La Chromatographie par Perméation de Gel :

Réalisé par : Cheriguene Lynda.

2023/2024
 Sommaire :
Introduction…………………………………………………………. 1
1
La chromatographie par perméation de gel et son principe……

Avantages et inconvénients…………………………………………. 1
Exemple d’application……………………………………………….. 2
Conclusion…………………………………………………………… 2
Références bibliographiques……………………………………….. 3
 1

Introduction :
La chromatographie est une branche de la science qui se penche sur la formation, l'évolution et le
déplacement des zones de concentration des composés (ou des particules) d'un échantillon à
l'étude au sein d'un flux de phase mobile. Ce déplacement se produit dans des conditions
d'échange entre différentes phases, l'une étant stationnaire et ayant des propriétés de sorption
et/ou de tamisage. Il convient de noter que la chromatographie comporte de nombreux types
différents, chacun adapté à des objectifs et des domaines d'application spécifiques, parmis eux la
chromatographie par permeation de gel [1].

La chromatographie par perméation de gel et son principe :

La technique de chromatographie par perméation de gel (GPC), également connue sous le nom
de chromatographie par exclusion de taille (SEC) est une méthode privilégiée pour la
caractérisation de la masse molaire en poids et en nombre des polymères, ainsi que pour évaluer
leur indice de polydispersité [2], elle permet la séparation des macromolécules en fonction de
leur taille moléculaire. Au début de l'évolution de cette méthode, des gels de polydextrane
réticulés avec des pores de différentes tailles, tels que le Sephadex de Pharmacia en Suède,
étaient utilisés en tant que phase stationnaire (Porath et Flodin 1959, Flodin 1962). Lorsque ces
gels sont gonflés dans de l'eau, ils forment une structure tridimensionnelle qui agit comme un
tamis moléculaire. Lorsqu'une solution aqueuse de macromolécules traverse une colonne
contenant ce gel, une séparation chromatographique a lieu : les molécules de petite taille (c'est-à-
dire celles ayant un faible rayon hydrodynamique) peuvent pénétrer dans les pores des particules
de gel, tandis que les molécules de plus grande taille sont exclues des pores et traversent
directement la colonne. Par conséquent, les molécules les plus grandes sont les premières à être
éluées, suivies des plus petites [3].

Avantages et inconvénients :

L'utilisation de la GPC présente des aspects positifs et négatifs. Parmi les avantages de cette
méthode, on peut noter une efficace séparation des molécules de grande taille par rapport à celles
de petite taille, ainsi qu'une rapidité dans l'obtention des résultats. En revanche, des
inconvénients subsistent, notamment la limitation du nombre de pics résolubles dans un laps de
temps court lors de l'exécution de la GPC. De plus, la GPC exige au minimum une différence de
10 % dans le poids moléculaire pour obtenir une résolution nette des pics [4].
 2

Exemple d’application :
Mesurer les distributions des poids moléculaires de l'asphalte et de l'asphaltène en utilisant
la chromatographie par perméation de gel :
Pour débuter l'expérience, des échantillons d'asphalte, préparés et filtrés avec un filtre Téflon de
0,45 µm lors de l'étape précédente, ont été dissous dans du THF à une concentration de 1 g/ml.
Ces solutions ont ensuite été introduites dans la phase mobile et dirigées à travers la colonne
GPC. La phase mobile utilisée pour ces tests était du THF, avec un débit approprié de 1 ml/min,
et la température maintenue constante à 23 °C. Pendant ce processus, l'asphalte dissous se
déplaçait à travers la colonne en suivant le courant de la phase mobile.
Les molécules de plus grande taille avaient des difficultés à traverser le milieu poreux, sortant
donc plus rapidement de la colonne, tandis que les molécules plus petites, en fonction de leur
taille, se déplaçaient sur une plus longue distance dans le milieu poreux, prenant davantage de
temps pour traverser la colonne et quitter le système. En conséquence, la séparation des
molécules solutés reposait sur leurs dimensions et leurs poids moléculaires.
Une fois que les particules avaient quitté la colonne, elles étaient détectées, et les données
relatives au comportement de l'échantillon étaient enregistrées sous forme de graphique sur un
ordinateur. Ce graphique permettait de visualiser combien de molécules quittaient la colonne à
un moment donné. Pour obtenir la distribution des poids moléculaires de chaque échantillon, ces
données étaient ensuite comparées à une courbe d'étalonnage établie à l'aide de normes de
polystyrène à faible dispersion.
Toutes les expériences ont été menées à température ambiante et sous pression atmosphérique, et
chaque expérience a été répétée deux fois pour garantir la précision des résultats. Des étapes
similaires ont été suivies pour évaluer la distribution des poids moléculaires de l'asphaltène [4].

Conclusion :

La chromatographie par perméation de gel offre un avenir prometteur. Elle a évolué avec une
base théorique en constante expansion, révolutionnant ainsi la méthodologie de recherche et de
contrôle en chimie. Cette avancée a élargi nos horizons et surmonté les limitations liées à la
manipulation et à la détection de la sensibilité dans de nombreuses expériences. Les implications
de la chromatographie se sont étendues à de multiples disciplines scientifiques fondamentales,
notamment la chimie, la biologie et la médecine, ainsi qu'à des applications pratiques telles que
l'environnement, l'alimentation, les produits pharmaceutiques et l'exploration spatiale. Elle a
résolu de nombreux défis de production industrielle et a donné naissance à une nouvelle branche
industrielle essentielle dans le domaine des instruments scientifiques [1].
 3

Références bibliographiques :
1-4

1 Robert L Wixom, and Charles W Gehrke, Chromatography: A Science of DiscoveryJohn Wiley

& Sons, 2011).
2 Michele Bolte, and Michel Troquet, 'Optimisation De La Caracterisation De Polymeres
Hydrosolubles Par Chromatographie a Permeation De Gel: Utilisation De Plans D'experiences,
Une Methode Rapide Et Efficace', European polymer journal, 26 (1990), 177-79.
3 G. Gellerstedt, 'Gel Permeation Chromatography', in Methods in Lignin Chemistry, ed. by
Stephen Y. Lin and Carlton W. Dence (Berlin, Heidelberg: Springer Berlin Heidelberg, 1992),
pp. 487-97.
4 Mohammad Nikookar, Mohammad R Omidkhah, Gholam R Pazuki, and Amir H Mohammadi,
'An Insight into Molecular Weight Distributions of Asphaltene and Asphalt Using Gel
Permeation Chromatography', Journal of Molecular Liquids, 362 (2022), 119736.