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Les examens de laboratoire

Définition
Les examens de laboratoire sont des
investigations techniques appelés analyses
qui se font sur des substances biologiques
dans le but d’avoir des résultats
permettant au personnel médical et
paramédical de prendre des décisions de
traitement et de prise en charge auprès des
patients.
Importance des examens de
laboratoire
• Les examens de laboratoire sont d’une grande
utilité dans la prise en charge des patients car ils
fournissent des informations qui servent dans:
• Le dépistage,
• Le diagnostic et le pronostic;
• Le contrôle de l’évolution de la maladie;
• Le suivi de l’efficacité du traitement
• La décision pour faire d’autres examens
Matières à prélèvement
• Les prélèvements peuvent être effectués dans:
Le sang (veineux, artériel ou capillaire)
Les urines
Les selles
Les crachats
Le pus
Les vomissements
Les secrétions de gorge
Les secrétions nasales
Les secrétions vaginales et urétrales
Les catégories d’examens
 Les analyses se repartissent en 4 catégories:

-Hématologiques,
-Bactériologiques
-Sérologiques
-Biochimiques
Les analyses hématologiques:
• Elles sont pratiquées sur le sang pour permettre
le diagnostic ou le suivi de certaines maladies.
• Le sang est composé d'un liquide, le plasma, dans
lequel flottent des cellules (globules rouges,
blancs et plaquettes) et un grand nombre de
substances (protéines, hormones, vitamines…)
• Ainsi, l'hématologie regroupe l'analyse des
cellules du sang mais aussi d'éléments dissouts
dans le plasma comme les facteurs de la
coagulation ou les anticorps.
Les analyses Bactériologiques et
Parasitologiques
• En bactériologie et parasitologie, le but des
analyses est souvent d'identifier l'agent
responsable de l'infection : bactérie, parasite,
champignons microscopiques, etc.
• Elles consistent donc à prélever un échantillon et
à rechercher l'élément pathogène soit par
observation directe soit après mise en culture.
• L'identification du germe pathogène aidera à
définir le meilleur traitement et l'antibiotique le
plus efficace.
Les analyses sérologiques
• La sérologie est l'étude du sérum c'est-à-dire
le sang débarrassé de ses cellules et d’autres
constituants.
• La plupart du temps, il a l'aspect d'un liquide
transparent et jaunâtre et comprend une
concentration en anticorps.
• La sérologie consiste donc à évaluer
l'immunité à une maladie en mesurant la
quantité d'anticorps spécifiques de celle-ci.
Les analyses biochimiques
• Les analyses biochimiques consistent à
mesurer les quantités des constituants
chimiques(Sodium ,Potassium , calcium,
glucose, lipides, …)dans les liquides
biologiques (sang, urine, etc.)
• La plupart des maladies ont en effet des
répercussions sur leur composition et leur
étude peut aider au diagnostic et au suivi de
nombreuses maladies.
Facteurs influençant les résultats des
examens

• Les valeurs des examens sont influencées


par : l’âge, le sexe et même la race,
• Les repas influencent également les
résultats : L’idéal est d’effectuer le
prélèvement12 heures après l’ingestion
d’aliments, car certains paramètres
comme le glucose, les lipides, … peuvent
être influencés.
Facteurs influençant les résultats des
examens (suite)
• L’heure idéale de prélèvement se situe entre 7
et 9 heures du matin et en tout cas avant 12
heures(midi),
• Idéalement, il faut attendre 12 heures après
un exercice musculaire pour effectuer un
prélèvement car plusieurs paramètres
biologiques peuvent être influencés par
l’activité physique.
Facteurs influençant les résultats des
examens (suite)
• Il est important de s’assurer de l’existence ou
non d’une situation de stress, car celle-ci a
également un grand retentissement à cause
des activités hormonales
• La prise de sang doit s’effectuer avant les soins
ou/et la prise de médicaments.
• Si le patient prend des médicaments, il faut
prendre cela en compte et en aviser le
laboratoire.
Facteurs influençant les résultats
des examens (suite)
• IL est à noter que d’autres facteurs influencent
les prélèvements notamment : la grossesse,
l’obésité, l’alcool, le cycle menstruel, la
contraception orale, le tabac, la caféine, les
médicaments.
• IL est à noter aussi la différence des résultats
selon le type de sang prélevé(sang veineux,
artériel ou capillaire).
A- les prélèvements
veineux
Conditions requises auprès du préleveur
Le préleveur est l’infirmier(e) ou le technicien de
laboratoire qui pratique les prélèvements:
 Il doit avoir une compétence initiale(formation)
pour la connaissance des examens demandés, les
facteurs influençant, les anticoagulants employés
et les conditions de stockage et d’acheminement.
 Il doit avoir également une compétence dans:
La localisation des veines, la pratique du
prélèvement et le remplissage correcte et
ordonné des tubes
Matériel pour prélèvement
 Sur un guéridon propre et désinfecté :
• un plateau stérile
• compresses stériles
• pince à servir
• cupule contenant du coton
• un garrot
• seringues avec aiguille stérile ou un venoject
Matériel (suite)
• bons de laboratoire
• étiquettes
• alcool à70
• Bétadine
• gants pour l’opérateur
• deux haricots
• un contenaire
La localisation des veines
Veines du dos de la main
Technique de prélèvement
Technique de prélèvement
• Se laver les mains avec du savon
• Mettre le chariot en parallèle au lit du malade
• Positionner le patient en position couchée ou
allongée, éventuellement assis
• Lui dégager le membre à ponctionner et le
mettre en extension
• Placer coussinet et protection sous site de
ponction
• Repérer la veine la plus accessible en choisissant
une de bonne calibre « ayant tendance à renfler »
• Si la veine n’est pas apparente : frotter le bras de
bas en haut ,tapoter doucement sur la veine et
demander au malade de serrer la main
• Placer le garrot au dessus de la région à
ponctionner
• Appliquer l’antiseptique largement sur la peau
du bas en haut ou en spiral
• Enfiler les gants de protection
• Immobiliser le membre en tendant la peau avec
le pouce de la main libre
• Ponctionner la veine en dirigeant le biseau de
l’aiguille vers le haut
Si on pique avec un venoject :
• Apres que l’aiguille est dans la veine enfoncer
chaque tube dans le venoject,
• Desserrer le garrot des que le 1er tube est rempli
• Placer une compresse imbibée d’antiseptique sur
le point d’injection pour comprimer la veine
• Demander au patient de maintenir la compresse
en appuyant dessus.
• Jeter l’aiguille dans le contenaire .
• Tourner et retourner le tube lentement, enlever
les gants, appliquer un diachylon
• Mettre les étiquettes sur les tubes, noter
dessus: nom, prénom, numéro d’entrée, service
et examen demandé.
• Inscrire le prélèvement sur le bon de labo.
• Placer les tubes dans le porte tube.
• Laver le matériel et le stériliser.
• Se laver les mains avec du savon
• Noter les examens sur la feuille de T° et de
SIG-HO.
principes à respecter
1.Avertir le malade la veille de l’examen pour
qu’il reste à jeun si c’est nécessaire.
2.Il est impératif de respecter strictement les
principes d’hygiène et de sécurité
3. vérifier l’état physique du patient sans obliger
son état psychique.
4.Vérifier l’existence de la prescription médicale
de demande d’examen ( nominative, signée et
datée).
principes à respecter (suite)
5.Il ne faut pas faire un prélèvement sur :
- une fistule artério-veineuse
- un bras hémiplégique.
- un bras perfusé.
6.Utiliser un corps de prélèvement pour chaque
patient, sinon mettre ce corps dans un récipient
Rempli d’eau et javel à 1/8 pendant 30min, puis
rinçage à l'eau et séchage libre.
principes à respecter (suite)
7.Vérifier la date de péremption du matériel et
produits utilisés
8. Bien placer le garrot , La position idéale de
celui- ci se situe de 7à 10 cm au-dessus du site
de ponction.
9. Introduire l’aiguille dans un angle se situant
entre 15° et 30°.
10. Prélever les tubes en respectant l’ordre
recommandé.
11.Mélanger calmement le tube de fond en fond
dés que celui-ci est rempli
principes à respecter (suite)
12. Retirer le dernier tube avant le venoject et le
corps de pompe;
13. Appliquer une compresse et une pression
sur la veine , le bras étant tendu
14. Ne jamais récapuchonner une aiguille ou un
venoject utilisé.
N.B :En cas d’échec, ne pas piquer le patient plus
de deux fois consécutives
principes à respecter (suite)
15. Mélanger calmement les tubes encore 5 à 7
fois au maximum après 2 minutes
16. Étiquetage immédiat des tubes(au chevet du
malade. (Lors de l’étiquetage des tubes pour
groupage, on doit être extrêmement vigilent)
17. Envoi rapide au laboratoire en indiquant les
examens urgents
18. Température de conservation et de transport
de 4 °C à 23 °C (transport idéal : en position
verticale).
Gestes à éviter
• La désinfection récurrente ;
• Le site de prélèvement pas totalement sec
après la désinfection(laisser un délai de
contact = 1mn
• Le positionnement non adapté du garrot ;
• L’application prolongée et/ou trop forte du
garrot (enlever-le dés survenu du sang dans le
1er tube)
• La recherche de la veine par tâtonnement ;
• La demande au patient de plier le bras après
prélèvement :constitution d’hématome.
Gestes à éviter (suite)
• Le prélèvement au niveau d’un hématome ;
• Prélèvement plus que la quantité demandée ;
• Le transfert forcé de l’échantillon de la
seringue au tube ;
• La négligence de mélange ou mélange forcé ;
• Le transfert des échantillons, (vibrations,
chocs, exposition à la chaleur et à la lumiere ) ;
• Négligence du malade après prélèvement .
Couleurs des tubes et
ordre des prélèvements
1-Tube rouge
C’est un tube sec pour les examens
biochimiques et sérologiques , exemples:
• Urée
• Créatinine
• Transaminases
• CRP
• Ionogramme
• VIH
• RAI
• Glycémie
2-Tube bleu
C’est un tube contenant du citrate 2.8 % pour
des examens hématologiques et d’hémostase
• VS et Groupage
• TP, TCK
3-Tube vert
C’est un tube contenant de l’héparine réservé
aux examens biochimiques : Ionogramme
(Si absent: tube rouge)
4-Tube mauve
• dit EDTA (Ethylène diamine tétra acétique)
pour l’examen de : NFS
5-Tube gris
• c’est un tube contenant du Fluorure pour:
Glycémie (Si absent: tube rouge)
6- Tube noire
. C’est un tube qui contient du citrate de sodium
3.8% consacré à la VS (Si absent: tube bleu)
Analyses hématologiques
I-Numération formule sanguine (NFS)
A-Numération sanguine
1-Conditions de prélèvement:
Prélèvement de sang veineux (en général au pli du coude).
Le tube est de couleur mauve contenant un anticoagulant
(EDTA= Ethylène diamine tétra acétique).
Il n'est pas nécessaire d'être à jeun.
2-Intérêt du dosage:
La numération sanguine consiste à compter les différents
éléments cellulaires du sang à savoir : globules blancs (ou
leucocytes), globules rouges (ou hématies) et plaquettes.
Eléments figurés du sang
• L’hémoglobine est un constituant des GR qui
est composé de 4 chaines d’acides aminés.
Chaque chaine(globine) contient un noyau
(hème) entouré d’atomes de fer responsable
du transport de l’oxygène et du CO2
Numération sanguine (suite)
 D’autres paramètres sont également mesurés
• Taux d'hémoglobine,
• Volume globulaire moyen = VGM)
• Hématocrite
• TCMH = teneur corpusculaire moyenne en
hémoglobine
• CCMH= concentration corpusculaire
moyenne en hémoglobine
Valeurs normales
Eléments Femmes Hommes
Hématies (millions /mm3) 4.0 - 5.3 4.2 - 5.7

Hémoglobine (g /100 ml) 12.5 - 15.5 14.0 - 17.0

Hématocrite (%) 37 - 46 40 - 52

VGM 80 – 95(µ3) 80 - 100(µ3)

CCMH (g/100ml) 30 - 36 30 - 35

TCMH 28 – 32 (pg) 28 - 32 (pg)

Leucocytes(/mm3) 4000 - 10000 4000 - 10000

Plaquettes (/mm3) 150000 - 400000 150 - 450000


Numération sanguine (suite)

Ces examens sont essentiels pour apprécier


des dysfonctionnements comme:
• Les perturbations de la moelle osseuse
• Les anémies,
• Attaque infectieuse de l'organisme,
• Problèmes de coagulation
Variations possibles
• Anémie: Diminution du taux d'hémoglobine
et/ou diminution du nombre des GR
• Polyglobulie :augmentation du Nb de GR
• Hypoleucocytose: diminution du Nb de GB
• Hyperleucocytose: augmentation du Nb de GB
• Thrombopénie: diminution du nombre des
plaquettes
• Thrombocytose: augmentation du nombre des
plaquettes.
• Voir aussi ( leucémie, bicytopénie, pancytopénie)
B-Formule sanguine
1-Conditions de prélèvement
Idem que le précédent
2-Intérêt du dosage
La formule Sg est toujours associée à la numération Sg.
Elle permet d'apprécier les éléments cellulaires du sang
sous leur aspect qualitatif :
 Morphologie des globules rouges et
 Morphologie des plaquettes
 Pourcentage de chaque catégorie de leucocytes :
-Polynucléaires(granulocytes)
-Lymphocytes
-Monocytes
G
Les types de leucocytes
r
a
n
u
l
e
u
x
Neutrophiles Eosinophile Basophile
A
g
r
a
n
u
l
e
u
x Lymphocyte Monocyte
Valeurs normales en mm3
Eléments adultes Enfants
Polynucléaires 2000 - 8000 2000 - 6000
Neutrophiles
Polynucléaires 40 - 400 100 - 500
Eosinophiles
Polynucléaires 0 - 100 0 - 150
Basophiles
Lymphocytes 1000 - 4000 1500 - 7000

Monocytes 80 - 1000 100 - 1500


C-Plaquettes
1-Conditions de prélèvement:
idem que précédemment
2-Intérêt du dosage
Les plaquettes ont un rôle très important dans la
coagulation.
-Une diminution trop importante du taux de
plaquettes entraîne un risque hémorragique
-Une augmentation du taux entraîne au contraire un
risque de thrombose par formation d'agrégats
plaquettaires.
3-Valeurs normales
150000 - 400000 /mm3
D-Réticulocytes
• Conditions de prélèvement (Idem)
• Intérêt du dosage:
-Les réticulocytes sont les précurseurs des GR.
Leur présence augmentée indique une hyper
production de GR dans la moelle osseuse, pour
combler un déficit lié à une anémie.
-Leur taux est donc important dans la découverte
d’une anémie.
• Valeurs normales:
25000 - 75000 / mm3 soit : 0.5 - 1.5 % des GR
E-Vitesse de sédimentation (VS)
• Conditions de prélèvement:
Idem sauf que le prélèvement est réalisé de
préférence à jeun sur tube bleu (ou noir) citraté.
• Intérêt du dosage
-La VS est le temps nécessaire aux éléments de Sg
pour sédimenter au bas d'une colonne de sang
incoagulable.
-Elle est exprimée en hauteur de cellules
sédimentées au bout d'1 heure puis de 2 heures
• Valeurs normales :1ère < 7 mm -2ème h < 20 mm
II-Groupage sanguin
A- groupage système ABO:
Conditions de prélèvement :
• Prélèvement de sang veineux ; 2 tubes bleus
avec anticoagulant (citrate) peuvent être
prélevés à des moments différents.
• Il n'est pas indispensable d'être à jeun.
• L'identification du patient doit être correctement
notée sur les tubes.
groupage système ABO (suite)
• Le système ABO est très important à déterminer
dans le cadre de transfusions sanguines afin de
respecter les règles de compatibilité.
• En effet, l'injection de produit sanguin d'un
donneur non compatible avec le groupe sanguin
du receveur peut entraîner des accidents
transfusionnels dramatiques.
• C'est pourquoi la détermination du groupe
sanguin est si importante et nécessite au moins 2
déterminations avant la délivrance d'une carte.
Données normales :Groupes A,B,AB et O
B- système rhésus
• Conditions de prélèvement :
La détermination du Rh ce fait sur le même
échantillon de sang prélevé pour groupage ABO
• Intérêt de la détermination:
-Elle permet de distinguer les sujets dits Rhésus D
positif des sujets Rhésus négatif pour éviter toute
incompatibilité lors de la transfusion.
-Elle est aussi importante chez la femme enceinte
pour éviter le risque d'immunisation contre le
groupe Rh du fœtus lors de grossesses ultérieures
quand la mère a un Rh - et le fœtus a un Rh+
C- Phénotypage
Conditions de prélèvement:
Idem que celles de groupage ABO
Intérêt de la détermination:
Il s’agit de phénotype Rhésus complet C c E e
• Ce sont des systèmes d'antigènes présents sur
les globules rouges
• Leur détermination est importante surtout
pour les sujets polytransfusés et les femmes
susceptibles d'être ultérieurement enceintes.
Autres systèmes sanguins
ABO
• OK
Rhésus Kell

Kidd Landsteiner-Wiener RAPH

Diégo Kx Milton Hagen

Cartwright Hm Ii

Xg Gerbich Globoside

Scianna Cromer GIL

Dombrock Knops Rh-associated

Colton Indian Duffy


Recherche d’anticorps irréguliers
Intérêt du test
• La (RAI) consiste à déceler la présence
d'anticorps dirigés contre des antigènes
présents sur les globules rouges du patient.
• La présence de ces anticorps, proviennent de
transfusions précédentes, de grossesses
antérieures.
RAI (suite)
• Ils peuvent provoquer lors de transfusions une
destruction des globules rouges donnant un choc
transfusionnel grave.
• Leur recherche et fort indiquée surtout chez les
polytransfusés.
• Chez une femme enceinte, la présence de ce type
d'anticorps peut provoquer, en cas
d'incompatibilité fœto-maternelle, une maladie
hémolytique du nouveau-né.
RAI (suite)
Résultats:
 Recherche négative :
donc pas de risque immunologique transfusionnel
 Recherche positive :
le risque de problème transfusionnel sera fonction de la
concentration en anticorps, du type d'anticorps
(certains sont peu dangereux ou peu actifs à 37°C).
 En cas de risque concret, les transfusions seront faites
uniquement avec du sang dit "phénotypé".
III-La coagulation : hémostase
A-Temps de saignement
Méthode de prélèvement (Technique de Duke) :
• Après désinfection locale à l'éther, une incision
de quelques millimètres est réalisée à l'aide
d'une microlance au lobe de l'oreille.
• Dès que la première goutte de sang apparaît, un
chronomètre est déclenché.
• Les gouttes de sang sont recueillies toutes les 30
secondes sur un buvard jusqu'à l'arrêt du
saignement. Le TS est ainsi déterminé.
Temps de saignement (suite)
• Intérêt du dosage
-Le TS permet d'évaluer le temps nécessaire à la
formation d'un thrombus plaquettaire, qui
formera après un caillot de coagulation.
-Ce temps est en relation avec le nombre de
plaquettes.
-Il permet de dépister un risque hémorragique
avant une intervention chirurgicale.
• Valeurs normales:
2 - 4 minutes
B- Temps de Céphaline Kaolin(TCK)
Conditions de prélèvement
• Prélèvement de sang veineux (en général au
pli du coude) sur un tube bleu contenant un
anticoagulant(citrate).
• Le prélèvement doit être réalisé en évitant la
pose d'un garrot trop prolongée.
• Indiquer s'il y a une prise de médicaments
anticoagulants
TCK (suite)
Interet du test: Le Temps de Céphaline kaolin (TCK)
ou Temps de Céphaline activé (TCA) est un test
qui se fait sur plasma . On calcule le temps que
prend le plasma pour se coaguler après ajout d’un
produit appelé activateur de coagulation.
Un TCA ou TCK long est le signe d´un trouble de la
coagulation, comme les hémophilies.
Valeurs normales: Le temps de coagulation normal
du plasma dans ce test est de 30 à 40 secondes.
Le TCA est aussi utilisé pour contrôler les TRT
anticoagulants. Il doit être 2 à 3 fois supérieur au
TCA témoin pour que le TRT soit efficace.
Taux de prothrombine (suite)
• Le TP a les mêmes conditions de prélèvement
que le TCK
• C’es la proportion du temps de la coagulation
chez un patient par rapport à un témoin .
• Cet examen teste le temps de transformation
de la prothrombine en thrombine qui va
transformer la fibrinogène en fibrine;
• Cet examen est utile en cas de syndrome
hémorragique ou de traitement par l‘héparine
ou par l’anti-vitamine k
• Valeurs normales : 70% à 100 %
II-Analyses bactériologiques et
parasitologiques
1-Examen cytobactériologique des urines (ECBU)
Conditions de prélèvement
Procéder d’abord à une toilette et désinfection locale avec
antiseptique (Dakin).
Les premières gouttes d'urine seront éliminées et l’urine
suivant sera recueilli dans un pot stérile.
Noter le nom et le prénom sur le flacon et le garder au frais
si attente avant de l'amener au laboratoire.
Chez les sujets sondés le prélèvement peut être fait
directement de la poche à urines ou ponction de la sonde.
Chez le nourrisson, un collecteur stérile peut être mis en
place (poche autocollante), chez l’adulte un étui pénien stéril
Collecteur d’urine autocollant
Image d’étui pénien
ECBU : Intérêt du test
• Cette analyse comporte un examen direct de
l'urine au microscope et une mise en culture
afin de rechercher et d'identifier la présence
de germes.
• L'ECBU permet de rechercher une infection
urinaire (cystite, pyélonéphrite) et d'identifier
le(s) germe(s) en cause.
• Si un germe est trouvé, un antibiogramme
peut alors être réalisé pour guider le médecin
dans sa prescription d'antibiotique.
ECBU : Résultats de l’examen
Résultat normal:
• Examen cytologique : < 10 éléments / mm3
• Examen bactériologique : culture stérile
Résultats pathologiques:
• Examen cytologique : Présence de leucocytes altérés
• Examen bactériologique : identification de germes ;
quantité > 104/ml.
Cystite ou infection urinaire basse à Escherichia coli, ou
à Staphylocoques
Pyélonéphrite aiguë avec le même type de germe que
dans la cystite
Chez l'homme : Cystite souvent + prostatite aiguë
/chronique ; épididymite aiguë (Gonocoque, Chlamydia)
2-Coproculture
A- Examen bactériologique des selles
Conditions de prélèvement
• Prélèvement de selles réalisé dans un
récipient stérile à l’aide d’une spatule
• Transporter le prélèvement rapidement au
laboratoire (ou le garder au frais en
attendant).
• Signaler l'existence d'un traitement
antibiotique éventuel.
Coproculture(suite)
• Intérêt de l'examen:
La coproculture à visée bactériologique permet de
rechercher et d'identifier des germes pathologiques qui
sont normalement absents : salmonelles, Shigelles,
Escherichia coli, Vibrion cholera…Ces germes peuvent être
responsables de diarrhées et d'infections digestives.
• Résultat normal:
Présence d'une flore normale
• Résultats pathologiques:
Infections digestives et diarrhées aiguës mettant en cause
des germes bactériens ou des virus. Ils peuvent provenir
d'une infection alimentaire, d'un problème d'hygiène.
B-Examen parasitologique des selles
Conditions de prélèvement:
La totalité des selles émise en une fois sera recueillie
dans un pot stérile rapidement amené au laboratoire
(ou conservé au frais).
Intérêt de l'analyse:
 C’est de déceler des parasites intestinales après
observation directe au microscope . Celles-ci sont
responsables de diarrhées accompagnées d'autres
symptômes qui varient selon l’gent causal.
 Les agents peuvent être transmis par
l'alimentation et les mains souillées, suite à un
voyage en zone d'endémie, émergence chez les
sujets immunodéprimés de parasites dits
opportunistes.
Examen parasitologique des selles (suite)
Résultats
Recherche négative :
Mieux de répéter la recherche car certains parasites
ne sont émis dans les selles que par intermittence.
Recherche positive: peut mettre en évidence:
• Kystes d'amibes pathogènes indiquant une amibiase
colique ;
• Oxyurose : Le prélèvement peut se faire par "scotch
test" : un ruban de scotch est appliqué le matin avant
la toilette sur la marge anale puis collé sur une lame
de verre adressée au labo.
• Œufs d'ascaris, Œufs de vers, Anneaux de Tænia,
Kystes…etc
3-Hémoculture
Conditions de prélèvement:
Il s’agit de 3 prélèvements veineux avant prise des
antibiotiques, espacés de 3 ou 4 heures, effectués
lors des pics de T° ou au contraire d'hypothermie et
mis dans des flacons destinés à cet effet.
Intérêt de l'examen:
C’est de mettre en culture un échantillon de sang
pour y identifier l’existence de germe(s) ou non.
La présence de germes indique que le patient a une
bactériémie qui peut évoluer en septicémie et
donner le choc septique.
L'hémoculture permet donc de réaliser un
antibiogramme qui orientera le TRT.
Hémoculture (suite)
Résultat normal:
Culture stérile
Résultats pathologiques:
• Si isolement répété du même germe : Il peut
s’agir d’ infection pulmonaire, endocardite,
pyélonéphrite, infection après intervention
chirurgicale, morsures ou griffures animales,
infection nosocomiale acquise à l'hôpital.
• Si isolement de germes différents : il faudra alors
évoquer un terrain particulier ayant problèmes
immunitaires ou des foyers infectieux.
4-Examen du liquide céphalo-rachidien
 Conditions de prélèvement:
• Le prélèvement est un geste médical réalisé en urgence
avant prise d’ATB et après étude du fond d‘œil. Le patient
est allongé sur un côté, le dos courbé et genoux pliés vers
la poitrine.
• Apres anesthésie locale, Quelques ml de LCR est prélevé
par ponction au niveau des vertèbres lombaires par un
trocart. L’échantillon est rapidement amené au labo.
 Intérêt de l'examen
• L'examen du LCR permet le diagnostic de méningite.
• Il peut être également nécessaire au diagnostic d'autres
infections du système nerveux Exp: méningo-encéphalites,
abcès cérébraux...
Examen du LCR :Résultats
L'analyse du LCR comporte plusieurs aspects :
• Analyse cytologique :recherche de cellules, surtout
les GB
• chimique : glucose, protéines, ions…
• bactériologique : culture pour identification de
germe(s)
Résultat normal:
 LCR a un aspect clair, eau de roches
- cellules: 0 – 2 / mm3
- Protéines : 0.20 - 0.40 g /l
- Glucose : 50 % de la glycémie
- Examen bactériologique négatif et culture négative
LCR: Résultats Pathologiques
Glucose
LCR / Culture
Aspect Cellules /mm3 Protéines (g/l) Interprétation
Glucose bactérienne
sang
0 Méningite
Clair 5 - 300 <1 = 1/2 Ou virale
lymphocytes Listeria Méningite à
ou spirochète Listeria
ou spirochète

Clair 100 - 200 >1 < 1/2 bacille Méningite


lymphocytes tuberculeux tuberculeuse

+
Trouble ou > 200 >1 < 1/2 (méningocoque, Méningite
purulent neutrophiles pneumocoque, ) bactérienne
Examen bactériologique de crachats
Conditions de prélèvement:
• Patient à jeun ayant rincé la bouche avec de l’eau stérile.
• Trois flacons de crachats sont recueillis en 2 jours par
mouvements d’expectoration , en cas de difficulté à
s’expectorer, une kinésithérapie peut être envisagée.
• une sonde d’aspiration gastrique peut aussi être utilisée
en cas de déglutition des crachats chez les enfants, les
patients ayant des difficultés ou chez les inconscients.
Intérêt de l’examen : C’est le diagnostic de la
tuberculose à partir d’une détection des bacilles de koch
(BK)par observation directe au microscope ou via une
mise en culture.
Examen des crachats (suite)
Résultats: Il y a 2 groupes de tuberculose pulmonaire
selon les résultats:
Tuberculose pulmonaire à microscopie positive (TPM+):
2 examens microscopiques positifs sur 2 échantillons
d’expectorations différents.
1 examen microscopique est positif avec signes cliniques
et radiologiques compatibles
1 examen microscopique est positif et une culture positive
Tuberculose pulmonaire à microscopie négative (TPM0):
Microscopie négative et culture est positive (TPM0C+)
Microscopie négative et culture non faite ou indisponible,
mais signes cliniques et radiologiques compatibles.
L’INTRA-DERMO-REACTION
OU
LE TEST TUBERCULINIQUE
Définition

C’est l’injection au niveau du derme d’une


quantité de tuberculine purifiée qui joue
une action antigénique et se manifeste par
une réaction inflammatoire survenant au
point de l’injection.
Indications
C’est une méthode de choix pour savoir si un
individu a été infecté par le bacille tuberculeux.
Elle sert à:
 Dépister des cas de tuberculose
 Enquêter autour d’un cas de tuberculose ;
 Surveiller des personnes exposées à l’infection
tuberculeuse.
Contre-indications
• L e cas ou il y a un antécédent de réactions
allergiques sévères au produit de la tuberculine
ou à l’un de ses composants (lors d’une injection
ultérieure).

• Elle est inutile auprès des personnes qui ont un


antécédent d’infection tuberculeuse active
(tuberculose-maladie) clairement identifié.
Matériel

• Flacon de 1ml du produit(TUBERTEST 10 doses)


• Antiseptique
• Compresses stériles ;
• Aiguille intradermique
• Seringue graduée en dixième de ml
• Stylo marqueur
• Gants
Seringue de 1 ml
La Technique
• Le test est pratiqué au niveau du tiers moyen de la face
antérieure de l’avant-bras,
• Enfiler les gants et nettoyer la peau avec l’antiseptique,
• Introduire l’aiguille, le bisou en haut dans la couche
dermique en tirant la peau entre le pouce et l’index,
• Injecter lentement 0.1 ml de la solution
• Examiner l’élévation d’une papule blanche, en aspect
« peau d’orange ». Sinon retirer et recommencer,
• L’injection doit être strictement intradermique et
exsangue (pas de sang),
• Retirer l’aiguille et désinfecter la peau,
• Faire entourer du stylo le site d’injection par un cercle
La lecture de la réaction
Elle s’effectue idéalement à la 72eme heure:
• L’induration qui s’est développée autour du
point de ponction est mesurée transversalement
par rapport au sens de l’injection,
• Les limites de l’induration sont déterminées par
la palpation et mesurées en millimètres (mm) à
l’aide d’une règle graduée,
• On exprime les résultats en millimètres et non
de façon qualitative (c'est-à-dire positif ou
négatif), s’il n’y a pas d’induration on
inscrit « 0 ».
La mesure de la réaction
Seuil de positivité
 Le diamètre de l’induration peut varier de 0 à
30 mm.
 L’érythème entourant L’induration n’a aucune
signification.
 Une réaction est jugée négative lorsque le
diamètre d’induration est inférieur à 5 mm.
 Une réaction est jugée positive lorsque le
diamètre d’induration est supérieur ou égal à 5
mm.
Interprétation de la réaction

• Inférieure à 5 mm= IDR négative : Tuberculose-


infection improbable
• Entre 5 et 9 mm= IDR positive mais non
significative : Réaction due au BCG ou
Tuberculose-infection ancienne (pas récente);
• Entre 10 et 14 mm= IDR positive : Etat de
tuberculose-infection (attention à IDR
antérieure)
• Supérieure ou égale à 15 mm= IDR positive :
Tuberculose-maladie.
III- Analyses sérologiques
A- Sérologie virale
V.I.H.
.
Conditions de prélèvement:
• Prélèvement de sang veineux.
• Il n'est pas indispensable d'être à jeun.
• Il pourra être nécessaire d'effectuer un deuxième
prélèvement pour contrôle.
Intérêt du dosage:
Le SIDA est la conséquence de l'infection au VIH ,son
diagnostic se fait par la détection des anticorps dans le
sang qui apparaissent entre 2 et 12 semaines après la
contamination ( séropositivité).
Virus du Sida (VIH)
V.I.H(suite)
Résultats:
• Le dépistage est réalisé obligatoirement par 2
techniques différentes : Elisa et western blot
• Si la recherche par les 2 techniques est négative,
le sujet est séronégatif.
• Si l'un des tests, ou les 2 sont positifs un nouveau
prélèvement est demandé pour effectuer un test
de confirmation. Une fois le test de confirmation
est positif, la séropositivité du sujet au VIH est
certaine.
Dépistage de l’hépatite C
Conditions de prélèvement:
• Prélèvement veineux, pas indispensable d'être à jeun.
• Des dosages répétés sont utiles pour confirmer la
positivité ou suivre l'évolution de la maladie.
Intérêt du dosage:
• L’infection par le virus de l'hépatite C passe inaperçue car
asymptomatique, mais elle évolue après vers l’hépatite
chronique, la cirrhose et même le cancer du foie.
• Il se transmet par voie sanguine, sexuelle et périnatales.
• L’existence des anticorps anti-VHC permet de prouver
une infection par ce virus
virus de l'hépatite C
Dépistage de l’hépatite C (suite)

Résultats :
Si recherche d'anticorps anti-VHC négative :
Cela signifie qu'il n'y a pas d'infection par le
VHC ou infection trop récente (apparition des
anticorps au moins 12 à 15 semaines après la
contamination).
Si recherche d'anticorps anti-VHC positive :
Cela nécessite une confirmation par un 2ème test.
B-Sérologie bactérienne
1-Dosage des Anti-StreptoLysines O
Conditions de prélèvement:
• Les ASLO apparaissent environ 10 jours après infection
par streptocoques A.
• Prélèvement de sang veineux avec garrot enlevé le plus
rapidement possible.
• Il est préférable d'être à jeun.
• Des prélèvements successifs (à 3 semaines d'intervalle
environ) sont réalisés pour suivre l'évolution du taux des
anticorps.
• Un autre dosage après démarrage du TRT par ATB est
effectué pour suivre l'efficacité du TRT (chute des taux).
Dosage ASLO (suite)
Intérêt du dosage: Les infections à Streptocoques
A peuvent entraîner des complications : RAA,
endocardite, glomérulonéphrite…
• Ces infections donnent lieu à la production
d'anticorps, en particulier de type ASLO.
• Le dosage de ces anticorps permet de confirmer
que ces infections sont d’origine streptococcique.
Résultats:
• Taux < 200 U ASLO /ml : non significatif
• Taux > 200 U ASLO /ml : significatif d'une
infection streptococcique de type A
2-Sérodiagnostic de la syphilis
Conditions de prélèvement:
• sang veineux, patient à jeun de préférence
• Des prélèvements successifs (à trois semaines
d'intervalle) peuvent éventuellement être réalisés
pour suivre l'évolution du taux des anticorps.
Intérêt du dosage: La syphilis évolue en 3 étapes
sur plusieurs années présentant des phases
asymptomatiques où seul le sérodiagnostic est
significatif. Celui-ci est basé sur 2 types de tests:
• VDRL (Veneral Disease Research Laboratory)
• TPHA (Treponema pallidum haemaglutinat° assay)
Sérodiagnostic de syphilis
Résultats
1er cas : les 2 tests sont négatifs : pas de syphilis
ou contamination récente (< 3 semaines, pas
d'anticorps)
2ème cas : les 2 tests sont positifs alors le syphilis
est en phase secondaire ou terciere
3ème cas : VDRL+ et TPHA négatif : VDRL pseudo
positive,
4ème cas : VDRL négatif et TPHA positif : ancienne
syphilis
IV-Analyses Biochimiques
A- Ionogramme sanguin
1- Dosage du calcium dans le sang:
Calcémie
Conditions de prélèvement: Echantillon de sang
veineux avec garrot tiré au plus tôt.
Le tube de prélèvement est vert ou rouge par défaut.
Il est préférable d'être à jeun.
Intérêt du dosage:
Le calcium est un élément très important pour la
formation et la minéralisation des os. Sa répartition
dans l'organisme est régulée par des hormones et son
analyse peut permettre le diagnostic de désordres
hormonaux, de pathologies des os, de troubles rénaux.
Calcémie (suite)
Valeurs normales:
Enfant < 3 ans : 88 - 110 mg /l
> 3 ans et adulte : 90 - 105 mg /l
Variations physiologiques et pathologiques:
• Hypocalcémie, elle est observée en cas de
grossesse, post-partum , hypoparathyroïdie
,pancréatite aiguë, hypomagnésémie,
insuffisance rénale chronique, apports
insuffisants ou baisse d'absorption intestinale
• Hypercalcémie: rencontrée lors d’ostéolyse liée à
certains cancers ou tumeurs de l’os, Ostéolyse
liée à une immobilisation prolongée mais c’est le
cas aussi pour d’autres maladies des os.
Dosage du sodium dans le sang: Natrémie
• Conditions de prélèvement: (Idem que le précédent)
• Intérêt du dosage: appréciation de l’équilibre hydro-
électrolytique
• Valeurs normales: 133 - 143 mmol / L
• Valeurs pathologiques:
-Hyponatrémie : Conséquence d'un déficit d'apport de
sodium: pertes digestives, rénales, ou encore une
augmentation de la quantité d'eau dans l’organise suite à
une insuffisance cardiaque ou rénale.
-Hypernatrémie : conséquence d'une diminution de la
quantité d'eau (déshydratation) due aux pertes digestives,
diminution d'apport hydrique, perte d'eau importante
( sudation) ou encore à cause d’ une surcharge de sodium.
Dosage du potassium (k) : kaliémie
Conditions de prélèvement: (idem que précédents)
Intérêt du dosage: Le potassium est le principal
cation du secteur intracellulaire.
Valeurs normales: 3,5 - 5 mmol / L
Valeurs Pathologiques:
• Hypokaliémie : due à un déficit d'apport
potassique, perte digestive, perte rénale ou à une
hyperglycémie.
• Hyperkaliémie : due à un excès d'apport
potassique, défaut d'élimination rénale et/ou
digestive.
Dosage du magnésium (Mg): Magnésémie
Conditions de prélèvement:(idem que précédents)
Intérêt du dosage: Estimer l’état neuro-musculaire
Valeurs normales : 0,75 - 1 mmol / L
Valeurs pathologiques:
• Hypermagnésémie: dépression du système
nerveux central
• Hypomagnésémie: Diminution de l’absorption
digestive : dans les maladies de l’intestin grêle,
dans les malnutritions, en cas d’insuffisance
rénale, par perte urinaires excessives ou emploi
de diurétiques et en cas de hypercalcémies.
B- Le bilan lipidique
1- Cholestérol
Conditions de prélèvement: 5ml de sang veineux
sur flacon vert ou rouge, le malade doit être à jeun.
Intérêt :déceler une hypercholestérolémie
Valeurs normales: -cholestérol total: 1.60 à 2.25 g/L
- HDL: 0,60 g/L - LDL :1,60 g/ L
Valeurs pathologiques:
• Hypocholestérolémie : tuberculose , cancers
Insuffisance hépatiques , malnutrition
• Hypercholestérolémie :atteinte hépatique,
diabète, syndrome néphrotique ou pancréatite
2- Triglycérides
• Condition de prélèvement: idem au cholestérol
• Intérêt du dosage:
- Les triglycérides font partie comme le cholestérol
des composés lipidiques de l'organisme. Ils
constituent la principale réserve énergétique du
corps et sont stockés dans les tissus adipeux.
- Leur dosage sert à détecter un risque de
formation de caillots sanguins (thrombose) mais
surtout à évaluer le dépôt des matières grasses
( plaques d’athéromes) sur la proie interne des
artères causant des atteintes cardiovasculaires
Image d’un segment d’artère obstrué
par une plaque d’athérome
Triglycérides (suite)
• Valeurs normales
• Homme : 0.5 - 2 mmol/l soit 0.45 - 1.75 g/l
Femme : 0.40 - 1.60 mmol/l soit 0.35 - 1.40 g/l
• Variations pathologiques
Elles se manifestent par une augmentation lors de:
Grossesse (surtout en 3eme trimestre), prise de
contraceptifs oraux, tabac, alcool, alimentation
riche en sucre, mais également en cas d’obésité, de
diabète , goutte , Insuffisance rénale et Infarctus du
myocarde .
B- Bilan des protéines et glucides
1-CRP = C-Réactive Protéine
Conditions de prélèvement: 5ml de sang
veineux, flacon sec, malade de préférence à jeun
Intérêt du dosage
La CRP reflète l’existence de maladie inflammatoire
et/ou infectieuse
• Valeurs normales : < 6 mg /l
• Variations pathologiques : > 6 mg /l
Infections bactériennes ,Infarctus du myocarde
Certains cancers , brûlures ,arthrites et RAA .
2-Albumine dans le sang : Albuminémie
Conditions de prélèvement : 5ml de sang veineux,
vert ou rouge par défaut, malade doit être à jeun.
Intérêt du dosage: Détecter une déshydratation ou
une malnutrition ou une atteinte rénale
Valeurs normales : 35 - 50 g /l
valeurs pathologiques :
• Diminution : Régime végétarien , dénutrition ,
inflammation sévère , Atteinte néphrotique
Brûlures étendues..
• Augmentation : Déshydratation, pertes
liquidiennes, diabète insipide
Glucose sanguin: glycémie
Conditions de prélèvement : sang veineux, tube
gris contenant du fluorure , le prélèvement sera
effectué à jeun depuis 12 heures ou 2 heures
après un repas (post-prandial).
Intérêt du dosage: dépistage et suivi du diabète
Valeurs normales : 0.80 - 1.26 g /l
valeurs pathologiques :
• Diminution : taux considéré comme
pathologique si < 0,60 g/l
• Augmentation : taux considéré comme
pathologique si > 1,28 g/l
c- Bilan hépatique: 1-transaminases:
ASAT = Aspartate Amino Transférase = TGO
ALAT = Alanine Amino Transférase = TGP
Conditions de prélèvement: sang veineux , garrot
laissé le moins longtemps possible. Le tube est
vert ou rouge par défaut. Il est préférable d'être à
jeun.
Intérêt du dosage :Les transaminases sont des
enzymes ayant une activité métabolique
importante. Leur augmentation reflète une lésion
cellulaire, en particulier au niveau hépatique,
cardiaque, rénal ou musculaire.
Transaminases (suite)
Valeurs normales:
• TGO : 10 - 40 UI /l à 37 °C
TGP : 10 - 45 UI /l à 37 °C
Variations physiologiques et pathologiques:
• Diminution : Grossesse, déficit en vitamine B6
• Augmentation : Surcharge pondérale, obésité ,
hépatites virales, médicamenteuses, ou
toxiques, atteinte hépatique secondaire à une
maladie auto-immune ,cirrhose, infarctus du
myocarde.
2- Dosage de bilirubine: bilirubinémie
Conditions de prélèvement: sang veineux , garrot
laissé le moins longtemps possible. vert ou rouge par
défaut. Il doit rester à l'abri de la lumière avant l’analyse.
Pas indispensable d'être à jeun.
Intérêt du dosage: La bilirubine est un pigment
présent dans la bile. Lorsque la bile s'accumule (défaut
d'élimination), cela provoque un ictère.
Il y a la bilirubine libre ou indirecte, toxique pour le
cerveau. Elle risque de s'accumuler chez le nouveau-né
quand le foie n'est pas encore mature : c'est l'ictère
physiologique du NN. La bilirubine conjuguée ou directe
augmente dans les cholestases. L'ensemble : bilirubine
libre + bilirubine conjuguée constitue la bilirubine totale.
Bilirubinémie (suite)
Valeurs normales:
Bilirubine totale
-Naissance :8 - 25 mg /l
-1ère semaine : 25 - 120 mg /l
-2ème semaine : 10 -110 mg /l
-3ème semaine : 6 - 30 mg /l
- 4ème semaine : 3 - 15 mg /l
>1 mois et adulte : 3 -10 mg /l
Adulte : Bilirubine libre =2 - 7 mg /l , Bilirubine conjugué = 1 -3 mg /l
Valeurs pathologiques:
• Augmentation: Anémies, accident de transfusion,
Incompatibilité fœto-maternelle, ictère du nouveau-né.
• Diminution: hépatites et inflammation des voies biliaires
D- Bilan rénal
1-Dosage de créatinine: créatinémie
Conditions de prélèvement: sang veineux , tube vert
ou rouge. Eviter l’effort chez le patient avant le recueil.
Intérêt du dosage : L’analyse permet d'apprécier la
filtration rénale.
Valeurs normales: -Homme : 7 à 13 mg/l
-Femme : 6 à 11 mg/l
Valeurs pathologiques:
• Diminutions : Myopathie chez l’enfant
• Augmentations : Insuffisance rénale, leucémie,
goutte, HTA, insuffisance cardiaque.
2-Dosage de l’urée dans le sang = urémie
Conditions de prélèvement :Idem à la créatinémie
Intérêt : détection d’une altération rénale.
Valeurs normales :
-Homme : 0.18 à 0.45 g/l, Femme : 0.15 à 0.42 g/l
Valeurs pathologiques:
• Diminutions : Jeûne prolongé ,Malnutrition,
hépatite et insuffisance hépatique :
• Augmentations : Effort prolongé ,Insuffisance
rénale aiguë ou chronique
3- Acide urique
Conditions de prélèvement: Prélèvement de sang
veineux ,le tube est vert ou rouge. Le patient doit
être à jeun et au repos (pas d'effort physique avant
le recueil).Indiquer tout traitement en cours.
Intérêt du dosage: L'acide urique provient de la
destruction (dégradation) des acides nucléiques
ADN & ARN. Il est sous forme de sel soluble (urate) .
Lorsque son taux s'élève trop dans le sang, la
quantité en excès devient insoluble et commence à
se précipiter vers les articulations et entraîner la
goutte (= gonflement inflammatoire du gros orteil)
Acide urique (suite)
Valeurs normales
Homme : 210 - 420 µmol /l soit 35 - 70 mg /l
Femme : 150 - 360 µmol /l soit 25 - 60 mg /l
Variations physiologiques et pathologiques
• Diminution :
Grossesse (jusqu'au 6eme mois), Insuffisance
hépatique sévère et en cas de certaines tumeurs avec
augmentation importante de l'élimination urinaire.
• Augmentation :
Obésité, goutte, alcoolisme, Insuffisance rénale
chronique, déshydratation, Jeûne prolongé et en cas
de certains cancers.

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