccine 2009;
Expert Rev Vaccines 2009;8(3):333-45.
27(42):5772-80.
[4] Appay V, Douek DC, Price DA. CD8+ T cell efficacy in vaccination
[18] Liu MA, Wahren B, Karlsson Hedestam GB. DNA vaccines: recent
and disease. Nat Med 2008;14(6):623-8.
developments and future possibilities. Hum Gene Ther 2006;17(11):
[5] Wolff JA, Malone RW, Williams P, Chong W, Acsadi G, Jani A, et 1051-61.
al. Direct gene transfer into mouse muscle in vivo. Science 1990;247
[19] Krieg AM, Yi AK, Schorr J, Davis HL. The role of CpG dinucleotides
(4949 Pt 1):1465-8. in DNA vaccines. Trends Microbiol 1998;6(1):23-7.
[6] Gaudreau MC, Lacasse P, Talbot BG. Protective immune responses [20] Tangy F, Naim HY. Live attenuated measles vaccine as a potential mul-
to a multi-gene DNA vaccine against Staphylococcus aureus. Vaccine tivalent pediatric vaccination vector. Viral Immunol 2005;18(2):317-26.
2007;25(5):814-24.
[21] Liniger M, Zuniga A, Morin TN, Combardiere B, Marty R, Wiegand M,
[7] Rao S, Kong WP, Wei CJ, Yang ZY, Nason M, Styles D, et al. Multivalent et al. Recombinant measles viruses expressing single or multiple anti-
HA DNA vaccination protects against highly pathogenic H5N1 avian gens of human immunodeficiency virus (HIV-1) induce cellular and
influenza infection in chickens and mice. PLoS One 2008;3(6):e2432. humoral immune responses. Vaccine 2009;27(25-26):3299-305.
[8] Liu MA, Ulmer JB. Human clinical trials of plasmid DNA vaccines. [22] Desjardins D, Huret C, Dalba C, Kreppel F, Kochanek S, Cosset
Adv Genet 2005;55:25-40. FL, et al. Recombinant retrovirus-like particle forming DNA vaccines in
[9] Kutzler MA, Weiner DB. DNA vaccines: ready for prime time? Nat prime-boost immunization and their use for hepatitis C virus vaccine
Rev Genet 2008;9(10):776-88. development. J Gene Med 2009;11(4):313-25.
[10] Pal R, Yu Q, Wang S, Kalyanaraman VS, Nair BC, Hudacik L, et [23] Abe S, Okuda K, Ura T, Kondo A, Yoshida A, Yoshizaki S, et al.
al. Definitive toxicology and biodistribution study of a polyvalent DNA Adenovirus type 5 with modified hexons induces robust transgene-
prime/protein boost human immunodeficiency virus type 1 (HIV-1) specific immune responses in mice with pre-existing immunity against
vaccine in rabbits. Vaccine 2006;24(8):1225-34. adenovirus type 5. J Gene Med 2009;11(7):570-9.
[11] Sheets RL, Stein J, Manetz TS, Duffy C, Nason M, Andrews C, et al. [24] Li H, Lin SW, Giles-Davis W, Li Y, Zhou D, Xiang ZQ, et al. A pre-
Biodistribution of DNA plasmid vaccines against HIV-1, Ebola, Severe clinical animal model to assess the effect of pre-existing immunity on
Acute Respiratory Syndrome, or West Nile virus is similar, without inte- AAV-mediated gene transfer. Mol Ther 2009;17(7):1215-24.
gration, despite differing plasmid backbones or gene inserts. Toxicol Sci [25] Liu J, OBrien KL, Lynch DM, Simmons NL, La Porte A, Riggs AM,
2006;91(2):610-9. et al. Immune control of an SIV challenge by a T-cell-based vaccine in
[12] Cui Z. DNA vaccine. Adv Genet 2005;54:257-89. rhesus monkeys. Nature 2009;457(7225):87-91.
[13] Lu S. Immunogenicity of DNA vaccines in humans: it takes two to [26] Guimaraes-Walker A, Mackie N, McCormack S, Hanke T, Schmidt
tango. Hum Vaccin 2008;4(6):449-52. C, Gilmour J, et al. Lessons from IAVI-006, a phase I clinical trial to

76 // REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417


VOLUTIONS RCENTES EN MICROBIOLOGIE

evaluate the safety and immunogenicity of the pTHr.HIVA DNA and cells via the DEC-205 receptor improves T cell vaccination. J Exp Med
MVA.HIVA vaccines in a prime-boost strategy to induce HIV-1 specific 2004;199(6):815-24.
T-cell responses in healthy volunteers. Vaccine 2008;26(51):6671-7. [36] Vingert B, Adotevi O, Patin D, Jung S, Shrikant P, Freyburger L, et
[27] McCormack S, Stohr W, Barber T, Bart PA, Harari A, Moog C, al. The Shiga toxin B-subunit targets antigen in vivo to dendritic cells
et al. EV02: a Phase I trial to compare the safety and immunogenici- and elicits anti-tumor immunity. Eur J Immunol 2006;36(5):1124-35.
ty of HIV DNA-C prime-NYVAC-C boost to NYVAC-C alone. Vaccine [37] Mascarell L, Bauche C, Fayolle C, Diop OM, Dupuy M, Nougarede
2008;26(25):3162-74. N, et al. Delivery of the HIV-1 Tat protein to dendritic cells by the CyaA
[28] Noad R, Roy P. Virus-like particles as immunogens. Trends Microbiol vector induces specific Th1 responses and high affinity neutralizing
2003;11(9):438-44. antibodies in non human primates. Vaccine 2006;24(17):3490-9.
[29] Garland SM, Hernandez-Avila M, Wheeler CM, Perez G, Harper DM, [38] Yang L, Yang H, Rideout K, Cho T, Joo KI, Ziegler L, et al. Engineered
Leodolter S, et al. Quadrivalent vaccine against human papillomavirus lentivector targeting of dendritic cells for in vivo immunization. Nat
to prevent anogenital diseases. N Engl J Med 2007;356(19):1928-43. Biotechnol 2008;26(3):326-34.
[30] Ludwig C, Wagner R. Virus-like particles-universal molecular tool- [39] Caminschi I, Lahoud MH, Shortman K. Enhancing immune respon-
boxes. Curr Opin Biotechnol 2007;18(6):537-45. ses by targeting antigen to DC. Eur J Immunol 2009;39(4):931-8.
[31] Baumert TF, Ito S, Wong DT, Liang TJ. Hepatitis C virus structu- [40] Xiang J, Chen Y, Moyana T. Combinational immunotherapy for esta-
ral proteins assemble into viruslike particles in insect cells. J Virol blished tumors with engineered tumor vaccines and adenovirus-media-
1998;72(5):3827-36. ted gene transfer. Cancer Gene Ther 2000;7(7):1023-33.
[32] Chackerian B. Virus-like particles: flexible platforms for vaccine [41] Palucka AK, Ueno H, Fay JW, Banchereau J. Taming cancer by
development. Expert Rev Vaccines 2007;6(3):381-90. inducing immunity via dendritic cells. Immunol Rev 2007;220:129-50.
[33] Jennings GT, Bachmann MF. Immunodrugs: therapeutic VLP- [42] Denis F, Alain S, Ploy MC. New routes of administration: epider-
based vaccines for chronic diseases. Annu Rev Pharmacol Toxicol mal, transcutaneous mucosal ways of vaccination. Med Sci (Paris)
2009;49:303-26. 2007;23(4):379-85.
[34] Spohn G, Bachmann MF. Exploiting viral properties for the rational [43] Vogt A, Mahe B, Costagliola D, Bonduelle O, Hadam S, Schaefer G,
design of modern vaccines. Expert Rev Vaccines 2008;7(1):43-54. et al. Transcutaneous anti-influenza vaccination promotes both CD4
[35] Bonifaz LC, Bonnyay DP, Charalambous A, Darguste DI, Fujii and CD8 T cell immune responses in humans. J Immunol 2008;180(3):
S, Soares H, et al. In vivo targeting of antigens to maturing dendritic 1482-9.

REVUE FRANCOPHONE DES LABORATOIRES - DCEMBRE 2009 - N417 // 77