Ministère de l’Enseignement Supérieur BURKINA FASO

de la Recherche Scientifique et de
UNITE-PROGRES-JUSTICE
l’Innovation (MESRSI)

MINISTERE DE LA SANTE
Université Saint Thomas D’Acquin
(USTA)

06BP :10212 Ouagadougou 06 LABORATOIRE SAINT ELISABETH

Tel :(00226)25-31-93-58/57/12 TEL : (00226)60-56-63-63/68-56-63-63
E-mail :usta@fasonet.bf E-MAIL : saintelisabethlabo1@gmail.com

RAPPORT DE STAGE EN BILOLOGIE MEDICALE EFFECTUER DU 22

MAI AU 23 JUIN AU LABORATOIRE SAINT ELISABETH

REDACTEURS : OUANDAOGO MYRIAM ASTRID MAITRE DE STAGE : KAGAMBEGA CLAUDE

OUEDRAOGO N LUC LEONCE

ANNEE UNIVERSITAIRE : 2022-2023

0
 REMERCIEMENTS
Nos remerciements vont au Dr Lady K Traoré de nous avoir accepté dans son
établissement.
- Au Dr Kagambega Claude de nous avoir accueilli dans son service.
- A Mme Traoré Sandra de nous avoir présenter au membre du
laboratoire.
- Nous remercions ensuite l’assemble du personnel du laboratoire saint
Elisabeth pour leur accueil chaleureux, à leur participation à notre
formation et à leur promptitude à répondre à
nos différentes questions.

Liste des abréviations

Ig : immunoglobulines
VIH : virus de l’immuno déficience humaine
NFS : numération formule sanguine
TCA : temps de céphalée activé
TP : taux de prothrombine

1
Table des matières
I. PRESENTATION DU LABORATOIRE................................................................................................3
A. GESTION.....................................................................................................................................3
B. LE PERSONNEL............................................................................................................................4
C. EXAMEN PROPOSÉ.....................................................................................................................4
II. Analyse...........................................................................................................................................5
A. PRELEVEMENTS..........................................................................................................................5
1. Prélèvement veineux..............................................................................................................5
2. PRELEVEMENT POUR TEST POST COÏTAL................................................................................6
3. PRÉLÈVEMENT VAGINAL.........................................................................................................7
4. PRELEVEMENT Gorge.............................................................................................................8
5. PRELEVEMENT Œil..................................................................................................................8
B. UNITER........................................................................................................................................8
1. BACTÉRIOLOGIE-PARASITOLOGIE-MYCOLOGIE......................................................................8
2. IMMUNOLOGIE....................................................................................................................18
3. HORMONE............................................................................................................................22
4. HEMATOLOGIE.....................................................................................................................24
5. BIOCHIMIE............................................................................................................................29
6. LES ENVOIS...........................................................................................................................32
7. SORTIE DES RESULTAT..........................................................................................................32
III. INTÉRÊT ET LIMITE...................................................................................................................32
A. INTÉRÊT....................................................................................................................................32
B. LIMITE.......................................................................................................................................32

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 Introduction
En vue de la préparation d’un rapport de stage de fin d’étude licence 3 science
biomédicale, nous avons effectué un stage pratique d’une durée de 1mois (22 MAI – 23
JUIN) au laboratoire d’analyse biomédicale SAINT ELIZABETH.
Ce stage a pour but de compléter la partie théorique par un développement pratique des
connaissances acquisses. Au cours du stage nous avons observé de façon permanente et
sérieuse les différents test et diagnostic biologique avant de passer à la manipulation.

I. PRESENTATION DU LABORATOIRE
A. GESTION
Le laboratoire de biologie médicale SAINT ELISABETH a ouvert ses portes le 5 janvier
1995. « Sa mission est de fournir aux patients et prescripteurs des prestations d’analyse
médicale de qualité dans le respect des exigences règlementaires et normatives ». Le
laboratoire est ouvert du lundi au samedi de 7H à 21H, et les dimanches de 7H à 12H. Il est
fermé les jours fériés.
Chaque patient reçoit à l’entrée un ticket qui indique son ordre d’arrivée. Lorsque son
numéro est appelé, il se dirige vers la caisse ou il remet son ordonnance et paye les frais
d’analyses. Ensuite il se dirige vers dans la salle de prélèvement. Selon les examens, l’agent
préleveur indiquera au patient quand il pourra recevoir ses résultats. Il est aussi possible
d’envoyer les résultats par email.
Enfin après avoir recueilli le liquide biologique à analyser, les échantillons sont acheminés
dans les bref délai au technicien de laboratoire pour être analyser.

LABORATOIRE SAINT ELISABETH

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 B. LE PERSONNEL
Le laboratoire de biologie médicale saint Elizabeth est formé d’une équipe dynamique et
serviable qui œuvre au bon fonctionnement du laboratoire. Nous avons :
-La directrice : Elle assure la bonne gestion du laboratoire.
Les chefs de laboratoires : Ce sont des techniciens de laboratoire chargé de confirmer les
résultats sortis par les chefs de paillasses.
Les chefs de paillasse : Leur rôle est de vérifier les échantillons et de procéder au analyse.
Les seconds ou copilote : Ils assistent le chef de paillasse dans sa tâche.
Agent préleveur : Leur rôle est de prélever les échantillons de sang et de s’assurer que les
tubes utilisés correspondent au examen demandé.
Secrétaire : Elle s’occupe de l’achat et du contrôle des différents réactifs et matériels.
Caissière : Elle s’occupe de l’enregistrement des patients et de la réception de certains
échantillons biologiques (urine, selle, sperme).
Fille de salle : Elle assure la propreté des locaux et l’évacuation des différents déchets.
Gardien : Il s’occupe de la protection du laboratoire et de l’accueil des clients.
Parkeur : Il s’assure de trouver une place adéquate pour les véhicules.

C. EXAMEN PROPOSÉ
Les examens dans le laboratoire SAINT ELISABETH sont réalisés dans trois salle différentes.
La salle de biochimie-hormone-immunologie, la salle d’hématologie-bactériologie et la salle
de bactériologie-mycologie-parasitologie.
PAILLASSE EXAMEN
BIOCHIMIE SANG : glycémie, hémoglobine glyquée , urée ,créatine , clairance
créatine ,acide urique ,ionogramme ,magnésium ,
calcémie ,phosphore ,protide totaux ,bicarbonates ,gamma
GT ,transaminases ,phosphatases alcalins , LDH , HDL , LDL , bilirubine
total et conjugué ,amylase ,lipase ,cholestérol
total ,triglycérides ,albumine sérique ,fer sérique , ferritinémies ,
transferrine ,CRP ,CPK,ASLO , fructosamine ,
procalcitomine ,électrophorèses des protéines , gazométrie sanguine
URINE : protéinurie de 24H ,iono-urinaire, ALB ,sucre , toxique urinaire
IMMUNO/ IGE ,facteur rhumatoïde ,PSA (libre et total ) , H.Pylori(ag et
HORMOLOGIE ac) ,toxoplasmose ,rubéole ,VDRL/TPHA,
chlamydia ,FSH,LH,TSH,T3,T4,serologie
dengue,BHCG,HIV1 ,HIV2 ;CD4T,HIV, hépatite B et C ;troponine ,ck-
MB ,Ag HBS ,Anti HBC ,Anti VHC , Anti HBE ,Anti HAV, Pro BNP, alpha
foetoproteine, cortisol, oestradiole , prolactine, testostérone

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 HEMATOLOGIE NFS , GR/RH ,taux de réticulocytes , VS ,TP/INR ,TCA , D-dimères ,
fibrinemie ,électrophorèse de l’hémoglobine, test de coombs
BACTÉRIOLOGIE Coproculture ,ECBU ,prélèvement vaginal ,prélèvement urétral, ECB
LCB, pus , liquide de ponction , hémoculture , prélèvement gorge ,
H.Pylorie
PARASITOLOGIE Goutte épaisse ,TDR palu ,KOP,
/MYCOLOGIE microfilaire ,bilharziose ,cryptocoque ,compte ADDIS ,examen
mycologique

II. Analyse
A. PRELEVEMENTS
Le prélèvement varie selon le liquide biologique. Certains prélèvements sont effectués par
le patient directement soit au laboratoire, soit chez eux.
Les principaux prélèvements effectués par le laboratoire sont : les prélèvements veineux, les
prélèvements génitaux, les prélèvements ORL et les prélèvements pour test post coïtal.
1. Prélèvement veineux
Le plus souvent la ponction veineuse s’effectue au plie du coude, cependant chez le bébé,
les personnes âgées et les personnes ayant de petite veine le prélèvement se fait au niveau
du dos de la main.
 Matériel
Coton
Tube (sec, EDTA, citrate de sodium, fluorure de sodium)
Garrot
Seringue
Tube vacutainer
Gant
Alcool 90°
Pansement
 Mode
-faire sortir le matériel et le déposer sur la table de prélèvement
-porter ces gants
-poser le garrot et le serré
-demander au patient de fermer le poing et chercher une veine
-désinfecter la zone avec du coton inhibé d’alcool
-desserré l’aiguille et le placer dans le tube vacutainer
-enfoncer doucement l’aiguille dans la veine du patient
-percer l’autre bout de la seringue avec le tube a prélèvement (commencer par le
tube sec)
-lorsque le sang pénètre demander au patient d’ouvrir le poing
-retirer le premier tube et mettre le second si besoin
-retirer le garrot
-retirer le dernier tube puis la seringue

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 -placer un coton inhibé d’alcool dans la zone de prélèvement
-enlever la seringue du tube vacutainer et jeter la seringue
-étiqueter les tubes
-placer un pansement sur la zone de prélèvement et libéré le patient
-ranger le reste du matériel
-jeter les cotons utilisés et les gants.

TUBE SEC
TUBE VACUTAINER TUBE EDTA

2. PRELEVEMENT POUR TEST POST COÏTAL

 Conditions 
La patiente doit :
-faire le prélèvement en période d’ovulation
-observer une période d’abstinence de 4J minimum
-faire un rapport sexuelle la veille du prélèvement en 24H et 1H du matin (sans usage
de préservatif)
-rester allonger pendant 30mn sur le dos après l’éjaculation du partenaire sexuel
-rester couchez jusqu’au matin
-se rendre au laboratoire au réveil pour le prélèvement sans faire de toilette intime.
 Matériel
Gant
Speculum
Aspiglaires
Ecouvillon
Lame gynécologique
Table de prélèvement
 Technique
-installer la patiente en position gynécologique
-mettre la patient en confiance et introduire le speculum verticalement
Lorsqu’il est introduit dans les ¾, le retourner afin de le mettre en position
horizontale
-presser légèrement le speculum avec la main pour écarter les parois et rechercher le
col de l’utérus

6
 Lorsqu’il est repéré, l’éclairer et s’il y’a du mucus sur l’orifice l’enlever avec un
écouvillon avant de prélever.
. PRÉLÈVEMENT INTRAVAGINAL
Faire le prélèvement par aspiration au niveau du cul de sac de Douglass
. PRÉLÈVEMENT DANS L’ENDOCOL
-introduire l’aspiglaire stérile dans l’endocol environ 1 à 2 cm de profondeur
-prélever une quantité importante de glaire
-retirer l’aspiglaire puis le speculum
Pour retirer le speculum commencer par le dévisser un peu puis on le retire tout en
effectuant un quart de tour pour le remettre en position vertical.

3. PRÉLÈVEMENT VAGINAL
 CONDITIONS
. La patiente doit éviter toute toilette intime, tous traitement locale (gel, crème,
savon) ainsi que rapport sexuelle dans les 24H qui précède l’examen
. Le prélèvement doit être réaliser avant ou à distance de tous traitement
antibiotique (> 15J pour chlamydiae ,>3J pour les autres germes ).
 Matériel
Coton
Ecouvillon stérile
Speculum stérile
Compresse
Lampe gynécologique
Table de prélèvement gynécologique
 Mode
Le site de prélèvement est fonction du diagnostic
-installer la patiente en position gynécologique
-mettre la patient en confiance et introduire le speculum verticalement
Lorsqu’il est introduit dans les ¾, le retourner afin de le mettre
position horizontale
-presser légèrement le speculum avec la main pour écarter les parois et
rechercher le col de l’utérus
Lorsqu’il est repéré, l’éclairer et s’il y’a du mucus sur l’orifice l’enlever avec
un écouvillon avant de prélever
. PRELEVEMENT ENDOCERVICAL
-Faire le prélèvement avec deux écouvillons (un écouvillon sec et un
écouvillon sur milieu amies gel)
-placer l’écouvillon sec dans son contenant et ajouter quelque goutte d’eau
physiologique stérile (pour éviter la dessiccation du prélèvement)
. PRELEVEMENT ENDOCERVICAL
-nettoyer soigneusement l’exocol pour éliminer les sécrétions

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 -introduire l’écouvillon dans l’endocol a environ 2cm de profondeur, tourner
l’écouvillon plusieurs fois et ramener de la glaire et des cellules endocervicale
sans faire la patiente
-retirer l’écouvillon sans toucher la paroi vaginale.

4. PRELEVEMENT Gorge
 Matériel
Un abaisse langue, un écouvillon sec et un écouvillon sur milieu amies gel
 Méthode
-Utiliser un abaisse langue pour diminuer le réflexe nauséeux et éviter de contaminer
l’écouvillon avec la salive
-écouvillonner les amygdales avec les deux écouvillons l’un après l’autre
5. PRELEVEMENT Œil
 Conditions
Le prélèvement doit être réaliser de préférence avant tout traitement local ou
générale (antiseptique ou antibiotique) et avant toute toilette oculaire depuis plusieurs
heures
En cas de traitement celui-ci doit être suspendue 24 à 48H avant d’effectuer le
prélèvement.
 METHODE
Pour la recherche de bactérie, il faut recueillir les sécrétions par frottis conjonctival
et le pus dans l’angle interne de l’œil à l’aide des deux écouvillons.
6. Prélèvement génitaux chez l’homme
 Matériel
Ecouvillon
Compresse
Lame
Lamelle
 Technique
Deux cas peuvent se présenter
-présence d’un écoulement purulent : masser l’urètre pour activer l’écoulement pour
ça placer le pouce sur la face inferieure de la verge tout en maintenant une pression
modérée, remonter sur 5 cm d’un mouvement lent (2s a 3s)
Répéter 3 à 5 fois le massage jusqu’à ce que le pus apparaisse au niveau du méat
urinaire et prélever l’écoulement à l’aide d’un écouvillon stérile
-en absence ou en cas d’écoulement mineur : introduire un écouvillon dans le méat
urinaire a hauteur 1cm et faire des mouvements de rotation avec l’écouvillon pour le
charger d’excrétion urétrale.

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 B. UNITER
1. BACTÉRIOLOGIE-PARASITOLOGIE-MYCOLOGIE
Au sein du laboratoire Saint Elisabeth, les examens de bactériologies, de parasitologies, de
spermogrammes et de mycologies sont réalisés dans la même salle ; mais toutes les
paillasses sont bien distingues.
L’analyse des échantillons biologique consistent à réaliser un examen macroscopique,
microscopique et une culture. Un antibiogramme est réalisé pour les examen
bactériologiques en cas d’identification d’un germe pathogène.
 MATERIEL
Disque antifongigramme Sysmex xn-31
Disque antibiogramme Papier PH
Huile a immersion Pipette pasteur
Huile a paraffine Anses
Tube a hémolyse Micropipette
Papier absorbant Bac de coloration
Milieu de culture Pince
Bec benzène Lame de verre
Vitek Conpact 2 Lamelle
Etuve à 37°C Centrifugeuse

a) EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE DES SELLES

 EXAMEN MACROSCOPIQUE
Il s’agit d’observer les selles à l’œil nu et à faire une appréciation. On note
-aspect des selles : normal, glaireuse, muqueuse
-couleur : brune, jaunâtre, verdâtre
-consistance : liquide, semi-liquide, molle, pâteuse
-parasite adulte : anneaux de ténia, oxyures, ascaris
-digestion : satisfaisante ou incomplet
 EXAMEN MICROSCOPIQUE
-REACTIF
Ligol
Eau physiologique stérile
Milieu de culture et bouillon d’enrichissement Kauffman
Disque antibiotique
Disque antifongiques
-ETAT FRAIS
Déposer sur le bord d’une lame porte objet, une goutte d’eau physiologique et déposer
sur l’autre bord de la même lame une goutte de ligol. Ecrasez a l’intérieur des différents
goutte une noisette des selles prélever et observer au microscope a l’objectif 4OX.
. Les éléments recherchés sont les hématies, les leucocytes, les parasites (kystes, œuf),
cristaux, levures.

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 CULTURE
. Utiliser une hanse stérile pour piquer à différents endroits pour prélever une petite
quantité des selles
. Ensemencer d’abord sur le milieux d’isolement Hektoen et le placer à l’étuve à 37°C
pour 18 à 24H
. S’il Ya la présence d’au moins quelque levure a l’examen direct encenser sur la gélose
Sabouraud + Chloramphénicol
. Prélever un fragment des selles puis écraser dans le bouillon d’enrichissement
Kaufman et le placer à l’étuve à 37°C
. Après 14 à 24H, d’incubation retirer le bouillon Kaufman puis le repiquer à l’aide d’une
anse stérile sur le milieu salmonelle-shigelle (ss) et le placer a incubation a l’étuve à 37°C
pendant 18 à 24H
. Pour les selles des enfants de moins de 02 ans, deux milieu d’isolement seront ajouter
systématiquement : le milieu sabouraud + chloramphénicol et le milieu éosine bleu de
méthylène .
 NOTIFICATION DES RÉSULTATS
. Sur hektoen
Colonie non suspect : couleur orange
Colonie suspect : colonie vert bleuâtre ou colonie une identification
.Sur SS 
Si colonie non suspect : colonie rose
Si colonie suspect : colonies translucide
.Sur EMB
Colonie suspect : colonie luisantes a reflet vert métallique (Escherichia coli) 
.Sur sabouraud + chloramphénicol
Colonie de bactérie résistant au chloramphénicol : colonie translucides
Colonie de levure : colonie blanche, faire une identification et antibiogramme
 IDENTICATION
L’identification et l’antibiogramme sont réaliser avec de l’automate vitek 2 compact
b) ETUDE CYTOBACTERIOLOGIQUE DES URINES
 EXAMEN MACROSCOPIQUE
-couleur : soit clair, jaune paille, jaune claire, jaune foncé, hématique
-aspect : soit limpide, légèrement trouble, trouble, et très trouble
-abondance du culot urinaire : préciser l’abondance du culot urinaire selon qu’elle soit
minime, peu abondant, abondant, très abondant
-chimie de l’urine :
.PH : la valeur du PH est celle correspondante à la valeur indiquée
. Nitrite : positif si la couleur correspondante vire du rouge au rose et négatif si la
couleur reste inchangée
 EXAMEN MICROSCOPIQUE
-REACTIF
Disque antibiotique

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 Disque antifongigramme
Huile a immersion
Milieux de culture
Colorants de gram
Eau physiologique stérile
-EXAMEN DIRECT A L’ÉTAT FRAIS
. Cytologie de la cellule de Malassez
Déposer une lamelle sur la cellule de Malassez de sorte à former la chambre de la
cellule de Malassez
Homogénéiser les urines. Prélever les urines à l’aide d’une pipette pasteur stérile et
remplir la chambre de la cellule
Laisser reposer pendant une minute environ
Lire au microscope à l’objectif 40X, compter les leucocytes et les hématies
-Examen du culot urinaire
A l’aide d’une pipette pasteur, mettre environ 3ml d’urine dans un tube a hémolyse et
centrifuger à 3000/tr min pendant 5mn
Eliminer le surnageant
Déposer une goutte du culot urinaire sur une lame et la recouvrir d’une lamelle
Dans un premier temps observer à l’objectif X40
Quantifier par très rare, rare, quelque et assez nombreux
-MISE EN CULTURE
Ensemencer sur chromid , s’il y a des levures à la lecture du culot ensemencé sur
sabouraud + chloramphénicol
Placer à l’étuve à 37°C pendant 18 à 24H
. La bactériurie : elle est obtenue par une comparaison des colonies bactériennes
présentes sur la boite de pétrie en fonction de la boite de lecture
. Appréciation des colonies bactériennes : elle est faite sur la base de la taille des
colonies, l’aspect des colonies et la diversité de la population des colonies
bactériennes
. Interprétation : elle est faite en fonction de l’espèce bactérienne, du nombre de
leucocytes, de la bactériurie, de la diversité des colonies bactériennes et du sexe du
patient.
c) EXAMEN CYTOBACTERIOLOGIQUE DES PRÉLÈVEMENTS
VAGINAUX
 EXAMEN MACROSCOPIQUE
Il se fait lors du prélèvement, il consiste à apprécier à l’œil nu les secrétions vaginal
-aspect : crémeux, laiteux
-couleur : blanchâtre, jaunâtre, incolore, hématique
-abondance : minime, pas abondant, abondant, très abondant
-odeur : fétide, inodore
 EXAMEN MICROSCOPIQUE
-REACTIF
Huile a immersion

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Alcool à 96°
Violet de gentiane
Iode
Soframine
Eau physiologique
-ETAT FRAIS
Placer une goutte d’eau physiologique sur une première lame
Décharger l’écouvillon du col en faisant sur tout la surface de la lame et la mettre à
sécher
Déposer une autre goutte d’eau physiologique sur une deuxième lame
Décharger toute la sécrétion de l’écouvillon du vagin dans la goutte d’eau sans faire
de frottis
Recouvrir à l’aide d’une lamelle
Lire cette lame a l’objectif X40
Indiquer la présence des leucocytes, des hématies, des levures, des cellules
épithéliales, des parasites
Elimer la lamelle et laisser sécher
-EXAMEN APRES COLORATION DE GRAM
. Coloration de gram
Fixer à l’alcool ou au bec benzène
Couvrir la lame de violet de giemsa(1MN)
Rincez à l’eau du robinet
Couvrir la lame de lingol(1MN)
Rincer à l’eau de robinet
Décolorer à l’alcool (goutte à goutte jusqu’à ce qu’il n’y ait plus de goutte qui tombe
de la lame)
Couvrir la lame de fuschine (30s)
Rincer à l’eau de robinet et laisser sécher
. Examen après coloration
Observer à l’objectif X100 et apprécier la flore vaginale selon la présence et la
prédominance de lactobacillus
-MISE EN CULTURE
Ensemencer sur chromid et sur la gélose chocolat et sabouraud + chloramphénicol
Incuber les boites de pétri a l’étuve 37°c
Réaliser la lecture des boîtes entre 18 à 24h après l’ensemencement
-LECTURE DES BOITES ET INTERPRETATION
. Si absences de colonies bactérienne sur le milieu ordinaire, sur le milieu enrichi et
sur le milieu sabouraud + chloramphénicol la culture est négatives
. Si présence de colonies bactériennes sur le milieu ordinaire, prélever une colonie
isolée et procéder à l’identification et a l’antibiogramme
Si présence de colonie bactérienne sur le milieu enrichi, prélever une colonie isolée et
procéder à l’identification et a l’antibiogramme.
.si présence de colonie, de levure sur le milieu sabouraud + chloramphénicol pour
prélever quelque colonie et procéder à l’identification et a l’antifongigramme.

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 d) ETUDE CYTOBACTERIOLOGIQUE DES PUS
 EXAMEN MACROSCOPIQUE 
-aspect : crémeux, laiteux, liquide
-couleur : blanchâtre, jaunâtre, hématique
-abondance : minime, peu abondant, abondant, très abondant
-odeur : fétide ou inodore
 EXAMEN MICROSCOPIQUE
-EXAMEN DIRECT A L’ETAT FRAIS
Déposer sur un bord d’une lame porte objet une goutte pour les collections
purulentes ou décharger dans de l’eau physiologique toutes les secrétions de
l’écouvillon pour les prélèvements obtenus par écouvillonnage.
Recouvrir d’une lamelle
Lire au microscope a l’objectif X40, apprécier par 0, très rare, rare, quelques, assez
nombreux, nombreux et très nombreux
-MISE EN CULTURE
Ensemencer sur
. Gélose chocolat + polyvitex
.Chromid
.Sabouraud + chloramphénicol
Placer à l’étuve à 37°C
Lecture des boites entre 18 et 24H
-LECTURE DES BOITES ET INTERPRÉTATION
. Si absence de colonies sur le milieu ordinaire, sur le milieu enrichi, et sur le milieu
sabouraud + chloramphénicol rendre la culture négative.
. Si présence de colonie bactérienne sur le milieu enrichi prélever une colonie isolée à
partir du milieu ordinaire et procéder à l’identification et a l’antibiogramme
. Si présence de colonie bactérienne sur le milieu ordinaire et absence de colonie
bactériennes sur le milieu enrichi, rendre la culture négative et signaler un cas de
souillure.
.Si présence de colonies de levure sur le milieu sabouraud
+chloramphénicol ,prélever quelques colonies et procéder a l’identification et a
l’antifongigrame .

e) HEMOCULTURE
L’hémoculture consiste à mettre en culture un échantillon de sang afin d’identifier la
bactérie ou la levure responsable d’une septicémie ou d’une candidenie

 PRIMO-CULTURE
Incuber les bouillon d’hémoculture à l’étuve à 37°C en laissant au repos pour
permettre au hématies de sédimenter

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 Après chaque 24H faire sortir les bouillons de l’étuve de manière à ne pas les
homogénéiser dans le but de rechercher des turbidités visibles à l’œil nu dans le
surnageant
-NOTIFICATION DES RÉSULTATS
Dès qu’il Y’a une présence de turbidité visible à l’œil nu dans le surnageant écrire la
date du jour dans le registre des cultures bactéries et entamer la culture secondaire.
Après 9j d’incubation, même si n’y a pas une présence de turbidité visible à l’œil nu
dans le surnageant, écrire la date du jour dans le registre des cultures bactériennes
puis entamer la culture secondaire.
 CULTURE SECONDAIRE
-Premier jour : mise en culture
Technique :
. Flamber les bouchons des flacons au bec benzène
. Homogénéiser le bouillon à l’aide d’une seringue par piqure puis aspiration et
refoulement du liquide
. Prélever à l’aide de la seringue 1Ml du bouillon et déposer une goutte sur chaque
milieu de culture
. Identifier les milieux de culture pour chaque bouillons de d’hémoculture (aérobie et
anaérobie)
. Ensemencer d’abord sur le milieu enrichi (gélose chocolat +polyvitex), ensuite sur
milieu ordinaire chromid et enfin sur milieu sélectif (sabouraud + Chloramphénicol)
. Incuber les boites de pétri a l’étuve 37°C et réaliser la lecture de la boite entre 18 et
24H après l’ensemencement
. Lecture des boites et interprétation
-MISE EN CULTURE
Ensemencer sur
. Gélose chocolat + polyvitex
.Chromid
.Sabouraud + chloramphénicol
Placer à l’étuve à 37°C
Lecture des boites entre 18 et 24H
-LECTURE DES BOITES ET INTERPRÉTATION
. Si absence de colonies sur le milieu ordinaire, sur le milieu enrichi, et sur le milieu
sabouraud + chloramphénicol rendre la culture négative.
. Si présence de colonie bactérienne sur le milieu enrichi prélever une colonie isolée à
partir du milieu ordinaire et procéder à l’identification et a l’antibiogramme
. Si présence de colonie bactérienne sur le milieu ordinaire et absence de colonie
bactériennes sur le milieu enrichi, rendre la culture négative et signaler un cas de
souillure.
. Si présence de colonies de levure sur le milieu sabouraud +chloramphénicol,
prélever quelques colonies et procéder à l’identification et a l’antifongigrame .

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 f) TEST POST COÏTAL
L’examen de TPC consiste à réaliser un examen macroscopique et un examen
microscopique de la glaire cervical ; il permet d’étudier la mobilité des spermatozoïdes
dans la glaire cervicale après un rapport sexuel.
 EXAMEN MACROSCOPIQUE :
-abondance : préciser l’abondance selon que la glaire soit minime, peu abondante,
abondante, très abondante
-viscosité : préciser la viscosité selon que la glaire soit visqueuse ou non visqueuse
-filance : préciser la filance selon que la glaire soit non filante, peu filante ou filante
-l’état du col de l’utérus : précisé qu’il soit ouvert ou fermé
-Ph : Couper environ 2cm de la bandelette de papier PH
. Mettre en contact avec la glaire en tenant le bout du papier par les doigts
. Laisser agir pendant 1 MN puis lire noter le PH
 EXAMEN MICROSCOPIQUE :
-LA MOBILITÉ : l’OMS clase le mouvement des spermatozoïdes en quatre catégorie A, B, C
et D
Catégorie A : rapide et progressif
Catégorie B : lent ou faiblement progressif
Catégorie C : mobile mais non progressif
Catégorie D : immobile
. TECHNIQUE
Au niveau du vagin : à partir du prélèvement obtenu au niveau du cul de sac de Douglas
ou du col de l’utérus. Déposer une goutte sur une lamelle porte objet et recouvrir d’une
lamelle
Lire au microscope a l’objectif X40 et comptez les spermatozoïdes dans 4 champs
différents
Dans chaque champ il faut compter de manière séparé chaque catégorie de
spermatozoïdes
Faire sécher la lame obtenue par le prélèvement du col de l’utérus pour la lecture de la
cristallisation et la coloration de gram.
g) SPERMOGRAMME
Le spermogramme permet une étude qualitative et quantitative des spermatozoïdes. Il
permet d’identifier les problèmes d’infertilité et les différents pathologies liées aux
spermatozoïdes.
L’examen se fait sous certaines conditions :
Le patient doit observer une période d’abstinence de 03 à 7j
Le prélèvement peut se faire par masturbation ou par coïte ; cependant si le prélèvement est
fait par masturbation, le patient ne doit pas utiliser de gel, de savon, ni de pommade et si le
prélèvement est réalisé par coïte, le patient ne doit pas utiliser de préservatifs
Lorsque les prélèvements sont réceptionnés au laboratoire, il est enregistré et l’échantillon
est placer à l’étuve pendant 1h.
 EXAMEN MACROSCOPIQUE

15
-volume : à l’aide d’une pipette pasteur en plastique on mesure le volume de sperme
recueilli
-liquéfaction : il suffit de prélevé un peu de sperme et de la laisser tomber goutte à goutte
. Si la consistance est liquide alors la liquéfaction est de 30mn
. Si la consistance est visqueuse la liquéfaction est de 1H
-PH : on mesure le PH en laissant tomber une goutte de sperme sur du papier PH
 EXAMEN MICROSCOPIQUE
-l’aspect : on dépose entre lame et lamelle, une goutte de sperme qu’on observe à
l’objectif X40. Il s’agit d’observer la quantité et l’aspect des spermatozoïdes
-la numération : dans un tube a hémolyse, on met 180µl de liquide de dilution et 20µL
de sperme.
On homogénéise et on met quelque goutte de la solution sur une cellule de Malassez et
on observe à l’objectif X40
-le spermocitogramme : c’est un examen qui permet d’évaluer la forme des
spermatozoïdes.
On mette une goutte de sperme et goutte d’éosine dans un tube a hémolyse et on agite
Ensuit faire un frottis du mélange sur une lame et observer au microscope
Enfin on décèle les différentes anomalies que peuvent avoir un spermatozoïde (forme,
taille, …) en commençant par la tête, la pièce intermédiaire et enfin le flagelle.
h) VITEK COMPACT 2

Le vitek compact 2 est un automate destiné à l’identification et a l’antibiogramme des

bactéries. Il utilise la technique de colorimétrie avancé pour faire l’identification et la
turbidimétrie pour l’antibiogramme. Le système comprend l’automate et un ordinateur
 MODE DE FONCTIONNEMENT
-démarrage
Démarrer l’ordinateur en appuyant sur ON/OFF de l’unité centrale
Démarrer l’automate en appuyant sur le bouton ON/OFF situé à l’arrière extrême droit
Après quelques minute l’écran Etat s’affiche
Le champ Etat situé au bas de l’écran doit indiquer l’état préchauffage puis OK
L’instrument V2C peut commencer le traitement des cartes dès que le champs Etat
indique OK
-Préparer les échantillons
Prendre des tubes a hémolyses et les introduire dans les emplacements de la cartes
(utiliser deux tubes sec dont un servira à l’antibiogramme et l’autre a l’identification de
la bactérie
Mettre dans chaque tube 3ML de solution saline
Suspendre 1 à 2 colonie bactérienne dans un tube a hémolyse et homogénéiser
Poser le tube contenant la suspension bactérienne en première position et faire suivre
celui prévu pour l’antibiogramme
Utiliser la micropipette et la calibré à 280µL pour les GP et a 145µL pour les GN
Pipeter la suspension bactérienne et diluer cette suspension dans 3ml de solution saline
contenue dans le tube voisin. On aura ainsi préparé la solution pour l’antibiogramme.

16
Placer la carte d’identification (GN ou GP6) et la carte (ASTN233 ou ASTGP) en fonction
de la nature du germe sur la casette
-Préparation de la casette virtuelle
Double cliquer sur l’icône Flex prep qui s’affiche sur la page principale de l’ordinateur
Saisir le numéro de la casette puis appuyer sur entrer
Saisir le numéro de l’échantillon dans la case ID labo
Placer le curseur dans la case « Type de carte » et scanner les codes-barres de la carte à
l’aide de la douchette
Cliquer sur « ajouter une carte » a échantillon et scanner de nouveau la carte suivante
Cliquer sur valider pour ajouter un échantillon
Une fois la casette terminer cliquer sur envoyer casette et terminer en cliquant OK
-Traitement des cartes
Ouvrir le capot de remplissage et insérer la casette a l’intérieur de la chambre
Fermer le capot de remplissage
Appuyer sur la touche lancer remplissage
Lorsqu’un message transféré s’affiche, retirer la casette de la chambre de remplissage et
l’introduire dans la chambre de lecture
Ouvrir le capot de chargement lorsque le message « retirer » s’affiche a droit du capot
et retirer les casettes
Refermer le capot
-Lecture des résultats
Les résultats sont disponibles 18 à 24h après le lancement de la casette
L’appareil nous donne le nom de la bactérie et la liste des médicaments qui seront
efficaces.
-Arrêt
Appuyer sur le bouton menu principale situer en haut en droit de l’écran
Appuyer sur le bouton maintenance
Défiler vers le bas et sélectionner l’option Arrêt, un message « arrêt en cours »
Attendre que le message « prêt pour arrêt » s’affiche
Terminer en appuyant sur l’interrupteur situé à l’arrière extrême droite de l’appareil.

VITEK COMPACT 2

17
 i) SYSMEX XN-31

Le sysmex XN-31 est un appareil qui nous donne les résultats qualificatif et quantitatif de la
recherche des trophozoites dans le sang ainsi que les valeurs sur certain paramètre de la
numération de la formule sanguine.
 MODE DE FONCTIONNEMENT
-DEMARRAGE
Soulever le capot mini réactif et vérifier que le bouton de mise hors tension de l’appareil
est sur ON
Allumé l’unité centrale et attendre que l’initialisation et la mise à jour s’effectue
-POUR PASSER LES CONTROLE
Faire sortir les trois contrôles L1, L2 et L 3du réfrigérateur et les laisser a la température
ambiante pendant 15 à 20mn
Mettre l’automate en mode passage manuelle des échantillons
Cliquer sur les paramètres QC, ensuite sur analyse QC
Faire glisser le curseur jusqu’au niveau de L1 du lot que l’on veut lancer et double
cliquer dessus
Homogénéiser le sang de contrôle manuellement
Placer dans le portoir d’échantillon et lancer l’analyse en appuyant sur le bouton bleu
juste à côté
Lorsque les résultats s’affichent faire accepter si toutes les valeurs sont dans la plages
Ensuite passer au deuxième contrôle
-PASSAGE DES ECHANTILLONS
Il y’a deux possibilités
. Passage en mode manuel
Basculer en mode manuel en appuyant sur le bouton noir présentant les deux flèche et
situé en bas à gauche
Vérifier que le voyant situé en haut à droit de l’appareil est vert ou orange
Aller sur l’écran de l’ordinateur en bas à gauche et cliquer sur l’icône manuel (une main
tenant le tube) puis une fenêtre de dialogue s’ouvre
Cliquer sur le numéro de l’échantillon et saisir le numéro de dossier
Placer le tube sur le support de tube après l’avoir homogénéisé et appuyer sur le bouton
bleu
-RESULTAT
Les résultats apparaissent automatiquement sur l’ordinateur étant affirmé par « positif
ou négatif »
-ARRET
Allez au bas de l’écran à gauche et cliquer sur l’icône de dialogue
Une page s’ouvre puis cliquer sur « arrêt » et attendre que le voyant situé en bas a droit
de l’appareil s’allume en vert
Appuyer sur le bouton bleu située juste en dessous du voyant vert pour démarrer la
procédure de rinçage qui dure environ 15mn
Eteindre l’unité centrale

18
 Soulever le capot mini réactif et appuyer sur le bouton de mise hors tension de
l’appareil et s’assurer qu’il soit sur OFF

2. IMMUNOLOGIE

Les tests immunologiques sont principalement réalisés par des tests rapides. Chacune
d’elle a un principe et un mode d’utilisation différent.
a) VIRUS IMMUNO-DEFICIENCE HUMAIN (VIH)

Le test de VIH est réalisé grâce au test rapide « determine HIV-1/2 » de la marque AB

BOT
Ce test ce base sur le principe de immuno-chromatographie pour la détection qualitative des
anticorps anti-VIH 1 et anti-VIH 2.
 MATERIEL
Test « determine HIV1/2 »
Chronomètre
Micropipettes
Tampon alcoolisé
Tube capillaire EDTA
Centrifugeuse
 MODE D’UTILISATION
Centrifuger l’échantillon biologique à 3500 tr/min pendant 5mn
Retirer le test de son emballage
Prélever 50µL de sérum et le déposer dans la zone de dépôt de l’échantillon
Attendre 15 MN et lire le résultat
 INTERPRÉTATION DES RÉSULTAT
-Positif (deux barre) : les barres rouges apparaissent dans la fenêtre contrôle et la
fenêtre patiente sur la bandelette
-Négatif (une barre) : une barre rouge apparait dans la fenêtre contrôle ; celle de la
fenêtre n’apparaît pas
-Non valide (pas de barre) : aucune barre rouge n’apparaît dans la fenêtre patient ou
contrôle
 DETERMINATION DU TYPE DE VIH
Dans le cas où un test est positif, il faut déterminer son type de VIH (VIH de type I ou
VIH de type II)
-REACTIF :
Solution de protéine A conjugué
HIV tri dot (test rapide)
Solution tampon
-mode d’utilisation
Faire sortir le test de son emballage
Ajouter 3 gouttes de solution tampon au centre du test
Ajouter 50µL d’échantillon au centre du test
Ajouter 5 goutte de solution tampon
19
 Ajouter 2 goutte de protéine A conjugué
Ajouter 5 goutte de solution tampon et lire le résultat
-RESULTAT ET INTERPRÉTATION
. Pas de réaction si un seul point (control) apparait
. Réaction :
Si deux point apparaissent, un pour le contrôle et l’autre pour HIV 1 ; l’échantillon
réagit au anticorps de VIH 1
Si deux point apparaissent, un pour le contrôle et l’autre pour HIV 2, l’échantillon
réagit au anticorps de VIH 2
Si tous les trois points apparaissent, un pour le contrôle, un pour HIV 1 et l’autre pour
HIV 2, l’échantillon réagit au deux type de VIH
Le test est invalide si aucun point n’apparaît

TEST POSITIF DU VIH DE TYPE 1

b) SYPHILIS

L’examen de syphilis est réalisé par un test rapides de la marque « on site Syphilis Ab
combs ». Il se base sur le principe de immuno-chromatographie a flux latéral.
 MATERIEL
Centrifugeuse
Micropipette
Montre ou chronomètre
Sachet scellé contenant une casette
Dropper en plastique
Un diluant d’échantillon
 MODE D’UTILISATION
Centrifuger l’échantillon
Retirer la casette
Prélever 30-34µL de sérum/plasma et le décharger dans le puit de sort qu’il n’y ait pas
de bulle d’air
Ajouter 1 goutte de diluant dans le puit et lire le résultat 15mn après
 RESULTAT ET INTERPRÉTATION

20
 -Négatif : si seul la ligne C apparait, aucun anticorps anti-TP n’est présent dans
l’échantillon
-Positif :si les lignes C et T apparaissent, le test indique la présence d’anticorps anti-TP
dans l’échantillon
-Invalide : si la ligne C n’apparaît pas
c) HEPATITE B

Le test rapide HBsAg combo on site est un immuno-dosage chromatographie a flux latéral
qui permet la détection qualitative de l’antigène de surface de l’hépatite B (AgHBs).
 MATERIEL
Centrifugeuse
Micropipette
Montre ou chronomètre
Sachet scellé contenant une casette
Dropper en plastique
Un diluant d’échantillon
 MODE D’UTILISATION
Centrifuger l’échantillon
Retirer la casette
Prélever 30-34µL de sérum/plasma et le décharger dans le puit de sort qu’il n’y ait pas
de bulle d’air
Ajouter 1 goutte de diluant dans le puit et lire le résultat 15mn après
 RESULTAT ET INTERPRÉTATION
-Négatif : si seul la ligne C apparait, aucun Ag HBs n’est présent dans l’échantillon
-Positif :si les lignes C et T apparaissent, le test indique la présence d’Ag HBs dans
l’échantillon
-Invalide : si la ligne C n’apparaît pas.

d) HEPATITE C

Le test rapide HCV Ab plus combo on site est un immuno-dosage chromatographie a flux
latéral qui permet la détection qualitative de l’antigène de surface de l’hépatite B (IgG ,
IgM,IgA).
 MATERIEL
Centrifugeuse
Micropipette
Montre ou chronomètre
Sachet scellé contenant une casette
Dropper en plastique
Un diluant d’échantillon
 MODE D’UTILISATION
Centrifuger l’échantillon
Retirer la casette

21
 Prélever 30-34µL de sérum/plasma et le décharger dans le puit de sort qu’il n’y ait pas
de bulle d’air
Ajouter 1 goutte de diluant dans le puit et lire le résultat 15mn après
 RESULTAT ET INTERPRÉTATION
-Négatif : si seul la ligne C apparait, aucun HCV Ab n’est présent dans l’échantillon
-Positif :si les lignes C et T apparaissent, le test indique la présence d’HVC Ab, dans
l’échantillon
-Invalide : si la ligne C n’apparaît pas
e) DENGUE

Le test rapide on site Duo Dengue Ag-IgG/igM possède deux bande, celle de droit teste
les antigènes et la bande de gauche teste les immunoglobulines G et M.
 MATERIEL
Tube capillaire de 5µL
Casette scellé
Un diluant
Chronomètre
Compte – goutte
 MODE D’UTILISATION
-Pour la détection IgG/IgM
Prélever 5µL de sang total à l’aide du tube capillaire et le déposer au centre du trou
où se trouve la lettre s
Ensuite mettre 3 goutte du diluant dans le trou où se trouve la lettre B ET attendre
20mn
-Pour la détection Antigène de Dengue
Prélever du sang total à l’aide d’une pipette pasteur et déposer 2 goutte de
l’échantillon dans le trou portant la lettre S
Ensuite déposer une goutte du diluant dans le même trou et lire le résultat après
20mn
 RESULTAT ET INTERPRÉTATION
Résultat négatif : si une seule ligne apparait pour le contrôle des antigène et/ou
IgM /IgG
Résultat positif : si en plus des contrôles rouges apparait pour les IgG/IgM et/ou
antigène
Résultat invalide : si aucun trait n’apparaît au contrôle

22
 TEST NEGATIF DE DENGUE

3. HORMONE

Les examens d’hormones sont réalisés par deux appareils à savoir le Mini Vidas et le
cobas e411.
a) LE MINI VIDAS

Le Mini Vidas est un automate robuste et très simple d’utilisation. Il est composé d’un
espace comportant deux compartiment A et B permettant d’introduire 12 cartouche ou
barrette de réactifs
Son principe repose sur la technique ELFA (méthode ELISA avec une lecture finale en
fluorescence)
 MODE DE FONCTIONNEMENT
-DEMARRAGE
Basculer le bouton arrière pour allumer, puis 45mn plus tard basculer le même
bouton pour éteindre et rallumer par la suite : l’appareil est prêt pour le travaille
-PREPARATION D’UN EXAMEN
Choisir l’un des compartiments
Soulever le couvercle du plateau cartouche et y introduire une cartouche de réactif
Pousser la cartouche jusqu’au cran d’arrêt
Ouvrir la porte du bloc-cône
Placer le cône dans le bloc directement au-dessus
Pipeter l’échantillon préalablement centrifuger et l’introduire dans le premier trou de
la cartouche
Fermer la porte du bloc-cône et abaisser le couvercle du plateau cartouche
Aller à test et faire le choix du test concerné et introduire le numéro de dossier du
patient
Aller a menu et sélectionner « menu utilitaire », ensuite « menu configuration » et
réglage date/heure et introduire la date de calibration noté sur le coffret du réactif.
Allez à l’écran initial et retourner au compartiment A ou B, puis démarrer
Le rapport est imprimé directement
Le statut des compartiments passe d’Occupé à retirer

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 Le voyant du compartiment clignote pour indiquer que les cartouches de réactif et les
cônes doivent être retirer
-ARRET
Basculer le bouton en arrière de l’appareil.
b) COBAS e411

 MODE DE FONCTIONNEMENT
-DEMMARRAGE
Faire une inspection avant le démarrage (vérifier que toutes les surfaces sont propres
et la pipette, les palettes de l’agitateur sont en bon état)
Vider la poubelle des déchets
Remplir le réservoir d’eau avec trois litre d’eau et 30Ml de syswash
Ouvrir les flacons PC/CC
Basculer, le disjoncteur
-PROCEDURE DE ROUTINE
Aller à routine
Cliquer sur sélection tests
Saisir l’identité du patient
Sélectionner les tests concernés
Puis sauvegarder
-ARRET
Clique sur sécurité arrêt syst
Cliquer sur arrêt et OK puis OK encore
Une fois l’écran éteint basculer le bouton avant ON/OFF ; puis le disjoncteur vers le
bas
Refermé les PC/CC.

4. HEMATOLOGIE

L’hématologie est l’étude des éléments sanguin. Les principaux examens proposer au
laboratoire sont le Temps de céphalée activé, temps de prothrombine, la numération de la
formule sanguine, le groupage sanguin, la vitesse de sédimentation et l’électrophorèse de
l’hémoglobine.
a) NUMERATION DE LA FORMULE SANGUINE

Le test de NFS est réaliser grâce à l’automate Sysmex XN-1000

 PRESENTATION DE L’AUTOMATE
Le sysmex XN-1000 est un automate d’hématologie qui utilise la technique de
l’impédances, la cryométrie de flux et la photométrie pour le dosage des différents
paramètres de la numération de la formule sanguine.
 MODE DE FONCTIONNEMENT :

24
Tout comme le sysmex XN-31 utilisé en parasitologie pour les examens de gouttes épaisse,
le sysmex XN-1000 est utilisé pour les examen de NFS ; Ils ont tous les deux le même mode
de fonctionnement

SYSMEX XN-1000

 VALEUR USUEL

25
 b) TEMPS DE CÉPHALÉ ACTIVÉ /TEMPS DE
PROTHROMBINE

Les examens de TCA et de TP sont des tests qui permet de déterminer la vitesse de
coagulation du sang. Il est réalisé par l’automate Satellite Max.

 PRESENTATION DE L’APPAREIL
L’automate Satellite max est un analyseur d’hémostase muni d’un écran tactile et
relier à un ordinateur.
 MODE DE FONCTIONNEMENT
-DEMARRAGE
Charger les réactifs sur l’automate
Appuyer sur le bouton démarrage de l’automate situer sur le côté droit de l’appareil
Cliquer sur l’application satellite gui qui s’affiche ; une fenêtre s’ouvre
Au niveau de cette fenêtre en bas, cliquer sur statut pour les réinstallations journalières
de l’automate
Attendre que les paramètres du statut s’allument et passe du rouge au vert avant
d’ajuster les réactifs.
-DOSAGE DE ROUTINE
Centrifuger les échantillons

26
 Transférer ceux qui l’exigent dans une micro-cupules
Aller au menu
Aller à la liste de travail
Cliquer sur l’icône tube en bas de l’écran
Sélectionner une position puis valider
Mettre l’identité du patient
Placer l’échantillon puis choisir « tube primaire » ou « micro-cupules » en fonction du
tube qui a été prélever
Cliquer sur l’examen demander et sur GO pour lancer l’analyse
-ARRET
Aller au menu 11 puis cliquer pour éteindre l’ordinateur
Appuyer sur le bouton de démarrage et retirer le portoir réactif de l’automate

SATTELLITE MAX

Valeur usuelle
TCA patient/TCA témoin :0,8-1,2 S

c) Vitesse de sédimentation

La vitesse de sédimentation est un test qui mesure le taux de sédimentation ou chute libre
des hématies dans un échantillon de sang laissé dans un tube vertical au bout d’une heure
 REALISATION DU TEST
Prélever d’abord un volume de sang nécessaire dans un tube citrate de sodium (long tube
noir)
S’assurer que le volume de sang prélever atteint la ligne du haut
Agiter légèrement le tube pour que l’anticoagulant agisse
Déposer le tube de façon verticale et lire le plasma a 30MN et 1H (30MN après la
première lecture)
-interprétation des résultats
1er lecture :si le volume de plasma est inférieur à 10mm ; la personne n’est pas infectée
Si le volume est supérieur à 10mm, la personne est infectée
2em lecture : si le volume de plasma est inferieur a 25mm, la personne n’est pas infectée

27
Si le volume de plasma est supérieur a 25mm, la personne est infectée

VITESSE DE SEDIMENTATION
d) GROUPAGE SANGUIN ABO/Rh

Le groupage sanguin est un test qui permet le groupe sanguin d’une personne. Les
méthodes utilisées sont celle de Simoner et de Beth Vincent ; cependant la méthode la
plus utiliser est celle de Beth Vincent.
-METHODE DE BETH VINCENT
Cette méthode consiste à mette en évidence les antigènes du système ABO a la surface
des globules rouges du patient, a laide d’anticorps monoclonal spécifique afin de
déterminer le groupe ABO.
. MATERIEL
Planche blanche
Échantillons biologique
Anticorps monoclonaux (A,B,AB,Rh)
. METHODE
Sur une planche blanche déposer une goutte de chaque réactif de façon éloigné
Déposer une goutte de sang à côté de chaque goutte de réactif
Homogénéiser à l’aide d’une coupelle de telle sorte que les réactifs ne se touche pas
Lire les résultats.
. RESULTAT ET INTERPRÉTATION
S’il y’a une agglutination au niveau de l’anticorps A et une réaction au niveau de AB,
alors le patient est de groupe A.
S’il y’a une agglutination au niveau de l’anticorps B et une réaction au niveau de AB,
alors le patient est de groupe B.
S’il y’a une agglutination au niveau de l’anticorps A et de l’anticorps B, et une
agglutination au niveau de AB, alors le patient est de groupe AB.
-RHESUS
S’il y’a une agglutination alors le patient est rhésus plus.
S’il n’y pas d’agglutination le patient est de rhésus moins.

28
 e) Electrophorèse

Les examens d’électrophorèses sont réalisés par un seul appareil : la Mini Lite.
Le Mini Lite est un automate destiné aux analyses des protéines sériques, de
l’hémoglobine, des lipoprotéines et des urines.
 FONCTIONNEMENT DE L’APPAREIL
-DEMARAGE
Appuyer sur le bouton d’alimentation situer à l’arrière gauche de l’automate
Allumer l’ordinateur et laisser le système d’exploitation démarrer
Lorsque le bureau Windows apparaît, cliquer sur démarrer
Double cliqué sur admin et saisir le mot de passe
-DOSAGE DE ROUTINE
Retirer la chambre d’électrophorèse de sa prise
Placer les deux ponts dans la chambre d’électrophorétique et les fixer avec un
support avec des trous prévus
Remplir chacun des deux compartiments avec 55-60Ml de solution tampon
Remettez la chambre élèctrphoeitique dans sa prise
Retirer la plaque de dépôt et à l’aide d’une pipette déposer 30µL d’échantillon dans
chaque puit
Mettre 1µL d’eau dans le compartiment de rinçage
Insérer la bande spéciale de papier absorbant dans le dernier compartiment
Replacer la plaque de dépôt
Placer l’application a la position D
Placer la bande d’acétate sur son support et cliquer sur démarrer
Choisir l’examen et appuyer sur Start
-ARRET
Recyclage des réactifs : cliquer sur setting aller sur réactif puis sur recycler les réactifs
Cliquer sur le bouton démarrer, ensuite sur arrêt
Basculer le bouton d’alimentation situer l’arrière gauche de l’appareil
 VALEUR USUELLE
-ÉLECTROPHORÈSE DES PROTEINE
FRACTION CONCENTRATION g/L
Albumine 35-50
Alpha 1 1-4
Alpha 2 5-11
Beta 7-16
Gamma 60-80
-ELECTROPHORESE DE L’HÉMOGLOBINE

29
 5. BIOCHIMIE

La biochimie est l’étude des réactions qui se passe au sein de l’être vivant. Au laboratoire
Saint Elisabeth les examens sont réalisés par 3 appareils à savoir le Pentra 400, le cobas pure
et Le cobas c311. Ces 3 appareils réalisent tous les mêmes examens ; mais malheureusement
nous n’avons réussi à utiliser qu’un seul appareil à savoir le cobas c311.
a) Cobas c311

L’analyseur cobas c311 de roche itachi est un automate destiné au analyse de chimie
clinique. Il utilise la technique de photométrie et de l’ISE Sur sérum, le plasma, les urines et
le LCR. L’automate est relié à un ordinateur, a un desionisateur et à un polytank qui assure la
distribution en eau ainsi que son refroidissement.

 FONCTIONNEMENT DE L’APPAREIL
-DEMERRAGE
Appuyer sur le bouton « ON/OFF » du suppresseur
Appuyer ensuite sur le bouton du desionisateur
Mettre sous tension l’interrupteur de l’appareil, l’ordinateur le moniteur de
l’imprimante
Attendre que l’appareil s’initialise
Inscrire l’identifiant et le mot de passe
-CALLIBRATION
Cliquer sur calibration
Appuyer sur « statut » dans le menu qui s’affiche
Appuyer sur « pos » dans la liste du menu du statut
Sélectionner le paramètre à calibrer
Définir le type de calibration et appuyer et sauvegarder
Cliquer sur l’onglet installé
Rechercher parmi les standards les paramètre sélectionner pour la calibration
Cliquer ensuite sur position pour repérer les positions définies pour les standards
Placer les standards nécessaires sur leur position dans le portoir d’échantillon
Cliquer sur « Start » dans la liste des fonctions situé
Revenir sur statut pour suivre l’évolution de la calibration
Si les paramètres sélectionner passent de la couleur verte à l’incolore, la calibration
est prête
-DOSAGE DE ROUTINE

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 S’assurer que les conditions électrique, hydraulique et thermique sont réunis
Démarrer l’appareil
Se connecter par le compte ou le mot de passe
Faire les maintenance journalières DDJ
Centrifuger les échantillons nécessaires
Aliquoter ceux qui l’exigent
Cliquer sur l’onglet « routine »
Appuyer sur l’onglet « sélection test »
Cocher l’option « erreur lecture CB »
Introduire la position du disque et flasher l’ID et ok pour confirmer
Placer l’échantillon à sa position
Appuyer sur Start au niveau des fonctions a droit de l’écran
Confirmer le démarrage par la sélection du grand Start
Terminer par OK
Pour suivre l’évolution des dosages cliquer sur Visu résultats
-Arrêt
Mettre l’appareil en attente en appuyant sur le bouton Start et cocher
« Prog/alimentation des échantillons »
Cliquer sur arrêt système
Attendre que l’ordinateur s’éteigne
Ensuite basculer le bouton à droite de L’appareil
Appuyer sur le bouton ON/OFF
Eteindre le dionisateur et le suppresseur

Cobas c311

-VALEUR USELLES
. ELEMENT MINERAUX VALEUR NORMALE
CALCIUM 2,25-2,62mmol/L
Carbonate 20-30mmol/L

31
Chlore 95-107mmol/L
Cuivre 11-22mmol/L
Fer 12-25mmol/L
Mg 0,74-1,03mmol/L
Ph 0,8-1,3mmol/L
K+ 3,5-4,5mmol/L
Na+ 135-145mmol/L

. PROTEINE ET DÉRIVÉ VALEUR NORMALE

Protéine total 60-75g/l
Albumine 35-49g/l
Haptoglobine 1-3g/l
Transferrine 2-4g/l
Fibrinogène 2,5-4,5g/l

. DÉRIVÉS AZOTÉE NON PROTÉIQUE VALEURS NORMALE

Urée 0,1-0,5g/l
Acides urique 30-70mg/l
Ammoniniemie 0,45-0,90mg/l
Créatinine 6-13,5mg/l

. CLAIRANCE valeur normale

Clairance de l’urée 72ml/mm
Clairance de la créatinine 72-144ml/mm

. LIPIDES ET DÉRIVÉ VALEUR NORMALE

Triglycérides 4-8g/l
Cholestérol total 0,53-2,18g/L
Cholestérol libre 1,8-2,71g/l
Cholestérol estérifier 1,3-1,7g/l
Phospholipides 1,55-3,48g/l
Acides biliaire 2mg/l

. GLUCIDE ET DÉRIVÉ VALEUR NORMALE

Glucose 0,8-1,05g/l
Lactates 90-153mg/l
Pyruvates 1,32-16,72mg/l

. AUTRE VALEUR NORMALE

Bilirubine conjugué < 2mmol/L
Bilirubine total < 20 mmol/L
LDL <1,6g/l
HDL 0,35-0,8g/l
LDH 120-246µ/l

32
 ASAT HOMME : 8-30µI/L. FEMME :6-25µI/L
ALAT HOMME : 8-35µI/L. FEMME :6-25µI/L

6. LES ENVOIS

Les envois sont des examens qui sont envoyer à l’extérieur du laboratoire pour être
réaliser. Les échantillons sont prélevés au sein du laboratoire et le traitement des
échantillons se fait comme suit :
Prélèvement de l’échantillon
Centrifuger si nécessaire
Séparer l’échantillon en deux part égal. Le premier sera acheminé vers un autre laboratoire
pour analyse et le second sera conserver au LSE au cas ou si le premier échantillon rencontre
un problème
Déterminer la méthode de conservation avant l’envoie. L’échantillon peut être congeler ou
réfrigéré selon la nature du liquide biologique
Effectuer l’envoie dans les bref délai.
7. SORTIE DES RESULTAT

Lorsque tous les analyse sont effectuer, les résultats sont directement transférés de
l’automate a l’unité centrale ; si nécessaire les TBM rentrent eux même les résultats. Ensuite
les chefs de laboratoire comparent les résultats obtenus avec ceux des précédents examens
effectuer par le patient au sein de laboratoire. Si on observe une très grande différence, les
examens sont refaits pour être confirmés.
Les résultats sont ensuite validés par les TBM et les patients peuvent recevoir leurs résultats.

III. INTÉRÊT ET LIMITE

A. INTÉRÊT

Le stage nous a été bénéfique. D’une part il nous a permis de nous familiariser avec la
fonction de technologiste biomédicale car ce fut notre premier ^stage dans un laboratoire
de biologie médicale ; et d’autre part ce stage nous a permis de mettre en pratique nos
différent cours théorique appris à l’université

B. LIMITE

Ce stage au LSE a été d’un grand intérêt pour nous cependant nous notons quelques limites
D’abord le manque de réactif souvent qui nous a empêcher l’utilisation de certains appareils
Ensuite le nombre élevé de stagiaire ralentissait souvent l’apprentissage
Enfin le manque de temps car les examens proposés par le laboratoire sont nombreux et il
est difficile de tous les apprendre en un mois
CONCLUSION

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Le laboratoire Saint Elizabeth est un laboratoire d’analyse biomédical bien organiser et qui offre des
services de qualités. Les résultats sont divers et variés et les résultats sont disponibles rapidement.

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