Bilirubine directe / totale

Test colorimétrique. DMSO.

Code HB0020 2 x 125 ml

Conserver entre 2-8°C. Liquide.

Principe Contrôle de qualité

La bilirubine, en présence de l’acide sulfanilique diazoté et dans un
Il est recommandé d’utiliser des contrôles pour contrôler le
milieu alcalin, forme un composé coloré rouge.
fonctionnement de la méthode. Si les valeurs de contrôle se situent en
Des deux fractions présenté en sérum, bilirubine-glucuromide et
dehors de la plage définie, contrôlez si l’instrument, les réactifs et le
bilirubine libre lâchement liés à l'albumine, seulement bilirubine-
calibreur ne présentent pas d’anomalies. Chaque laboratoire doit
glucuromide réagit directement dans une solution aqueuse (bilirubine
élaborer son propre système de contrôle de la qualité et des mesures
directe), alors que la bilirubine libre exige de la solubilisation avec du
correctives si les contrôles ne sont pas conformes aux tolérances
diméthylsulfoxyde (DMSO) avant de réagir (bilirubine indirecte).
admissibles.
L’intensité de la couleur formée est proportionnelle à la concentration
Sérums normale et pathologique humains (HBC01, HBC02) sont
de bilirubine de l’échantillon.
disponible.
Composition de réactifs Valeurs de référence
Réactif D Acide Sulfanilique .………..….…....30 mmol/l
Bilirubine totale: jusqu’à 1,10 mg/dl (18,81 µmol/l)
Acide hydrochlorique……..……...150 mmol/l
Bilirubine directe: jusqu’à 0,25 mg/dl (4,27 µmol/l).
Réactif T Acide sulfanilique………………......30 mmol/l Ces valeurs sont données à titre indicatif. Chaque laboratoire doit
Acide Hydrochlorique.……….…....50 mmol/l élaborer sa propre plage de référence.
Diméthyl sulfoxide….…….……….…...7 mol/l
Caractéristiques de fonctionnement
Réactif N Nitrite de sodium….…………….......29 mmol/l Plage de mesure: de 0,04 mg/dl (limite de détection) jusqu’à 20 mg/dl
Pour le diagnostic in vitro. (limite de linéarité). Si les résultats obtenus sont supérieurs à 20
mg/dl, diluez l’échantillon 1:2 avec une solution saline, répétez la
Précautions mesure et multipliez le résultat par le facteur 2.
Réactif N: Nocif (Xn) : R22 : Nocif en cas d'ingestion ; S45 : En cas
Précision:
d’accident ou de malaise consulter immédiatement un médecin et lui
Bilirubine directe Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20)
montrer l’emballage ou l’étiquette.
Moyenne (mg/dl) 0,59 2,31 0,56 2,35
Préparation SD 0,03 0,06 0,02 0,05
Tous les réactifs sont prêts à l’emploi. CV (%) 4,61 2,86 3,60 2,10
Bilirubine totale Intra-assai (n=20) Inter-assai (n=20)
Conservation et stabilité
Moyenne (mg/dl) 1,201 5,366 1,219 5,455
Tous les réactifs sont stables entre 2 et 8°C jusqu'à la date de
péremption indiquée, à condition d’être conservés dans un récipient SD 0,043 0,115 0,05 0,116
fermé hermétiquement et à l’abri de la lumière et d’éviter les CV (%) 3,55 2,16 4,12 2,14
contaminations lors de leur utilisation. Sensibilité: 1 mg/dl = 0,034 Abs (directe) ; = 0,034 mg/dl (totale).
Le réactif doit se présenter sous l’aspect d’une solution limpide. Jetez Exactitude: les résultats obtenus à l’aide des réactifs CYPRESS
le réactif, si vous constatez une turbidité ou une précipitation ou s’il y DIAGNOSTICS n’ont pas présenté de différence systématique par
a un développement de couleur dans le réactif N. rapport aux autres réactifs disponibles dans le commerce.

Equipement supplémentaire Interférences

- Spectrophotomètre ou colorimètre permettant des mesures à 555 Hémolyse cause des résultats de bilirubine diminués. Une liste de
nm (530-580) médicaments et d’autres substances interférant avec la détermination
- Cuvettes assorties (trajet optique 1,0 cm) de bilirubine a été publiée par Young et al.
- Équipement général de laboratoire Notes
Échantillons 1. Pour la détermination de bilirubine dans les nouveau-nés, pipetez
Sérum ou plasma, libre d’hémolyse. Conservez à l’abri de la lumière. 50 µl de l'échantillon. Multipliez le résultat par 2.
Stable 2 mois à -20°C ou 4 jours entre 2-8°C. 2. Pour des systèmes automatiques, il est recommandé d’utiliser un
calibreur.
Méthode Bilirubine totale calibreur (HBS01) peut être utilisé pour le test
1. Longueur d’onde 555 nm (530-580); Température 15-25°C; Cuvette Bilirubine totale. Il doit être reconstitué avec 2 ml de l’eau distillée.
trajet optique 1 cm. Attendez 30 min avant l’utiliser. Conservez à l’abri de la lumière.
2. Ajustez le zéro de l’instrument avec de l’eau distillée. Stabilité : 2 mois à –20°C.
3. Pipetez dans une cuvette: Le calibreur de sérum (HBC03) peut être utilisé pour le test
Bilirubine totale Bilirubine directe Bilirubine totale et Bilirubine directe.
Echant/Cal Echant/Cal ( Abs Echant. − Abs Echant.Blanc )
Echant/Cal Echant/Cal Bilirubine (mg / dl ) = x Conc. Calibreur
( AbsCalibreur − AbsCalibreurBlanc )
Blanc Blanc
Réactif D --- --- 1,5 ml 1,5 ml
RéactifT 1,5 ml 1,5 ml --- ---
Réactif N --- 50 µl --- 50 µl Bibliographie
Kaplan A. et al. Bilirubin. Clin Chem The C.V. Mosby CO. St Louis. Torronto. Princeton
EchantillonNote1 /CalibreurNote2 100 µl 100 µl 100 µl 100 µl 1984; 1238-1241, 436 and 650
Mixer et attendre exactement 5 minutes à la température ambiante. Malloy H.T. et al. J. Biol Chem. 1937:112, 2: 481-491
Mesurer l’absorbance (Abs.). Martinek R. Clin. Chim. 1966: Acta 13: 61-170
Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press 1995
Calculation Young DS. Effects of diseases on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC 2001
Burtis A et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed AACC 1999
Bilirubine (mg/dl) = (Abs Echant. – Abs Echant. Blanc) x facteur* Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory tests, 3rd ed AACC 1995.
*Facteur théorétique: Langdorp, 02.2011
CYANPlus CYANStart
Bilirubine totale 33 29
Bilirubine directe 37 32
Facteur de conversion : mg/dl x 17,1 = µmol/l

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