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Activité anti oxydante :

Matériels :
Balance
Spatule
Tubes à essaye avec leur support
Ballon Bicol de 1000 ml
Micropipette de 250µl et 1000µl
Vortex

Produits :
DPPH
Méthanol
Eau distille
DMSO
Ligand (C34H12N2O2S)
CoCl2,6H2O
CuCl2,2H2O
NiCl2,6H2O
Test anti oxydante :
Pour réaliser ce test, La solution de DPPH est préparé par solubilisation de 4 mg de DPPH
dans 100ml de méthanol puis agité 20min (son absorbance après doit être entre 7 et 9).
L’évaluation de la capacité antioxydante est réalisée comme suit : un volume de 1250 µl de la
solution de DPPH (0,004%) déjà préparé est ajouté à 50µl de chacune de différentes
concentrations de l’extrait ou le BHT comme standard. Le mélange réactionnel est agité sur
vortex, ensuite incubé à l’abri de la lumière et à température ambiante pendant 30min, puis
l’absorption est lue à 517 nm par un spectrophotomètre UV-visible. Le control contient
(1250µl DPPH 0,004% + 50µl eau distillé).
Le pourcentage d’inhibition (1%) du radical DPPH pour les extraits et le BHT ont été calculé
comme suit : Effet de piégeage de DPPH% :
DPPH% = (Abs contrôle- Abs échantillon) / Ab control *100
La concentration inhibition à 50% de DPPH (IC50) est définie étant la concentration du
substrat qui cause la dégradation de 50% de DPPH (c’est-à-dire les concentrations
d’échantillons nécessaire pour piéger 50% des radicaux libres). Elle a été calculée par
régression linéaire à partir des graphes des taux d’inhibition et elle est exprimée en µg/ml et
comparé avec celle de standard BHT.

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