Compte rendu :

Chromatographie en phase gazeuse et

chromatographie en phase liquide

Réalisé par : Encadre par :

Année universitaire : 2023/2024

 Chromatographie
I. Définition:
La chromatographie : méthodes de séparation sert à séparer les mélanges très complexes
(Composer de plusieurs molécules), chroma est un mot grec signifie l’étude des couleurs,
graphie : c’est la science. La chromatographie c’est la science des études de la couleur.

II. Les types de chromatographique :

Il existe de nombreux types de chromatographie ; on peut notamment les classer selon la
nature de la phase mobile :
 La chromatographie sur couche mince (CCM ou TLC) ;
 La chromatographie en phase gazeuse (CPG ou GC) également appelée CPV
(chromatographie en phase vapeur) ;
 La chromatographie en phase liquide (CPL ou LC) ;
 La chromatographie en phase liquide à haute performance (CLHP ou HPLC)
 La chromatographie en phase supercritique (CPS ou SFC).
On peut aussi les nommer selon les interactions développées par la phase stationnaire :
• la chromatographie d'adsorption/d'affinité ;
• la chromatographie de partage ;
• la chromatographie à échange d'ions ;
• la chromatographie chirale (qui est, soit de la CPG, soit de la CPL) ;
• la chromatographie d'exclusion stérique (CES ou SEC).
Ou selon le support de la phase stationnaire :
• la chromatographie sur colonne (regroupant notamment HPLC et CPG) ;
• la chromatographie planaire (qui recouvre chromatographie sur couche mince et
chromatographie sur papier) ;
Enfin, un nouveau type de chromatographie commence à trouver des applications : la
chromatographie à 2 dimensions.
Que nous intéresse est la chromatographie en phase gazeuse
 La chromatographie en phase gazeuse

La chromatographie en phase gazeuse (CPG) est une technique de séparation d’un mélange de
molécules volatiles, et qui constitue de :
- Un injecteur : sert à vaporiser les solutés en solution dans le solvant afin qu'ils
puissent être entrainés dans la colonne par le gaz vecteur
- La colonne capillaire : sont de simples tubes de longueur peut être de 15 mètres
jusqu’à 120 mètres.
- Le détecteur : c’est une spectroscopie de masse pour donner l’identité de la molécule
séparée.
Les conditions sur l’échantillon ou bien sur la matrice à analyser pour faire la
chromatographie c’est :
- L’échantillon doit être volatile.
- La thermostabilitée d’échantillon.
1. Mode Opératoire de la Chromatographie en Phase Gazeuse (CPG) :

La première étape c’est la préparation de la solution à analyser

puis la solution change la phase liquide en phase gazeuse à l’aide
d’augmentation de la température ,après la phase mobile gaz de
l’hélium (He) qui va pousser les molécules de notre échantillon, il
va continuer selon un débit(mL/min), et les molécules vont
séparer les uns des autres selon affinité ou bien la polarité dans la
phase stationnaire, les éléments les moins polaires vont sortir les
premières jusqu’à la molécule le plus polaires.
Après la séparation le détecteur va jouer leur rôle, toute les molécule séparer vont dépasser
directement vers la source d’ionisation pour ioniser la molécule (arracher un électron) on
prépare la molécule pour la fragmentation (pour l’étude de la masse), on prépare plusieurs
fragments et chaque fragment constitue d’une masse et l’ensemble des fragments constitué le
spectre de masse, la valeur expérimentale mesurer par la chromatographie c’est le temps de
rétention ( c’est le temps nécessaire pour un molécule de traverser la colonne jusqu’à la sortie)
le tR c’est un caractéristique pour chaque molécule,
A partir du tR et le spectre de masse le logiciel donne le nom de la molécule (à partir d’une
librairie a jour). Le résultat obtenu se forme d’un chromatogramme.

La chromatographie sur colonne

La chromatographie sur colonne est une chromatographie
d’adsorption, elle repose sur le même principe que la chromatographie
sur couche mince : les espèces chimiques à séparer sont plus ou moins
entraînées par un éluant sur une phase fixe.
Il y a deux modes dans la chromatographie sur colonne (en phase
liquide) :
Mode Isocratique : En chromatographie isocratique, la composition de la
phase mobile reste constante pendant toute la durée de l'analyse. Le
même mélange de solvants est utilisé tout au long de la séparation.
Mode Gradient : En chromatographie en mode gradient, la composition
de la phase mobile varie de manière contrôlée tout au long de l'analyse.
On commence souvent avec une phase mobile plus polarisée et on la
modifie au fil du temps vers une phase mobile moins polarisée, ou vice
versa.

2. Mode Opératoire de la Chromatographie en phase liquide :

- Préparation de la Phase Stationnaire :

Choisissez une colonne appropriée pour votre application et remplissez-la avec la
phase stationnaire correspondante.
La phase stationnaire peut être constituée de particules solides, de gels, de résines,
etc., en fonction de la technique de chromatographie.

- Injection de l'Échantillon :
Injectez soigneusement l'échantillon à analyser dans la colonne. Utilisez un injecteur
approprié en fonction de la technique de chromatographie.

- Élution :
Passez la phase mobile à travers la colonne de manière continue. Les composants de
l'échantillon se déplacent à des vitesses différentes en fonction de leur interaction avec
la phase stationnaire.

- Détection : par la spectroscopie de masse.