Procédure Du Dosage ASAT

HÔPITAL STE JOSEPHINE
BAKHITA
13 B.P. 119 Agoé-Kové Route de :Code :PDASAT-HSJB-01
Mission Tové
PROCEDURE DU DOSAGE DE Version :01
Tel : 00228-70-47-06-62 L’ASPARTATE Nombre de pages :
AMINOTRANSFERASE (ASAT) Date d’application
Création du document : 02 Mars 2022
Nom Fonction Date et Signature

Auteur(s) Surveillant du
FOLLY Yao Anani
laboratoire
Vérificateur(s)
Personne
validant le
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Evolution du document
Versio Date Modification faite Modifications opérées par rapport à

n d’application par version précédente
BAKHITA
Mission Tové
Table des matières

1- Objectifs et portée.......................................................................................................................3
2- Abréviations et définitions..........................................................................................................3
3- Tâches, autorisations et responsabilités......................................................................................3
4- Principe......................................................................................................................................3
5- Sécurité et environnement..........................................................................................................3
6- Échantillon :...............................................................................................................................4
7- Équipements et fournitures.........................................................................................................4
8- Réactifs et produits chimiques....................................................................................................4
9- Contrôle de la qualité..................................................................................................................4
10- Mode opératoire......................................................................................................................4
11- Valeurs de référence...............................................................................................................5
12- Interférences...........................................................................................................................5
13- Valeurs critiques.....................................................................................................................6
14- Formulaires connexes.............................................................................................................6
15- Références..............................................................................................................................6
16- Pièces jointes..........................................................................................................................6
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Mission Tové
1- Objectifs et portée
Cette procédure vise à décrire les différentes étapes du dosage de l’Aspartate
Aminotransferase (ASAT) dans le sérum. Elle permet d’identifier certains problèmes
hépatiques.
2- Abréviations et définitions
CIQ : Contrôle Interne de Qualité
RL : Responsable du laboratoire
RQ : Responsable Qualité
ASAT : Aspartate Aminotransferase
LDH : Lactate Heshydrogénase
IFCC : Fédération International de Biochimie Clinique
3- Tâches, autorisations et responsabilités
Tâche Autorisé Responsable

Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne RQ, RL RL
Mesure à blanc RQ, RL RL
Préparation des réactifs RQ, RL RL
Préparation des sérums de contrôle RQ, RL RL
Passage des contrôles et validation des contrôles RQ, RL RL
Passage des échantillons RQ, RL RL
Validation analytique RQ, RL RL
4- Principe
Méthode développé IFCC selon le schéma réactionnel suivant :
l-asparate +2oxoglutarate AST Oxaloacétate + L-Glutarate

Oxaloacétate + NADH + H+ MDH
L –MALATE + NAD+
La diminution de l’absorbance due à la conversion du NADPH en NAD+ et proportionnelle à

l’activité de l’ASAT dans le spécimen, est mesurée à 340 nm.
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Mission Tové
5- Sécurité et environnement
- Utiliser les équipements de protection (Gant, blouse, lunettes)
- Rincer abondamment à l’eau en cas de contact avec la peau ou les yeux.
- Respect la procédure de tri et de gestion des déchets
- Réactif nocif, après contact avec la peau, se laver abondamment avec l’eau
Par mesure de sécurité, tous échantillon doit être traité comme potentiellement infectieux
6- Échantillon :
Matériel Quantité Stabilité

minimale
Sérum 100 µl 28 jours 2-8°C, 01 an à 20 °C
7- Équipements et fournitures
Consommable
Embouts de pipette, 10-100 µl
Embouts de pipette, 100-1000 µl
Tube à hémolyse
Matériel et équipement :
Spectrophotomètre
Micropipette 10-100 µl
Micropipette 100-1000 µl
8- Réactifs et produits chimiques
Désignation Réactif Conditions de stockage Lieu de stockage
Réactif R1 Réactif de travail 2à8°C Réfrigérateur
- Préparation de la solution de travail : Ajouter au flacon R1 la quantité d’eau

déminéralisée indiquée sur l’étiquette. Mélanger doucement jusqu’à dissolution
complète (2 minutes).
- Stabilité et conservation : Après reconstitution, la solution de travail est stable 60
jours l’absence de contamination de 2 à 8 °C.
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9- Contrôle de la qualité
Faire au moins un contrôle de qualité (Sérum de contrôle normal, sérum de control
pathologique) dans chaque série ou au moins par 24 heures. Procédure de contrôle
qualité
10- Mode opératoire
o Enregistrement et étiquetage : Les échantillons sont enregistrés après avoir vérifié
leur conformité.
o Centrifugation et décantation : Centrifuger à 4000 tours pendant 10 minutes puis
décanter le sérum.
o Préparation de la liste de travail : Faire la liste de travail
o Ramener les réactifs à la température du Laboratoire et préparer les réactifs si
nécessaire
o Démarrage du spectrophotomètre et maintenance quotidienne : rinçage de la cuve
avec l’eau distillée. Vérifier l’état de la cuve de lecture en faisant une mesure à blanc.
Le blanc consiste mesurer la densité optique de l’eau distillée.
o Dosage des échantillons : Le dosage des échantillons est fait comme l’indique le
tableau ci-dessous
Blanc Etalon Dosage

Solution de travail 1ml 1ml 1ml
Eau déminéralisée 100 µl
Etalon 100 µl
Spécimen 100 µl
Mélanger, après 1 minute, enregistrer l’absorbance initiale à 340 nm puis toutes les minutes pendant 3 minutes.
Il est impératif de valider les résultats des sérums de contrôle normal et pathologique
avant d’analyser chaque série d’échantillon.
o Calcul
Résultat : (Variation de l’absorbance/min) x1746
o Validation technique : Elle consiste à vérifier le bon déroulement des différentes
phases de réalisation des analyses et surtout de la validité des CIQ.
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o Intervalle de mesure : 03 – 350 UI/l, diluer au 1/5 avec du sérum physiologique si la

valeur est supérieur à 350 UI/l.
11- Valeurs de référence
Femme : Valeur ≤ 31 UI/l
Homme : Valeur ≤ 38 UI/l
o Valeurs critiques : 10 fois les valeurs normales
12- Interférences
Hémoglobine : Pas d’interférence jusqu’à 0,48 g/dl
Hémolyse : Interférence positive en raison de l’ASAT contenu dans les érythrocytes
Bilirubine : Pas d’inférence jusqu’à 20 mg/l (342 µmol/l)
Turbidité : Pas d’interférence jusqu’à 6,16 g/l (7 mmol/l)
La LDH contenue dans le réactif permet pendant la phase de préincubation, de réduire la
pyruvate endogène qui sinon produirait une interférence positive.
De meme l’oxaloacétate, produit dans la réaction, peut être decarboxylé pour former du
pyruvate. Celui-ci sera lui aussi consommé par la LDH présente dans le réactif et n’interfère
pas avec le dosage.
13- Valeurs critiques
Sans objet
14- Formulaires connexes
- Fiche de paillasse
- Fiche de gestion des CIQ :
15- Références
- Normes ISO 15189
- Fiche technique du réactif du dosage de l’acide urique BIOLABO Ref : 80027,
80127.
16- Pièces jointes
Fiche technique de la notice de réactif en cours d’utilisation

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3- Tâches, autorisations et responsabilités

Tâche Autorisé Responsable

l-asparate +2oxoglutarate AST Oxaloacétate + L-Glutarate

La diminution de l’absorbance due à la conversion du NADPH en NAD+ et proportionnelle à

Matériel Quantité Stabilité

- Préparation de la solution de travail : Ajouter au flacon R1 la quantité d’eau

Blanc Etalon Dosage

o Intervalle de mesure : 03 – 350 UI/l, diluer au 1/5 avec du sérum physiologique si la

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