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BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDTR-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DU DOSAGE DE Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Nombre de pages :
TRIGLYCERIDE Date d’application
Evolution du document
1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage des triglycérides dans le
plasma ou le sérum. Elle permet de détecter une anomalie du taux de graisses circulant dans le
sang.
2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
GPO : Glycérol 3 phosphate Oxydase
PAP : Amino Antipyrine
SL : Surveillant du laboratoire
RQ : Responsable Qualité
4- Principe
Test photométrique enzymatique (GPO) basé sur la détermination des triglycérides selon
les réactions suivantes :
HÔPITAL STE JOSEPHINE
BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDTR-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DU DOSAGE DE Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Nombre de pages :
TRIGLYCERIDE Date d’application
7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse
Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Flacon R1 Tampon 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R2 Enzyme 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R3 (Etalon primaire) Triglycérides 2 g/l 2à8°C Réfrigérateur
Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leurs conformités.
o Centrifugation et décantation : Les échantillons sont centrifugés à 4000 tours
pendant 10 minutes puis décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve
avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le
tableau ci-dessous
Blanc Etalon Dosage
Réactif 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 10µl
Etalon 10 µl
Spécimen 10µl
Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à 37°C ou 20 minutes à la température ambiante puis lire à 500 nm (4
520). La coloration est stable 1 heure.
Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
|( Dosage )|×Concentration étalon
Résultat :
|( Etalon)|
HÔPITAL STE JOSEPHINE
BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDTR-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DU DOSAGE DE Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Nombre de pages :
TRIGLYCERIDE Date d’application
12- Interférences
Acide ascorbique : Pas d’interférence jusqu’à 25 mg/l. Au-delà, sous-estimation.
Bilirubine : Interférence négative à partir de 80 ml/l. Au-delà, sous-estimation.
Hémoglobine : Pas d’interférence jusqu’à une concentration de 193 g/dl. Au-delà, sous-estimation.
Glycérol libre : Surestimation d’environ 0,10 g/l générée par le glycérol endogène.
13- Valeurs critiques
Sans objet
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse
- Fiche de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage Triglycérides (GPO) BIOLABO Ref : 80019,87319.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation