HÔPITAL STE JOSEPHINE Page

BAKHITA Codification :
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de PROCEDURE DU DOSAGE Indice de révision :
Mission Tové Date d’application. :
Tel : 00228-70-47-06-62 DU CALCIUM Lieu :
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Création du document : 02 Mars 2022

Nom Fonction Date et Signature

Auteur(s) Surveillant du
FOLLY Yao Anani
laboratoire
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Table des matières

1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3
2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3
3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3
4- Principe......................................................................................................................................3
5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3
6- Échantillon :...............................................................................................................................3
7- Équipements et fournitures.........................................................................................................3
8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4
9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4
10- Mode opératoire......................................................................................................................4
11- Valeurs de référence :.............................................................................................................5
12- Interférences...........................................................................................................................5
13- Valeurs critiques.....................................................................................................................5
14- Formulaires connexes.............................................................................................................5
15- Références..............................................................................................................................5
16- Pièces jointes..........................................................................................................................6
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1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage du calcium dans le sérum et
plasma.
2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
SL : Surveillant du laboratoire
RQ : Responsable Qualité

3- Tâches, autorisations et responsabilités

Tâche Autorisé Responsable

Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, SL SL
Mesure à blanc RQ, SL SL
Préparation des réactifs RQ, SL SL
Préparation des sérums de contrôle RQ, SL SL
Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, SL SL
Passage des échantillons RQ, SL SL
Validation analytique RQ, SL SL

4- Principe
A pH légèrement acide et en présence d’ions calcium, le metallochromogène Arsenazo III
forme un complexe coloré dont l’absorbance mesurée à 650 nm (640-660 nm) est
proportionnelle à la concentration en calcium dans le spécimen.
5- Sécurité et environnement
- Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes)
- Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux.
- Respect la procédure de tri et de gestion des déchets
Par mesure de sécurité, tous échantillon doit être traité comme potentiellement infectieux

6- Échantillon :
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Matériel Quantité minimale Stabilité

Sérum 50 µl 7 jours de 2 à 8° C, 6 mois -20 °C
Plasma (héparine) 50 µl 7 jours de 2 à 8° C, 6 mois -20 °C

7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse

Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Flacon R1 Tampon enzyme 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R2 (Etalon primaire) Calcium 100 mg/l 2à8°C Réfrigérateur
Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur

- Préparation de la solution de travail : Le réactif est prêt à l’emploi.

9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leurs conformités.
o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 10 minutes puis
décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
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o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve

avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le
tableau ci-dessous

Blanc Etalon Dosage

Réactif 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 10 µl
Etalon 10 µl
Spécimen 10 µl
Bien mélanger et incuber 1minute à la température ambiante puis lire à 650 nm (640-660). La coloration est stable
minutes à l’abri de la lumière.

Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
|( Dosage )|×Concentration étalon
Résultat :
|( Etalon)|
o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes
phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ.
o Intervalle de mesure : 2,1 – 150 mg/l, diluer au 1/2 avec du sérum physiologique si
la valeur est supérieur à 150 mg/l (3,75 mmol/l).
o Facteur de conversion 
mg/l x 0,0250 = mmol/l
11- Valeurs de référence :
Calcémie : 86 – 105 mg/l
12- Interférences
Pour éviter les contaminations avec le calcium environnemental, il faut manipuler avec
précaution les contrôles, spécimens, et calibrant. Utiliser de préférence des tubes et cuvettes à
usage unique, laver la verrerie avec du HCI 1N puis bien rincer avec de l’eau déminéralisée.
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Les flacons en plastique ou en verre sont susceptibles d’absorber le calcium durant le

stockage.
13- Valeurs critiques
Sans objet
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse
- Fiche de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage du calcium BIOLABO Ref : 90004.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation