SG1 04 Recommandations Pour La Maîtrise de Létape de Prélèvement Des Échantillons Biologiques

Qualité et accréditation en biologie médicale
Ann Biol Clin 2010 ; 68 (Hors série no 1) : 69-104
SG1-04
Recommandations pour la maîtrise

de l'étape de prélèvement
des échantillons biologiques
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F. Barbier, Z. Berkane, JP. Dehorne, G. Desch, JL. Dhondt, I. Drouillard,

F. Serre-Debeauvais, P. Soubiran, P. Surgat, A. Szymanowicz
et les membres du sous-groupe 1 pré-analytique*
Groupe de travail SFBC « Accréditation des laboratoires de biologie médicale »
(coordonnateur M. Vaubourdolle)
Résumé
Les recommandations relatives à la bonne réalisation des prélèvements les plus courants sont
précisées, suivies d'une liste des sites Internet utiles pour approfondir les connaissances
concernant les prélèvements d'échantillons biologiques et les catalogues d'examens spécia-
lisés. Puis, nous présentons une méthodologie pour la mise à disposition d'un guide pré-
analytique (manuel de prélèvement) des examens de biologie médicale. Les examens pour
lesquels des renseignements ou des documents particuliers sont indispensables soit pour la
réalisation soit pour l'interprétation sont ensuite identifiés. Lorsque des conditions particu-
lières peuvent influencer le résultat, des précisions sont apportées. Enfin, nous proposons une
fiche standardisée descriptive d'un examen, outil permettant de préparer un catalogue des
examens facilitant l'information de tous les professionnels.
MOTS CLÉS : accréditation | ISO 15189 | pré-analytique | prélèvement | renseignements

cliniques | manuel de prélèvement
ABSTRACT Guidelines relative to the collection and handling management

of biological samples
Guidelines relative to the management of samples collection and handling for common tests
are proposed with a list of websites to improve knowledge concerning the practices of bio-
logical sampling. Then, methodology is given for the creation of an electronic primary sample
collection manual for medical laboratory tests. A list containing the medical laboratory tests
for which the information and/or particular documents are needed either for the request or
interpretation is presented. Another list for some specific laboratory tests with special indi-
vidual requirements is proposed. We give also items allowing a standardized description of
laboratory tests to help to create a personalized list of the available examinations, facilitating
the information of professionals.
KEY WORDS: accreditation | ISO 15189 | pre-examination phase | sample collection | clinical
information | primary sample collection manual
* Liste des membres du SG1 : Anton Szymanowicz (coordonnateur), Véronique Annaix, Magali Annette-
Reisch, Pascal Bailly, Frédéric Barbier, Zoulikha Berkane, Dominique Challine, Jean-Pierre Dehorn, Gérard
Desch, Jean-Louis Dhondt, Laurence Drouard, Isabelle Drouillard, Françoise Flourié, Jean-Marc Giannoli,
Chantal Houlbert, Mickelina Labaky, Jean-Paul Lionne, Xavier Palette, Jérôme Pfeffer, Françoise Serre-
Debeauvais, Pierre Soubiran, Philippe Surga, Anne Vassault, Jean-Pierre Yvert
69
SG1 PHASE PRÉ-ANALYTIQUE – SG1-04
SG1-04 Recommandations pour la maîtrise

de l'étape de prélèvement
des échantillons biologiques
Objet et domaine d'application
➥ Décrire tous les éléments nécessaires et suffisants pour assurer de manière

optimale la réalisation des prélèvements d'échantillons biologiques. L'objectif est
de permettre d'obtenir des échantillons biologiques conformes dont la prise en
charge maitrisée va conduire à la réalisation d'examens de biologie médicale

fiables et témoignant de la situation réelle du patient. Les recommandations
s'appuient sur les items de la norme NF EN ISO 15189.
1 Instructions spécifiques relatives au prélèvement

et à la manipulation des échantillons primaires
À L'ATTENTION DE toute personne habilitée ou en cours d'habilitation pour pratiquer les
prélèvements d'échantillons biologiques les plus courants
Les instructions relatives à la réalisation conforme des prélèvements les plus courants
en vue de la réalisation des examens de biologie médicale sont précisées et illustrées.
Les éléments nécessaires sont énumérés : matériel de prélèvement et de transport,
préconisations pour l'utilisation des tubes, l'identification des échantillons, leur manipu-
lation. La préparation et le conditionnement de la demande d'examen ainsi que les
conditions d'acheminement sont aussi décrits. Cette fiche d'instruction doit faire partie
intégrante du manuel de prélèvement. Elle peut aussi être utilisée à des fins
pédagogiques.
Fiche pédagogique d'instructions relatives au prélèvement

➜ Matériel de prélèvement
Prévention du risque Utiliser du matériel de prélèvement à usage unique et sécurisé

d'exposition aux produits Éviter les tubes en verre si possible
biologiques Utiliser des protections individuelles si nécessaire : gants,
masque, lunettes... selon les préconisations adaptées
à la situation
Utiliser une boîte jette-aiguilles
Éliminer les déchets de prélèvements selon la procédure interne
70
Recommandations pour l'accréditation des laboratoires de biologie médicale 1
Matériel nécessaire Choix du matériel nécessaire au prélèvement (cf. catalogue

d'analyses ou plan de prélèvement informatisé)
Vérification du matériel (non périmé)
Organisation de l'ordre des contenants à prélever sur un portoir
Étiquetage par le préleveur après avoir prélevé
Étiquette identifiant Étiquettes à préparer avant de prélever
le patient : Items obligatoires devant figurer sur les étiquettes :
– informatisée – nom de naissance
– manuscrite (si SIL – nom (usuel), prénom, date de naissance, sexe
indisponible) – date et heure de prélèvement
– localisation du site de prélèvement quand cela est nécessaire

– distinction de la 1re détermination de la 2nde lorsqu'il s'agit
d'un groupe sanguin
– no IPP ou no d'hospitalisation (en milieu hospitalier)
Matériel de transport Sac double-poche dont une est hermétique (un patient au plus
Pour assurer la sécurité par sac)
du personnel,
des prélèvements
et la confidentialité
Boîtes de transport des flacons (ECBU, expectoration, LCS, etc.)

avec portoir compartimenté
Boîtes de transport pour triple emballage contenant un support

absorbant si le prélèvement est acheminé par transport routier
Matériel permettant la conservation de l'échantillon

à la température requise (+ 37 oC ou réfrigérée,
protection de la lumière, etc.)
SIL : système d'information du laboratoire ; IPP : identifiant permanent du patient ; ECBU : examen cytobactériologique des
urines ; LCS : liquide cérébrospinal.
71
➜ Procédures de prélèvement
Ponction sanguine Veillez au confort physique et moral du patient par une attitude
calme et rassurante
Évitez les sources d'impact sur les examens (par ex., pour un
f:\2000\image\130591\berkane\12
produit désinfectant, évitez la solution alcoolisée lorsqu'il s'agit

d'une alcoolémie) ou la pose d'un garot trop serré
Prélèvements Respectez les mesures d'hygiène (matériel à usage unique) et
de bactériologie de sécurité (aiguille sécurisée) selon le manuel de prélèvement
➜ FIGURE 1 : RESPECTEZ LES ÉTAPES ET RESTEZ VIGILANTS JUSQU'AU BOUT !
• Bonne personne/bonnes étiquettes

Patient coopératif Interrogation : le patient décline son identité
Patient non coopératif Consultation du dossier médical, voire respect de la procédure
d'identification provisoire
Vérifier à l'aide du bracelet d'identification quand il est présent
(milieu hospitalier)
Vérifier la concordance de l'identification étiquettes/patient
72
• Bons tubes/bon ordre

Ordre Hémoculture à prélever toujours en premier si prévue
des
contenants
à prélever
Tubes de sang
• •
Sans
additif
Citraté Avec gel
•
activateur
• • • •
Hépariné EDTA Fluoré
ou de la coagulation
tube
de Remplir jusqu'à
purge la marque Pour VS
Dans le cas où le prélèvement est fait par l'intermédiaire d'une tubulure
(cathéter, épicrânienne, microfuseur), il convient d'utiliser en premier un tube
de « purge » si un bilan d'hémostase est demandé dans la prescription médicale
d'examens.
Niveaux de Tubes : notamment pour tube citraté et le tube de VS
remplissage Des flacons pour hémoculture : niveau optimal de sang
Seringue pour sang artériel : préférez les seringues à remplissage automatique
et bouchon à évent
Homogénéi- Les tubes avec additifs doivent êtres mélangés immédiatement par plusieurs
sation retournements (évitez l'agitation énergique)
5 à 8 retournements lents pour les microtubes et les tubes à vide partiel
Prélèvement sur seringue pour sang artériel : contrôlez visuellement la présence
éventuelle de bulles d'air, tapotez le corps de la seringue pour remonter celles-ci,
purgez les bulles juste après le prélèvement, refermez immédiatement
la seringue, puis agitez délicatement par rotation de la seringue entre les paumes
des mains
Étiquetage À réaliser après le prélèvement par le préleveur lui-même
des
échantillons
Validation du Date et heure de prélèvement, traitement, renseignements cliniques,
prélèvement nom du préleveur, nom du prescripteur
VS : vitesse de sédimentation ; EDTA : acide éthylène diamine tétra-acétique.
73
➜ Bonnes conditions d'acheminement du prélèvement au laboratoire
Conditions de température Respect des conditions d'acheminement au laboratoire dictées

par une procédure interne : réfrigéré, à + 37 oC, ambiante,
à l'abri de la lumière. Des moyens de vérification existent
actuellement et doivent être mis en place au moins
partiellement
Respect des conditions de stockage avant acheminement
au laboratoire (voir procédure interne)
Délais d'acheminement Respect des délais d'acheminement au laboratoire. Se référer

au manuel de prélèvement réalisé par le laboratoire
Modalités de Les échantillons prélevés sont insérés dans la partie hermétique

conditionnement du sachet et la demande d'examens biologiques dans la partie
non hermétique. Un sachet ne doit contenir que les échantillons
d'un seul patient
Boîte de transport identifiée au nom du laboratoire expéditeur

et au nom du laboratoire destinataire
74
Instructions liées au traitement de l'échantillon au laboratoire
Étiquetage Règles générales : rigueur, attention. L'étiquette du laboratoire

(SIL ou manuscrit) doit permettre la lecture du nom du patient porté
sur l'échantillon identifié par le préleveur
À réaliser au fur et à mesure que les sacs de transport
sont déballés
Déballez un sac à la fois
Centrifugation Respect du temps de coagulation requis pour les tubes secs

Respect des conditions de centrifugation (température, vitesse,
durée)
Nature de l'échantillon Respect des recommandations des fiches techniques

pour chaque réactif utilisé par le laboratoire
Examens transmis Préférez le tube primaire (obligatoire pour les examens

d'immuno-hématologie) chaque fois que possible
Joindre une fiche de suivi (éditée par le SIL ou fiche manuelle
avec entête du laboratoire en cas d'indisponibilité du SIL)
Si fractions aliquotes nécessaires : étiquetage au fur et à mesure
Respect des conditions de conservation en attendant l'envoi
Utilisation de sachet de transport de couleur distinctes selon qu'il
s'agit d'un échantillon congelé, réfrigéré ou à température
ambiante
Cryoconservation Préférez les tubes primaires (tube à séparateur de sérum avec

gel, par ex.) plutôt que l'aliquotage en tube secondaire
SIL : système d'information du laboratoire.
2 Références consultables sur Internet

pour l'acte de prélèvement et les examens rares
Nous proposons tout d'abord une liste de sites Internet intéressants à consulter pour
approfondir les connaissances ou l'actualisation des pratiques concernant les prélève-
ments d'échantillons biologiques. Une première série d'adresses intéresse les référen-
tiels généraux, une seconde traite des actes spécifiques. Dans une seconde section, sont
rassemblés les sites donnant accès à des catalogues d'examens plus ou moins complets
ou spécialisés. Il est utile que le laboratoire dispose de ces adresses même si leur consul-
tation n'est qu'occasionnelle. En milieu hospitalier, les questions sur de nouvelles ana-
lyses rares ou parfois inconnues du biologiste peuvent être posées, et il est alors impor-
tant de répondre de manière pertinente à la demande médicale. Ce chapitre doit aider
le biologiste dans son rôle d'information et de conseil aux médecins.
75
➥
Mise en garde
Compte tenu de la rapide évolutivité des références sur
Internet, certaines de ces adresses peuvent avoir été
changées. Il convient si nécessaire de faire une recherche
à partir des mots clés de l'adresse citée dans le présent
document.
Pour faciliter cette recherche, nous mettons à disposition des
lecteurs une version électronique de ces liens actualisés sur
le site http://www.sfbc-accreditation.org.
Pour le domaine de l'acte de prélèvement

Cette section rassemble les principaux sites Internet qui peuvent fournir des renseigne-
ments spécifiques ou spécialisés pour réaliser les prélèvements dans des conditions
optimales. L'application de ces informations doit rester sous le contrôle et la compétence
du biologiste qui a la responsabilité de la bonne prise en charge du patient.
➜ Références communes à plusieurs actes de prélèvement
http://www.chu-toulouse.fr/-catalogue-et-manuel-de-biologie-
http://prel.sang.free.fr/
http://ifr48.timone.univ-mrs.fr/Dictionnaire_semiologie/index_prlvt.html
http://cclin-sudest.chu-lyon.fr/Doc_Reco/guides/guides.html
http://www.srlf.org/s/rubrique4ad3.html ?id_rubrique=62
http://www.soins-infirmiers.com/tubes_analyses_biologiques_ordre_prelevement.php
http://aipbmc.free.fr/res/ouvrage/revir.pdf/chap01.pdf
http://www.specimencare.com
➜ Références spécifiques à certains actes de prélèvement
Prélèvement http://prel.sang.free.fr/prelevement_capillaire_en_images.pdf
capillaire
Prélèvement http://devsante.org/IMG/html/doc-12004.html
veineux http://www.youtube.com/watch?v=iheIqF0JKVQ
Ponction http://www.neuro-club.info/neuro-ponctionlombaire.php
lombaire http://www.youtube.com/watch?v=R2_0gOI8uV0
http://www.youtube.com/watch?v=khwYVD6t1iI
Gaz du sang http://www-sante.ujf-grenoble.fr/SANTE/GDS/GDS_fichiers/fullscreen.htm#slide
0001.htm
http://www.youtube.com/watch?v=0Rr6vpFMKPE
http://www.youtube.com/watch?v=stxntv0KkBE&hl=fr
Ponction http://filmsmedicaux.org/pages_specialites/hepatologie/hepatologie_ponction_
d'ascite ascite.html
http://www.dailymotion.com/video/x5sath_ponction_dascite_school
76
Prélèvement http://www.chu-rouen.fr/uchpg/rbprattissu.html
de tissus
Prélèvement http://www.chu-rouen.fr/uchpg/bpratorg.html
d'organes
Ponction http://ifsi53000.free.fr/module-pneumo/documents-ppt/ponction_pleurale.ppt
pleurale
Myélogramme http://sfh.hematologie.net/telechargements/biopsie_osseuse.doc
BOM http://sfh.hematologie.net/fr/telechargements/Pratiques_Professionnelles/Pro
cedures_Realisation.pdf
Prélèvements http://spectrabiology.com/Documents/SB159_29-34.pdf
cutanés chez
le diabétique
Ponction http://ifr48.timone.univ-mrs.fr/Dictionnaire_semiologie/prelevement/pct_arti
articulaire culaire.html
BOM : biopsie ostéomédullaire.
Pour les examens rares ou spécialisés

À L'ATTENTION DES biologistes et leur équipe : internes en biologie, cadres, techniciens
et secrétaires
Cette section doit permettre de trouver l'information ou son chemin pour obtenir la
réponse à toute question émanant des prescripteurs, des patients ou de tout autre
professionnel de santé concernant la réalisation des examens. L'utilisation ou la trans-
➥
mission des informations recueillies doit être préalablement validée par le biologiste.
Cette liste ne peut en aucun cas être considérée comme exhaustive.
Objet
Proposer une liste de sites Internet utiles pour trouver
des informations complémentaires sur les examens
de biologie médicale.
Référence de la norme NF ISO 15189 : 4.7
➜ Maladies rares et orphelines

http://www.orphanet.fr/ : portail des maladies rares et médicaments orphelins ; recherche possible par mala-
dies, tests diagnostiques, villes, laboratoires, professionnels.
http://www.sante-sports.gouv.fr/IMG/pdf/Liste_des_centres_de_competences_et_de_references_par_grou
pe.pdf et http://www.reseau-chu.org/_new/maladies_rares.htm : liste des centres de référence labellisés
pour une maladie rare ou un groupe de maladies rares.
http://www.sante-sports.gouv.fr/les-maladies-rares.html : dossier du ministère de la Santé, de la jeunesse
et des sports sur les maladies rares.
➜ Cancers rares de l'adulte

http://www.e-cancer.fr/component/docman/doc_download/4692-structuration-de-loffre-de-soins-pour-les-
patients-adultes-atteints-de-cancers-rares : liste des centres labellisés pour cancers rares de l'adulte.
77
➜ Microbiologie
http://www.invs.sante.fr/surveillance/cnr/liste_cnr_03032010.pdf : liste des centres nationaux de référence,
microbiologie.
http://www.pasteur.fr/sante/clre/cnractiv/liscnr.html : centre national de référence relevant de l'Institut
Pasteur.
➜ Immuno-hématologie
http://www.ints.fr/GroupeSanguin.aspx : centre national de référence pour les groupes sanguins.
http://www.sante.gouv.fr/htm/dossiers/hemabio_perinat/accueil_chp.htm : centre national de référence en
hémobiologie périnatale.
➜ Laboratoires de recherche
http://bir.inserm.fr/ : banque d'informations sur la recherche INSERM.
http://www.pasteur.fr/ip/easysite/go/03b-000017-000/recherche/departements-scientifiques : portail de
l'Institut Pasteur : annuaire des départements, unités, laboratoires et groupes de recherche.
➜ Laboratoires de biologie médicale spécialisés

et sites d'information sur les examens
http://www.lab-cerba.com/Catanalys.cfm : catalogue d'examens du laboratoire Pasteur Cerba.
http://www.biomnis.com/component/option,com_wrapper/Itemid,302/lang,fr/ : catalogue d'examens du
laboratoire Biomnis.
http://www.labtestsonline.fr/ : catalogue des examens de l'American Association for Clinical Chemistry
(AACC) : renseignements physiopathologiques.
http://calypsonet.chu-lyon.fr/Consultation/frame.asp : catalogue des examens du centre hospitalier univer-
sitaire de Lyon.
http://www.specimencare.com/index.asp : conditions pré-analytiques (site Internet sponsorisé par BD Dia-
gnostics – Preanalytical Systems, Europe »).
http://www.spidia.eu/ : projet européen relatif à la standardisation des conditions pré-analytiques pour les
diagnostics in vitro (SPIDIA).
http://whqlibdoc.who.int/hq/1999/WHO_DIl_LAB_99.1_REV.1.pdf : document de l'OMS sur l'utilisation des
anticoagulants pour les examens de biologie médicale.
3 Méthodologie pour la mise à disposition

d'un guide pré-analytique informatisé
(manuel de prélèvement) des examens
de biologie médicale
Les aspects méthodologiques et le rappel des exigences de la norme NF EN ISO 15189
sont présentés dans ce chapitre. Des suggestions pour l'utilisation de l'outil informatique,
avec plusieurs solutions pratiques possibles sont décrites. Les recommandations géné-
rales sur le contenu d'un manuel de prélèvement sont également présentées.
78
➥ Objet
Fournir des recommandations pour que chaque laboratoire
puisse élaborer le plus judicieusement possible, en fonction
des moyens disponibles ou choisis, son propre manuel de
prélèvement. Le but est que ce manuel réponde aux
exigences de la norme. Sa formalisation doit aboutir à un
véritable guide pour réaliser les prélèvements de manière
optimale et aider à la maîtrise de la phase pré-analytique
des examens de biologie médicale.
Aspects méthodologiques
➜ Généralités
Les informations à propos du manuel de prélèvement présentées dans la norme NF EN
ISO 15189 sont contenues dans les chapitres 5.4.3 et 5.4.9 de la norme. Ce manuel des
prélèvements doit comporter toutes informations ou documents permettant une prise
en charge des prélèvements destinés aux examens de biologie médicale. Les informa-
tions liées à la phase pré-analytique doivent présenter les caractéristiques suivantes :
• être disponibles dans le laboratoire à tout moment pour une utilisation
permanente ;
• être disponibles, pour certaines d'entre elles, auprès des clients du laboratoire :
patients, correspondants chargés d'un stockage intermédiaire, préleveurs
externes, prescripteurs ;
• être dépendantes du processus analytique, des caractéristiques des méthodes
en usage localement ;
• être organisées pour des mises à jour fréquentes ;
• être organisées pour faciliter la mise en forme du manuel de prélèvement.
➜ Exigences de la norme
La diffusion des documents doit être contrôlée : dates, versions, nombre d'exemplaires,
archivages. Cela répond à l'exigence de la norme : 5.4.4 : « Le manuel de prélèvement
des spécimens doit faire partie du système de maîtrise des documents ».
Cette caractéristique impose la mise en place d'un contrôle de ces informations et de
leur diffusion. Ce contrôle demande la nomination d'un responsable de la diffusion, dans
le laboratoire, et la mise en place d'un système fiable de gestion des versions.
Ces informations doivent, autant que faire se peut, être les plus pérennes possibles,
d'autant qu'elles sont diffusées à l'extérieur du laboratoire. Une attitude qui permettrait
de limiter la circulation de versions périmées serait d'annoncer la diffusion papier d'une
version n + 1 au moment de la diffusion n ou encore de diffuser systématiquement une
nouvelle version à intervalle de temps régulier (tous les ans, par ex.).
79
Les différents types de document peuvent être (liste non exhaustive) :

• des fiches d'information pour les prélèvements par analyse ;
• des formulaires de demande de renseignements ;
• des notices pour la réalisation des prélèvements ;
• un catalogue permettant une référence rapide pour les demandes les plus
courantes.
La construction de ce catalogue doit répondre à plusieurs points de la norme : 5.4.9 :
« Le laboratoire doit périodiquement revoir ses exigences en matière de volume
de spécimen exigé pour le prélèvement veineux (et autres spécimens, tel que le
LCS) afin de s'assurer que les quantités de spécimens prélevées ne sont ni exces-
sives ni insuffisantes ».
Cette revue périodique peut être faite lors de la revue de direction.
Et également : 5-4-3 : « Le manuel de prélèvement des spécimens doit comprendre
les éléments suivants : [...]
• c) des instructions concernant [...]
■ 2) le type et la quantité du spécimen à prélever,
■ 3) le moment précis auquel le prélèvement doit être effectué, si nécessaire,
■ 4) tout besoin de manipulation particulière entre le moment du prélèvement
et le moment de la réception par le laboratoire (exigences de transport,

réfrigération, chauffage, livraison immédiate, etc.), [...]
■ 6) les renseignements cliniques nécessaires (par exemple prise de médi-
caments) [...]
• d) des instructions concernant
■ 1) le stockage des échantillons examinés [...] »
Nous retrouvons dans ce chapitre 5.4.3 les items de la phase pré-analytique auxquels
sont confrontés quotidiennement les préleveurs.
➜ Suggestions pour le classement et l'utilisation de l'informatique

Les documents nécessaires à l'établissement du manuel de prélèvement peuvent être
classés en deux catégories :
• recommandations générales : nous retrouvons ici les instructions et formulaires
pour enregistrement qui peuvent être présents dans le manuel de prélèvement ;
• fiches pré-analytiques des examens constituant le catalogue.
Ces fiches peuvent être présentées sous la forme d'un dictionnaire des analyses, para-
mètre par paramètre, sur la base d'un modèle type présenté dans la section suivante.
Elles sont destinées à fournir les éléments d'informations nécessaires à l'ensemble des
utilisateurs des prestations du laboratoire. Le modèle type peut présenter les rubriques
principales suivantes :
■ les informations précisant le(s) contexte(s) physiopathologique(s) au(x)-
quel(s) le paramètre est rattaché ;

■ les valeurs de référence du laboratoire pour l'examen ;
■ la préparation du patient à l'examen ;
80
■ les conditions du prélèvement : modalités, détaillées s'il y a lieu, matériels

utilisés ;
■ les conditions (modalités) de manipulation et d'acheminement vers le
laboratoire.
Les documents de la première catégorie (constituant les recommandations générales)
peuvent être gérés individuellement par l'intermédiaire de la gestion documentaire du
système qualité, en particulier à l'aide d'un logiciel dédié. Un document intitulé « Manuel
de prélèvement du laboratoire XXX » peut être édité par compilation des informations.
Les fiches pré-analytiques sont rédigées à partir d'un document de base sous forme de
trame comportant les items nécessaires : nature et volume du prélèvement, préparation

du patient, stockage, etc. Ces fiches peuvent être présentées sous la forme d'un diction-
naire des analyses, paramètre par paramètre, dont on trouvera une liste exhaustive dans
la section suivante.
À ce stade, plusieurs possibilités s'offrent pour gérer ce catalogue, que l'on pourra joindre
en annexe du manuel de prélèvement ou qui fera l'objet d'un recueil indépendant.
Plusieurs méthodes peuvent être suggérées :
• Utiliser un unique document « traitement de texte », avec une fiche par page
et un classement des fiches par ordre alphabétique :
■ avantages : simple et direct. Une page de garde peut être la première page
pour présenter le document ;

■ inconvénients : aucun ; le rédacteur doit simplement avoir de la discipline
dans la gestion des versions.

Il faut donc préparer un document (type document « Word ») par examen
constituant le catalogue. La version mise à disposition des utilisateurs ne doit
pas être modifiable (document pdf ou Word verrouillé). La gestion des ver-
sions est simple et les évolutions successives d'une fiche n'ont pas de consé-
quence sur la pagination des autres documents.
• Utiliser une base de données intégrée à un « pack » de bureautique : plus
complexe, cette solution demande un temps de développement plus important
avec un gain mineur par rapport à la solution précédente.
• Utiliser une base de données et développer un logiciel adapté pour lire, modifier
et présenter les données. Cette solution plus complexe permet de mettre à
disposition un document complet sous forme papier mais également sur un site
Internet.
• Il peut être assez aisé de construire un site web avec des liens logiques sous
HTML conduisant rapidement l'utilisateur vers les fiches des analyses qu'il sou-
haite consulter. Les mises à jour sont effectuées par le webmestre. S'il continue
d'exister une version papier, les mises à jour sont effectuées par remplacement
des anciennes fiches par les nouvelles versions.
81
• Le manuel de prélèvement peut être un document fourni sous forme de

maquette par les sociétés d'accompagnement à l'accréditation grâce à des
outils qualité dédiés. Il convient au biologiste d'en vérifier et compléter le
paramétrage. Il doit en assurer la maîtrise conformément à la norme.
• Le manuel de prélèvement peut être un document partagé via des outils élec-
troniques dont il revient au biologiste de vérifier et prouver la pertinence de
l'utilisation qui en est faite.
➥
Conclusions
Le manuel de prélèvement est, dans le laboratoire de biologie
médicale, la clé de voûte de la maîtrise du processus
pré-analytique selon la norme NF EN ISO 15189. Ce manuel
peut comprendre, outre des recommandations générales, un
catalogue de fiches pré-analytiques. La gestion des données
liées à chaque prélèvement peut être effectuée par
f:\2000\image\130591\barbier\1
l'informatique par des moyens plus ou moins complexes qui

doivent répondre à la norme.
➜ FIGURE 2 : STRUCTURE ET ITEMS À DÉCRIRE DANS LE MANUEL DE PRÉLÈVEMENT
82
Éléments pré-analytiques utiles pour chaque examen

Il s'agit des items de la fiche pré-analytique pour chaque examen, items à retenir pour
l'élaboration du catalogue de fiches. Les éléments en bleu sont ceux formulés dans la
norme 15189.
• Liste des examens :
■ Nom (NABM [nomenclature des actes de biologie médicale] et nomencla-
ture de Montpellier)
■ Synonymes
•
Formulaire de consentement éclairé et attestation

• Information au patient : préparation du patient avant le prélèvement
• Information au préleveur : préparation du patient
• Nature du prélèvement
• Lieu de prélèvement
• Type de matériel pour le recueil et additif
• Type d'échantillon et quantité à prélever
• Moment ou horaire du prélèvement
• À jeun
• Manipulation particulière entre prélèvement et réception au laboratoire
• Renseignements cliniques
• Formulaire de renseignements cliniques requis
• Instruction pour la conservation avant analyse
• Délai de conservation pour prescrire une analyse complémentaire
• Délai de conservation en biothèque
• Analyses complémentaires
• Conditions de transport
■ Délai
■ Température
■ Abri de la lumière
■ Sécurité
• Si réalisable en urgence
• Valeurs usuelles, unités, facteur de conversion UI vers unités conventionnelles
• Précautions particulières à prendre
• Technique mise en oeuvre
• Délai de réalisation
• Examen transmis
• Bornes de « panique »
• Délais de conservations :
o o o
■ sang total : à température ambiante, à + 4 C, à – 20 C ou –70 C ;
o o o
■ plasma (ou sérum) : à température ambiante, à + 4 C, à –20 C ou –70 C ;
o o o
■ autres échantillons : à température ambiante, à + 4 C, à –20 C ou –70 C.
• Intérêt clinique
• Délai recommandé entre deux prescriptions de l'examen
83
Recommandations générales du manuel de prélèvement

Dans cette section, sont énumérées toutes les instructions utiles à la réalisation des
prélèvements, l'identification des échantillons, leur prétraitement et leur acheminement
vers le laboratoire. Le but de ces informations est de permettre la maîtrise de la phase
pré-analytique et de diminuer les risques d'erreurs de cette phase, en grande partie
réalisée à l'extérieur du laboratoire. L'objet est de garantir la qualité optimale des exa-
mens de biologie médicale.
➜ Procédures relatives à
• la préparation du patient
• l'identification des échantillons
• le prélèvement de l'échantillon primaire avec description du matériel de recueil
des échantillons primaires
➜ Instructions
• Façon de renseigner la feuille de prescription.

• Type et quantité de l'échantillon primaire à prélever
• Le moment précis
• Tout besoin de manipulation particulière entre le moment du prélèvement et
le moment de la réception au laboratoire
• Étiquetage
• Renseignements cliniques
• Identification complète
• Enregistrement de l'identité du prescripteur et du préleveur
• Élimination des déchets
• Stockage des échantillons examinés
• Délais pour prescrire une analyse complémentaire
• Les analyses complémentaires
➜ Référence à
• Liste des analyses disponibles au laboratoire

• Formulaire de consentement si nécessaire
• Informations fournies au patient sur sa préparation
• Information sur les indications médicales et le choix des méthodes disponibles.
• Références
1. NF EN ISO 15189. Laboratoires d'analyses de biologie médicale : exigences particulières concernant
la qualité et la compétence. (chapitres 5.4.3 et 5.4.9).
2. GBEA (guide de bonne exécution des analyses). Version 1 : Arrêté du 2 novembre 1994 relatif à la
bonne exécution des analyses de biologie médicale (JO du 4 décembre 1994 ; no 281). Version 2,
Arrêté du 26 novembre 1999 relatif à la bonne exécution des analyses de biologie médicale (JO du
11 décembre 1999 (no 287) modifié par l'Arrêté du 26 avril 2002 (JO du 4 mai 2002 ; no 104).
84
4 Examens nécessitant l'obtention

de renseignements et/ou de documents
particuliers
➥ Objet
Formaliser une liste des examens de biologie médicale pour
lesquels des renseignements ou des documents particuliers

sont indispensables soit pour la réalisation de la demande
soit pour l'interprétation des résultats.
Le tableau I présente les renseignements complémentaires (cliniques ou thérapeutiques)

nécessaires pour une interprétation correcte des résultats d'examens. Ces éléments sont
à adapter en fonction des contraintes et spécificités locales en concertation avec les
cliniciens et sages-femmes. Ce tableau peut être extrait à partir du manuel de prélève-
ment et a pour vocation d'offrir un accès sélectif et direct à cette partie du manuel pour
une information rapide.
➜ TABLEAU I. RENSEIGNEMENTS COMPLÉMENTAIRES NÉCESSAIRES LORS DE LA RÉALISATION

D'EXAMENS DE BIOLOGIE MÉDICALE PARTICULIERS
Examens Renseignements à obtenir
Activité anti-Xa Préciser le traitement anticoagulant en cours (posologie) et les horaires
d'injection et de prélèvement (à mi-distance entre 2 injections pour
héparine standard et 3 à 4 heures après l'injection pour HBPM)
Antithrombine III Préciser le traitement et les circonstances de la demande
Bactériologie But de l'analyse (diagnostic étiologique, choix ou suivi d'une
et virologie antibiothérapie, contrôle d'efficacité thérapeutique), traitement en cours,
immunodépression, voyage
Pour la recherche de germes particuliers ou inhabituels prendre contact
avec un biologiste
Bilan thyroïdien Renseignements cliniques, traitement en cours
Cofacteurs du TP Si possible renseignements cliniques (syndrome inflammatoire,
et du TCA grossesse), circonstances (saignement, thrombose, bilan pré-opératoire)
et traitements
Cortisol, Heure de prélèvement
adrénocortico-
trophine (ACTH)
D-dimères Renseignements cliniques, traitement
85
Dosages de Date et heure de prélèvement, date et heure de la dernière prise

médicaments Raison de la prescription
Date de début du traitement et/ou de l'éventuelle modification
de posologie
Âge, taille et poids du sujet si possible
Renseignements posologiques (quantité administrée, fréquence, voie
d'administration)
Antibiotiques : préciser si taux résiduel, pic ou plateau
Électrophorèse Circonstances de la demande
sérique Contexte clinique
Bilan Symptomatologie
immunologique Traitements
Immunotypage des
immunoglobulines
Électrophorèse
urinaire
Électrophorèse Renseignements cliniques
du LCS
Électrophorèse de NFS, bilan martial, origine ethnique
l'hémoglobine/ Antécédent familial
recherche d'une Bilan étiologique d'une microcytose et/ou d'une polyglobulie inexpliquée
anomalie de Suivi d'une hémoglobinopathie connue (préciser laquelle), confirmation
l'hémoglobine/ d'un variant et/ou de la mutation génétique suspectée
dosage de
l'hémoglobine S
Examen Présomption diagnostique
cytobactériolo- Contexte clinico-épidémiologique
gique du LCS Traitement antérieur ou actuel
FSH, LH, prolactine Renseignements cliniques, âge, période du cycle
Gaz du sang Nature de la ventilation : spontanée (air ambiant ou sous O2) ou assistée
(volume, fréquence, FIO2)
Température du patient
hCG Date des dernières règles (DDR)
Renseignements cliniques
Degré d'urgence
Hémoculture Renseignements cliniques (température, frissons, antibiothérapie)
Heure de prélèvement et no hémoculture
Lieu de prélèvement
En cas de suspicion d'endocardite infectieuse (EI) ou de brucellose,
prendre contact avec un biologiste
International Traitement antivitamines K (AVK)
Normalised Ratio Liquides de ponction
(INR) Renseignements cliniques
Marqueurs Préciser si diagnostic ou suivi thérapeutique (pathologie, traitement
tumoraux en cours)
86
Métabolites Renseignements cliniques

spécialisés Prendre contact avec un biologiste
Myélogramme Renseignements cliniques
Numération Renseignements cliniques dans le cadre de la surveillance d'une
formule plaquettes hémopathie
Parasitologie du Signes cliniques
sang, des selles, Origine géographique
des urines Déplacements et séjours effectués
Immunodépression
Plaquettes Préciser si traitement par héparine

Protéine C Renseignements cliniques
réactive (CRP)
pour recherche virale
Protéine C, Traitement anticoagulant en cours
protéine S Si possible renseignements cliniques (syndrome inflammatoire,
grossesse)
et circonstances (saignement, thrombose, bilan pré-opératoire)
Recherche de Prescription médicale, fiche de renseignements cliniques, attestation
mutation de consultation
génétique
Recherche de Dates et lieux de séjour
paludisme Chimioprophylaxie suivie
Recherche Renseignements cliniques, degré d'urgence
toxicologique Prendre contact avec un biologiste
Sérologies virales Renseignements cliniques, notion de voyage
« exotiques » Schizocytes
Renseignements cliniques
TP, TCA Préciser le contexte clinique : bilan pré-opératoire, traitement
(nom de spécialité et posologie)
Tests dynamiques Renseignements cliniques, nature précise du test, motif de l'indication
d'exploration
Trisomie 21 Prescription médicale, fiche de renseignements cliniques, attestation
de consultation et consentement de la patiente
Vitamine D Indiquer s'il s'agit de la recherche d'une carence ou d'un suivi de
traitement (si oui, préciser lequel)
HBPM : héparine de bas poids moléculaire ; LCS : liquide cérébrospinal ; NFS : numération formule sanguine ; TP : taux de
prothrombine ; TCA : temps de céphaline activée.
87
5 Examens spécifiques nécessitant

des conditions particulières ou susceptibles
d'interférences médicamenteuses
Certains examens nécessitent des conditions particulières afin d'être exacts et interpré-
tables. Il s'agit des examens nécessitant un jeûne strict, influencés par le rythme circa-
dien, sujets à des interférences médicamenteuses et à des variations importantes selon
➥
l'activité et la position du patient.
Objet
Formaliser une liste facilement accessible pour informer les
professionnels sur les modalités particulières pour la
réalisation des prélèvements et la prise en charge de certains
examens spécifiques.
Le respect des conditions énoncées dans ce chapitre permet une meilleure interprétation
des résultats et conduira donc à un diagnostic plus juste et précis. Sont détaillés dans
les sections suivantes :
• les paramètres nécessitant un jeûne strict ;
• les paramètres soumis à un rythme circadien (variant au cours de la journée) ;
• les interférences médicamenteuses et alimentaires ;
• les paramètres variant suivant la position du patient lors du prélèvement.
Examens dont la réalisation nécessite un jeûne strict
Examens Type de prélèvement et autres conditions particulières

Acides gras libres non estérifiés Sérum
Apolipoprotéine A1 Sérum ou plasma hépariné
Apolipoprotéine B Sérum ou plasma hépariné
Bilan ferrique Sérum ou plasma hépariné
Cholestérol Sérum ou plasma
Cholestérol LDL direct Sérum ou plasma
Cross-laps : sérum Plasma EDTA ou plasma hépariné non hémolysé
Prélèvement le matin à jeun avant 9 h 00, et toujours à la même
heure pour les prescriptions renouvelées. Séparer dans les
3 heures le sérum
88
Cross-laps : urines Urines de 1re ou 2e miction du matin. La créatininurie sera

effectuée systématiquement sur le même échantillon
(recommandations SFBC). Le mode de prélèvement choisi doit
être conservé dans les prescriptions renouvelées
Eau libre : clairance Sérum ou plasma hépariné + 15 mL Urines recueillies sur
24 heures ou 3 heures
Prélèvement à jeun. Préciser la diurèse et le temps de recueil des
urines
Gastrine Après jeûne de 10 heures minimum. Plasma à proscrire
Centrifuger et congeler immédiatement. Domicile déconseillé
Helicobacter pylori : test Air expiré 4 tubes à température ambiante

respiratoire à l'urée 13 C Le test doit être réalisé après :
– arrêt de tout traitement antibiotique depuis au moins
4 semaines
– arrêt des antisécrétoires depuis 2 semaines (IPP, anti-H2, etc.)
– arrêt des anti-acides et pansements gastro-intestinaux depuis
24 heures
Protocole : sujet à jeun depuis la veille, au repos sans boire ni
manger ni fumer pendant l'épreuve, temps de recueil de l'air
expiré à T0 et à T30
Homocystéine Plasma EDTA ou hépariné
Placer l'échantillon dans la glace fondante immédiatement après
le prélèvement. Centrifuger et décanter dans l'heure suivant le
prélèvement
Nordin (index de) Urines 10 mL, urines de 2 heures
avec ou sans hydroxyproline Faire boire à jeun à 8 h 00 le matin 300 mL d'eau de Volvic
(après avoir éliminé les urines de la nuit)
Recueil d'un échantillon urinaire à 10 h 00 le matin
Télopeptides N-terminal 5 mL d'urines de 1re ou 2e miction du matin
collagène I (NTX) : urines La créatininurie sera effectuée systématiquement sur le même
échantillon (recommandations SFBC). Le mode de prélèvement
choisi doit être conservé dans les prescriptions renouvelées
Phosphore : taux 1 mL de sérum + 5 mL d'urines de 2 heures
de réabsorption tubulaire Le sujet à jeun depuis la veille, vide sa vessie à 8 h 00 et absorbe
250 mL d'eau. Recueillir les urines émises de 8 à 10 h 00
Testostérone biodisponible Sérum exclusivement
Triglycérides Sérum ou plasma hépariné ou EDTA
Xylose Plasma fluoré ou sérum
EDTA : acide éthylène diamine tétra-acétique ; IPP : inhibiteurs de la pompe à protons ; anti-H2 : anti-histaminiques de type 2.
89
Examens soumis à un rythme circadien dont la réalisation

nécessite le respect de l'heure ou son indication impérative
sur la demande
En plus des variations nycthémérales présentées ici, certains paramètres peuvent être
modifiés par l'état physiologique du patient (âge, sexe, grossesse, obésité, jeûne, travail
posté de nuit, l'exercice, l'altitude, le fait de fumer, etc.) et seront à prendre en compte
lors de l'interprétation des résultats.

ACTH Plasma EDTA
Concentration maximale le matin
Aldostérone Sérum, plasma hépariné ou plasma EDTA
Régime alimentaire : valeurs de référence valables qu'en
régime normosodé (80-250 mmol/24 heures de natriurèse).
Aldostérone : urines 20 mL d'urines des 24 heures non acidifiées
Régime alimentaire : valeurs de référence valables qu'en
régime normosodé (80-250 mmol/24 heures de natriurèse).
Corticostérone : composé B Sérum ou plasma EDTA ou plasma hépariné
concentration maximale le matin
Cortisol : composé F Salive 5 mL prélevée dans « salivette » congeler < 4 heures
Cortisol : composé F Sérum, plasma hépariné ou plasma EDTA
Le cycle du cortisol est inversé chez le travailleur en poste de nuit
Le stress augment le cortisol qui ne doit pas être prescrit avant
24 heures d'hospitalisation
Désoxypyridinoline : urines 5 mL d'urines de 2e miction du matin
Concentration maximale le soir ou la nuit. En cas de prescriptions
renouvelées, l'heure de recueil devra être toujours la même
Déhydroépiandrostérone Sérum ou plasma EDTA ou plasma hépariné
(DHEA) Concentration maximale le matin
Prolactine Sérum, plasma hépariné
Prélèvement entre 8 et 12 h 00 (taux minimal) chez un sujet
reposé et non stressé, en début de cycle chez la femme, à distance
d'un traitement médicamenteux (antagonistes dopaminergiques,
psychotropes, etc.)
Parathormone (PTH) Sérum, plasma hépariné
Concentration maximale entre 14 et 16 h 00
Prélèvement le matin
Sulfate de prégnénolone Sérum ou plasma EDTA ou plasma hépariné
90
Thyréostimuline (TSH), Sérum ou plasma hépariné

T3 et T4
11-désoxycorticostérone Sérum
concentration maximale le matin
11-désoxycortisol : composé S Sérum ou plasma EDTA
17-hydroxy prégnénolone Sérum ou plasma EDTA ou plasma hépariné
21-désoxycortisol Sérum ou plasma EDTA ou plasma hépariné
Examens soumis à des interférences médicamenteuses

Pour tout dosage de médicaments, conformément à la NABM, toute demande doit
comporter impérativement :
■ la date et l'heure de prélèvement, la date et l'heure de la dernière prise ;
■ les raisons de la prescription (recherche d'efficacité et/ou de toxicité) ;
■ la date de début du traitement et/ou de l'éventuelle modification de
posologie ;
■ l'âge, la taille et le poids du sujet lorsque cela est possible ;
■ les renseignements posologiques (quantité administrée, fréquence, voie
d'administration).
Ne sont pas inclus dans ce tableau les paramètres modifiés physiologiquement par un
traitement, dont le clinicien devra tenir compte lors de l'interprétation des résultats :
prises de diurétiques, de vitamines, corticothérapie, traitement anticoagulant, traitement
thyroïdien substitutif, hypolipémiants...
Examens Interférences Interférences

médicamenteuses alimentaires
Acide 5-hydroxy indol Éviter dans les 48 heures précédant
acétique (5HIA) : le dosage la consommation de
plasma et urines banane, chocolat, fruits secs,
agrumes, avocat, tomate, prune,
kiwi, ananas et mollusques
Acide homovanilique Éviter dans les 48 heures précédant
(HVA) : urines le dosage, la consommation de
banane, vanille, thé, café, chocolat
Acide urique Hypo-uricémiant, transport
dans la glace et techniquer
très rapidement
Acide vanylmandélique : Éviter dans les 48 heures précédant
urines le dosage, la consommation de
banane, vanille, thé, café, chocolat
91
Aldostérone : Régime normosodé

sang et urine (80-250 mmol/24 heures
de natriurèse)
Ammoniémie Ne pas fumer dans les 6 heures
précédant le prélèvement
Anticoagulant circulant Recherche à proscrire lors Congeler < 1 heure
d'un traitement par héparine
(signaler si AVK ou HBPM)
Antithrombine III À distance d'un traitement par Congeler < 1 heure
héparine (1 semaine) ou d'une

prise d'oestrogène (1 mois).
Préciser les circonstances
Catécholamine Le traitement par bêtabloquants Exclure dans les 48 heures
et dérivés méthoxylés peut interférer dans le dosage précédant le dosage, chocolat,
et doit être arrêté sous banane, agrumes et consommer
contrôle médical modérément thé et café
Cortisol Corticothérapie Jeûne prolongé et stress peuvent
augmenter le taux
Créatine kinase (CK) Augmentée par les médicaments
administrés en intramusculaire
(peut être important si injections
répétées)
D-dimères Thrombolytiques
Dérivés méthoxylés Le traitement par bêtabloquants Exclure dans les 48 heures
des catécholamines : peut interférer dans le dosage précédant le dosage, chocolat,
plasma ou urines banane, agrumes et consommer
modérément thé et café
Électrophorèse Produits de contrastes iodés : pic
des protéines migrant en alpha, bêta ou gamma
Les traitements antibiotiques
peuvent donner une fausse
bisalbumine
Glucose-6-phosphate Ne pas réaliser après une
déshydrogénase (G6PD) transfusion sanguine
et pyruvate kinase (intervalle : 3 semaines)
Hémostase Préciser le traitement
anticoagulant
AVK : antivitamines K ; HBPM : héparine de bas poids moléculaire.
92
Examens présentant des variations importantes

selon la position du patient ou son type d'activité
et nécessitant impérativement la présence
de cette indication sur la demande

Acide lactique Nettement augmenté au cours de l'effort sportif chez un sujet
normal
Activité rénine-angiotensine Facteurs influençant l'activité du système
et aldostérone rénine-angiotensine-aldostérone (SRAA) :

• position du sujet (préciser debout/couché sur le tube) :
– couché : sujet couché depuis au moins 3 heures, n'ayant pas
mis le pied par terre (prise de sang à domicile avec tierce
personne pour ouvrir la porte)
– debout : déambulation pendant une heure minimum. La rénine,
comme l'aldostérone, double en orthostatisme
• heure : concentration maximale vers 8 h 00 du matin
• âge : la concentration diminue avec l'âge (le taux chez les
sujets ayant plus de 50 ans est deux fois moindre que chez les
sujets de moins de 30 ans)
• apports sodés : l'activité du SRAA est inversement liée aux
apports sodés. Il est donc indispensable d'effectuer l'exploration
chez des patients ayant un régime normalement sodé
• prises médicamenteuses : la plupart des anti-hypertenseurs
interfèrent avec l'activité du SRAA. Les diurétiques, les
bêtabloquants, les inhibiteurs de l'enzyme de conversion, doivent
être arrêtés au moins 15 jours avant l'exploration, 1 mois s'il s'agit
d'anti-aldostérone (spironolactone). Seuls les traitements par la
prazosine (Minipress®, Alpress LP®) et les anti-hypertenseurs
centraux (type alpha méthyl dopa) peuvent être poursuivis
Créatine kinase L'activité sportive intense augmente très significativement les
résultats
Gaz du sang La gazométrie peut être réalisée selon les besoins sur un patient :
– au repos
➥
– après effort
– sous air
– sous oxygène
Il convient de compléter et d'adapter ces listes en fonction

des missions du laboratoire et de son activité. Concernant les
interférences médicamenteuses, la liste doit être établie à partir
des fiches techniques des examens propres au laboratoire car
elles sont étroitement liées à la technique utilisée localement.
Pour un bon respect des modalités pré-analytiques, il convient
de se référer au manuel des prélèvements.
93
6 Recommandations pour établir une liste des tests

d'exploration dynamique et examens particuliers
Ce chapitre présente la trame d'un CD-Rom réalisé par le collège national de biologie
des hôpitaux (CNBH) qui se veut être un outil didactique pratique pour la mise en oeuvre
d'explorations spécialisées statiques ou, la plupart du temps, dynamiques. Le lecteur
pourra se procurer le CD-Rom complet en suivant le lien proposé sur http://www.sfbc-
accreditation.org.
Ce chapitre rassemble la plupart des examens biologiques statiques et dynamiques qui
➥
peuvent être plus exceptionnellement prescrits par les médecins spécialistes. La liste de
ces examens est classée par spécialité, par axe ou par domaine couvrant 15 thématiques.
Objet
La liste des tests est associée à des thématiques
particulières en vigueur pour lesquels il est utile que
le laboratoire dispose d'une documentation pertinente
à transmettre aux cliniciens sous forme de fiches papier
ou de documents électroniques consultables sur un Intranet
et, le cas échéant, éditables par l'utilisateur. L'ensemble
de ces fiches doit être disponible dans ou à partir du manuel
de prélèvement.
Thématiques et tests à documenter

Il est recommandé que les cliniciens puissent trouver dans le manuel de prélèvement
une documentation sur les thématiques suivantes. Pour certaines d'entre elles, une intro-
duction sera parfois nécessaire. Pour chacun des tests listés ici, nous conseillons de
rédiger des fiches dont vous trouverez un modèle dans la section suivante.
➜ Allergologie
• Introduction au choc anaphylactique

• Choc anaphylactique
• Test d'histaminolibération
• Test de libération des leucotriènes
• Allergie immunomédicamenteuse
94
➜ Cardiologie
• Catécholamines et leurs métabolites

• Dosage de la rénine/aldostérone
• Test au captopril ®
• Test au Catapressan ou clonidine pour catécholamines
• Freinage aldostérone
• Syndrome coronarien aigu (SCA) et troponines
➜ Axe corticotrope
• Introduction à l'axe corticotrope

• Adrenocorticotropic Hormone (ACTH) et cycle ACTH
• Cycle cortisol et cortisol libre urinaire
• Test à la lysine-vasopressine
• Test à la métopirone classique per os
• Test à la métopirone rapide per os
• Test au CRF (Corticotropin-releasing factor) ou CRH (Corticotropin-releasing
hormone)
• Test CRF ornithine TRH (Thyrotropin-releasing hormone) test triple
• Test de Liddle, test au Dectancyl®
• Test au Dectancyl®, test de freination nocturne
• Test à la dexaméthasone
• Test au Synacthène® rapide
• Test au Synacthène retard®
• Test court de stimulation à l'ACTH adulte
• Test court de stimulation à l'ACTH enfant
• Test au Synacthène® en réanimation
➜ Gastro-entérologie
• Recueil des selles pour la recherche de sang occulte

• Recherche de sang dans les selles par la technique d'immunochromatographie
• Test au xylose adulte
• Chimisme gastrique
• Clairance de l'alpha 1 antitrypsine
• Fécalogramme
• Stéatorrhée : graisses dans les selles
• Test de charge en galactose
• Test à la sécrétine
• Transit digestif : test au rouge carmin
• Pancréolauryl test
• Test respiratoire à l'urée
• Clairance au vert d'indocyanine
95
➜ Génétique
• Introduction à la génétique
• Dépistage de la trisomie 21
➜ Axe gonadotrope
• Introduction à l'axe gonadotrope

• Test à la TRH chez l'enfant ®
• Test à la LH-RH (Luteinizing hormone-releasing hormone) après Décapeptyl
• Test à l'HCG (gonadotrophine chorionique humaine) standard chez l'enfant
• FSH (Follicle-stimulating hormone) et LH urinaires (bilans de puberté)

• Test à la LH-RH court
• Test à la LH-RH chez la femme
• Test au citrate de clomifène (femme)
• Mini cycle FSH/LH
• Test de réserve ovarienne
• Test à la LH-RH chez l'homme
• Test au citrate de clomifène (homme)
®
• Test au Primpéran intraveineux
• Test l'HCG court chez l'homme
• Tableau des valeurs de référence
➜ Axe lactotrope
• Introduction à l'axe lactotrope

• Test à la L-dopa
• Test à la TRH et au métoclopramide
• Test à la TRH long avec dosage de prolactine
➜ Néphrologie
• Clairance de la créatinine
• Clairance des phosphates
• Index de Nordin
• Test d'acidification au NH4Cl
• Test d'hypercalciurie provoquée (test de Pak)
• Test de charge hydrique complet
• Test de restriction hydrique simple
• Test à la desmopressine ®
• Test de restriction hydrique complet au Minirin
• Volume de sang pour les bilans d'hémodialyse
• Test à la PTH (Parathyroïd hormone)
• Test d'orthostatisme
®
• Test au Minirin Spray (solution endonasale)
96
➜ Pédiatrie
• Galactosémie congénitale
• Glycogénose de type 3 ou 6
• Déficits métaboliques congénitaux
• Test au xylose chez l'enfant
• Ambiguïté sexuelle chez le nouveau-né
®
• Test au Synacthène à faible dose
®
• Test au Synacthène classique
• Test à la LH-RH chez l'enfant
®
• Test à la LH-RH après Décapeptyl chez l'enfant
• Test à l'HCG chez l'enfant
• FSH et LH urinaires (bilans de puberté)
• Accidents hypoglycémiques chez l'enfant
• Hyperplasie congénitale des surrénales
• Mutation du récepteur des androgènes
• Prélèvements post-mortem (mort subite du nourrisson)
• Test associés (à préciser selon les pratiques locales)
➜ Axe somatotrope
• Introduction à l'axe somatotrope

• Test à l'ornithine
• Test à l'arginine
• Test à l'insuline
• Test à la clonidine
• Test à la L-dopa avec dosage de hGH (human growth hormone)
• Test à l'arginine et l'insuline
• Test au glucagon-propranolol
• Test au glucagon-bétaxolol
• Test à la clonidine-bétaxolol
• Test au GHRH (growth hormone-releasing hormone) ou GRF (Growth hormone-
releasing factor)
• Test d'hyperglycémie provoquée orale (HGPO) avec dosage d'hGH
• Test à la TRH avec dosage d'hGH et prolactine (PRL)
• Test à la LH-RH avec dosage d'hGH
• Cycle d'hGH
• Cycle hGH après somatostatine
• Test couplé à la GHRH-arginine
97
➜ Axe thyréotrope
• Introduction à l'axe thyréotrope

• Test à la TRH court
• Test TRH avec dosage de TSH, hGH et PRL
• Test couplé à la TRH et la LH-RH ®
• Test à la pentagastrine (Peptavlon ) (indisponible depuis le 1er mai 2008,
Afssaps)
• Test à la TRH long
• Test au Thyrogen®
➜ Dosage de médicaments
• Informations sur les dosages de médicaments

• Liste des médicaments dosables
• Test d'acétylation de l'INH (isoniazide)
• Dosage d'antibiotiques
• Dosage des antirétroviraux
➜ Diabétologie
• Introduction au diabète sucré

• Introduction au diabète gestationnel
• Cycle glycémique
• HGPO sur 2 heures
• HGPO sur 5 heures
• HGPO sur 2 heures (diagnostic de diabète gestationnel)
• Test au glucagon
• Test au tolbutamide
• Épreuve de jeûne
• Test de tolérance au glucose er
• Test d'O'Sullivan et Mahan (1 temps)
e
• Test de O'Sullivan (2 temps)
• Dépistage du diabète de type 1 (fratrie)
➜ Test de mobilisation et divers
®
• Test au Desféral
• Plomburie provoquée : EDTA (sel calcicosodique de l'acide éthylène diamine
tétra-acétique)
• Adrénalinurie provoquée
• Test à la D-pénicillamine
• Test de charge en pyridoxine
• Électrophorèse des protéines du liquide cérébrospinal (LCS)
• Diagnostic d'une porphyrie
• Diagnostic de la maladie de Creutzfeldt-Jacob (MCJ)
• Prélèvement post-mortem
98
➜ Post-hypophyse
• Introduction à la post-hypophyse
• Test de charge hydrique
• Test de restriction hydrique complet
• Test de restriction hydrique simple
• Test à la lysine-vasopressine
Plan d'une fiche : modèle de grille à utiliser
pour la documentation de chaque test
Nom du test
Principe Décrire en quelques mots le principe du test

et son intérêt
Préparation du patient Préciser les conditions de préparation du sujet :

– à jeun ou non ;
– couché ou débout ou assis ;
– régime particulier ;
– etc.
Matériel – Liste du matériel et des tubes à prélever

– Produits à administrer, comment se le procurer
– Comment l'administer ?
– Surveillance médicale associée : pouls, tension,
poids
– Les précautions particulières, présence d'un médecin
à proximité
Protocole Le timing précis des produits à administrer

et des échantillons à prélever
Transmission Comment et dans quels délais transmettre les

au laboratoire échantillons et la demande au laboratoire ?
Résultats Valeurs usuelles : .............................................................

Interprétation : .................................................................
NB : cette grille est valable pour un test. Pour une introduction au choc anaphylactique ou à la génétique ou à l'un des
axes endocriniens, il est recommandé de faire un résumé des articles qui font référence en la matière tels que les
recommandations des bonnes pratiques éditées par la Haute Autorité de santé (HAS) ou par les sociétés savantes telles
que la Société française d'endocrinologie (SFE) ou la Société française de biologie clinique (SFBC).
99
• Références
1. Schilienger JL, André G, Chabrier G, Reiss D, Simon C. Explorations fonctionnelles en endocrinologie
et métabolisme (2e édition). Paris : Expansion scientifique française 1993, 198 pages.
2. Szymanowicz A, Billion P, Collignon I, et al. Protocole d'explorations en biochimie. Roanne : Collège
national de biochimie des hôpitaux, 1999, 180 pages (ISBN 2-9513631-1-7).
3. Szymanowicz A, Billion P, Cartier B, et al. Protocole d'explorations en biochimie (Version 3). Roanne :
Collège national de biochimie des hôpitaux, 2004 (CD-Rom). (Version 4 en cours de finalisation.)
4. Thomas-Teinturier C. Le B.A.-ba des tests en endocrinologie pédiatrique. Paris : Éditions John Libbey
Eurotext, 2006, 44 pages.
7 Fiche standardisée descriptive d'un examen

Ce chapitre est proposé en vue de la création d'un catalogue le plus descriptif possible
des examens disponibles dans le laboratoire. Il intègre tous les items relatifs aux trois
phases de son élaboration : pré-analytique, per-analytique et post-analytique. Le but est
de rassembler sur le même document toutes les informations utiles à chaque profes-
sionnel concerné par les examens de biologie médicale : biologiste, technicien, secré-
taire, préleveur, médecin prescripteur. Ce chapitre a une vocation pratique permettant
de répondre à toute information sur les examens réalisés et pédagogique dans le cadre
de l'intégration de nouveaux professionnels. Il peut également servir de plan à des
procédures ou modes opératoires analytiques. La capacité des outils informatiques
actuels facilite grandement la réalisation d'un tel catalogue et en permet l'accès très
aisé.
Méthode
Il convient d'utiliser l'expérience professionnelle du groupe et la description des catalo-
gues d'examens présents sur les sites Internet de laboratoires français et étrangers.
L'utilisation des rares références internationales est également très instructive.
Identification de l'examen
➜ Nom
•Nom de l'analyte
•Abréviation
•Synonymes
•Expression des résultats : unités et facteurs de conversion
100
➜ Nomenclature des actes de biologie médicale (NABM)

•Date de création dans le catalogue
•No d'analyse
•Chapitre no
•Cotation en B et en euros
➜ Autres cotations
•BHN (B hors nomenclature, code dit de « Montpellier »), Code de procédure pénale
(CPP), Compagnie nationale des biologistes et analystes experts (CNBAE)...
➜ Obligations réglementaires
•Dosages en double
•Utilisation de deux techniques différentes
•Méthodes légales (alcoolémies, stupéfiants, etc.)
•Techniques de références
•Matériau de référence (étalons, etc.)
•Conservation en biothèque
➜ Intérêt et indications de l'examen

•Décrire les éléments principaux justifiant la prescription de l'examen
Phase pré-analytique
➜ Conditions de prélèvement
•Identification, étiquetage
•Nature de(s) l'échantillon(s) : sang périphérique, artériel, veineux, urines, autres
milieux...
•Nature des récipients utilisables, ordre de remplissage, nombre de tubes
•Volume ou quantité d'échantillons à prélever
•Causes d'erreurs : garrot, alcool comme antiseptique, gauges trop fines, cathéter
•Date et heure du prélèvement
•Nombre de prélèvements ou d'échantillons
➜ Renseignements utiles/indispensables
•Liés à la demande : prescription médicale, judiciaire...
•Liés au prélèvement : date, heure, temps de recueil... prélèvements conser-
vatoires.
•Liés au patient : poids, taille, date des dernières règles (DDR), date des faits,
date du décès...
•Cliniques : pathologie, causes de l'hospitalisation, circonstances de l'intoxi-
cation...
101
• Liés aux traitements : thérapeutique suivie ou mise en oeuvre, date de la der-

nière/prochaine prise, dose.
• Liés au site de prélèvement anatomique
➜ Échantillons biologiques
•Date et heure de réception des échantillons
•Date et heure, modalités d'enregistrement des demandes et des échantillons
(nombre), étiquetage
•Conditions de centrifugation, d'aliquotage, de mise en biothèque
•
Volume nécessaire pour l'analyse

•Prétraitement éventuel
•Conditions de stabilité de l'analyte dans l'échantillon
•Conservation pré-analytique
•Conditions de transport en cas de sous-traitance
•Causes de non-conformités liées à l'identité, à la demande et/ou au prélè-
vement
➜ Facteurs de variations biologiques, physiopathologiques ou iatrogènes

•Âge, sexe
•Régime
•Rythme nycthéméral ou biologique
•Grossesse
•Traitement
•Principales pathologies concernées, recommandations de la Haute Autorité de
santé (HAS)
➜ Données pharmacologiques et toxicologiques

•Demi-vie, élimination, métabolisme, distribution, redistribution post-mortem
•Concentrations thérapeutiques (résiduelle, maximum) toxiques, létales
Phase analytique
➜ Méthodes et systèmes analytiques utilisables
•Description du matériel, identification
➜ Système analytique utilisé (réactifs + appareils)

•Critères de choix, principe de la méthode
•Validation de la méthode et du système (vérification, qualification)
•Appareil : principe de fonctionnement, description, liste des analyses réalisées
• Réactifs : marquage CE, conservation, préparation, stabilité sur appareil,
localisation
•Consommables : nature, conformité avec les normes du fournisseur de l'appareil
•Étalons, spécimens de contrôle, calibrateurs : nature, nombre, préparation, uti-
lisation, stabilité sur l'appareil, localisation
102
➜ Mode opératoire : fiche technique

•Programmation des instruments, température, nature du diluant, dilution des
échantillons
•Nombre de mesures, nature du blanc réactif...
•Mode et fréquence du contrôle de la calibration
•Calculs et facteurs de conversion
•
Contrôles : valeurs cibles, limites d'acceptabilité, de rejet (recalibration), d'alerte
(mesures correctives) et conduites à tenir.
•Modalités de saisie des résultats (double saisie), connexion informatique
➜ Performances analytiques
•Domaine de mesure : limite de détection, de quantification : linéarité (proto-
coles de dilution)
•Précision pour différents niveaux des concentrations : intra et inter-séries
•Corrélation
•Calcul d'incertitude
➜ Causes d'erreurs : précautions particulières

•Nature du liquide de dilution
•Limites de stabilités de l'analyte
•Interférences analytiques :
■ endogènes : bilirubine, turbidité, hémolyse, agglutinines froides, facteurs
rhumatoïdes (FR), immunoglobulines monoclonales de type M (IgM)...

■ exogènes : médicaments, produits de contraste iodés, aliments, adulté-
rants, gammaglobulines, transfusions...

•Interférences liées à la technique [chromatographie en phase gazeuse (CPG),
chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (CPG/
SM), etc.] ou à la matrice [absorption atomique (AA), etc.]
•Réactions immunologiques croisées (faux positifs, etc.)
•Seuils de sensibilité (faux négatifs, etc.)
•Présence d'anticorps hétérophiles, macroprotéines
•Conditions de transport des échantillons non respectées ou non tracées
•Contaminations, ordre de passage, fréquence des rinçages...
➜ Validation technique et biologique

•Bornes de validation technique et de réanalyse, delta-check (cohérence des
résultats biologiques dans le temps) absolu et relatif...
•Bornes de « vraisemblance », seuils létaux...
•Critères de validation biologique : cohérence avec les autres paramètres biolo-
giques et avec les renseignements cliniques...
•Conduite à tenir devant des résultats anormaux
103
➜ Bibliographie et documents associés

•Dossier de vérification de méthode
•Références bibliographiques
•Ouvrages scientifiques
•Résultats des essais de validation de la méthode et du système analytique
•Références des procédures, fiches techniques, modes opératoires, cahiers de
maintenance concernés
•Carnets de bord des réactifs, calibrateurs, contrôles et certains consommables :
dates de réception, de reconstitution ou de préparation, de péremption, numéro
de lots et dates de changement

•Recommandations de pratiques professionnelles
➜ Procédures dégradées
•Techniques de « dépannage » ou transmission des échantillons à un autre
laboratoire
Phase post-analytique
➜ Conservation post-analytique des échantillons
•Modalités (température, durée, hygrométrie, obscurité, etc.) réglementaires ou
fixées par le biologiste
•Lieu de conservation et localisation précise (archivage et biothèque)
➜ Élimination des échantillons

•Modalités d'élimination des échantillons (procédure d'élimination)
➜ Transmission des résultats

•Modalités de transmission : mentions obligatoires, serveur de résultats...
•Analyses « sensibles » : virus de l'immunodéficience humaine (VIH), marqueurs
tumoraux, stupéfiants, bêta-HCG...
•Modalité de transmission des résultats urgents
•Modalité de transmission des résultats très pathologiques
➜ Informations et documents à archiver

• Modalités de conservation des documents (réglementaires ou fixées par le
biologiste) : enregistrement des échantillons, résultats, rapports, documents
•Techniques de laboratoire (courbes de calibrage, tracés, etc.).
•Mesures correctives : anomalies constatées aux contrôles interne et externe
Conflits d'intérêts : aucun
104

SG1 04 Recommandations Pour La Maîtrise de Létape de Prélèvement Des Échantillons Biologiques

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Qualité et accréditation en biologie médicale

Ann Biol Clin 2010 ; 68 (Hors série no 1) : 69-104

Recommandations pour la maîtrise

F. Barbier, Z. Berkane, JP. Dehorne, G. Desch, JL. Dhondt, I. Drouillard,

MOTS CLÉS : accréditation | ISO 15189 | pré-analytique | prélèvement | renseignements

ABSTRACT Guidelines relative to the collection and handling management

SG1-04 Recommandations pour la maîtrise

➥ Décrire tous les éléments nécessaires et suffisants pour assurer de manière

charge maitrisée va conduire à la réalisation d'examens de biologie médicale

1 Instructions spécifiques relatives au prélèvement

Fiche pédagogique d'instructions relatives au prélèvement

Prévention du risque Utiliser du matériel de prélèvement à usage unique et sécurisé

Matériel nécessaire Choix du matériel nécessaire au prélèvement (cf. catalogue

– localisation du site de prélèvement quand cela est nécessaire

Boîtes de transport des flacons (ECBU, expectoration, LCS, etc.)

Boîtes de transport pour triple emballage contenant un support

Matériel permettant la conservation de l'échantillon

produit désinfectant, évitez la solution alcoolisée lorsqu'il s'agit

➜ FIGURE 1 : RESPECTEZ LES ÉTAPES ET RESTEZ VIGILANTS JUSQU'AU BOUT !

• Bonne personne/bonnes étiquettes

• Bons tubes/bon ordre

➜ Bonnes conditions d'acheminement du prélèvement au laboratoire

Conditions de température Respect des conditions d'acheminement au laboratoire dictées

Délais d'acheminement Respect des délais d'acheminement au laboratoire. Se référer

au manuel de prélèvement réalisé par le laboratoire

Modalités de Les échantillons prélevés sont insérés dans la partie hermétique

Boîte de transport identifiée au nom du laboratoire expéditeur

Instructions liées au traitement de l'échantillon au laboratoire

Étiquetage Règles générales : rigueur, attention. L'étiquette du laboratoire

Centrifugation Respect du temps de coagulation requis pour les tubes secs

Nature de l'échantillon Respect des recommandations des fiches techniques

Examens transmis Préférez le tube primaire (obligatoire pour les examens

Cryoconservation Préférez les tubes primaires (tube à séparateur de sérum avec

2 Références consultables sur Internet

Pour le domaine de l'acte de prélèvement

➜ Références spécifiques à certains actes de prélèvement

Pour les examens rares ou spécialisés

➜ Maladies rares et orphelines

➜ Cancers rares de l'adulte

➜ Laboratoires de biologie médicale spécialisés

3 Méthodologie pour la mise à disposition

Les différents types de document peuvent être (liste non exhaustive) :

■ 3) le moment précis auquel le prélèvement doit être effectué, si nécessaire,

■ 4) tout besoin de manipulation particulière entre le moment du prélèvement

et le moment de la réception par le laboratoire (exigences de transport,

➜ Suggestions pour le classement et l'utilisation de l'informatique

quel(s) le paramètre est rattaché ;

■ la préparation du patient à l'examen ;

■ les conditions du prélèvement : modalités, détaillées s'il y a lieu, matériels

trame comportant les items nécessaires : nature et volume du prélèvement, préparation

pour présenter le document ;

dans la gestion des versions.

• Le manuel de prélèvement peut être un document fourni sous forme de

l'informatique par des moyens plus ou moins complexes qui

➜ FIGURE 2 : STRUCTURE ET ITEMS À DÉCRIRE DANS LE MANUEL DE PRÉLÈVEMENT

Éléments pré-analytiques utiles pour chaque examen

Formulaire de consentement éclairé et attestation

Recommandations générales du manuel de prélèvement

• Façon de renseigner la feuille de prescription.

• Liste des analyses disponibles au laboratoire

4 Examens nécessitant l'obtention

lesquels des renseignements ou des documents particuliers

Le tableau I présente les renseignements complémentaires (cliniques ou thérapeutiques)