République Algérienne Démocratique et Populaire

Ministère de l’enseignement supérieur et de la recherche

scientifique

Faculté : science de la nature et de la vie.

Département : biologie.
Spécialité : M2, biochimie appliqué.
Module : Opération d’élaboration et de transformation des
biomolécules en produits finaux

TP°01 :
L’extraction des huiles essentiales
par Clevenger et Soxhlet

Année universitaire : 2023/2024

Introduction :
 Définition botanique de thym :
Le thym commun (Thymus vulgaris) est une plante herbacée aromatique
appartenant à la famille des Lamiacées. Elle est caractérisée par des petites
feuilles persistantes, souvent vert grisâtre, et des fleurs tubulaires de couleur
rose pâle à pourpre.
Le thym commun est largement utilisé à des fins culinaires et médicinales. Ses
feuilles aromatiques sont prisées en cuisine pour leur saveur intense et sont
également utilisées dans des infusions pour leurs propriétés médicinales. 1
Son goût est différent selon le terroir et il porte souvent le nom du lieu où il
croît. C'est un sous-arbrisseau rustique qui pousse spontanément dans le midi sur
les terrains rocailleux, chauds et secs. Il peut pousser jusqu'à 1 500 à 2 000 m
d'altitude. Ses tiges grêles, ramifiées et tortueuses, ligneuses à la base, sont
garnies de petites feuilles étroites gris-vert, odorantes et persistantes. Entre mars
et août, de petites fleurs généralement blanches ou rosées se regroupent à la
pointe des tiges en petits capitules. Le thym est une des plantes aromatiques les
plus utilisées. 2
Classification taxonomique :
Selon (Mebarki, 2010 ; Madi, 2010) :
Règne : Plantae (végétal)
Sous règne : Tracheobionta
Division : Magnoliophyta
Embranchement : Spermaphytes (phanérogames)
Sous embranchement : Angiospermes
Classe : Magnoliopsida
Sous-classe : Astéridae
Ordre : Lamiales
Famille : Lamiaceae (labiées)
Genre : Thymus
Principes actifs du thym :
Le thym comporte plusieurs molécules intéressantes qui se retrouvent dans les
différents organes de la plante .
Ces molécules sont :
o Le thymol
o Les acides phénoliques : Acide caféique acide rosmarinique.
o Les flavonoïdes : Hesperédine, eriotrécine, narirutine, lutéoline.
o Les polyphénols : Tanin. 5
Espèces et variétés de thyms :
La classification et la reconnaissance des thyms sont complexes car ils
s'hybrident très facilement et certaines espèces ne se distinguent que par une
variation dans l'huile essentielle. 2
Des principales espèces de genre Thymus en Algérie 6
Espèce Localisation
Thymus capitatus Rare dans la région de Tlemcen
Thymus fontanesii Commun dans le Tell Endémique Est Algérie-
Tunisie Thymus numidicus Le sous-secteur de l’atlas tellien. La
grande et la petite
Kabylie. De Skikda à la frontière tunisienne et Tell constantinois
Thymus commutatus Endémique Oran
Thymus guyoni Rare dans le sous-secteur des hauts plateaux
algérois, oranais et constantinois
Thymus lancéolatus Le secteur de l’atlas tellien (Terni de Médéa
Benchicao) et dans le sous-secteur des hauts plateaux algérois, oranais (Tiaret)
et constantinois
Thymus pallidus Très rare dans le sous-secteur de l’Atlas Saharien
et constantinois
Thymus hirtus Commun sauf sur le littoral
Thymus glandulosus Très rare dans le sous-secteur des hauts plateaux
algérois
Thymus algériensis Très commun dans le sous-secteur des hauts
plateaux algérois, oranais
Thymus munbyanus Endémique dans le secteur et Nord algérois
L’intégrée thérapeutiques :
Le thym (Thymus vulgaris) est souvent utilisé à des fins thérapeutiques en
raison de ses propriétés médicinales. Voici quelques-unes des applications
thérapeutiques du thym :
A. Activité antibactérienne :
L’effet antibactérien du thym est dûaux composants résidant dans l’huile
essentielle à titre d’exemple : thymol et carvacrol, ainsi à sa teneur en
polyphénols. Ces derniers jouent un rôle très important dans la protection du
végétal. Parmi ces composés, les flavonoïdes qui ont une capacité d’agir sur les
protéines virales et inhibent la réplication du rétrovirus du SIDA, ils ont
également une action sur diverses bactéries en inhibant leurs enzymes
métaboliques, en séquestrant les substances nécessaires à la croissance
microbienne et en chélatant des métaux tels que le fer. 7
B. Effet tonique :
Son effet tonique général est aussi intéressant dans le cadre d’une infection
puisqu’il permettra de stimuler l’organisme et de lutter contre la fatigue amenée
par l’infection. On l’utilisera donc pour lutter contre la toux associée à un
refroidissement en cas de bronchite, de rhinopharyngite, d’état grippal. 9
C. Antioxydant Naturel :
Thym conteien lune grandes capacités antioxydantes. Différents composés du
thym lui permettent de posséder un tel statut, comme les phénols (thymol et
carvacrol), les flavonoides, l’acide rosmarinique, l’acide caféique et lavitamine.
8

*Les composés antioxydants du thym aident à neutraliser les radicaux libres, ce

qui contribue à protéger contre le stress oxydatif.
D. Propriétés Anti-inflammatoires
L’action anti-inflammatoire importante de thym permet aussi de calmer
l’inflammation de l’arbre bronchique. 9

E. Activité antispasmodique :
Affecte au niveau bronchique pour calmer les toux sèches et son
activité expectorante mise à profit dans les toux grasses. 9
La Commission E allemande reconnaît l’efficacité du thym pour le traitement
des symptômes de la bronchite, de la coqueluche et de l’inflammation des voies
respiratoires. En plus de ces usages, l'ESCOP lui reconnaît une utilité pour le
traitement de l’inflammation des muqueuses de la bouche et des gencives
(stomatite) et de la mauvaise haleine chronique (halitose). Quant à
l'Organisation mondiale de la Santé, elle souligne qu'en plus de ces usages, les
pharmacopées européennes font mention du thym pour traiter la dyspepsie et
d'autres troubles gastro-intestinaux, la laryngite et l'amygdalite (en gargarisme),
ainsi que les blessures cutanées mineures. 10
Recommandation thérapeutiques
Le thym peut être administré à forte doses et souvent ainsi qu’on obtient. En cas
d’indications précises, il est préférable d’utiliser une spécialité pharmaceutique
standardisée. Le thym peut être utilisé sous trois formes. 7
 Tisane : faire infuser à couvert deux cuillères à café de la poudre de plante
finement broyée dans une tasse d’eau bouillante pendant 5 min, puis
filtrer et boire une tasse plusieurs fois par jours.
 Teinture : prendre 5 à 10 gouttes de la préparation médicamenteuse
liquide obtenue par l’action de l’alcool sur la poudre finement broyée du
thym, plusieurs fois par jours dans un peu d’eau ou sur un morceau de
sucre, pour le traitement de la toux spasmodique aigue.
 Extrait fluide : prendre une demi cuillère à café de la poudre finement
broyée du thym, plusieurs fois par jour, diluer dans un peu d’eau, pour le
traitement des courbatures stomatiques et intestinales. Les effets des
plantes médicinales sont traditionnellement connus, mais il y a lieu
d’ajouter que leurs vertus thérapeutiques peuvent varier avec la partie de
la plante utilisée ou encore selon le type de plantes qui sont associées
entre-elle. 11
 Définition de l’extraction :
L’extraction est utilisée pour extraire sélectivement un ou plusieurs composés
d’un mélange initial, sur la base de propriétés chimiques ou physiques. Le but de
l’extraction est d’isoler une ou plusieurs molécules à partir d’un organisme. 12
Il existe plusieurs méthodes pour effectuer une extraction. Dont nos TP on
utilise 2 méthode « soxhlet » et « Clevengere ».
1. Soxhlet :
Soxhlet est une pièce de verrerie permettant d’effectuer une extraction solide
liquide avec une grande efficacité. L’appareil porte le nom de son inventeur:
Franzvon Soxhlet , elle fait partie des extracteurs solide-liquide du type à lits
immobiles.
Une petite quantité d'échantillon sec est placée dans une cosse, récipient prévu à
cet effet, puis placé dans un ballon de distillation contenant le solvant approprié.
Le niveau de débordement atteint, la solution contenue dans le porte-cosse est
aspirée par un siphon, puis refoulée le dans le ballon de distillation. Cette
solution véhicule l'extrait dans le liquide. Le soluté reste dans le ballon de
distillation et le solvant retourne dans le l’échantillon. Le processus se répète
jusqu'à l’extraction complète. 13
2. Clevenger :
Le montage Clevenger est désigné par le nom de son inventeur, Joseph Franklin
Clevenger, qui l’a publié en 1928. Quelques modèles existent. Le plus commun
est une pièce de verrerie modifiée, celle que l’on voit au-dessus du ballon. Le
ballon, de taille variable, contient de l’eau que l’on fait bouillir et la plante à
extraire. La vapeur monte dans le montage jusqu’à un condensateur, et le
condensat retombe dans la petite burette. L’huile flotte sur l’eau, qui est pour sa
part progressivement renvoyée dans le ballon chauffé par le conduit en
diagonale. Après 2 h d’extraction, on peut mesurer directement dans la burette le
volume d’huile recueilli. 14
L’objectif(s) :
Connaitre les différences entre les 2 méthodes d’extraction soxhlet et clevenger
et l’effet de chaque technique sur le rendement d’extraction et quels sont les
facteurs qui influent l’extraction.
Matériels et méthodes :
 Matériels végétales :
 Poudre de thym commun (Thymus vulgaris).
 Réactifs :
 Hexane
 L’eau distillée
 Appareillage :
 Montage de soxhlet
 Montage de Clevenger

 Mode opératoire :

1. Soxhlet :

2
.

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 2. Clevenger :

Ballon : 50g de thym et

l’eau distillée

1. On pesé avec une balance sensible 50g de poudre

de thym et mettent dans un ballon.

2. Placé le ballon dans le chauffe ballon contient une

contétée important d’eau distillée comme solvant que
l’on fait bouillir en contact direct avec le 50g de thym.
3. La vapeur monte dans la tubulaire jusqu’au
réfrigérant, et le condensat passe à la burette graduée,

4. L’huile décante et forme une couche au-dessus de

l’eau qui passe dans le ballon par la conduite en
diagonale.

5. Après 3 h d’extraction, on recupuré le volume

d’huile essentielle+ la phase aqueuse .
Résultats :
Le rendement de soxhlet :

masse extrait sec ⁡(g)

R% = masse de matière végétale(g) × 100

0.25
R% = 10 × 100 = 2 .5 %

Le rendement de méthode de Clevenger :

masse de l ’ huile essentielle(g)

R% = masse de mati è ℜ v é g é tale (g) ×100

3ml  3g

3
R% = 50 ×100 = 6%

Interprétation:
D’après nos résultats, le rendement de l'extraction par le montage de clevenger
est plus élevé que celui de l'extraction par soxhlet 6% 2.5%, ce faible
rendement est probablement dû à :

-La taille de la cartouche étant limitée, il peut être nécessaire de réaliser

plusieurs extractions successives avec plusieurs cartouches, ce qui peut prendre
un temps considérable.
-L'extraction à chaud peut dégrader certaines substances chimiques.
-La régulation précise de la température peut être difficile ce qui peut entraîner
des variations dans les résultats d'extraction.
- Ou le choix de solvant.
*Par contre l’extraction par clevenger est donc considérée comme la plus
représentative du rendement « absolu » en composés volatils, car elle utilise la
vapeur d'eau pour extraire les huiles essentielles sans exposition excessive à la
chaleur, donc elle donne une quantité plus élevée d rendement.

Comparaissant avec les recherches des scientifiques pour l’extraction par

clevenger :

Rendement (%) Origine Références

2.2 Algérie (Mostaganem) Abdelli ,2017
2 Algérie (Relizane ) Djrouguerra et al 2017
1.42 Algérie (Stif) Nedjai. 2017
1.12 Algérie (Tizi Ouzou) Aoamari et Shaki 2018
4.2 Algérie (Telemcen) Abdelli, 2017
2.112 Algérie ( Makhloufi et Mameri
2022
0.25 Brésil Alexandre et al, 2007
0.81 Iran Pirbaloutiet al 2013
5.0 Jordanie Hudaib et Aburjai 2007
1.25 Roumanie Boruga, 2014

Comme le montre le tableau ci-dessus, nous avons pu obtenir des résultats

provenant de différentes régions d'Algérie et du monde à différentes périodes
(entre 2007 et 2022).
Les rendements rapportés dans différentes régions d’Algérie de l’HE de Thym
varient entre 1,12 % et 4,2% avec la plus grande valeur pour l’espèce de
Tlemcen. Ces rendements sont relativement proches de ceux trouvés chez la
même espèce dans différentes régions du monde, en effet le rendement varie de
0,25% à 5,0 % avec la plus grande valeur pour l’espèce de Jordanie et le faible
valeur pour l'espèce de brasil.
Dans tous les cas, le rendement que nous avons obtenu dans nos TP reste le plus
élevé (6%).

Cette différence entre les résultats ceci peut être expliqué par une différence
au niveau de plusieurs paramètres soient géographiques, physicochimiques ou
biologiques tels que :
la différence du site de récolte y compris l’environnement de la plante, la
lumière(durée d'ensoleillement) , température , fréquence et l'intensité de la
précipitation, la topographie, la saison, type de sols, période de récolte, le
patrimoine génétique, la procédure d'extraction utilisée, la partie de la plante
étudiée ou leurs produits phytochimiques.
Notez aussi que le choix de solvant joue un rôle très important dans la
quantité de rendement, nous devons prendre en considération :
Affinité Chimique : Choisissez un solvant qui a une affinité chimique avec les
composés cibles que vous souhaitez extraire.

Polarité : La polarité du solvant doit être adaptée aux composés à extraire. Des
solvants polaires pour des composés polaires, et des solvants apolaires pour des
composés apolaires.
Température d'Ébullition : La température d'ébullition du solvant doit être
compatible avec le processus d'extraction et faciliter l'évaporation après
l'extraction.
Compatibilité avec la Matrice : Assurez-vous que le solvant ne réagit pas
chimiquement avec la matrice de l'échantillon.
Sélectivité : Choisissez un solvant sélectif pour éviter l'extraction de composés
indésirables.
Toxicité et Sécurité : Considérez la toxicité et la sécurité du solvant, en
particulier pour des processus à grande échelle ou avec une exposition
potentielle.
Coût : Le coût du solvant peut influencer la décision, en tenant compte de
l'efficacité.
Solubilité : Assurez-vous que le solvant dissout efficacement les composés
cibles.
Considérations Environnementales : Choisissez des solvants respectueux de
l'environnement autant que possible.
Compatibilité avec les Techniques Analytiques : Assurez-vous que le solvant
n'interfère pas avec les techniques d'analyse ultérieures.
 Le choix de la technique d'extraction joue un rôle crucial dans la quantité de
rendement, la sélectivité et la qualité des composés extraits. Différentes
méthodes d'extraction sont adaptées à des applications spécifiques en fonction
des propriétés des composés cibles et des objectifs de l'extraction.

Comparaissant avec les recherches des scientifiques pour l’extraction par

soxhlet :

Il serait inexact de dire qu'il n'y a pas de recherche scientifique basée sur la
méthode d'extraction Soxhlet. La méthode d'extraction Soxhlet est en fait une
technique bien établie et largement utilisée en chimie et en laboratoire pour
isoler des composés d'un solide. Mais malheureusement, je n'ai pas pu trouver
dans le cadre de mes recherches d'autres recherche qui utilisant l'hyxane par
contre j'trouver des recherche qui utilisant l'Ethanol,et nous avons constaté que
le rendement est estimé à 9.25% selon l'étude de (Sara Palmieri, Marika
Pellegrini, 2020 Septembre 2).

On remarquant que leur rendement et plus élevée que nos rendement .Cela est
probablement dû à:

- la différence de solvant ( par exemple entre hexane qui est apolaire et le

éthanol est polaire) . Le solvant joue un rôle essentiel dans la quantité et la
qualité du rendement, comme nous l'avons évoqué précédemment.

- la granulométrie du solide : Tout réduction de la taille des échantillon peut

améliorer l'efficacité de l'extraction et donc améliorer le rendement .( comme
nos tp on utilise la poudre de thym)

-Ou la taille de la cartouche, où plus elle est grande, plus elle peut contenir
d'échantillons et plus le rendement est élevé.

-La température et durée de l'extraction : Le temps d'extraction doit être

suffisant pour permettre une extraction complète, mais une exposition excessive
avec la température élevée peut entraîner la dégradation des composés extraits.

-Le réglage de l'appareil Soxhlet : Toute erreur pourrait entraîner une diminution
du rendement.

Conclusion:
L’extraction des HE de la matière végétale peut être réalisée au moyen de
plusieurs procédés (dons nos TP soxhlet et clevenger), basés sur des techniques
anciennes ou récentes. Ces dernières, bien que présentant de nombreux
avantages, notamment celui de réduire considérablement le temps d’extraction,
ne sont pas, pour l’instant, reconnues par la Pharmacopée Européenne.
Cependant, quel que soit le procédé utilisé, l’extrait final correspond à une
concentration des composés initialement présents dans la matière première. De
plus, les méthodes de production tout comme l’origine géographique, le climat,
le sol, la période de récolte ou bien encore les pratiques agriculturales, peuvent
avoir une influence directe sur la composition chimique de l’huile essentielle
distillée.
Il est important de noter que le choix de la méthode d'extraction dépend des
composés spécifiques que vous souhaitez extraire, de la nature de l'échantillon,
et des objectifs de votre recherche. Chaque méthode à ses avantages et
inconvénients, et elle doit être adaptée en fonction du contexte de l'étude.

Les prochaines années verront raisonnablement augmenter, de façon

significative, le nombre de publications relatives à l’utilisation de nouvelles
techniques innovantes, fiable et rapides, dans le domaine de l’extraction des
substances aromatiques.

Les réponses :

1. La définition et les caractéristiques physico-chimiques d’huiles

essentielles :
A. La définition d’HE :

Le terme “Huile essentielle” a été inventé au 16ème siècle par le médecin suisse
Parascelsus Von Hohenheim afin de désigner le composé actif d’un remède
naturel

L’Association Française de Normalisation: AFNOR, Edition 2000, définit

l’huile essentielle comme : « Produit obtenu à partir d’une matière première
végétale, soit par entrainement à la vapeur d’eau soit par des procédés
mécaniques, l’huile est ensuite séparée de la phase aqueuse par des procédés
physiques »

Selon la norme ISO : 9235 (Organisation Internationale de Standardisation)

l’huile essentielle est : « Produit obtenu à partir d’une matière première naturelle
d’origine végétale, soit par entraînement à la vapeur d’eau, soit par des procédés
mécaniques à partir de l’épicarpe de fruits de citrus (agrumes), soit par
distillation sèche, après séparation de l'éventuelle phase aqueuse par des
procédés physique » 15

B. Les caractéristiques physico-chimiques :

Les HEs sont caractérisées par leurs propriétés physiques (densité relative,
indice de réfraction) ainsi que par leurs propriétés chimiques (indice d’acide).
16
 a) Densité relative d20 : La plupart des huiles essentielles ont une densité
inférieure à celle de l’eau (densité < 1), cela permet leur séparation dans
l’essencier lors de leur extraction par hydro- distillation. 17

*Selon la norme AFNOR (Association Française de Normalisation) (AFNOR

: NF T 75 -111. 2000), la densité relative de l’HE est définie comme étant le
rapport de la masse d’un certain volume d’huile à 20°C et la masse de
volume d’eau distillée à 20°C.

b) Indice de réfraction ȠD20: L’indice de réfraction d’une huile essentielle

est le rapport entre le sinus de l’angle d’incidence et le sinus de l’angle de
réfraction d’un rayon lumineux de longueur d’onde déterminée, passant
de l’air dans l’huile essentielle maintenue à une température constante.
L'indice de réfraction des HEs est généralement élevé. Il est supérieur à
celui de l'eau à 20 °C = 1.3356 . 15
c) Indice d’acide IA: L'indice d'acide indique le comportement et la quantité
des acides libres présents dans notre huile. Il peut aussi nous renseigner
sur la susceptibilité de l'huile à subir des altérations, notamment
l'oxydation (Ouis, 2015).15

* Selon la nome AFNOR (AFNOR : NFT 75 – 103. 2000), Il représente le

nombre en milligrammes d’hydroxyde de potassium (KOH) nécessaire à la
neutralisation des acides libres contenus dans 1g d’huile essentielle

2. La différence entre l’hydrodistillation classique est clevenger:

*Conception et configuration : L'appareil Clevenger est un type spécifique
d'appareil conçu pour la collecte d'huiles essentielles lors de l'hydrodistillation.
L'hydrodistillation, quant à elle, fait référence au processus plus large
d'utilisation de la vapeur pour extraire les huiles essentielles, et elle peut être
réalisée à l'aide de diverses configurations de distillation.
*Collecte d'huile essentielle : tandis que l'hydrodistillation collecte à la fois
l'hydrolat et l'huile essentielle, l'appareil Clevenger sépare et collecte
spécifiquement l'huile essentielle.
*Utilisation : Le terme « hydrodistillation » fait référence à une méthode
générale d'extraction des huiles essentielles, tandis que l'appareil Clevenger est
un outil conçu pour un aspect spécifique de ce processus : la collecte des huiles
essentielles.
En résumé, l'hydrodistillation est la méthode globale d'utilisation de la vapeur
pour extraire les huiles essentielles, et l'appareil Clevenger est un appareil
spécifique conçu pour la collecte d'huiles essentielles lors de l'hydrodistillation.
L'appareil Clevenger permet de séparer et de quantifier la partie huile essentielle
de l'hydrolat.

Les références bibliographiques :

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Medicine: Expanded Commission E Monographs." American Botanical Council.
2https://jardinage.ooreka.fr/plante/voir/30/thym

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polyphénolique de deux plantes médicinales (Thym et Sauge) et la mise en
évidence de leurs activités biologiques thèse de magister en Biotechnologie
végétale, Université-Mentouri Constantine, p1-2.
4Mebarki noudjoub, (2010), extraction de l’huile essentielle de thymus
fontanisii et application à la formulation à une forme médicamenteuse-
antimicrobienne thèse de magister entechnologie des hydrocarbures,
département génie des procédés chimiques et pharmaceutiques, université
M’Hamed Bougara-Boumesdes

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médicinales d’intérêt économique (Thymus vulgaris, Rosmarinus officinalis) et
évaluation de leur activité antibactérienne. Diplôme de Magister, Université des
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numidicus kabylica, thèse de magister d’ingénieur d’état en Génie chimique,
université Mohamed Bougera- Boumerdes, p5.

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de l’activité antibactérienne de l’extrait méthanolique de thymus vulgaris,

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EXTRAITS DE FEUILLES DE Thymus vulgaris L. ET Laurus nobilis L.p5.
9 https://www.pharma-gdd.com/fr/les-bienfaits-du-thym
10https://www.passeportsante.net/fr/Solutions/PlantesSupplements/
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Application à la formulation d’une pommade. »., p15.
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13https://www.velp.com/fr-ww/les-4-avantages-de-choisir-les-extractions-
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14https://phytochemia.com/fr/2014/08/04/lextraction-dhuiles-essentielles-en-
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supercritique : Etude comparative. Mémoire de Master, Université Larbi Ben
M’hidi, Oum-El- Bouaghi, Algérie

17Desramaux, M. (2018). Huiles essentielles en dermocosmétologie. Sciences

Pharmaceutiques, édition Dumas.