BILIRUBIN T- DMSO

Bilirubine Totale
DMSO. Colorimétrique

Détermination quantitative de bilirubine CALCULS

IVD  Avec le calibreur:

Conserver à 2-8ºC (A) Echantillo n - (A)Blanc Echantillo n

x Calibreur Conc. = mg/dL de bilirubine
PRINCIPE DE LA METHODE (A) Calibreur - (A)BlancCa libreur
La bilirubine se transforme en azobilirubine au contact de l’acide
sulphanilyque diazotade et se mesure par photométrie. Sur les deux  Avec facteur:
fractions présentes dans le sérum, la bilirubine-glucuronide et la ((A) Echantillon– (A) Blanc d’échantillon) x Facteur* = mg/dL bilirubine dans
bilirubine libre liée à l’albumine, seule la première réagit en milieu aqueux l’échantillon
(bilirubine directe). La deuxième doit être mélangée à du
dimetilsulphoxyde (DMSO) pour pouvoir réagir (bilirubine indirecte). Dans ConcentrationduCalibreur
la détermination de la bilirubine indirecte, on détermine également la *Facteur:
directe. Le résultat final donne la bilirubine totale. (A) Calibreur - (A) Blanc Calibreur
L’intensité de la couleur est proportionnelle à la concentration de bilirubine
présente dans l’échantillon testé1, 2,3. Facteur de conversion: mg/dL x 17,1 = mol/L.

SIGNIFICATION CLINIQUE CONTROLE DE QUALITE

La bilirubine est générée par la dégradation de l’hémoglobine. Il est conseillé d’analyser conjointement les échantillons de sérum dont les
Elle est transportée e la rate vers le foie et est excrète dans la bile. valeurs ont été contrôlées: SPINTROL H Normal et pathologique (Réf. 1002120
L’hyperbilirubinémie est le résultat d’une augmentation de la bilirubine et 1002210).
dans le plasma. Les causes les plus probables de l’ hyperbilirubinémie Si les valeurs se trouvent en dehors des valeurs tolérées, analyser l’instrument,
sont les suivantes: les réactifs et le calibreur.
La bilirubine totale: augmentation de l’hémolyse, altérations génétiques, Chaque laboratoire doit disposer de son propre contrôle de qualité et déterminer
anémie néonatale, altérations éritropoyétiques, présence de drogues. les mesures correctives à mettre en place dans le cas où les vérifications ne
La bilirubine directe: Colestase hépatique, altérations génétiques et correspondraient pas aux attentes.
altérations hepatiques1, 6,7.
Le diagnostic clinique doit être réalisé en tenant compte des données VALEURS DE REFERENCE1
cliniques et de laboratoire. Bilirubine totale: Jusqu’à 1,10 mg/dL  Jusqu’à 18,81 mol/L
Ces valeurs sont données à titre d’information. Il est conseillé à chaque
REACTIFS laboratoire de définir ses propres valeurs de référence.
Acide sulphanilyque 30 mmol/L
R1 Acide chlorhydrique (HCI) 50 mmol/L CARACTERISTIQUES DE LA METHODE
Diméthysufoxide (DMSO) 7 mol/L Gamme de mesures: Depuis la limite de détection de 0,099 mg/dL jusqu’à la
limite de linéarité de 18 mg/dL.
R2 Nitrate de sodium 29 mmol/L Si la concentration de l’échantillon est supérieure à la limite de linéarité, diluer
Optionnel BILIRRUBIN CAL Réf: 1002250 1/2 avec du ClNa 9 g/L et multiplier le résultat final par 2.
Précision:
PRECAUTIONS Intra-série (n= 20) Inter-série (n= 20)
R1 /RT: Corrosif (C): R35: provoque des brûlures graves. Moyenne (mg/dL) 1,12 5,36 1,01 5,28
S26: En cas de contact avec les yeux, rincer à grande eau immédiatement, et SD 0,02 0,12 0,03 0,12
rendez-vous chez un médecin CV (%) 2,33 2,27 2,70 2,32

PREPARATION Sensibilité analytique: 1 mg/dL = 0,01540 A.

Tous les réactifs sont prêts à l’emploi. Exactitude: Les réactifs SPINREACT (y) ne montrent pas de différences
systématiques significatives lorsqu’on les compare à d’autres réactifs
CONSERVATION ET STABILITE commerciaux (x).
Tous les composants du kit sont stables jusqu’à la date de péremption Les résultats obtenus avec 50 échantillons ont été les suivants:
indiquée sur l’étiquette de la capsule, et si les capsules sont maintenus Coefficient de corrélation (r): 0,996.
hermétiquement fermés à 2-8ºC, à l’abri de la lumière et des sources de Equation de la Coubre de régression: y=0,0208 + 0,9884x.
contamination. Ne pas utiliser les réactifs en dehors de la date indiquée. Les caractéristiques de la méthode peuvent varier suivant l’analyseur employé.
Indices de détérioration des réactifs:
- Présence de particules et turbidité. INTERFERENCES
- Développement de couleurs en R 2. La présence d’hémolyse réduit la valeur de bilirubine1,2,3.
Différentes drogues ont été décrites ainsi que d’autres substances qui peuvent
MATERIEL SUPPLEMENTAIRE interférer lors de la détermination de la bilirubine4,5.
- Spectrophotomètre ou analyseur pour les lectures à 555 nm.
- Cuvettes de 1,0 cm d’éclairage. REMARQUES
- Equipement classique de laboratoire. 1. Pour déterminer la présence de bilirubine dans les néonates, relever avec
la pipette 50 L de l’échantillon. Multiplier le résultat obtenu par 2.
ECHANTILLONS 2. SPINREACT dispose de consignes détaillées pour l’application de ce
Sérum ou plasma sans hémolyse1. Protéger de la lumière. réactif dans différents analyseurs.
Stabilité de l’échantillon: 4 jours à 2-8ºC ou 2 mois à –20ºC.
BIBLIOGRAPHIE
PROCEDURE 1. Kaplan A et al. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St Louis. Toronto.
Princeton 1984; 1238-1241. 436 and 650.
1. Conditions de test:
2. Malloy H T. et al. The determination of bilirubin with the photoelectric colorimeter.
Longueur d’ondes: . . . . . . . . . . . . . . . 555 nm (530-580) J. Biol Chem 1937; 112, 2; 481-491.
Cuvette:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm d’éclairage 3. Martinek R. Improved micro-method for determination of serum bilirubin. Clin
Température . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15-25ºC Chim 1966: Acta 13: 61-170.
2. Régler le spectrophotomètre sur zéro en fonction de l’eau distillée 4. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
3. Pipetter dans une cuvette: 5. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001.
Blanc B. totale 6. Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999.
7. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed AACC 1995.
R 1 (mL) 1,5 1,5
R 2 (L) -- 50 PRESENTATION
Echantillon (Remarque 1) / Calibreur (L) 100 100 Réf: 1001042 R 1 : 2 x 150 mL
Cont.
4. Mélanger et incuber pendant exactement 5 minutes à 15-25ºC. R 2 : 1 x 10 mL
5. Consulter l’absorption (A)

BSIS04-F 28/11/13 SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) ESPAGNE
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