IMMUNOLOGIE

Réalisé par :
Nouhaila Zriouel
Salma Qarbal

Encadré par : Mme. El Ouaai Fatiha

 Plan
Le système du complément Les techniques
immunoenzymatiques

La réaction antigène - Les techniques

anticorps d’immunoprécipitation

Les techniques d’agglutination Les techniques

immunologiques immunomarquage
 LE SYSTEME DU COMPLEMENT
Définition :
-Le système du complément est une partie du système
immunitaire inné qui joue un rôle essentiel dans la
défense de l'organisme contre les infections. Il est
constitué d'un ensemble de protéines circulant dans le
sang.

-Douze 12 de ces protéines sont directement impliquées

dans les mecanismes d'élimination des pathogénes, les
autres régulent finement I'activité des premieres afin
d'eviter une reaction auto-immune (réaction
contre le soi).
Rôle :
• la lyse des cellules, des bactéries et des virus.
• l'opsonisation qui favorise la phagocytose des
antigènes particulières.
 Voie Classique

- La voie classique commence par

l'activation du complexe C1.

- Complexe C1 est formé de 3 molécules :

• C1q = dépourvu d'activité enzymatique, se
lie au domaine FC des IgM et des IgG.
• C1r = sérine protéase
• C1S = sérine protéase
 Voie Lectine

- La voie de lectine est activée par la liaison de protéines à des

surfaces microbiennes.

- Fait intervenir la MBP (mannose binding protein), une lectine de la

même famille que C1q.

- L'activation de cette voie commence par la fixation du MBL à des

résidus mannoses de glycoprotéines à la surface de micro-
organismes comme des bactéries, des champignons et de certains
virus (VIH).

- Une fois liée, la MBL recrute une protéase (la mannose binding
protein associated protease ou MASP) qui est l'équivalent de C1s et
dont les substrats sont C4 et C2.
 Voie Alterne

*Considérée comme constituant de *Cette voie implique quatre protéines sériques :

l'immunité naturelle. 1. Le C3,
2. le facteur B,
* C'est un système de surveillance qui 3. Le facteur D,
fonctionne en permanence à bas bruit, avec 4. La properdine.
hydrolyse spontanée d'une faible quantité
C3 en C3 hydrolysé. *Aboutit à l'activation du
MAC (complexe d'attaque membranaire)•
*La voie alterne nécessite une surface
activatrice ( peu sialilée, des
lipopolysaccharides bactériens, certains
composants de membrane de levure,
etc..
 LA REACTION
ANTIGENE-ANTICORPS
La réaction antigène-anticorps est une réponse spécifique et coordonnée du
système immunitaire qui vise à neutraliser, marquer et éliminer les agents
pathogènes et autres substances étrangères présentes dans l'organisme.

Anticorps
Antigéne

site de fixation
spésifique de cet Ag

Acossiation Ag-Ac
La diversité des Ag et des Ac
la spécificité antigène-anticorps

la spécificité antigène-anticorps est l'une

des caractéristiques fondamentales de la
réponse immunitaire adaptative. elle se
réfère à la capacité des anticorps à
reconnaître et à se lier de manière sélective
à des antigènes spécifiques. cette spécificité
est essentielle pour assurer une réponse
immunitaire ciblée et efficace.
Les forces d'interaction

Les paramétres qui influence sur les

forces d’interaction

La température

PH
 Affinité
C'est la somme des forces
d'attractions et de répulsions
entre un
épitope et un paratope.
• Définie par la réaction :
Avidité
• c'est la force de fusion
d'un anticorps possédant
multiples paratopes avec un
antigènes contenant
plusieurs épitopes. • Ainsi
l'avidité est
supérieur à la somme des
affinités.
• Donc l'avidité est influencé
par la valence, tout comme la
T, le pH et la force ionique.
 LES TECHNIQUES D’AGGLUTINATION
Les techniques d'agglutination immunologiques sont des méthodes utilisés en
immunologie pour détecter la présence d'anticorps spécifiques ou d'antigènes
dans des échantillons biologiques.

L'agglutination est l'agrégation, c'est-à-dire la réunion en amas, d'un antigène

particulaire ou cellulaire (bactéries, hématies, billes de latex...] avec un
anticorps agglutinant (IgM)
les complexes immuns forment un agglutinat.

Observation directe de la réaction Ag-AC (visible à l'œil nu)

I.Agglutination directe :
1.Groupage sanguin:
2.Test de Coombs direct :
II.Agglutination indirecte :
lle est réalisée entre un Ac et un Ag normalement soluble, mais
rendu particulaire par fixation sur une particule inerte ex: latex,
hématie.
1.Test de Coombs indirect :
2.Test de Latex :

3.Test de Waaler-rose :
 LES TECHNIQUES IMMUNOENZYMATIQUES

Les techniques immunoenzymatique sont des méthodes

qui permet de détecter et quantifier la présence
d'antigènes ou d'anticorps dans des échantillons
biologiques, ces techniques basées sur le marquage par
des enzymes , qui permet de transformer un substrat
incolore en produit coloré.

NB: le marquage par une enzyme ne touche qu’une molécule ,

soit l’ag, soit l'Ac et ne consiste pas les deux à la fois
ELISA (Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay)

L’ELISA est une technique utilisée pour détecter la

présence et quantifier la quantité d'antigènes ou
d'anticorps spécifiques dans un échantillon , grace à une
réaction colorée .

microplaque
puits
Les différents types d'ELISA
Elisa direct :

Elisa indirect :
Elisa sandwich :
Elisa par compétition :
LES TECHNIQUES IMMUNOPRICIPITATION
Test de l’anneau : Néphélémétrie :

Turbidimétrie :
Test d’ouchterlony :
Mancini :
Laurell :
Electrosynérèse :
Immunoélectrophorèse :
 LES TECHNIQUES IMMUNOMARQUAGE :
L'immunomarquage est une méthode qui exploite la réaction spécifique
entre les anticorps (Ac) et les antigènes (Ag) en dehors du milieu
biologique naturel (c'est-à-dire in vitro). Ces techniques font largement
appel à l'utilisation d'un marquer (traceur) détectable afin de révéler la
réaction entre les antigènes et les anticorps.

Marqueur = entité (atome, molécule, ion…) lié chimiquement à un Ag ou Ac et pas les deux à la fois, et
délivrant un signal direct ou indirect .
L’immunofluorescence :

L'immunofluorescence est une technique qui

utilise des marqueurs fluorescents pour
détecter et visualiser spécifiquement la
présence d'antigènes dans des échantillons
biologiques.

Il existe deux types d'immunofluorescences :

Immunofluorescence direct (IFD)
Immunofluorescence indirect (IFI)
 Immunofluorescence direct (IFD)
l'immunofluorescence directe consiste à utiliser des anticorps primaire directement marqués
avec un fluorochrome

Immunofluorescence indirect (IFD)

Repose sur l'utilisation d'anticorps non marqués spécifiques pour la protéine cible, suivie d'une
détection par un anticorps secondaire marqué avec un fluorochrome.
Les techniques
radio-immunologiques

Les techniques radio-immunologiques

(RIA) sont des méthodes utilisées pour
révéler et de quantifier la réaction entre
les antigènes et les anticorps .
Ces techniques combinent les principes
de l'immunologie avec l'utilisation
d'isotopes radioactifs pour marquer les
molécules d'intérêt.
Les techniques radio-immunologiques par
compétition:

compteur Geiger-Müller
Les techniques radio-immunologiques sans
compétition ( sandwich):
MERCI VOUR VOTR ATTENTION !