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HÔPITAL STE JOSEPHINE

BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de Code : PDTR-HSJB-01
Mission Tové PROCEDURE DU DOSAGE DE Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 Nombre de pages :
TRIGLYCERIDE Date d’application 

Création du document : 02 Mars 2022

Nom Fonction Date et Signature


Auteur(s) Surveillant du
FOLLY Yao Anani
laboratoire
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Personne
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Table des matières


1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3
2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3
3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3
4- Principe......................................................................................................................................3
5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3
6- Échantillon :...............................................................................................................................4
7- Équipements et fournitures.........................................................................................................4
8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4
9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4
10- Mode opératoire......................................................................................................................4
11- Valeurs de référence...............................................................................................................5
12- Interférences...........................................................................................................................5
13- Valeurs critiques.....................................................................................................................6
14- Formulaires connexes.............................................................................................................6
15- Références..............................................................................................................................6
16- Pièces jointes..........................................................................................................................6
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1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage des triglycérides dans le
plasma ou le sérum. Elle permet de détecter une anomalie du taux de graisses circulant dans le
sang.

2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
GPO : Glycérol 3 phosphate Oxydase
PAP : Amino Antipyrine
SL : Surveillant du laboratoire
RQ : Responsable Qualité

3- Tâches, autorisations et responsabilités

Tâche Autorisé Responsable


Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, RL RL
Mesure à blanc RQ, RL RL
Préparation des réactifs RQ, RL RL
Préparation des sérums de contrôle RQ, RL RL
Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, RL RL
Passage des échantillons RQ, RL RL
Validation analytique RQ, RL RL

4- Principe
Test photométrique enzymatique (GPO) basé sur la détermination des triglycérides selon
les réactions suivantes :
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La concentration de la quinonéimine est proportionnelle à la concentration des


triglycérides.
5- Sécurité et environnement
- Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes)
- Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux.
- Respect la procédure de tri et de gestion des déchets
Par mesure de sécurité, tous échantillon doivent être traités comme potentiellement
infectieux.
6- Échantillon :

Matériel Quantité Stabilité


minimale
Sérum, Plasma (héparine,EDTA) 50 µl 5 à 7 jours entre 2 et 8° C ; 3 mois – 20 °C

7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse
Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Flacon R1 Tampon 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R2 Enzyme 2à8°C Réfrigérateur
Flacon R3 (Etalon primaire) Triglycérides 2 g/l 2à8°C Réfrigérateur
Sérum de contrôle normal Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur
Sérum de contrôle pathologique Sérum -10 à 20 °C Réfrigérateur

- Préparation de la solution de travail : Verser le contenu du flacon R2 (Enzyme)


dans le flacon R1(Tampon). Mélanger doucement et attendre la dissolution complète
(2 minutes environ)
- Stabilité : La solution de travail est stable jusqu’à la date de péremption indiquée sur
la boite.
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9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leurs conformités.
o Centrifugation et décantation : Les échantillons sont centrifugés à 4000 tours
pendant 10 minutes puis décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve
avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le
tableau ci-dessous
Blanc Etalon Dosage
Réactif 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 10µl
Etalon 10 µl
Spécimen 10µl
Bien mélanger et incuber pendant 5 minutes à 37°C ou 20 minutes à la température ambiante puis lire à 500 nm (4
520). La coloration est stable 1 heure.

Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
|( Dosage )|×Concentration étalon
Résultat :
|( Etalon)|
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o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes


phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ.
o Intervalle de mesure : 0,1-7 g/l (7,9 mmol/l), diluer au 1/2 avec du sérum
physiologique si la valeur est supérieur à 7g/l.
o Facteur de conversion 
g/l x 1, 143 = mmol/l
11- Valeurs de référence 
Triglycérides : 0,35- 1,60 g/l

12- Interférences
Acide ascorbique : Pas d’interférence jusqu’à 25 mg/l. Au-delà, sous-estimation.
Bilirubine : Interférence négative à partir de 80 ml/l. Au-delà, sous-estimation.
Hémoglobine : Pas d’interférence jusqu’à une concentration de 193 g/dl. Au-delà, sous-estimation.
Glycérol libre : Surestimation d’environ 0,10 g/l générée par le glycérol endogène.
13- Valeurs critiques 
Sans objet
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse
- Fiche de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage Triglycérides (GPO) BIOLABO Ref : 80019,87319.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation

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