Rapport de Stage en Biologie Clinique: Ministère de L'enseignement Supérieur Et de La Recherche Scientifique

Rapport de stage en biologie clinique ǀ Jerfel Hatem
Ministère de l’enseignement supérieur et de la recherche

scientifique
Université de Monastir
Faculté de Pharmacie de Monastir
Rapport de stage en biologie clinique
CHU Fatouma Bourguiba Monastir
Laboratoire de Biochimie – Toxicologie
Maitre de stage : Pr. Najjar Mohamed Fadhel
Réalisé par : Jerfel Hatem

Période de stage : 01/09/2021– 30/11/2021
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Sommaire
Liste des abréviations ....................................................................................................................... 4
I. Organisation générale du laboratoire .......................................................................................... 5
1) Gestion des locaux : .................................................................................................................... 5
a) Partie administrative : .............................................................................................................. 5
b) Partie technique : ..................................................................................................................... 6
c) Zones de stockage : ................................................................................................................. 7
2) Le personnel : .............................................................................................................................. 8
a) Organisation et répartition des tâches : ................................................................................... 8
b) Modalités du travail au sein du service : ..................................................................................... 9
c) La formation continue : ......................................................................................................... 10
3) Processus d’hygiène et de sécurité : .......................................................................................... 10
a) Types de risque et mesures de prévention : ......................................................................... 11
b) Gestion des déchets : ............................................................................................................. 13
4) Gestion de la documentation : ................................................................................................... 13
5) Gestion des consommables : ..................................................................................................... 15
a) Définition : ............................................................................................................................ 15
b) Approvisionnement : ............................................................................................................. 15
c) Réception des commandes : .................................................................................................. 15
d) Stockage : .............................................................................................................................. 16
e) Gestion du stock : .................................................................................................................. 16
6) Gestion des équipements : ......................................................................................................... 17
a) Approvisionnement : ............................................................................................................. 18
b) Maintenance : ........................................................................................................................ 18
II. Processus analytique et concept d’assurance qualité ........................................................... 20
1) Phase pré analytique : ................................................................................................................ 20
a) Le prélèvement : .................................................................................................................... 20
b) Les différents types d’échantillons : ...................................................................................... 21
c) Les tubes de prélèvement : .................................................................................................... 21
d) Acheminement : .................................................................................................................... 22
e) Saisie et tri : ........................................................................................................................... 22
f) Identification de l’échantillon et analyse réglementaire : ...................................................... 22
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g) Traitement des échantillons avant analyse : .......................................................................... 23

h) Conservation :........................................................................................................................ 23
2) Phase analytique : ...................................................................................................................... 23
a) Choix de la technique : .......................................................................................................... 24
b) Contrôle de qualité : .............................................................................................................. 24
3) Phase post analytique : .............................................................................................................. 29
a) Validation : ............................................................................................................................ 29
b) Présentation des résultats :..................................................................................................... 30
c) Transmission des résultats : ................................................................................................... 30
d) Les équipements : .................................................................................................................. 31
e) Les principales analyses et leurs méthodes de dosage : ........................................................ 33
III. Etude des cas cliniques ............................................................................................................ 36
Cas n°1 : Myélome multiple ............................................................................................................. 36
Cas n°2 : Méningite bactérienne ....................................................................................................... 42
Cas n° 3 : Insuffisance rénale décompensée ..................................................................................... 45
Cas n° 4 : Pancréatite aiguë .............................................................................................................. 49
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Liste des abréviations
- ALAT : Alanine Amino Transférase

- ASAT : Aspartate Amino Transférase
- AEG : Altération de l’Etat Général
- BC : Bilirubine Conjuguée
- β HCG : β Human Chorionic Gonadotropin
- BNP : Brain Natriuretic Peptide
- BPR : Ponction Biopsie Rénale
- BU : Bandelette Urinaire
- CAT : Conduite A Tenir
- CK : Créatine Kinase
- CRP : C-Reactive Protein
- EDTA : Ethylenediaminetetraacetic acide
- EPP : ElectroPhorèse des Protéines
- LDH : Lactate Déshydrogénase
- PAL : Phosphatase Alcaline
- PU : Protéinurie
- TCMH : Teneur Corpusculaire Moyenne en Hémoglobine
- TDM : TomoDensitoMétrie
- UI : Unité Internationale
- VGM : Volume Globulaire Moyen
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I. Organisation générale du laboratoire
1) Gestion des locaux :
Le laboratoire de biochimie-toxicologie de l’hôpital Fattouma Bourguiba de Monastir comporte

plusieurs unités bien organisées de sorte que toutes les activités qui y sont pratiquées soient
adéquatement organisées contribuant ainsi au bon fonctionnement du laboratoire
a) Partie administrative :
 Salle de réception :
Réservée à la réception des échantillons pour les analyses biochimiques ou toxicologiques et à

la distribution des rapports des résultats des analyses effectuées au laboratoire.
o Réception des échantillons à analyser :
Les échantillons sont déposés au guichet, le plus souvent par le personnel des différents services
de l’hôpital ou par un personnel de la salle de prélèvement qui achemine les échantillons vers
le laboratoire.
Cette tâche veille à :
- Vérifier la conformité des informations inscrites sur la demande d’analyse avec celles
indiquées sur le ou les tubes de prélèvements correspondants, à savoir : la ou les analyses,
le matricule, le service, le nom et le prénom
- Trier les échantillons selon leur destination :
 Analyses en urgences
 Analyses de routine : - Services internes
- Consultations externes
 Analyses spécifiques
Ces échantillons sont ensuite adressés à la salle de saisie.
o Distribution des résultats des analyses :

Les rapports des résultats des analyses effectuées sont délivrés selon l’organisation suivante :
- Les résultats des analyses des patients admis dans les services cliniques du CHU sont
distribués dans des casiers correspondants chacun à un service. Ces casiers sont accessibles aux
personnes chargées de la récupération des résultats des analyses.
- Les résultats des analyses des patients consultant à titre externe sont également distribués dans
des casiers placés de sorte qu’ils ne soient qu’à la portée du personnel du service.
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 Salle de saisie :
Dans cette salle, les informations relatives au patient tel que son matricule, son nom et prénom,
le bilan d’analyses à effectuer et les services sont saisis moyennant un système d’informatique
permettant d’attribuer un code à barres à chaque échantillon afin d’assurer l’identification et la
traçabilité de l’analyse de la réception jusqu’au rendu des résultats.
À partir de la salle de saisie, chaque échantillon identifié est adressé ensuite aux différentes
salles d'analyse.
 Des bureaux nominatifs : pour les personnes régissant le service : le chef de service, les
professeurs, la surveillante et la secrétaire.
 Une salle de réunion : qui est aussi la salle de garde pour les résidents.
 Des vestiaires : munis de casiers fermant à clés, réservés au personnel
 Espaces sanitaires
b) Partie technique :
Plusieurs salles sont destinées à la réalisation des analyses et elles sont classées selon la nature
des paramètres demandés et l’origine des demandes d’analyses :
Salle des urgences (Salle N°1)
C’est la salle des analyses urgentes réservée aux :
- Dosage de la troponine cardiaque, de la β-HCG, de l’hormone de croissance (GH), de la

progestérone, du peptide natriurétique B (BNP) effectués sur AIA 360™
- Analyse des gaz du sang effectué sur GEM 3500TM.
- Ces analyses sont demandées lorsque le pronostic vital du patient est mis en jeu et
permettent, grâce aux résultats qui seront disponibles généralement dans les 30 minutes
à 2 heures qui suivent la réception des analyses, d’orienter la prise en charge du patient.
Salles des analyses de routine (Salles N°2 et N°3)
Où sont effectués tous les bilans chimiques et hormonaux des différents liquides biologiques
(sang, LCR, urine, liquide de ponction) qui sont demandés soit par les services d’urgence et
les services internes de l’hôpital pour des malades hospitalisés ou bien par des personnels de
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ces services, soit par les consultations externes de l’hôpital ou provenant d’autres
établissements de santé du gouvernorat de Monastir. Ces analyses sont effectuées sur deux
automates COBAS 6000™.
Salle des paramètres spécifiques
Réservée aux :
- EPP sériques, urinaires, du LCR et de l’hémoglobine ainsi que l’immuno-typage des

immunoglobulines (Ig) sur CAPILLARYS 3 OCTA™ et CAPILLARYS 2™.
- Dosage de l’HbA1c sur ADAMS A1C™.
- Recherche des protéines de Bence-Jones dans les urines par immunofixation.
Salle de toxicologie
C’est une unité indépendante réservée à certaines analyses toxicologiques telles que :
- Le dosage de l’alcoolémie
- Le dosage de certains toxiques et drogues
- Le dosage de certains psychotropes
c) Zones de stockage :
- Une salle de dépôt dans laquelle on place les consommables tels que les tubes à essai, les
embouts des micropipettes, les gants jetables…
- Trois congélateurs à -20°C pour le stockage et la conservation des pools de sérum ou des
échantillons de prélèvement devant être conservés plus d’une semaine.
- Un congélateur à -80°C pour la conservation des échantillons à longue durée.
- Des réfrigérateurs munis d’un thermomètre dont la température est contrôlée trois fois par jour
(température entre 2-8°C). On y stocke les réactifs, les échantillons traités, les solutions
d’étalonnage correspondant à chaque automate.
- Une chambre froide à fermeture étanche et à température située entre 2 et 8°C dans laquelle
sont stockés les coffrets de réactifs.
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2) Le personnel :
a) Organisation et répartition des tâches :
Fonction Attributions
Il gère la direction du laboratoire et supervise le bon déroulement

du travail. Il assure :
-Encadrement des résidents, internes et stagiaires.

Le chef de service
-Interprétation des bilans et validation biologique
-Gestion des ressources humaines.
-Participation à la recherche scientifique.
-Appels d’offre auprès des fournisseurs.
Les professeurs hospitalo- -Participe à la recherche scientifique et à l’enseignement.

universitaires -Encadrement des résidents et des internes
-Mise au point des techniques
-Avis scientifique et biologique
-Réalisation des travaux de recherches
-Validation biologique des résultats
-Réalisation des analyses
Les résidents -Contrôle qualité des appareils et leur étalonnage
-Apprentissage et formation théorique
-Interprétation des bilans et validation biologique sous le contrôle

des biologistes et du chef de service
-Travaux de recherche
Les internes -Initiation à l’exercice de la profession de biologiste clinicien
-Formation théorique et pratique sous le contrôle des résidents et

des biologistes
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-Gestion des ressources humaines : tableaux de garde, congés,

roulements.
Le surveillant
-Gestion du stock des réactifs, des consommables ainsi que tout
produit ou dispositif indispensable pour le fonctionnement du
laboratoire et son hygiène
-Inventaire de tous les produits
-Approvisionnement régulier des différentes salles du laboratoire

en consommables et réactifs.
Les techniciens -Réception, tri et vérification de la concordance entre l’échantillon

et la demande.
-Réalisation des analyses demandées.
-Validation technique.
La secrétaire -Elle est responsable de la mise en forme des documents utilisés et

établis par le laboratoire.
Les ouvriers -Ils assurent le transport des consommables et des courriers.
-Ils assurent l’hygiène et l’entretien de tous les locaux par leurs

nettoyages et leurs désinfections.
b) Modalités du travail au sein du service :
Le travail au sein du service dure 24h sur 24 et 7 jours sur 7. Pour assurer une bonne continuité
du travail et un bon rendement du personnel, une répartition adéquate est fixée par le chef du
service :
 Une première équipe du matin ; constituée par la majorité du personnel (7h-13h30min ou
8h-14h30min)
 Une deuxième équipe de l’après-midi constituée par deux techniciens, un interne et un
résident de garde (12h30min-19h)
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 Une troisième équipe de nuit pour assurer la veille, constituée également par deux
techniciens et le résident de garde (19h-7h)
c) La formation continue :
C’est un programme de formation qui apporte aux personnels des mises à jour dans un
domaine particulier.
Cette formation permet la révision des connaissances déjà acquises ainsi que la maitrise de
nouvelles connaissances en cas d’introduction de nouvelles techniques au sein du laboratoire.
Pour tout nouveau matériel, le laboratoire exige dans le contrat d’achat une formation initiale
du personnel pour le nouvel appareillage.
Pour les manipulations à haut risque de contamination, le technicien bénéficie d'une formation
spéciale assurée par le service d'hygiène.
Concernant les nouveautés scientifiques et techniques, le laboratoire offre une participation
constante dans la majorité des séminaires et congrès
3) Processus d’hygiène et de sécurité :
La manipulation des produits biologiques d'origine humaine et des produits chimiques constitue
un danger pour le personnel du laboratoire et pour l'environnement.
La mise en place des mesures de protection et de prévention adaptées, des règles de bonnes
pratiques, vise à limiter ces risques. Ces règles et mesures doivent être bien connues et
parfaitement respectées, pas trop contraignantes et économiquement acceptables.
Donc tout laboratoire de biologie doit obéir à des règles d’hygiène et de sécurité pour assurer
la sécurité du personnel et ceci selon le Guide de Bonnes Pratiques de Laboratoire (GBPL).
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a) Types de risque et mesures de prévention :
Types de risque Description Mesures de prévention
Biologique Le risque biologique est - Le port de vêtements de protection :

blouse, gants jetables et dans certains
défini comme étant le résultat
cas port de masque et des lunettes.
d’une exposition à des micro-
- Le lavage fréquent des mains.
organismes susceptibles de
- L’application des règles
provoquer une infection, une
universelles de sécurité à tous les
allergie ou une intoxication stades d’acheminement des liquides
biologiques.
qui peut entrainer des
maladies professionnelles. Il - Le respect des règles de bonnes
pratiques tel que l’interdiction du
est essentiellement lié à la pipetage à la bouche.
manipulation de produits - L'utilisation de matériel à usage
biologiques. unique, précaution dans la
manipulation des aiguilles et
seringues souillées et dans
l’utilisation des centrifugeuses.
- La surveillance de la santé du
personnel : vaccinations à jour et
visites régulières à la médecine de
travail.
- L'élimination des déchets à risque
infectieux conformément à la
procédure de gestion des déchets.
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Chimique Ce risque est lié aux - Informer et former le personnel

propriétés physico-chimiques - Respecter les règles d’hygiène et de
des réactifs (instabilité, sécurité
inflammabilité, corrosivité) à - Identifier, étiqueter et stocker les

produits de manière adéquate
l’origine d’incendies voire
d’explosions souvent - Limiter la quantité de produit
utilisé
accompagnés de rejets gazeux
- Limiter le nombre de personnes
toxiques. exposées ou susceptibles de l’être
- Limiter la durée et l’intensité de
l’exposition
- Mettre à disposition les matériels
adéquats
- Concevoir des méthodes et
procédures de travaux adaptés
- Utiliser des systèmes de ventilation
et de captage efficaces et
régulièrement contrôlés
- Maintenir les espaces de travail
propres, rangés et non encombrés
- Gérer les déchets chimiques
Incendie Le déclenchement d'un - Aération, climatisation et contrôle

régulier de la température des
incendie dans un laboratoire
différentes salles
peut être causé par différents
- Installation de détecteurs et
moyens : installation extincteurs
électrique défectueuse,
 la conduite à tenir en cas
appareillage électriquement d'incendie (téléphoner au 198,
fermer les vannes de gaz, couper
défaillant, substances
l'électricité générale, utiliser les
inflammables, manque couvertures anti-feu et les
extincteurs...)
d'aération et de
climatisation...
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b) Gestion des déchets :

Les déchets sont classés en plusieurs catégories :
 Les déchets biologiques :
Déchets biologiques perforants ou contendants : (exemple : aiguilles, embouts de

pipettes) éliminés dans des conteneurs en plastique de couleur jaune remplis par de l'eau
de javel et fermé d'une manière étanche par un couvercle rouge (RIGIBOX)
Déchets biologiques non perforants :(exemple : tubes, gants, bouchons …) éliminés

dans des sacs en plastique jaunes.
 Les déchets non biologiques : (Sacs, papiers ...) sont éliminés dans des sacs en
plastique noirs.
 Les déchets liquides : (Solvants, liquides de nettoyage des appareils …) éliminés ainsi
dans les sacs en plastique jaunes.
 Après collecte des déchets, le service d’hygiène se chargera de leur récupération
4) Gestion de la documentation :
La documentation permet de :
- Assurer la reproductibilité et la transmission de l’information
- Constituer une base de données
- Traçabilité
Les documents comportent :
 Les documents techniques :
- Les manuels et les guides d’utilisation des appareils
- Les fiches d’instructions, d’utilisation et d’entretien des appareils
- Les fiches de maintenance, les catalogues des appareils et des réactifs
- Les notices des réactifs, des étalons et des échantillons de contrôle
- Les procédures opératoires pour les analyses pratiquées
- Des formulaires pour les résultats des analyses
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 Les documents d’enregistrement : Ce type de document constitue le pilier du concept de la

traçabilité. Parmi ces documents, on distingue :
- Les feuilles de demande des analyses biologiques : Elles doivent préciser :
• La date.
• Le service demandeur de l’analyse.
• Le nom et prénom du patient.
• Le matricule pour les patients internes ou numéro d’enregistrement pour les
demandes externes.
• Cachet et signature du médecin demandeur.
• Des renseignements cliniques justifiant la demande d’analyse et orientant le
diagnostic et l’interprétation des résultats.
• Les examens demandés.
- Les feuilles de résultats : Comptes rendus des analyses comportant :
• L’identification du laboratoire.
• L’identification du malade.
• La date de demande de l’analyse ainsi que celle d’émission du résultat.
• Le service demandeur de l’analyse (si interne).
• La nature de l’analyse et les résultats.
• La signature du responsable (biologiste ou résident).
• Le numéro d’enregistrement.
• Les résultats du patient et les intervalles de référence.
- Une lettre explicative par rapport au motif de la demande de certaines analyses : (dosage
des troponines, du BNP, de la ß HCG, de la ß2microglobuline, toutes les demandes de
l’électrophorèse et des dosages des marqueurs tumoraux…)
- Les cahiers d’archivage des résultats : dans lesquels sont enregistrées quotidiennement les
données des patients avec les résultats des analyses correspondantes. On distingue :
• Le cahier des résultats de dosage des troponines, du BNP, de la ßHCG, de la
ß2-micro globuline et du GH.
• Le cahier des résultats de l’électrophorèse des protéines.
• Le cahier des résultats de dosage de certaines protéines spécifiques
(Haptoglobine, protéine de Bence Jones)
• Le cahier de l’immunotypage des protéines.
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5) Gestion des consommables :

a) Définition :
Les consommables sont tous les produits nécessaires à la réalisation des analyses mis à part des
automates et équipements.
Exemples : réactifs, tubes, embouts, gants…
Tout en sachant que le réactif peut être présenté sous forme d’un kit prêt à l’emploi comme il
peut nécessiter une préparation préalable
La gestion des consommables est assurée par la surveillante, visée par le chef de service.
b) Approvisionnement :
Le laboratoire détermine chaque année les prévisions des besoins. Le choix du fournisseur se
fait soit par consultation soit par la voie d’appel d’offres selon la procédure suivante :
- Définition des spécifications et préparation du cahier de charge.

- Lancement de l’appel d’offre sur le site national obligatoirement
- Ouverture des plis et dépouillement technique et financier.
- Choix et contrôle du moins disant.
- Choix définitif.
- Commande du matériel auprès du fournisseur retenu.
Il faut noter que l’approvisionnement de certains réactifs se fait obligatoirement auprès du

même fournisseur qui a mis à disposition l’appareil utilisant ces réactifs.
Les dispositifs médicaux et certains solvants ou réactifs sont approvisionnés auprès de la

pharmacie hospitalière. Dans ce cas, le laboratoire établit un bon de commande auprès de la
pharmacie.
c) Réception des commandes :
Il faut toujours vérifier les bons de livraison et s’assurer de leur conformité avec les bons de
commande et avec les produits livrés (quantité, intégrité contenu-contenant, date de péremption,
numéro de lot).
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d) Stockage :
Ils sont conservés selon les recommandations du fabriquant soit :

- A température ambiante.
- Au réfrigérateur (pour la majorité des réactifs, conservation entre +2 et +8°C)
Le stockage est fait selon la règle FEFO (First Expired First Out).
Les produits chimiques présentant un caractère toxique et/ou dangereux doivent porter des
mentions permettant la connaissance du danger lors de la manipulation.
On approvisionne chaque salle selon les automates qui s’y trouvent et les bilans qui y sont
pratiqués, d’un stock minimal de consommables pour assurer la continuité du travail. Ceci
tout en respectant les règles de stockage.
e) Gestion du stock :
Elle est assurée par la surveillante qui se charge de noter les entrées, les sorties et la date de
péremption pour chaque produit sur un registre. Toutes ces informations sont remises à jour à
chaque entrée ou sortie par la surveillante qui doit délivrer personnellement tous les réactifs et
les produits.
Cette gestion est complétée par les inventaires ; un inventaire annuel qui fait partie de
l’inventaire général de l’hôpital.
Pour chaque produit on définit un stock d’alerte : c’est la quantité minimale qui nécessite un
réapprovisionnement afin d’éviter la rupture d’un produit donné.
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6) Gestion des équipements :

Le laboratoire de biochimie dispose d’équipements adéquats et spécifiques aux analyses qui y
sont effectuées, afin d’assurer la qualité de ses prestations. Ce matériel est manipulé par un
personnel formé et autorisé, dans le respect des instructions d’utilisation, de sécurité et de
maintenance.
Emergence
d'un besoin
Reforme Analyse des

besoins
Etalonnage et Achat
vérification
Maintenance Approvisionnement
Suivi Reception
Mise en
Utilisation service
Edition des
documents pertinents
Figure : Cycle de vie d’un équipement dans le service de biochimie
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a) Approvisionnement :
La passation des commandes sur les marchés publics (achat ou mise à disposition) se fait suite
à des appels d’offre ou des consultations, garantissant l’équivalence des chances et la
transparence des procédures.
Critères d’achat de matériel :
• Le coût de l’appareil, de l’installation, du fonctionnement, des consommables et de la

maintenance.
• Disponibilité des accessoires
• Le service après-vente
• La performance : robustesse, performance analytique
• L’utilisation des méthodes de dosages validées et standardisées
• L’adaptabilité au débit du travail
• Simplicité de manipulation et d’entretien
A la réception d’un nouvel équipement :
• Vérification de son intégrité (présence de toutes les pièces mentionnées dans le cahier
de charge) et de son fonctionnement
• Qualification : de l’installation, opérationnelle et des performances
• Mise en place
• Formation du personnel assurée par le fournisseur
b) Maintenance :
C’est l’ensemble des actions permettant de maintenir ou de rétablir un bien dans un état spécifié
ou en mesure d’assurer un service déterminé.
Tous les appareils sont donc périodiquement et efficacement inspectés, nettoyés, entretenus et
vérifiés selon la procédure opératoire en vigueur.
Les objectifs visés par la maintenance sont :
 Accroître la durée de vie des équipements
 Améliorer la performance des équipements
 Réduire la survenue et les coûts de défaillance
 Eviter l’arrêt du cycle de travail
 Garantie de la sécurité optimale des utilisateurs et des équipements
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On distingue :
 Maintenance en interne : Réalisée par le technicien travaillant sur l’appareil (maintenance

quotidienne, hebdomadaire ou mensuelle) : elle est effectuée rigoureusement selon les
instructions du fabricant et en fonction des fiches techniques pour chaque automate.
 Maintenance en externe : Réalisée par les techniciens du fournisseur et enregistrée sur un

bon d’intervention
 Gestion des pannes :
- Si une panne apparait et qui dépasse les connaissances du personnel, on fait appel au service
de maintenance de l’hôpital et en cas de besoin, au service après-vente du fournisseur.
- Lorsqu’un dysfonctionnement majeur est signalé sur un appareil, et que le délai

d’intervention devient incompatible avec la durée de conservation des échantillons et/ou le
degré de réalisation des analyses, une solution de suppléance sera ainsi mise en place.
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II. Processus analytique et concept d’assurance qualité
1) Phase pré analytique :
a) Le prélèvement :
Les prélèvements sont effectués au niveau de l’unité de prélèvement externe, dans les services
d’hospitalisation et dans les urgences.
Avant tout prélèvement, il faut :
- Vérifier l’identité du patient

- La préparation du patient : un climat de confiance doit être établi.
- Il faut savoir différencier pour chaque type d’analyse le tube à utiliser
- Informer le patient sur les règles à suivre :
 A jeun depuis 8h (glycémie, épreuve d'hyperglycémie provoquée par voie orale…)
 A jeun depuis 12h (bilan lipidique)
 A heure précise : glycémie post prandiale (1h30 à 2h après repas)
 Pour le cortisol, le prélèvement doit être effectué à 8h du matin chez un patient
étant couché depuis au moins 8h.
- Choix du récipient et son étiquetage (Nom et prénom du malade, Numéro
d’enregistrement du tube)
- Préparation du matériel nécessaire : l’antiseptique, coton, gants, pansement, aiguille, tube,
garrot…
Le préleveur doit également respecter les règles de bonnes pratiques de prélèvement :
- Le garrot ne doit être ni trop serré ni laissé trop longtemps

- Respect de l’ordre de prélèvement des tubes
- Le niveau de remplissage des tubes et le ratio sang/additif doivent être respectés pour
éviter les interférences et la coagulation du sang
- L’homogénéisation des tubes après le prélèvement est primordiale par 6 à 8 retournements
lents et ceci pour assurer une action complète de l’anticoagulant et éviter le phénomène
d’hémolyse
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b) Les différents types d’échantillons :

- Sang veineux ou artériel
- Sérum (prélèvement sans anti coagulant) ou plasma (prélèvement sur anti coagulant)
- Urines (du réveil ou de 24h)
- LCR (liquide céphalo rachidien),
- Liquides de ponction : liquide d’ascite, liquide pleural.
 La qualité du prélèvement conditionne toute l’analyse.
Le bon d’analyse doit comporter les informations relatives au patient, la prescription ainsi que
les renseignements cliniques.
Les données suivantes doivent figurer sur ce bon :
 Le service clinique
 Nom et prénom du patient
 Date de prescription
 Matricule du patient (si hospitalisé) ou le numéro de soins (si patient en consultation
externe)
 Les analyses à réaliser
 Nom et cachet du médecin prescripteur
c) Les tubes de prélèvement :

Le code couleur (bouchon et étiquette colorés) facilite l’identification du type du tube de
prélèvement, de l’additif et des analyses pouvant être réalisées à partir du tube utilisé.
Couleur du bouchon du Anticoagulant Analyses à faire
tube utilisé
Verte Héparinate de La majorité des examens biochimiques :
lithium Ionogramme, urée, créatinine, bilan hépatique,
bilan lipidique, lactate, glycémie ...
Violette EDTA tri Hémoglobine glyquée, BNP, électrophorèse de
potassique l’hémoglobine
Rouge ou Blanche Sans Electrophorèse des protéines, marqueurs

anticoagulant tumoraux (PSA, CA125 ...)
(Tube sec)
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Autres prélèvements :
Crachoir stérile : Pour les analyses des urines, du LCR et les autres liquides de ponctions
Seringue héparinée : Pour les analyses des gaz de sang sur prélèvement de sang artériel ou
veineux
d) Acheminement :
Les prélèvements doivent être acheminés au laboratoire dans un délai bref tout en respectant
les conditions de stabilité des échantillons qui dépend de la nature du paramètre à analyser
Exemple : Pour le dosage des lactates le tube doit être immergé dans l’eau glacée depuis le
prélèvement jusqu’à la pratique de l’analyse
e) Saisie et tri :
- Vérifier la concordance entre le bon d’analyse et la nature du prélèvement.
- Trier les demandes d’analyse par type d’analyse (analyses en urgence, analyses des services
internes et celles des consultations externes)
f) Identification de l’échantillon et analyse réglementaire :
- Vérification de la conformité des informations portées sur le tube et celles sur la demande
d’analyse (nom, prénom, matricule …)
- Vérification de la date
- Service demandeur
- Cachet et signature du médecin prescripteur
- Numéro d’enregistrement pour les patients externes
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g) Traitement des échantillons avant analyse :
Pour la majorité des analyses, une centrifugation préalable du prélèvement doit être effectué.
La centrifugation est réalisée généralement à 4000 tours /minutes pendant 10 minutes.
Pour les tubes destinés à l’électrophorèse des protéines sériques (EPP), une première
centrifugation est réalisée sur le sang total puis une deuxième sur le sérum pour éliminer les
micro-caillots de fibrine car les capillaires de l’automate sont très fins.
Il y a certaines analyses qui se font sur sang total telles que le dosage de l’hémoglobine glyquée.
h) Conservation :
Cette étape concerne les analyses qui se font par série (EPP) ou encore en cas de manque de
réactif ou une panne quelconque affectant le fonctionnement d’un appareil.
Ainsi les échantillons des patients doivent être conservés dans des conditions qui préservent
leurs qualités analytiques après centrifugation et décantation dans :
- Le réfrigérateur si la durée de conservation ne dépasse pas une semaine
- Le congélateur si la durée de conservation pourrait se prolonger jusqu’à un mois
2) Phase analytique :
C’est la phase de la réalisation proprement dite de l’analyse demandée
A la réception des échantillons avec les demandes d’analyses au niveau de sa paillasse, le

personnel chargé de sa réalisation procède par :
- Vérification de la qualité des échantillons reçus : échantillon non hémolysé, quantité

suffisante, absence de caillot de fibrine ou de coagulation
- Vérification de la conformité de l’identification mentionnée sur le tube de prélèvement
aux données sur le document de la demande d’analyse
Remarque : Quelque soit l’erreur ou la non-conformité détectée, l’information doit être

communiquée au demandeur de l’analyse pour la rectifier.
2
3
a) Choix de la technique :
Pour chaque paramètre dosé, il existe une multitude de méthodes de dosage, mais il faut
choisir la technique la plus fiable (précise, exacte, spécifique) et reconnue par les sociétés
savantes tout en tenant compte des possibilités mises à la disposition du laboratoire (différents
appareillages et différents réactifs présents).
Avant de réaliser le dosage, il faut :
 Faire la maintenance correspondante et exigée pour chaque automate

 Vérifier l’état des réactifs, préparer et mettre en place de nouveaux réactifs si nécessaire
 Faire des étalonnages pour chaque nouveau réactif
 Faire le contrôle de qualité (Deux contrôles : Un contrôle normal et un contrôle
pathologique)
 Refaire l’étalonnage dans le cas où le contrôle de qualité donne des résultats inacceptables
b) Contrôle de qualité :
- Il s’agit d’un processus systématique documenté en vue d’obtenir des preuves de contrôle
et de les évaluer de manière objective pour déterminer dans quelle mesure les critères de
contrôle sont satisfaits.
- Afin d’assurer la qualité, le laboratoire doit suivre un système de deux types :
Contrôle interne de qualité :
 Le contrôle interne de qualité (CIQ) permet de reconnaitre les anomalies et les non
conformités analytiques afin d’y remédier immédiatement. Il consiste à faire passer dans
les séries d’analyses des échantillons de contrôle titrés et obligatoirement traités dans les
mêmes conditions que les échantillons des patients.
 En pratique, il s’agit d’un contrôle quotidien réalisé avant chaque série d’analyse
 On utilise quotidiennement deux échantillons de contrôle : un contrôle normal et un
contrôle pathologique.
 Ces contrôles sont des pools de sérums collectés et présentés sous forme lyophilisée. On
prépare une quantité suffisante pour plusieurs jours ; cette dernière est conservée au
congélateur.
 Lors de la réalisation d’un contrôle de qualité, on décongèlera un tube de contrôle normal
et un tube de contrôle pathologique.
 À chaque fois qu’on change de lot, on doit l’enregistrer afin d’assurer sa traçabilité.
2
4
 Il concerne tous les paramètres dosés au sein du laboratoire et surtout ceux qui sont les
plus fréquemment demandés. Pour les paramètres rarement demandés, il convient
d’effectuer un contrôle uniquement avant de pratiquer l’analyse en question.
 Les résultats des contrôles normal et pathologique sont affichés sous forme de graphique
et interprétés selon des intervalles mises en évidence par la carte de Levey – Jennings
présentée ci-dessous :
Règles de Westgard :
Règle 12s : 1 mesure entre ± 2s et ± 3s
Cette règle est considérée comme un avertissement et non pas comme un critère de rejet d’une
série. Elle est violée lorsqu’un résultat de CQI se situe entre le seuil d’avertissement et le seuil
d’alarme
46 +3s
45 +2s
44 +1s
Cible 43
42 -1s
41 -2s
40 3s
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Action :
 Les résultats des échantillons de patients peuvent être utilisés.
 Continuer la série en surveillant le déroulement du contrôle qui doit être répété le cas échéant
2
5
Règle 22s : 2 mesures consécutives entre ± 2s et ± 3s
Cette règle détecte uniquement les erreurs systématiques. Elle est violée lorsque deux résultats
de CQI consécutifs sont compris entre le seuil d’avertissement et le seuil d’alarme, du même
côté de la cible.
46 +3s
45 +2s
44 +1s
Cible 43
42 -1s
41 -2s
40 -3s
.
Action :
 Les résultats de CQI sont non conformes et les résultats des échantillons de patients sont à rejeter.
 Il faut rechercher et corriger la source d’erreur et répéter toute la série de mesurages
Règle 13s : 1 mesure > ± 3s

Cette règle détecte les erreurs aléatoires. Elle est violée lorsqu’un seul résultat de CQI se situe
en dehors des limites du seuil d’alarme.
+3s
+2s
+1s
-1s
-2s
-3s
Action :
 A rejeter. Le résultat de CQI est non conforme, les résultats des échantillons de patients sont inacceptables.
 Il faut rechercher et corriger la source d’erreur et répéter toute la série de mesurages.
2
6
Règle R4s : 2 mesures consécutives espacées de > 4s

Cette règle détecte les erreurs aléatoires trop importantes. Elle est violée lorsque deux résultats
de CQI consécutifs sont espacés de plus de 4s. Les deux résultats de CQI successifs se situent
donc de part et d’autre de la valeur cible.
46 +3s
45 +2s
44 +1s
Cible 43
42 -1s
41 -2s
40 -3s
Action :
 Les résultats de CQI sont non conformes, les résultats des échantillons de patients sont à rejeter.
 Il faut rechercher et corriger la source d’erreur et répéter toute la série de mesurages.
Règle 41s : 4 mesures consécutives > ± 1s

Cette règle détecte les erreurs systématiques, même de faibles importances. Elle est violée
lorsque quatre résultats de CQI consécutifs sont au-dessus de +1s ou en dessous de -1s.
46 +3s
45 +2s
44 +1s
Cible 43
42 -1s
41 -2s
40 -3s
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Action :
 Il faut rechercher et corriger la source d’erreur (souvent problème d’étalonnage)
2
7
Règle 10x : 10 mesures consécutives du même côté de la cible

Cette règle détecte les erreurs systématiques, même de très faibles importances, et nécessite une
validation précise de la valeur cible. Elle est violée lorsque dix résultats consécutifs de CQI sont
situés du même côté de la cible.
46 +3s
45 +2s
44 +1s
Cible 43
42 -1s
41 -2s
40 -3s
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Action :
 Il faut rechercher et corriger la source d’erreur (souvent problème d’étalonnage)
Autres actions correctives :
 Il faut vérifier le réactif (aspect, date de péremption, condition de stockage et de

préparation)
 Il faut vérifier l’étalon (N° de lot, date de péremption, stockage et concentration)
 Il faut vérifier le contrôle (N° de lot, date de péremption, condition de préparation et de
stockage), l’analyseur (système de prélèvement, processus de nettoyage, propriétés des
cuves, système de mesure)
Contrôle externe de qualité :
Il permet la détermination des performances d’un laboratoire par comparaison inter-

laboratoires. En effet, il s’agit d’une procédure utilisant les résultats de plusieurs laboratoires
qui analysent le même échantillon, et ceci pour les évaluer en les comparant. Cette évaluation
se fait dans le but de motiver des actions correctives quand ceci s’avère nécessaire.
Chaque année, le laboratoire reçoit des échantillons provenant du ministère de la santé qui
doivent être analysés dans les mêmes conditions que les échantillons des patients.
Après l’envoi des résultats, on reçoit des comptes rendus individuels et le compte rendu de
l’évaluation globale. Les résultats de cette évaluation sont conservés pendant cinq ans.
 C’est le contrôle national obligatoire et gratuit
2
8
Chaque laboratoire peut également participer à une évaluation externe de la qualité avec un
organisme extérieur lui permettant de se positionner par rapport aux autres participants.
Ce contrôle permet au laboratoire de se contrôler, de vérifier l’exactitude de ses résultats sur le

plan international et de déceler les non conformités s’il y en a pour pouvoir les traiter.
 Ce type de contrôle n’est pas obligatoire mais recommandé et il n’est pas gratuit, mais il est
souhaitable
3) Phase post analytique :
a) Validation :
 La validation technique des résultats :

Elle est effectuée par le personnel de paillasse sous la responsabilité du biologiste, et ceci
après avoir vérifié les indicateurs du bon fonctionnement de l’équipement et après vérification
des résultats de contrôle de qualité interne. Elle consiste à la vérification des valeurs qui sont
trop faibles ou trop élevées par rapport aux valeurs acceptables.
 Validation biologique des résultats :

Elle sert à la vérification de la compatibilité des résultats de l’ensemble des analyses
pratiquées pour un même patient et c’est seul le biologiste ou le résident en biologie qui est
autorisé à faire cette validation. Ces responsables peuvent ajouter des commentaires en cas de
besoin permettant de faciliter l’interprétation des résultats et dans certains cas demander des
contrôles de certains résultats moyennant un autre prélèvement.
2
9
b) Présentation des résultats :
Le compte rendu d’analyse après validation comporte :
 L’identification du laboratoire
 La référence de la demande et la catégorie de l'analyse (routine, urgence,)
 Le service clinique demandeur de l’analyse
 L’identité du patient (nom, prénom, matricule, numéro de soins ou numéro du reçu)
 Les résultats des analyses en unité système international.
 Les valeurs usuelles de référence
 La date d'édition du bilan
 Nom, prénom et signature de biologiste ou du résident.
c) Transmission des résultats :
- Tous les bilans sont imprimés et mis dans les casiers correspondants à chaque service pour
les malades hospitalisés et ceci pour faciliter leur récupération par le personnel concerné.
- Pour les patients externes, les résultats sont mis et organisés dans des cases à part dans la
réception du laboratoire pour faciliter la distribution des résultats aux patients et aux
personnels des consultations externes par les agents travaillant dans la réception.
3
0
d) Les équipements :
Les différents équipements du laboratoire de biochimie sont représentés selon les salles dans
les tableaux ci-dessous :
 Salle d’urgence :
Automate/Analyseur Analyses
GEM 3500™ Gaz du sang
AIA 360™ Troponine, BNP, β2microglobuline, GH,

βHCG…
 Salles des analyses de routine :

Automate Analyses
Cobas 6000™ (Roche) Module 501c : Ionogramme, CRP, bilan hépatique, bilan
lipidique, bilan rénal, bilan martial, urée, glycémie ...
Module 601e : Dosage hormonal (TSH, FT4...),

marqueurs tumoraux (CA19-9, CA 125, PSA …) …
Cobas Integra 400 plus™ Ammoniaque, protéines urinaires...
3
1
 Salle des paramètres spécifiques :

Automate Analyses
Adams A1C™ Dosage de l’HbA1c
Capillarys 3 Octa™ Electrophorèses des protéines sériques, de

l’hémoglobine et des protéines urinaires.
Immuno- typage des immunoglobulines
Capillarys 2™
3
2
e) Les principales analyses et leurs méthodes de dosage :
Paramètres Produit biologique Méthode de dosage
Calcium Plasma hépariné, Méthode Colorimétrique à 340

urine de 24h nm
Phosphore Plasma hépariné, Phospho-molybdate à 340 nm

urine de 24h en milieu acide
Electrolytes
Fer Plasma hépariné Méthode colorimétrique à la
ferrozine
Sodium Plasma hépariné, Méthode électrochimique :

urine de 24h Potentiométrie indirecte
Potassium
Chlorure
Amylase Plasma hépariné Méthode cinétique dans le

visible 405nm
Phosphatase
alcaline
Gamma-glutamyl-
Enzymes
transférase
Lipase Plasma hépariné Méthode colorimétrique
ASAT Plasma hépariné Méthode cinétique dans l’UV

340nm
ALAT
LDH
CK
3
3
Glucose Plasma hépariné, Méthode enzymatique

(hexokinase)
LCR, Urine
Créatinine Plasma hépariné, Méthode enzymatique en deux

Urine points
Urée Plasma hépariné, Méthode enzymatique à

Urine l’uréase dans l’UV
Acide urique Plasma hépariné Méthode colorimétrique

enzymatique à l’uricase
Bilirubine Plasma hépariné Méthode colorimétrique en

milieu acide en présence de
dichloro-3.5benzene diazonium
Substrats
CRP Plasma hépariné Immuno-turbidimétrie
et
Lactate Plasma hépariné Méthode enzymatique
protéines colorimétrique
Protéines Plasma hépariné Méthode colorimétrique
Urine, LCR Méthode par turbidimétrie
Albumine Plasma hépariné Méthode colorimétrique au

vert de bromocrésol
Urine Immuno-turbidimétrie
Ferritine Plasma hépariné Electro-chimiluminescence

(ECLIA)
Ammonium Plasma hépariné ou Méthode enzymatique (GLDH)

EDTA
Dosage des Ig Sérum Immuno-turbidimétrie
IgE totales Plasma hépariné ECLIA
3
4
Cholestérol total Plasma hépariné, Méthode enzymatique

colorimétrique à la cholestérol
Sérum
oxydase
HDL-cholestérol Plasma hépariné, Méthode enzymatique

colorimétrique directe
Sérum
Triglycérides Plasma hépariné, Méthode enzymatique

colorimétrique à la
Sérum
triglycérides lipase (TGL)-
glycérol-3-phosphate oxydase
Troponine Plasma hépariné ELISA avec détection par

immunofluorescence
B-HCG
B2-microglobuline
GH
Progestérone
Marqueurs Sérum ou plasma ECLIA

tumoraux et hépariné (Electrochimiluminescence)
Autres
hormones
Haptoglobine Plasma hépariné ou Immuno-turbidimétrie

sérum
Procalcitonine Plasma hépariné ou ECLIA

sérum
HbA1C Sang total HPLC : chromatographie en

phase inverse par échange
cationique suivie d’une
spectrophotométrie
Homocystéine Plasma EDTA Méthode enzymatique cyclique
3
5
III. Etude des cas cliniques
Cas n°1 : Myélome multiple
1) Présentation du cas clinique :

T F est un homme âgé de 61 ans admis par le biais des consultations externes de néphrologie le
25/10 pour hypercalcémie et insuffisance rénale avec créatinémie à 346 µm/l
 Antécédents :
 Médicaux : RAS
 Familiaux :
 Lithiase rénale et insuffisance rénale chronique chez le père
 Hémopathie maligne chez le cousin paternel décédé à l’âge de 65 ans il y a 4 mois
 Histoire de la maladie :
Remonte à un mois marquée par l’installation d’une altération de l’état général avec asthénie,
anorexie et amaigrissement. Notion d’un syndrome polyuro-polydipsique et douleurs
thoraciques diffuses qui s’aggravent lorsque le patient change de position ou qu’il tousse ou
respire.
Le patient a consulté un médecin de libre pratique (MLP) généraliste il y a 10 jours pour ses
douleurs thoraciques qui lui a mis sous paracétamol + antibiotique et devant la non amélioration
de la symptomatologie, un bilan a été demandé.
2) Examens à l’admission :
a) Examen clinique :
Examen cardiovasculaire :
- TA : 100/60 mm Hg
- FC : 80 bpm
- Pouls présents et symétriques
- AC : absence de souffles
3
6
Examen neurologique :
- Conscient, bien orienté
- Marche et position debout stables
Examen abdominal :
- Abdomen souple, dépressible et indolore
- Orifices herniaires libres
Examen pulmonaire :
- Eupnéique
- SaO2 : 97%
- Douleur à la palpation des 2 dernières cotes costales antérieures droites
Examen urologique : (bandelette urinaire)
- pH : 5
- Hématurie : ++
- Protéinurie : ++
- Glucosurie : -
b) Examens biologiques :
Tableau I : Bilan hématologique :
Paramètres Unités Valeurs du Valeurs usuelles Interprétation

patient
Hémoglobine (g/dL) 8,6 12 - 16 Anémie
VGM (fl) 81,5 80 - 100 Normochrome
TCMH (%) 28,2 27 - 32 Normocytaire
Leucocytes (103/µL) 12,5 4 - 10 Hyperleucocytose
Plaquettes (103/µL) 34 150 - 400 Thrombopénie
VS >130 < 15 mm Accélérée
3
7
Tableau II : Bilan biochimique :
Paramètres Unités Valeurs du patient Valeurs usuelles Interprétation

Créatinine µmol/L 340 53 - 120 Augmentée
Clairance mL/min 17,08 100 - 140 IR sévère
(MDRD)
Urée mmol/L 19,3 2,5 - 7,0 Augmentée
Sodium mmol/L 131 136 - 145 Légèrement diminuée
Potassium mmol/L 3,9 3,5 – 4,5 Normale
Chlorures mmol/L 91 95 - 105 Légèrement diminuée
CRP mg/L 22 <8 Augmentée
Calcium mmol/L 3,82 2,20 - 2,60 Augmentée
Phosphore mmol/L 1,96 0,8 – 1,5 Augmentée
3) Discussion diagnostic :
On évoque le myélome multiple devant les arguments cliniques et biologiques suivants :
1. Les critères de CRAB (3/4) :
C : Hypercalcémie
R : Insuffisance rénale
A : Anémie normocytaire normochrome
B : Atteinte osseuse (Absence de douleurs osseuses dans notre cas)
2. L’âge et le sexe masculin
3. Altération de l’état général
4. VS accélérée dans un contexte non évocateur d’une pathologie inflammatoire ou
infectieuse
 On va confirmer le diagnostic par :
- L’EPP
- Ponction sternale (myélogramme)
3
8
Ponction sternale : 12% de plasmocytes dystrophiques

 À ce titre un myélome multiple est suspecté
EPP :
- Un pic monoclonal à 12,9 g/l au niveau des gammaglobulines
3
9
- L’immunotypage a montré la présence d’une IgG Lambda monoclonale
CAT :
- Hyperhydratation 2L (1,5L sérum physiologique + 0,5L bicarbonate 14%)
- Dexaméthasone 40 mg
4
0
4) Evolution :
Paramètres J1 J5 J8 J9 Valeurs usuelles

Créatinine 340 428 230 172 53 – 120 µmol/L
Urée 19,3 21 21 15,2 2,5 – 7,0 mmol/L
Sodium 131 128 136 141 136 – 145 mmol/L
Potassium 3,9 3,1 2,4 2,5 3,5 – 4,5 mmol/L
Chlore 91 90 104 108 95 – 105 mmol/L
Le 03/11/2021 (J9) :
- Amélioration de la fonction rénale après hydratation
Correction de potassium :
- 4 ampoules KCl dans 500 ml sérum physiologique
Le 04/11/2021 :
Patient transféré en hématologie clinique pour continuer la prise en charge.
4
1
Cas n°2 : Méningite nosocomiale à

Staphylococcus aureus

H H.A est une femme âgée de 32 ans admise au service de neurochirurgie le 17/10 suite à
l’installation d’une fièvre associée à une céphalée et plusieurs épisodes de vomissements.
Ancienne patiente dans le service de neurochirurgie, hospitalisée à l’âge de 8 ans pour la prise
en charge d’une hydrocéphalie congénitale, ayant bénéficié d’une dérivation ventriculo-
péritonéale (DVP), révisée en février 2021 suite à un dysfonctionnement de la valve avec mise
en place d’une nouvelle DVP. L’évolution a été marquée depuis mai 2021 par une perte de
substance et mise à nu de la chambre de la valve. Devant le risque infectieux, elle a bénéficié
le 09/10 d’une ablation de la DVP droite et son remplacement par une DVP gauche ainsi que la
mise d’une couverture antibiotique.
L’évolution a été réadmise le 17/10 avec à l’imagerie un aspect TDM en faveur d’une méningite
compliquée d’une ventriculite.
Devant ce contexte clinique, des analyses sanguins et du liquide céphalorachidien ont été
demandé.
2) Examens biologiques :

VGM (fl) 83,3 80 - 100 Normochrome
Leucocytes (103/µL) 26,7 4 - 10 Hyperleucocytose
Plaquettes (103/µL) 441 150 - 400 Thrombocytose
GR (106/µL) 3.55 3.8 – 5.4 Limite inférieure
4
2

Créatinine µmol/L 39 53 - 120 Diminuée
Clairance mL/min 175,8 100 - 140 Pas d’IR
(MDRD)
Urée mmol/L 2,9 2,5 - 7,0 Normale
Sodium mmol/L 123 136 - 145 Diminuée
Potassium mmol/L 2,7 3,5 – 4,5 Diminuée
Chlorures mmol/L 80 95 - 105 Diminuée
PAL UI/L 184 50 – 150 Augmentée
CRP mg/L 404,30 <8 Très augmentée
Tableau III : Liquide Céphalo-Rachidien

Glucose mmol/L < 0,01 2,2 – 4,4 Très diminuée
Protéines g/L 3,27 0,15 – 0,6 Augmentée
Chlorures mg/L 107 125 – 130 Augmentée
Tableau IV : Formule Leucocytaire
Polynucléaires Neutrophiles Lymphocytes

90 % 10 %
4
3
3) Discussion du diagnostic :
En se basant sur ce tableau et sur les résultats biologiques :
 Bilan biochimique en faveur d’une méningite bactérienne purulente.

Culture du LCR : Positive
Germe identifié : Staphylococcus aureus sensible à la méticilline
CAT :
Traitement par :
- Céfotaxime
- Vancomycine
Evolution de la CRP :
Date J1 J3 J10
Résultat 404,3 113,08 15,58
Diminution de la CRP : bonne évolution de l’infection
4) Evolution :
Patiente sortante le 29/10 avec un rendez vous aux consultations externes pour réévaluation de
la DVP
4
4
Cas n° 3 : Insuffisance rénale chronique

décompensée

I.S est un homme âgé de 51 ans admis par le biais de consultation externe le 01/11 pour
détérioration de la fonction rénale (Créatinine passant de 220 µmol/L en février à 638 µmol/L)
 Antécédents :
 Médicaux :
 Diabétique depuis 15 ans
 HTA depuis 10 ans
 Dyslipidémie
Traitement habituel :
- Glufix 3cp/j
- Glucophage 1cp/j
- Moxonyl 0,4 1cp/j
- Novorapid 10-14-10
- Aprofort 300/5 1cp/j
- Ator 20 1cp/j
 Familiaux : RAS
Remonte au 26/10 où le patient a consulté son médecin endocrinologue qui a découvert à la
biologie faite le 28/10 une créatinémie : 535 µmol/L avec une urémie : 30,48 mmol/L.
La CAT du médecin était d’arrêter la metformine et d’adresser le patient à la consultation
externe où un bilan biologique sanguin fait le 31/10 a montré une créatinémie : 596 µmol/L,
une natrémie : 134 mmol/L et une kaliémie : 6 mmol/L.
Devant ces résultats, le patient a été hospitalisé pour clinique et prise en charge.
4
5
- TA : 150/70 mm Hg
- FC : 70 bpm
- AC : absence sans anomalies
Examen abdominal :
- Abdomen souple, dépressible et indolore
- Pas de douleurs à l’ébranlement lombaire
Examen des membres :
- OMI bilatérale gardant le godet
Examen pulmonaire :
- Eupnéique
- SaO2 : 96%
- AP : sans anomalies
Examen urologique : (bandelette urinaire)
- pH : 6
- Hématurie : -
- Protéinurie : +++
- Glucosurie : -
VGM (fl) 88 80 - 100 Normochrome
Leucocytes (103/µL) 8,7 4 - 10 Normale
Plaquettes (103/µL) 245 150 - 400 Normale
TP % 75,5 > 70 Normale
INR 1,2 1,0 – 1,3 Normale
TCA S 29,9 30 - 40 Normale
4
6

Clairance mL/min 8,567 100 - 140 IR terminale
(MDRD)
Sodium mmol/L 137 136 - 145 Normale
Potassium mmol/L 5,3 3,5 – 4,5 Augmentée
Chlore mmol/L 103 95 - 105 Normale
Bicarbonates mmol/L 16 22 - 28 Diminuée
Glycémie mmol/L 10,1 3,5 – 7,8 Augmentée
A. Urique µmol/L 408 240 - 360 Augmentée
Calcium mmol/L 2,05 2,25 – 2,60 Diminuée
Phosphore mmol/L 2,04 0,80 – 1,4 Augmentée
PAL UI/L 97 50 - 150 Normale
Albumine g/L 37,2 35 - 52 Normale
CRP mg/L 1,41 <8 Normale
ASAT UI/L 10 5 - 45 Normale
ALAT UI/L 14 5 - 45 Normale
Bilirubine mg/L 2 3 - 10 Diminuée

Totale
Bilirubine mg/L 1,4 2-7 Diminuée
Directe
CPK UI/L 567 10 - 200 Augmentée
LDH UI/L 177 20 - 200 Normale
PTH pg/mL 91 15 - 65 Augmentée
4
7
En se basant sur ce tableau et sur les résultats biologiques :
 Il s’agit probablement d’une néphropathie diabétique devant l’ancienneté de diabète qui a
évolué vers une IRC.
Un examen des urines sur une diurèse de 24 h (3 L) a montré :

Protéines g/L 1,793 < 0,130 Augmentée
Sodium mmol/L 31 50 – 300 Diminuée
Potassium mmol/L 34 20 – 120 Normale
Chlore mmol/l 23 50 - 220 Diminuée
Urée mmol/l 201 200 - 500 Normale
Micro albumine mg/24h 87 < 20 Augmentée
CAT :
Arrêt Glucophage, Glufix et Aprofort
Ajout Amlodipine
Mettre le patient sous :
- Sérum physiologique 1 L/j
- Moxonyl 2 cp/j
- Bicarbonates 2 gélules*2/j
- Calperos 1 cp*3/j
- Lantus 48 UI/j
4) Evolution :
Malade sortant le 11/11 et adressé au service d’hémodialyse pour continuer la prise en charge.
4
8
Cas n° 4 : Pancréatite aiguë

A.H est un enfant âgé de 11 ans admis au service de pédiatrie le 26/10 pour douleurs
abdominales
 Antécédents :
 Médicaux :
- Epileptique
- Tumeur cérébrale frontale gauche découverte en 02/21 et opéré en 07/21
- Admis au service de pédiatrie à l’âge de 5 ans pour convulsions fébriles
Traitement habituel :
- Dépakine® 500 mg : 1cp*3/j
 Chirurgicaux : Opéré
 Familiaux : RAS
Remonte au 11/10 marquée par la notion d’un traumatisme abdominal sur le ventre et depuis
l’enfant se plaint de douleur abdominale mais la maman n’a pas consulté.
Le 25/10 : installation brutale d’une douleur abdominale avec vomissements dans un contexte
d’apyrexie. Elle a consulté un MLP qui l’a adressé aux URG d’où son admission pour CPEC.
Examen général :
- Taille : 140 cm
- Poids : 49 kg
- T° : 36 C
- Bon état d’hydratation
- TA : 110/60 mm Hg
4
9
Examen abdominal :
- Sensibilité épigastrique +++
- Pas d’HSMG
- OMI gardant le godet
Examen pulmonaire :
- Eupnéique
- SaO2 : 98%
- FR = 18 cycles
Examen cutané :
- Pâleur cutanéomuqueuse
Autre examen :
- Cicatrice frontale gauche en rapport avec l’opération de son astrocytome

Hémoglobine (g/dL) 13,9 12 - 16 Normale
Leucocytes (103/µL) 12 4 - 10 Hyperleucocytose
Plaquettes (103/µL) 253 150 - 400 Normale
5
0

Créatinine µmol/L 40 40 - 90 Normale
Urée mmol/L 6,4 2,5 - 7,0 Normale
Potassium mmol/L 4,9 3,5 – 4,5 Légèrement augmentée
Chlorures mmol/L 96 95 - 105 Normale
PAL UI/L 320 50 - 150 Augmentée
CRP mg/L 13 <8 Légèrement augmentée
ASAT UI/L 24 5 - 45 Normale
ALAT UI/L 17 5 - 45 Normale
Bilirubine mg/L 13 3 - 10 Augmentée

Totale
Bilirubine mg/L 6 2-7 Normale
Directe
Amylase UI/L 521 25 - 100 Pancréatite
Lipase UI/L 1248 < 65 aiguë
Devant une douleur abdominale avec vomissements et devant au bilan pancréatique :
Amylase : 521 (5*N)
Lipase : 1248 (10*N)
 On évoque le diagnostic de pancréatite aiguë
CAT :
- Perfalgan® 750 mg*4/j

- Mopral ® 40 mg/j
5
1
Dans le cadre du bilan étiologique de la pancréatite :

 Une échographie abdominale a été pratiqué montrant un épanchement intrapéritonéal de
faible abondance
 Une TDM (tomodensitométrie) a montré une VBP (voie biliaire principale) d’aspect
normale ainsi que l’absence d’obstacles décelables dans les voies biliaires extra-hépatiques
4) Evolution :
Un bilan de contrôle fait le 30/10 (J4) a montré :

CRP mg/L 8.72 <8 Normale
ASAT UI/L 28 5 – 45 Normale
ALAT UI/L 15 5 – 45 Normale
Amylase UI/L 84 25 – 100 Normale
Lipase UI/L 152 < 65 Augmentée
 Une amélioration sur le plan biologique est notée : abaissement des valeurs de la
lipasémie et de l’amylasémie. (Lipase=2*N, amylase normale)
 Le patient est mis sortant le 31/11 avec un rendez-vous aux consultations externes.
5
2
Cas n° 5 : Acidose lactique

L.M est une femme âgée de 75 ans admise aux urgences le 24/09 pour un coma vigile
 Antécédents :
 Médicaux : Diabétique sous Metformine
 Chirurgicaux : RAS
 Familiaux : RAS
La patiente a consulté un MLP cardiologue le 22/09 qui a pratiqué un ECG montant une
ischémie coronarienne. Le 24/09 elle se plaint d’une grande asthénie, de crampes des membres
inférieurs, de douleurs abdominales et verse progressivement dans un coma d’où son admission
en urgence.
Examen général :
- T° : 36,6 C
- TA : 80/60 mm Hg
- FC : 110 bpm
Examen pleuropulmonaire :
- 30 cycles/min
- SaO2 : 95%
Examen abdominal :
- Souple, dépressible
- Absence d’OMI
5
3
Tableau I : Gaz du sang :

Ph 7,13 7,35 – 7,45 Acidose
PaCO2 KPa 2,39 5,0 – 6,0 Diminuée
PaO2 KPa 12,8 10 – 13 Normale
HCO3 mmol/L 6 21 – 28 Diminuée
SO2 % 95 95 - 100 Normale

Clairance mL/min 15 75 - 115 IR sévère
(MDRD)
Glycémie mmol/l 6,2 4,0 – 6,0 Légèrement augmentée

Potassium mmol/L 4,9 3,5 – 4,5 Légèrement augmentée
Chlorures mmol/L 97 95 - 105 Normale
Protides g/l 65 60 - 75 Normale
Lactates mmol/L 19 < 2,5 Augmentée
5
4
 Le gaz du sang a montré une acidose métabolique (HCO3 diminué) partiellement
compensée
Calcul du trou anionique : (VU : 16 – 20 mmol/L)
TA = (Na + K) – (HCO3 + Cl) = (140 + 4,9) – (6 + 97) = 41,9 mmol/L
 Valeur augmentée
En se basant sur le résultat de la clairance de créatinine (15 ml/min) et le rapport Urée

plasmatique/ Créatinine plasmatique (64 < 70)
 Il s’agit d’une insuffisance rénale organique sévère liée à une néphropathie diabétique
 La valeur augmentée du lactate oriente vers une acidose lactique qui est à l’origine du
coma causée par la metformine
CAT :
- Bicarbonate de sodium 1,4%

- Lasilix spécial 500 mg
4) Evolution :
Patiente transférée le 26/09 au service d’hémodialyse pour continuer la prise en charge
5
5

Rapport de Stage en Biologie Clinique: Ministère de L'enseignement Supérieur Et de La Recherche Scientifique

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Rapport de stage en biologie clinique ǀ Jerfel Hatem

Ministère de l’enseignement supérieur et de la recherche

Rapport de stage en biologie clinique

CHU Fatouma Bourguiba Monastir

Laboratoire de Biochimie – Toxicologie

Maitre de stage : Pr. Najjar Mohamed Fadhel

Réalisé par : Jerfel Hatem

g) Traitement des échantillons avant analyse : .......................................................................... 23

Liste des abréviations

- ALAT : Alanine Amino Transférase

I. Organisation générale du laboratoire

1) Gestion des locaux :

Le laboratoire de biochimie-toxicologie de l’hôpital Fattouma Bourguiba de Monastir comporte

Réservée à la réception des échantillons pour les analyses biochimiques ou toxicologiques et à

Ces échantillons sont ensuite adressés à la salle de saisie.

o Distribution des résultats des analyses :

professeurs, la surveillante et la secrétaire.

 Des vestiaires : munis de casiers fermant à clés, réservés au personnel

Salle des urgences (Salle N°1)

C’est la salle des analyses urgentes réservée aux :

- Dosage de la troponine cardiaque, de la β-HCG, de l’hormone de croissance (GH), de la

- Analyse des gaz du sang effectué sur GEM 3500TM.

Salles des analyses de routine (Salles N°2 et N°3)

Salle des paramètres spécifiques

- EPP sériques, urinaires, du LCR et de l’hémoglobine ainsi que l’immuno-typage des

- Dosage de l’HbA1c sur ADAMS A1C™.

- Recherche des protéines de Bence-Jones dans les urines par immunofixation.

- Le dosage de certains toxiques et drogues

- Le dosage de certains psychotropes

- Un congélateur à -80°C pour la conservation des échantillons à longue durée.

a) Organisation et répartition des tâches :

Il gère la direction du laboratoire et supervise le bon déroulement

-Encadrement des résidents, internes et stagiaires.

-Gestion des ressources humaines.

-Participation à la recherche scientifique.

-Appels d’offre auprès des fournisseurs.

Les professeurs hospitalo- -Participe à la recherche scientifique et à l’enseignement.

-Mise au point des techniques

-Avis scientifique et biologique

-Réalisation des travaux de recherches

-Validation biologique des résultats

-Réalisation des analyses

Les résidents -Contrôle qualité des appareils et leur étalonnage

-Apprentissage et formation théorique

-Interprétation des bilans et validation biologique sous le contrôle

Les internes -Initiation à l’exercice de la profession de biologiste clinicien

-Formation théorique et pratique sous le contrôle des résidents et

-Gestion des ressources humaines : tableaux de garde, congés,

-Inventaire de tous les produits

-Approvisionnement régulier des différentes salles du laboratoire

Les techniciens -Réception, tri et vérification de la concordance entre l’échantillon

-Réalisation des analyses demandées.

La secrétaire -Elle est responsable de la mise en forme des documents utilisés et

Les ouvriers -Ils assurent le transport des consommables et des courriers.

-Ils assurent l’hygiène et l’entretien de tous les locaux par leurs

b) Modalités du travail au sein du service :

3) Processus d’hygiène et de sécurité :

a) Types de risque et mesures de prévention :

Types de risque Description Mesures de prévention

Biologique Le risque biologique est - Le port de vêtements de protection :

Chimique Ce risque est lié aux - Informer et former le personnel

inflammabilité, corrosivité) à - Identifier, étiqueter et stocker les

Incendie Le déclenchement d'un - Aération, climatisation et contrôle