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Numération des

réticulocytes

Année 2008 Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS) 1


POCHET
Érythropoïèse : genèse du réticulocyte

Proérythroblaste

MOELLE OSSEUSE ROUGE


Érythroblaste
basophile I

Érythroblaste
basophile II

Érythroblaste
polychromatophile

Érythroblaste
acidophile

Réticulocyte ou
Proérythrocyte

Réticulocyte ou

SANG
Proérythrocyte
Hématie, Érythrocyte
ou Globule rouge

Année 2008 Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS) POCHET 2


Présentation du réticulocyte

 Globule rouge
 passé dans le sang depuis moins de 48 heures
 témoin de l’activité érythropoïétique de la moelle
osseuse rouge
 Cellule
 de taille légèrement plus élevée que l’hématie mature
 non saturée en hémoglobine,
 possédant encore quelques ribosomes et des traces
de protoporphyrine permettant de terminer la
synthèse de l’hémoglobine

Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)


Année 2008 POCHET 3
Mise en évidence

 Cellule non repérable à la coloration au MGG


 À peine plus grosse
 À peine plus uniformément colorée en gris-bleuté

 Cellule identifiable grâce à la révélation des


ribosomes et traces de protoporphyrine par
 Précipitation (colorants vitaux)
 Marquage spécifique de l’ARN ribosomal

Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)


Année 2008 POCHET 4
Technique de coloration

 Colorants
 Bleu de Crésyl Brillant,
 Bleu de Una,
 New Methylen Blue …

 Incubation
 volume à volume du sang avec le colorant (sauf hématocrite
faible : 1 volume de colorant pour 2 volumes de sang)
 10 minutes (37°C) à 20 minutes (température laboratoire)

 Réalisation d’un frottis fin et séché rapidement

Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)


Année 2008 POCHET 5
Résultat de la coloration
 au microscope grossissement x1000 à immersion

Évolution cytologique durant 24 à 48 heures avec


 charge progressive en hémoglobine
 disparition des restes ribosomaux

Réticulocytes

Attention aux artéfacts Hématie


Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
Année 2008 POCHET 6
Dénombrement

 Compter tous les globules rouges (hématies


matures et réticulocytes) présents dans un
champ
 Identifier et dénombrer les réticulocytes
présents parmi eux
 Poursuivre le dénombrement jusqu’à avoir
identifier un nombre suffisant de
réticulocytes (environ 50)
 Si les zones sont homogènes, les globules
rouges ne peuvent être comptés que tous les
cinq champs
Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
Année 2008 POCHET 7
Dénombrement

43 globules rouges dont 5 réticulocytes


Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
Année 2008 POCHET 8
Dénombrement

65 globules rouges dont 2 réticulocytes et de nombreux artéfacts !!!


Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)
Année 2008 POCHET 9
Résultat du dénombrement

 En dénombrant les globules rouges 1 champ sur 5


 Total de globules rouges : 314
 Total de réticulocytes : 110
 Calcul de la valeur relative en %
 %rétic = 110 x 100 / (314 x 5) = 1100 / 1570 = 7 %
 7 % des globules rouges sont des réticulocytes
 Calcul de la valeur absolue en 109 /L
 À l’aide du résultat de la numération des hématies, par
exemple 2.1012 /L
Nrétic = 7 x 2 x 1012 / 100 = 140.109 /L

Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)


Année 2008 POCHET 10
Interprétation du résultat

 Numération réalisée en cas d’anémie


 taux d’hémoglobine < 110 g/l
 taux d’hémoglobine < 130 g/L
pour en estimer le caractère régénératif selon
un seuil de 120.109 /L
< arégénérative ≥ régénérative
 Conclusion
 Nrétic = 140.109/L : anémie régénérative

Équipe pédagogique du lycée Jean MOULIN (ANGERS)


Année 2008 POCHET 11