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Pour clôturer mes trois années d'études en biologie, j'ai décidé de faire un
stage volontaire de fin d'étude en analyse médicale. Ce stage d'une durée 10
jours , s'est déroulé au niveau des différents services du Laboratoire Nationale
de Biologie de Médicale de Hôpital Mohamed Boudiaf - Médéa. Le choix du
stage s'est révélé très intéressant et très enrichissant pour mon expérience
professionnelle.
Ce rapport présente le travail que j'ai effectué lors de mon stage qui a débuté du
01 juillet 2022 , Le but de ce-dernier n'est pas de faire uniquement une
présentation exhaustive de tous les aspects théoriques que j'ai pu apprendre ou
approfondir, mais aussi, de manière synthétique et claire de faire un tour
d'horizon des aspects pratiques et humains auxquels j'ai été confrontée .
2- Présentation du laboratoire
Un laboratoire d'analyse médicale est une structure où des professionnels de la santé
prélèvent et analysent différents fluides de l'organisme. Il peut s'agir de prélèvement de
sang, de peaux, d'urines, de selles ou de muqueuses, Il regroupe de nombreux
professionnels de la santé tels que des infirmiers, des techniciens de laboratoire, des
biologistes et des médecins, donc le laboratoire reçoit les prélèvements des personnes
soit à l’intérieur de laboratoire :le prélèvement sanguin ou bien à l’extérieure de
laboratoire chez un médecine :un prélèvement vaginal Ou dans la maison comme le
prélèvement des urines et selles .
Les activités de laboratoire:
il exist 7 secteurs sont:
salle de prélèvement.
salle de hématologie .
salle de biochimie.
salle de sérologie.
salle de bacteriologie.
salle de parasitologie.
salle de hormonologie.
3-tâches effectuées
1- salle de prélèvement
- Se faire prélever par le personnel du laboratoire ;
- Déposer des échantillons ;
- Retirer des résultats d’analyses.
Les échantillons sont enregistrés (numéro d’identification, analyses requises…) grâce
aux Renseignements portés sur la fiche de suivi qui les accompagne. Cette opération de
tri et D’enregistrement est une étape essentielle qui nécessite un environnement calme
pour éviter toute erreur d’étiquetage. D’un autre côté, le personnel doit également gérer
les urgences et les pics d’activité. Dans ce cas, plusieurs personnes peuvent être
affectées à ce poste.
a-Définition :Une prise de sang consiste, comme son nom l’indique, à prélever une
certaine quantité de sang dans le corps d’une personne. Ce prélèvement de sang est
réalisé au moyen d’une seringue dotée d’une très fine aiguille par un professionnel de
santé (médecin, infirmière, professionnel travaillant au sein d’un laboratoire d’analyses
médicales). L’aiguille est enfoncée dans une veine, le plus souvent au niveau du creux
du bras. Cet acte médical est généralement indolore et rapide (figure1). Une prise de
sang est prescrite par un biologiste (ou non) et peut avoir plusieurs objectifs, à savoir :
• contribuer au dépistage d’une maladie,
• aider le médecin à adapter un traitement,
• voir l’évolution d’une maladie.
Tube citraté
Le tube citraté contient du citrate de sodium qui est un anticoagulant. Il possède un
bouchon bleu.Il est à prélever en premier afin que l’héparine du tube vert ne contamine
pas le tube citraté.De plus, il faut remplir ce tube à plus de 80% ; il existe un trait de
remplissage obligatoire à atteindre pour que le prélèvement soit accepté. Ce remplissage
est nécessaire à cause du citrate présent dans le tube qui est un anticoagulant liquide ; si
la quantité prélevée est trop faible, le sang sera trop dilué et les résultats seront faussés.
(figure2)
Tube sec
Les tubes secs possèdent soit un bouchon rouge soit un bouchon jaune.
Les tubes secs ne contiennent rien (pas d’anticoagulant) et peuvent être utilisés comme
tubes de purge. Une fois centrifugé, on obtient du sérum. Tous les autres tubes
contiennent un anti coagulant donc après centrifugation, on obtient du plasma.(figure2)
•Le plasma est la partie liquide du sang obtenu après centrifugation du sang
recueilli dans un tube contenant un anticoagulant. Après centrifugation du tube, le
plasma, qui a une couleur jaune-clair, apparaît en haut du tube, alors que les
globules rouges et les autres cellules sanguines forment le culot
•Le sérum est la partie liquide du sang obtenu après recueil du sang sur un tube
sans anticoagulant (appelé tube sec). Au contact du tube, le sang va coaguler dans
un premier temps en laissant un exsudat (sérum) se produire. Au cours de la
centrifugation, le caillot se déplace au fond du tube de prélèvement, laissant le
sérum au-dessus.
On distingue le tube rouge qui est un tube sérum avec activateur de coagulation et le
tube jaune avec un tube sérum avec gel séparateur et activateur de coagulation.
Tube hépariné
Le tube hépariné contient un anticoagulant, l’héparine de lithium. Il possède un bouchon
vert.(figure2)
Tube EDTA
Le tube EDTA contient un anticoagulant : Ethylène Diamine Tétra-Acétique). Il possède
un bouchon violet.
•Les numérations
•L’hémoglobine glyquée
•Les groupes sanguins
•Les RAI
2 -la salle de hématologie
b-Frottis sanguin
Comment se préparer :
Résultats normaux
•VS 1ère heure < 7 mm
Le bilan biochimique regroupe une série de tests sanguins qui permettent d’évaluer le
bon fonctionnement de plusieurs organes et systèmes importants pour la santé, dont le
foie et les reins. Le bilan biochimique peut être effectué à jeun ou non, et il est
généralement accompagné d’une formule sanguine complète.
Fonction rénale : urée, créatinine, eGFR (calcul du débit de filtration des glomérules),
acide urique, phosphore
Santé des os, fonctionnement des glandes parathyroïdes, statut en vitamine D : calcium,
phosphore, phosphatase alcaline (ALP)
Fonction du foie et des voies biliaires : bilirubine totale, ALP, lactate déshydrogénase
(LDH), aspartate aminotransférase (AST), alanine aminotransférase (GPT), gamma-
glutamyltransférase (GGT), albumine
a-La glycémie
Le taux de sucre dans le sang est généralement mesuré à jeun, mais il peut être répété
après le repas (glycémie post-prandiale), ou à intervalles réguliers durant une journée
pour observer la variation de la concentration du sucre au fil des heures. Le résultat est
augmenté en cas de diabète.La valeur normale à jeun est comprise entre 4,4 et 6,93
mmol/litre (0,8 et 1,26 g/l).(figure5)
b-La créatinine
Cette substance est normalement excrétée dans les urines si les reins sont sains et
fonctionnent normalement. Son augmentation traduit une insuffisance rénale, et sa
chute, une dénutrition.
La valeur normale est comprise entre 50 et 100 umol/litre (entre 6 et 11 mg/l) pour une
femme et entre 65 et 120 umol/litre (entre 7 et 13 mg/l) pour un homme.(figure5).
c-L'ionogramme
C’est l’étude des ions sanguins, principalement du sodium et du potassium. Le premier peut augmenter
en cas de déshydratation. Un excès du second peut traduire une insuffisance des reins ou des glandes
surrénales, alors que sa chute peut être liée à des diarrhées.
Le taux normal du sodium se situe entre 136 et 145 mmol/l. Le taux de potassium est compris entre 3,5
et 4,9 mmol/l.(figure5)
d-Les lactate déshydrogénases
4- la salle de sérologie
C'est une mesure du pourcentage de protéines dans le sang qui est sécrétée par le foie
dans les cas d'inflammation aiguë qui affectent le corps humain, car lorsque cette
protéine est détectée et s'aperçoit qu'elle est présente en grande quantité, cela indique
que la personne a une inflammation aiguë.
L'objectif du test CRP est de déterminer s'il existe une inflammation aiguë dans le corps,
et ce test est important dans le suivi et l'évaluation des maladies vasculaires et des
maladies cardiaques, telles que les cas d'insuffisance coronarienne ou d'infection
bactérienne dans le doublure du cœur, mais ce test ne détermine pas l'emplacement de
l'inflammation Mais le médecin indique l'importance de faire d'autres tests pour détecter
l'emplacement de la maladie ou de l'infection
Le niveau normal de protéine C-réactive dans le corps est de (0,2) mg (dL), et s'il le
dépasse, cela indique la présence d'une inflammation dans le corps, en tenant compte du
fait qu'il existe une divergence dans la validité des résultats d'un laboratoire à l'autre.
1- (CRP à haute sensibilité), qui est un test protéique à haute sensibilité qui aide à
mesurer la proportion de protéines de couleur claire dans le sang entre (5,-10) mg par
litre ; Où il est utilisé chez les personnes normales pour déterminer l'étendue de
l'insuffisance coronarienne ou de certaines maladies cardiaques.
2- (CRP régulière), qui est un test très riche en protéines dans le sang entre (10-1000)
mg par litre, et ce test est utilisé pour connaître la présence d'inflammation ou d'infection
dans le corps.(figure 7)
5- salle de bacteriologie
a-l'hémoculture
L’hémoculture est un examen bactériologique qui consiste à rechercher la
présence de germes (microbes) dans le sang.
FLACONS D’HÉMOCULTURES
Ils sont munis d’une capsule en plastique rigide qui recouvre un opercule en caoutchouc.
Cet opercule peut être perforé sans en altérer l’étanchéité, après retrait de l’aiguille
La pression dans les flacons est réduite, ce qui facilite le recueil du sang.
L'examen direct du liquide céphalorachidien (LCR) est une urgence dans laquelle le rôle
du laboratoire est fondamental: il permet très rapidement de confirmer un diagnostic de
méningite, de reconnaître une cause bactérienne et d'orienter un traitement antibiotique.
En effet, la méningite bactérienne est une maladie grave, et c'est seulement un traitement
précoce et efficace qui peut conduire à une guérison sans séquelles.
I. Prélèvement
Il doit toujours être effectué dans des conditions d'asepsie rigoureuses, avant tout
traitement antibiotique.
Le liquide céphalorachidien est recueilli dans trois tubes stériles, remplis
successivement, avec 1 à 3 ml de liquide. Il doit être transporté en urgence au laboratoire
et traité avec le plus grand soin.
Si l'examen doit être différé, les échantillons seront conservés à 37°C pour les cultures,
et à 4°C pour l'étude des cellules.
Après homogénéisation par une légère agitation, on note le degré de limpidité du liquide
et sa coloration.
•Un liquide clair (appelé souvent eau de roche) correspond soit à un liquide
normal, soit à un liquide pathologique: les liquides clairs peuvent se rencontrer
dans les méningites virales, tuberculeuses, mycosiques ou à leptospires.
•Un liquide trouble ou franchement purulent (eau de riz) correspond à une réaction
leucocytaire marquée, traduisant généralement une méningite bactérienne ou, plus
rarement, une réaction méningée inflammatoire amicrobienne.
•En cas de piqûre d'un vaisseau au cours de la ponction, on note une coloration
rouge du liquide, plus marquée dans le premier tube que dans le dernier, avec
souvent formation d'un petit caillot.
•Les liquides sanglants ou jaunes (appelés xanthochromiques) dans les trois tubes
évoquent plutôt une hémorragie méningée, sans toutefois éliminer
systématiquement une méningite.
La cellule de Malassez contient 1 mm3. Elle est divisée en dix bandes de 1/10 mm3.
Chaque bande est divisée en dix rectangles de 1/,100 de mm3 (quadrillés ou non).
•Recouvrir la cellule d'une lamelle (en la faisant adhérer avec un peu de salive
déposée avec le doigt).
•S'assurer que la platine du microscope est horizontale et attendre quelques
minutes pour permettre aux éléments de sédimenter.
selon leur abondance, compter soit toute la cellule, soit plusieurs bandes, soit plusieurs
rectangles. Faire la moyenne. Calculer et rendre les résultats par mm3. Pour faciliter
l'examen, on peut ajouter une trace de colorant (solution de bleu de méthylène) à
quelques gouttes du liquide céphalorachidien.
En cas de liquide hémorragique, il peut être difficile de différencier les hématies et les
éléments. Compter alors l'ensemble, puis dans un petit tube ajouter à 9 gouttes de liquide
céphalorachidien, 1 goutte d'acide acétique au 1/10e. Attendre quelques minutes que les
hématies soient lysées, puis compter à nouveau l'ensemble des éléments visibles.
Ajouter 10% à cette valeur pour tenir compte de la goutte d'acide acétique. La quantité
de leucocytes sera obtenue par soustraction des deux valeurs des dénombrements.
2 Examen bactériologique
Coloration de Gram
La deuxième lame est utilisée pour la coloration de Gram. Les bactéries sont
généralement peu nombreuses, leur forme et la façon dont elles sont groupées, leur
situation à l'intérieur ou à l'extérieur des polynucléaires et leur affinité pour les colorants
permettent avec l'habitude de faire une identification présomptive. Même si cela n'est
pas le cas, il est important de pouvoir répondre:
•s'il s'agit de cocci à Gram positif, de cocci à Gram négatif, de bacilles à Gram
négatif, de bacilles à Gram positif.
coprologie
L’examen parasitologique des selles vise à diagnostiquer la présence d’un parasite dans
le tube digestif qui consiste à rechercher directement la présence de parasites par
observation au microscope avant et après enrichissement. Les modalités de prélèvement
peuvent différer selon les laboratoires d'analyses, et celui-ci peut être fait sur place ou à
domicile. Il est recommandé d'effectuer trois analyses sur des selles recueillies
séparément à quelques jours d'intervalle, afin de faciliter le diagnostic. En pratique, les
laboratoires demandent souvent 2 prélèvements, effectués à 2 à 3 jours d'intervalle.
En cas de résultat positif, différents types de parasites peuvent être mis en évidence :
taenia (ver solitaire), amibes (pathogènes ou non pathogènes), oxyures (communs chez
l'enfant), ascaris, trichocéphale…
•Un résultat négatif oriente vers un autre type d'examen, sachant que l'examen
parasitologique des selles peut être renouvelé en cas de doute. En effet, certains
parasites sont rejetés dans les selles par intermittence.
Figure 01: déroulement de prelevement sanguine
Ce stage me fait une apportunité de comprendre beaucoup des informations sur les
différents secteurs de laboratoire, j'ai participée pour faire des analyses et ça me
vraiment plaît le domaine biologie spécialement microbiologie est très intéressant avec
ce stage j'ai approfondi sur le monde de bactériologie et les autres différents secteurs.