La maitrise de la

phase préanalytique en
biochimie
Dr Abaza Hajer
INTRODUCTION :

l’analyse biologique est constituée d’une série d’étapes indépendantes les unes
des autres :

une étape d’analyse proprement dite,

précédée d’une phase pré analytique dont l’acteur principal est le

prélèvement ,

et suivie d’une phase post analytique s’articulant autour du résultat .

Chaque phase constitue à elle seule une source majeure d’erreurs.

L’assurance qualité a pour objectif :

de lutter contre ces erreurs afin de les annuler,

ou de les maintenir dans les limites acceptabilités.

 la phase pré_analytique : les étapes
● la prescription des analyses

● la préparation du patient

● le prélèvement

● l’étiquetage

● le transport et l’acheminement jusqu’au laboratoire

● la préparation de l’échantillon à analyser et sa conservation

la prescription :
la prescription :

la demande d’analyse peut être illisible à cause d’une mauvaise écriture

la généralisation de l’informatisation peut résoudre le problème .

la demande d’analyse peut comporter une une fausse transcription de

l’analyse ou une analyse non pratiquée.
la préparation du patient :

Certaines analyses nécessitent une position particulière ( le passage d’une

position à une autre s’accompagne d’une position importante du paramètre
étudié ) : aldostérone .

Pour d’autres paramètres ayant un cycle nycthéméral , le moment du

prélèvement est très important : cortisol /ACTH

Le moment de prélèvement est important aussi pour les hormones

participant au cycle menstruel de la femme , le prélèvement se
faisant à j3 ou j4 du cycle .
Les Précautions à prendre :

● Délai de 8 heures entre le dernier repas et la prise de sang.

● En cas de bilan lipidique , le délai est porté à 12 heures .

● En cas d'analyse urgente, le non respect du jeûne n'est pas un
obstacle.
● Concernant la prise de traitement médicamenteux, il est préférable de
faire la prise de sang avant la prise de médicaments (sauf cas
particulier).
il faut éviter aussi :

L’ alcool :
En aigu: augmentation des lactates, acide urique et triglycérides.

En chronique : augmentation du cholestérol –LDL, GGT et triglycéride .

Cigarettes :
augmentation de la carboxyhémoglobine et de l’hémoglobine
la réception :

Parmi les difficultés rencontrées au cours de cette phase on peut citer :

un étiquetage illisible ou non conforme entre le tube de

prélèvement et la demande

L’informatisation et l’installation d’un système d’identification à code à barres

 Rappel
le prélèvement :
Biochimie Acide urique, Amylase, Bilirubine, Cholestérol, HDL,
Fer sérique, Gamma GT, Glycémie, LDH, Lipase, Phosphatases
alcalines, CPK, Transaminases, Triglycérides, Urée, Créatinine, ...

• Protéines spécifiques : CRP, Transferrine, Apo A et B, Albumine,

Haptoglobine, β2-microglobuline.

• Ionogramme : Sodium, Potassium, Chlore, Bicarbonates.

• Calcium, Phosphore, Magnésium

Héparinate de Lithium
 Rappel

• Protéines spécifiques : Protéines totales, Électrophorèse et IEP (2

tubes secs) ,CDT, Préalbumine, Immunoglobulines (IgG, IgA, IgM),
CTX, Calcitonine, Thyroglobuline

• Auto-immunité : Ac antinucléaires, Ac antithyroïdiens, Ac anti-CCP,

Ac anti-Cardiolipine IgG et IgM, Ac anti-β2glycoprotéine IgG, Ac anti-
récepteur de la TSH

• Facteurs rhumatoïdes : Latex, Waaler-Rose

• Agglutinines irrégulières (+ 1 tube EDT

Tube sec

• Hormonologie: β-HCG, FSH, LH,

 Rappel
Allergie : IgE totales, IgE spécifiques (RAST ou CAP), CLA,
Phadiatop, Trophato

• Marqueurs tumoraux : ACE, AFP , CA 15-3, CA 19-9, CA 125, PSA

Total et Libre (+ 1 tube gel pour sérothèque)

• Sérologies virales (+ 1 tube gel pour sérothèquE

HIV, Hépatite A (Ac totaux, IgM

Tube sec

Hépatite B (Ac anti-HBc, Ac anti-HBs, Ag HBs),

Hépatite C, Rubéole IgG, CMV, Varicelle-Zona, Parvovirus B19,

 Rappel

Sérologies bactériennes(+ 1 tube gel pour sérothèque)

Syphilis (TPHA, VDRL), ASLO, Chlamydiae, Mycoplasmes uro-génitaux,

Lyme, Hélicobacter Pylori IgG

• Sérologies parasitaires (+ 1 tube gel pour sérothèque)

Toxoplasmose (IgG + IgM)

Tube sec

• Divers : Ferritine, Vitamine D, Vitamine B12, Folates sériques,

Marqueurs Trisomie 21

• Dosage de médicaments : Digoxine, Lithium, Dépakine, Tégrétol

 Rappel

TP-INR

• TCK, TCA

• D-Dimères

• Fibrinogène

• Activité anti-Xa
citrate de sodium

• Antithrombine III (AT III

• Héparinémie

• Protéine C, Protéine S
Afin de garantir les résultats de l’analyse,
il est impératif de bien remplir le tube
pour respecter 1 volume d’anticoagulant
pour 9 volume de sang total.
 L’EDTA est l’acide éthylène diamine tétra-acétique. Il inactive le calcium
nécessaire à la coagulation,

ainsi que d’autres ions comme le magnésium, en formant un complexe inactif.

Il ne peut donc pas être utilisé pour

doser le calcium, le magnésium et certains métaux lourd (plomb).

 Rappel

NFS - Plaquettes - VS Réticulocytes

• Coombs direct

• Hb A1C (Hb glyquée) EDTA

• Electrophorèse de l'hémoglobine

•BNP,Troponine,Myoglobine

• Parathormone (PTH)

• Groupe sanguin, RAI (recherche d'agglutinines irrégulières) (+ 1 tube gel)

 Rappel

• Phénotypage des lymphocytes CD4, CD8

• Charge virale HIV

• DNA viral de l'hépatite B

• RNA viral de l'hépatite C

• Immunosuppresseurs : Ciclosporine, Tacrolimus.

• Recherche de Mutations : Hémochromatose, Mutation du Fact V Leiden, du Fact II

 Rappel

Le tube gris contient du fluor.

Il permet d'effectuer la glycémie.

Le fluor bloque les enzymes de la glycolyse

évitant ainsi les dosages erronés.

 la centrifugation de ces différents types de tubes contenant des
anticoagulants (EDTA, fluor, citrate, héparine), permet de récupérer du
plasma et un culot globulaire.

Le tube rouge contient des microparticules de silice (activateur de

coagulation). Il est qualifié de « sec » et permet donc au sang de coaguler.
La centrifugation permet de récupérer le sérum.
Définitions : sang total, plasma, sérum Rappel

Le sang frais, utilisé immédiatement après prélèvement est dénommé « sang

total ».
Le sang total est constitué d’un liquide biologique, le plasma, contenant toutes
les cellules sanguines. Ces cellules ou

« éléments figurés du sang » sont les globules rouges, les globules blancs et les
plaquettes. Le plasma est

un liquide un peu visqueux, transparent et jaunâtre chez le sujet sain.

 Le sang total n’est pas un produit stable.

En dehors des vaisseaux sanguins (par exemple dans un tube de

laboratoire), il coagule spontanément en quelques minutes, générant une masse

semi-solide ressemblant à un gel compact et appelé « coagulum ».

Le coagulum contient du plasma modifié, des cellules sanguines et

de la fibrine, responsable en partie de sa structure. Si l’on centrifuge un

coagulum, il perd sa structure et est

séparé en une partie solide et une partie liquide.

La partie solide est un agrégat compact de fibrine et de

cellules sanguines. Le surnageant liquide, appelé sérum, est proche du plasma

mais de composition

différente car il a subi les modifications liées à la coagulation. Obtenir du

plasma est plus simple, il suffit de
centrifuger du sang total pour séparer par gravité les cellules sanguines de leur
liquide biologique, après ajout d’un anticoagulant, et de récupérer le surnageant
Le prélèvement :

* Les erreurs rencontrées au cours de cette phase peuvent se résumer en un

mauvais choix de récipient ou du milieu biologique ( sérum / plasma .. urines
fraiches ou urines de 24h …) .

* De plus pour un récipient et un milieu correct , les modalités de prélèvement et

le proportions anticoagulant/sang peuvent ne pas être respectées
A éviter :

Pas de prélèvement à la seringue et à l’aiguille chez l’adulte

Pas de transvasement le sang d’un tube à un autre
Pas de prélèvement sur un point de ponction imbibé d’alcool
Pas de ponction sur un hématome
Pas de garrot serré pendant plus d’une minute
Pas de « pompage » à la main de la part du patient lors la ponction
Le prélèvement :
 Tube citrate Tube Tube héparine Tube EDTA Tube fluorure Tube citrate (VS)

Sec
avec Gel
examens de 1 dans tous les Cytologie - 1 dans tous les 1

r 1 dans
Immunologie - 1 ou 2
outine : 1 cas cas tous les cas
Groupe/RAI - 1
Profils -
autres examens
:2 tetanos - 1
1

B HCG, - 1 chimie - 1

digoxine, - 1
L’étiquetage :

Il doit se faire dans les mêmes conditions ( temps et espace) que la ponction
pour éviter une mauvaise identification entraînant une inversion de tubes ou un
etiquetage non conforme à l’analyse prescrite .

Identification par code à barres en collant la même étiquette sur la demande et

sur l’échantillon biologique
Le transport :

si le prélèvement n’est pas réalisé au sein du laboratoire ,son acheminement

peut constituer une source d’erreurs :

*délais inappropriés de transport

*non respect des règles d'hygiène et de sécurité et /ou de la température et de

milieu de transport .
Principales analyses ayant un délai et des
conditions d’acheminement très strictes :

*Gaz du sang 30 mn dans la glace *Ac lactique 30 mn dans la glace

*Ammoniémie 30 mn dans la glace *Procalcitonine 1 heure

*Homocystéine 1 heure *Glycémie 2 heures

*LDH 2 heures *Potassium 4 heures

*Lithium 4 heures *PTH 4heures

*Hémostase 4 heures (sauf: héparinémie HNF 1 heure)

Le traitement pré analytique et la
conservation :

Pour les analyses différées , celles à sous traiter ou celles soumises à une
réglementation particulière des procédures écrites fixant le température
optimale la durée maximale et les conditions de conservations : (obscurité durée
identification …) sont indispensables .